| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
DYRK1B (IC50 = 17 nM); DYRK1A (IC50 = 88 nM)
AZ191 specifically targets dual-specificity tyrosine-phosphorylation-regulated kinase 1B (DYRK1B) (IC50 = 13 nM) [1] AZ191 shows no significant inhibition of glycogen synthase kinase 3β (GSK3β) even at concentrations up to 10 μM [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
AZ191 选择性抑制 DYRK1B 丝氨酸/苏氨酸激酶活性，对酪氨酸激酶自磷酸化没有影响。在 HEK-293 细胞中，AZ191 对 DYRK1B 的抑制 CCND1 磷酸化的效力也比对 DYRK1A 更强。在 HD1B 细胞中，AZ191 强烈抑制细胞周期调节因子 p21Cip1 和 p27Kip1 的水平，并加速细胞周期进程。细胞测定：在HEK-293细胞中，1uM的AZ191不能抑制DYRK1B自磷酸-Tyr273并选择性抑制DYRK1B丝氨酸/苏氨酸激酶活性。在与 DYRK1A 或 DYRK1B 共表达 CCND1 的 HEK-293 细胞中，AZ191 在低至 30-100 nM 的剂量下抑制 CCND1 的磷酸化，对 DYRK1B 的抑制效果优于 DYRK1A。 AZ191 是一种新型 DYRK1B 选择性抑制剂，其选择性比 DYRK2 高约 100 倍，比 DYRK1A 高 5-10 倍。 AZ191 将用作定义 DYRK1B 功能和 DYRK1B 底物的有用探针。
AZ191（0.1–10 μM）在过表达 DYRK1B 和 cyclin D1 的 HEK293 细胞中，剂量依赖性抑制 DYRK1B 介导的 cyclin D1 Thr286 位点磷酸化，不影响 Thr288 位点磷酸化。这种抑制作用独立于 GSK3β，因为 AZ191 不会改变 GSK3β 活性或 GSK3β 介导的 cyclin D1 磷酸化 [1] - 在脂肪肉瘤细胞系（SW872、HT1080、MLS 402）中，AZ191 抑制细胞增殖，处理 72 小时后的 IC50 值分别为 SW872（2.5 μM）、HT1080（3.1 μM）、MLS 402（3.8 μM）。它诱导 G1 期细胞周期阻滞，表现为 SW872 细胞中 G1 期细胞比例从约 45% 增加至 5 μM 时的约 70%，S 期细胞比例降低 [2] - AZ191（1–5 μM）在划痕实验中抑制 SW872 和 HT1080 细胞迁移：5 μM 时，24 小时后迁移闭合率分别从约 85% 降至 30%（SW872）和 80% 降至 28%（HT1080）。它还抑制克隆形成，5 μM 时 SW872 和 HT1080 细胞的克隆数分别减少约 65% 和 58% [2] - Western blot 分析显示，AZ191（2.5–5 μM）下调 cyclin D1 蛋白水平（SW872 细胞 5 μM 时降低约 50%），上调 p27Kip1 表达（5 μM 时增加约 2.3 倍），而对 cyclin E1 或 CDK4 水平无影响 [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在脂肪肉瘤（SW872 细胞）裸鼠异种移植模型中，腹腔注射 AZ191（25 mg/kg，每周 5 次，持续 3 周）显著抑制肿瘤生长。与溶媒对照组相比，肿瘤体积减少约 60%，肿瘤重量减轻约 55%。肿瘤组织免疫组化染色显示，Ki-67 增殖指数从约 75% 降至 30%，cyclin D1 Thr286 位点磷酸化水平降低 [2]
- AZ191 给药期间，小鼠体重无显著变化，表明在测试剂量下无明显急性毒性 [2] |
| 酶活实验 |
DYRK1B 激酶活性实验：重组人 DYRK1B 蛋白与底物（如 GSK3βtide 或含 Thr286 的 cyclin D1 肽段）在反应缓冲液中孵育。将系列稀释（0.001–10 μM）的 AZ191 加入反应体系，随后加入 [γ-32P]ATP。30°C 孵育 30 分钟后，加入终止缓冲液终止反应，将混合物点样到磷酸纤维素纸上。洗去未结合的放射性物质，通过液体闪烁计数法测量结合底物的放射性强度，计算抑制率和 IC50 值 [1]
- 激酶选择性实验：在 30 种不同激酶（包括 GSK3α、CDK2、CDK4、JAK2 等）中测试 AZ191（1 μM）的抑制活性。采用与 DYRK1B 相同的放射性实验检测激酶活性，计算每种激酶的抑制率，以评估 AZ191 的选择性 [1] |
| 细胞实验 |
1uM 的 AZ191 无法选择性抑制 HEK-293 细胞中的 DYRK1B 丝氨酸/苏氨酸激酶活性或抑制 DYRK1B 自磷酸-Tyr273。在低至 30-100 nM 的剂量下，AZ191 可抑制 CCND1 的磷酸化，在与 DYRK1A 或 DYRK1B 共表达 CCND1 的 HEK-293 细胞中，对 DYRK1B 的抑制效果优于 DYRK1A。 AZ191 是一种选择性靶向 DYRK1B 的新型抑制剂，其选择性比 DYRK2 大约高 100 倍，比 DYRK1A 高 5-10 倍。为了鉴定 DYRK1B 底物和功能，AZ191 将是一个有用的探针。
cyclin D1 磷酸化实验：HEK293 细胞转染 DYRK1B 和 cyclin D1 表达质粒，转染 24 小时后血清饥饿 12 小时，再用 AZ191（0.1–10 μM）处理 4 小时。制备细胞裂解液，通过 Western blot 检测磷酸化 cyclin D1（Thr286 和 Thr288）、总 cyclin D1、DYRK1B 以及 GSK3β（作为内参）[1] - 细胞增殖实验：脂肪肉瘤细胞（SW872、HT1080、MLS 402）以 5×103 个细胞/孔接种到 96 孔板，贴壁 24 小时后加入 AZ191（0.1–20 μM），培养 72 小时。每孔加入 MTT 试剂，孵育 4 小时后去除上清液，溶解甲臜结晶，测量 570 nm 处吸光度，计算细胞活力和 IC50 值 [2] - 细胞迁移实验（划痕实验）：SW872 和 HT1080 细胞接种到 6 孔板培养至汇合，用 200 μL 移液管尖端划一条直线，PBS 洗涤去除漂浮细胞，加入 AZ191（1–5 μM），分别在 0 和 24 小时拍摄划痕区域图像，通过测量剩余间隙宽度计算迁移闭合率 [2] - 细胞周期和克隆形成实验：SW872 细胞用 AZ191（2.5–5 μM）处理 24 小时后收集，乙醇固定，碘化丙啶染色，流式细胞术分析细胞周期分布。克隆形成实验中，处理后的细胞以 500 个细胞/孔接种到 6 孔板，培养 14 天，结晶紫染色，计数可见克隆数 [2] |
