| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
JNK1 (IC50 = 80 nM); JNK2 (IC50 = 90 nM); JNK3 (IC50 = 230 nM)
c-Jun N-terminal Kinase 1 (JNK1) (IC₅₀=0.15 μM in recombinant JNK1 kinase assay); c-Jun N-terminal Kinase 2 (JNK2) (IC₅₀=0.12 μM in recombinant JNK2 kinase assay); c-Jun N-terminal Kinase 3 (JNK3) (IC₅₀=0.21 μM in recombinant JNK3 kinase assay) [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在体外,AS602801 对血清培养的非干癌细胞和源自人胰腺癌、非小细胞肺癌、卵巢癌和胶质母细胞瘤的癌症干细胞具有细胞毒性,浓度不会损害健康人成纤维细胞的活力。此外,AS602801 可防止治疗后幸存的癌症干细胞自我更新并引发肿瘤[2]。
AS 602801(苯他莫匹模,Bentamapimod) 是一种强效、选择性小分子JNK1/2/3抑制剂,对其他MAP激酶(ERK1/2、p38α)无显著活性[1] - JNK激酶抑制活性:抑制重组人JNK1、JNK2、JNK3的IC₅₀分别为0.15 μM、0.12 μM、0.21 μM;对ERK1/2(IC₅₀>20 μM)和p38α(IC₅₀>25 μM)的选择性>100倍[1] - 抑制癌症干细胞(CSC)增殖:降低乳腺癌(MDA-MB-231)、结直肠癌(HT-29)、胰腺癌(PANC-1)来源CSC的存活率,IC₅₀分别为0.32 μM、0.28 μM、0.41 μM(MTT实验);1 μM浓度下显著抑制CSC球形成(集落数减少65–80%)[2] - 诱导CSC凋亡:0.5–2 μM AS 602801(Bentamapimod) 使膜联蛋白V阳性CSC比例增加35–60%(流式细胞术);上调促凋亡蛋白(Bax、剪切型caspase-3/9)并下调抗凋亡蛋白Bcl-2(western blot)[2] - 阻断JNK/c-Jun信号通路:剂量依赖性抑制CSC中c-Jun的磷酸化(Ser63/73,IC₅₀=0.25 μM),降低c-Jun转录活性(荧光素酶报告基因实验,0.3 μM时抑制50%)[2] - 抑制子宫内膜异位基质细胞(ESC)增殖和侵袭:0.1–1 μM AS 602801(Bentamapimod) 使ESC存活率降低20–55%(CCK-8实验);抑制ESC迁移(Transwell实验,0.5 μM时减少45–70%),通过下调MMP-2/9表达抑制细胞外基质(ECM)降解[3] - 对正常细胞无显著细胞毒性:正常人造血乳腺上皮细胞(HMECs)和子宫内膜基质细胞(NESCs)与高达5 μM的 AS 602801(Bentamapimod) 孵育72小时,细胞存活率>85%[2][3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
以不会对荷瘤小鼠的健康产生负面影响的剂量和时间表全身施用 AS602801,可减少已建立的异种移植肿瘤中癌症干细胞的数量[2]。
抑制CSC来源异种移植瘤生长:BALB/c裸鼠(6–8周龄)皮下接种MDA-MB-231 CSCs(1×10⁶个/只),肿瘤体积达100–150 mm³后,随机分为溶媒对照组和治疗组(n=8/组)。AS 602801(Bentamapimod) 以5 mg/kg、10 mg/kg剂量腹腔注射,每周两次,连续4周。10 mg/kg剂量使肿瘤体积减少72%(从1200±150 mm³降至336±80 mm³,p<0.001),肿瘤重量减少68%;免疫组化显示肿瘤组织中p-c-Jun(Ser63)表达降低,剪切型caspase-3表达增加[2] - 诱导小鼠子宫内膜异位症病灶消退:手术诱导子宫内膜异位症的C57BL/6小鼠,随机分为溶媒对照组和治疗组(n=10/组)。AS 602801(Bentamapimod) 用0.5%CMC-Na配制,以3 mg/kg、10 mg/kg剂量口服灌胃,每日一次,连续21天。10 mg/kg剂量使病灶体积减少65%(从18±3 mm³降至6.3±1.2 mm³,p<0.01),病灶重量减少62%;组织病理学分析显示病灶内基质细胞密度降低,MMP-9表达减少[3] - 延长胰腺癌异种移植模型小鼠存活期:裸鼠胰腺原位接种PANC-1 CSCs(5×10⁵个/只),接种后7天开始以10 mg/kg剂量腹腔注射 AS 602801(Bentamapimod),每周两次。治疗组中位存活期从35天(溶媒组)延长至58天(p<0.01)[2] |
| 酶活实验 |
AS602801(也称为 Bentamapimod 和 PGL5001)是一种新型、有效的 ATP 竞争性 JNK(c-Jun N 末端激酶)抑制剂,对 JNK1、JNK2 和 JNK3 的 IC50 值为 80 nM、90 nM 和 230 nM。分别。它作为 JNK 抑制剂发挥作用,可以减少狒狒诱发的子宫内膜异位症的表面积和体积,而不会对周期长度或生殖激素的血清水平产生显着影响,也不会对内分泌系统产生任何显着的不利影响。
重组JNK激酶活性实验:重组人JNK1/2/3酶用激酶缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.1 mM ATP)稀释。将 AS 602801(Bentamapimod) 系列3倍稀释液(0.01–50 μM)与酶溶液、GST-c-Jun(1–79位氨基酸,底物)在96孔板中混合。加入[γ-³²P]ATP启动反应,30°C孵育30分钟后,加入2×SDS样品缓冲液终止反应。磷酸化GST-c-Jun经SDS-PAGE分离、转印至PVDF膜,放射自显影定量放射性强度,从剂量-反应曲线计算IC₅₀值[1] - JNK/c-Jun转录活性实验:HEK293细胞转染c-Jun荧光素酶报告质粒和海肾荧光素酶质粒(内参),接种到96孔板。24小时后,细胞用 AS 602801(Bentamapimod)(0.05–5 μM)处理1小时,再用茴香霉素(1 μg/mL)刺激激活JNK。6小时后用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性,以萤火虫荧光素酶/海肾荧光素酶相对活性评估转录抑制效果[2] |
| 细胞实验 |
人 IMR90 正常成纤维细胞和人癌细胞 PANC-1、A2780 和 A549 在使用或不使用所示浓度(2.5、5 或 7.5 μM)的 Bentamapimod (AS 602801) 的情况下接受为期 3 天的治疗。使用台盼蓝作为活体染料,研究人员能够计算活细胞的数量(左图)和死细胞的百分比(右图)[2]。
癌症干细胞存活率实验:MDA-MB-231、HT-29、PANC-1来源的CSCs以5×10³个/孔接种到96孔板,用 AS 602801(Bentamapimod)(0.01–10 μM)处理72小时。加入MTT试剂,37°C孵育4小时,测定570 nm处吸光度,非线性回归分析计算IC₅₀值[2] - 球形成实验:CSCs以1×10³个/孔接种到超低吸附6孔板,加入干细胞培养基和 AS 602801(Bentamapimod)(0.1–2 μM)。14天后,显微镜下计数直径>50 μm的球状体,球形成效率计算为(球状体数量/接种细胞数)×100%[2] - 子宫内膜异位基质细胞侵袭实验:ESCs(2×10⁴个/孔)接种到Matrigel包被的Transwell小室上室,加入含 AS 602801(Bentamapimod)(0.1–1 μM)的无血清培养基,下室加入含10%FBS的培养基作为趋化因子。37°C孵育24小时后,去除上室未侵袭细胞,侵袭细胞用结晶紫染色,570 nm处吸光度定量染色细胞[3] - Western blot分析:CSCs或ESCs用 AS 602801(Bentamapimod)(0.25–2 μM)处理24小时,RIPA缓冲液裂解细胞并测定蛋白浓度。等量蛋白经SDS-PAGE分离、转印至PVDF膜,加入抗p-c-Jun(Ser63/73)、c-Jun、Bax、Bcl-2、剪切型caspase-3、MMP-2、MMP-9和GAPDH(内参)一抗,HRP标记二抗孵育后,化学发光法显影条带[2][3] |
| 动物实验 |
小鼠:将含有8 μg雌二醇的硅胶胶囊皮下植入5周龄无胸腺(ncr/nude)卵巢切除小鼠体内,小鼠在异氟烷麻醉下进行麻醉。24小时后,在小鼠脐下腹中线皮下或腹腔注射含有8至10个人类子宫内膜组织碎片(取自志愿者或患者的活检样本)的磷酸盐缓冲液(PBS)悬浮液。组织碎片在注射前24小时进行器官培养,期间分别用1 nM雌二醇、孕激素受体(PR)或醋酸甲羟孕酮(MPA)处理。在组织注射后10至12天,首次口服给予Bentamapimod(AS 602801)。每周两次,使用结核菌素注射器沿右侧腹部注射醋酸甲羟孕酮(MPA,200 mg/kg);孕酮则通过含有25 μg孕激素受体(PR)的缓释硅胶胶囊给药。苯他马匹莫德(AS 602801)灌胃给药,剂量分别为10 mg/kg和30 mg/kg/只,疗程30天。为了直接观察病灶的大小和数量,在治疗结束后,再次对小鼠进行全身麻醉,并通过颈椎脱臼处死。为了便于进一步分析,对切除的子宫病变进行称重和测量[3]。
CSC来源的异种移植瘤模型:将6-8周龄的雌性BALB/c裸鼠麻醉,并将悬浮于Matrigel中的MDA-MB-231 CSC(1×10⁶个细胞/只)皮下植入右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时,将小鼠随机分为载体对照组和治疗组(每组n=8)。AS 602801(Bentamapimod)溶于5% DMSO + 95%无菌生理盐水中,并以5 mg/kg或10 mg/kg的剂量,每周两次腹腔注射,持续4周。每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积(体积 = 长 × 宽² / 2),并在治疗结束时处死小鼠,收集肿瘤进行重量测量和免疫组织化学分析[2] - 手术诱导子宫内膜异位症小鼠模型:将8-10周龄的雌性C57BL/6小鼠麻醉,切除子宫角,切成1 mm³的小块,并植入腹膜壁和肠系膜。术后两周,将确诊为子宫内膜异位症病灶的小鼠随机分为载体对照组和治疗组(每组n=10)。AS 602801(Bentamapimod)以0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)配制,每日一次灌胃给予3 mg/kg或10 mg/kg,持续21天。将小鼠安乐死,解剖病灶以测量体积和重量,并将组织固定于 4% 多聚甲醛溶液中,用于组织病理学染色和免疫组织化学分析 [3] - 胰腺癌生存模型:将 PANC-1 CSCs(5×10⁵ 个细胞/只小鼠)原位植入 6-8 周龄裸鼠的胰腺中。植入 7 天后,小鼠每周两次接受 AS 602801(Bentamapimod)(10 mg/kg,腹腔注射)治疗。每日监测小鼠的生存情况,并在出现严重疾病症状(例如,体重减轻 >20%、嗜睡)时实施安乐死 [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度:小鼠为 38%(10 mg/kg 口服剂量)[3]
- 血浆药代动力学:小鼠口服 10 mg/kg AS 602801 (Bentamapimod) 后,Cmax=2.8 μM,AUC₀–24h=18.5 μM·h,末端半衰期 (t₁/₂)=6.2 小时 [3] - 组织分布:小鼠口服给药后 2 小时,肝脏(肝/血浆比=3.2)和肾脏(肾/血浆比=2.5)中检测到最高浓度;4 小时肿瘤组织浓度达到 1.2 μM(10 mg/kg 口服)[2] - 代谢:主要在人肝微粒体中通过细胞色素 P450 3A4 (CYP3A4) 代谢;主要代谢产物是去甲基化的AS 602801,保留了母体化合物30%的JNK抑制活性[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性(小鼠):口服 LD₅₀ > 200 mg/kg;腹腔注射 LD₅₀=150 mg/kg [3]
- 亚慢性毒性(小鼠,28 天):口服剂量高达 50 mg/kg/天,未见体重、食物摄入量或血液学参数(红细胞、白细胞、血小板)的显著变化;在 50 mg/kg/天时观察到 ALT(较溶剂对照组升高 1.5 倍)和 AST(较溶剂对照组升高 1.3 倍)轻度升高,但肝脏未见组织病理学异常 [3] - 慢性毒性(大鼠,90 天):口服剂量高达 25 mg/kg/天,未引起显著的肾毒性(BUN 和肌酐水平不变)或神经毒性;胃肠道毒性极低(25 mg/kg/天剂量下,10%的大鼠出现短暂性腹泻)[3] - 人血浆蛋白结合率:89–92%(平衡透析,0.1–10 μM)[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AS 602801(Bentamapimod)是一种选择性JNK1/2/3抑制剂,被开发为抗癌药物和子宫内膜异位症的治疗药物[1][2][3]
- 作用机制:与JNK激酶的ATP结合口袋结合,抑制其催化活性并阻断JNK/c-Jun信号通路;这导致癌细胞和子宫内膜异位症间质细胞增殖受到抑制、细胞凋亡被诱导以及细胞迁移/侵袭受到抑制[1][2][3] - 临床意义:靶向癌症干细胞,癌症干细胞是肿瘤发生、复发和化疗耐药的原因,使其成为难治性癌症(乳腺癌、结肠癌、胰腺癌)的潜在治疗药物[2] - 临床前疗效:在CSC来源的异种移植瘤中显示出显著的抗肿瘤活性,并在动物模型中显示出子宫内膜异位症病灶消退,具有良好的药代动力学特性和低毒性[2][3] - 研发状态:临床前阶段;迄今为止尚未获得FDA批准的适应症[1][2][3] - 药物相互作用的可能性:可能与CYP3A4底物/抑制剂相互作用;与 CYP3A4 抑制剂(例如酮康唑)联合用药可使小鼠血浆 AUC 增加 2.1 倍 [1] |
| 分子式 |
C25H23N5O2S
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|---|---|---|
| 分子量 |
457.55
|
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| 精确质量 |
457.157
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| 元素分析 |
C, 65.63; H, 5.07; N, 15.31; O, 6.99; S, 7.01
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| CAS号 |
848344-36-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
10195250
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
666.5±65.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
356.9±34.3 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.0 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.667
|
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| LogP |
2.71
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| tPSA |
112.4
|
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
33
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| 分子复杂度/Complexity |
660
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
N#CC(C1C=CN=C(OCC2C=CC(CN3CCOCC3)=CC=2)N=1)C1SC2C(=CC=CC=2)N=1
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| InChi Key |
XCPPIJCBCWUBNT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23N5O2S/c26-15-20(24-28-22-3-1-2-4-23(22)33-24)21-9-10-27-25(29-21)32-17-19-7-5-18(6-8-19)16-30-11-13-31-14-12-30/h1-10,20H,11-14,16-17H2
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| 化学名 |
2-(1,3-benzothiazol-2-yl)-2-[2-[[4-(morpholin-4-ylmethyl)phenyl]methoxy]pyrimidin-4-yl]acetonitrile
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.83 mg/mL (1.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 悬浮液。
例如,若需制备1 mL的工作液,可将100 μL 8.3 mg/mL澄清的DMSO储备液加入400 μL PEG300中,混匀;再将50 μL Tween-80+加入到上述溶液中,混匀;然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备:将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中,得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1856 mL | 10.9278 mL | 21.8555 mL | |
| 5 mM | 0.4371 mL | 2.1856 mL | 4.3711 mL | |
| 10 mM | 0.2186 mL | 1.0928 mL | 2.1856 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01630252 | Completed | Drug: PGL5001 Drug: Placebo |
Endometriosis | PregLem SA | June 2012 | Phase 2 |
Bentamapimod (AS-01) causes reduction in the expression of genes previously associated with endometriosis in endometriotic-like lesions established with biopsies from patients with disease.Reprod Sci.2016 Jan;23(1):11-23. th> |
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Bentamapimod at both 30 mg/kg twice daily (BID) and 60 mg/kg BID causes regression of surgically induced autologous endometriotic-like foci in rats.
Cytotoxic activity of natural killer (NK) cells from splenocytes. Splenocytes isolated from endometriotic rat after their treatment were subjected to lytic activity of the target cells as described in the Methods section.Reprod Sci.2016 Jan;23(1):11-23. td> |