| 动物实验 |
Liposarcoma xenograft model: Female nude mice (6–8 weeks old) were subcutaneously injected with SW872 cells (5×106 cells/mouse) into the right flank. When tumors reached a volume of ~100 mm³, mice were randomly divided into control and treatment groups. AZ191 was dissolved in DMSO and diluted with normal saline (final DMSO concentration = 10%), then administered intraperitoneally at a dose of 25 mg/kg, 5 times per week (Monday to Friday) for 3 weeks. The control group received the same volume of vehicle (DMSO/saline). Tumor volume (measured by caliper every 3 days) and body weight (measured weekly) were recorded throughout the experiment. At the end of the experiment, mice were sacrificed, tumors were excised, weighed, and fixed in formalin for immunohistochemical analysis [2]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
In the nude mouse xenograft study, intraperitoneal administration of AZ191 (25 mg/kg, 5 times/week for 3 weeks) did not cause significant changes in body weight (control vs. treatment: ~20 g vs. ~19.5 g) or obvious toxic symptoms (e.g., lethargy, loss of appetite, organ abnormalities) [2]
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
AZ191 is a novel and selective small-molecule inhibitor of DYRK1B [1,2]
- The mechanism of AZ191 involves specific inhibition of DYRK1B-mediated cyclin D1 Thr286 phosphorylation, leading to stabilization of cyclin D1 and subsequent cell cycle arrest in G1 phase [1] - AZ191 exhibits antitumor activity against liposarcoma cells both in vitro and in vivo, suggesting potential therapeutic value for the treatment of liposarcoma [2] - AZ191 does not cross-react with GSK3β, distinguishing it from non-selective DYRK/GSK3 inhibitors and reducing potential off-target effects [1] |
| 分子式 |
C24H27N7O
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|---|---|---|
| 分子量 |
429.52
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| 精确质量 |
429.228
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| 元素分析 |
C, 67.11; H, 6.34; N, 22.83; O, 3.72
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| CAS号 |
1594092-37-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
72716071
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| 外观&性状 |
Brown solid powder
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| LogP |
3.61
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| tPSA |
71.34
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
601
|
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C([H])([H])[H])C1=C(C([H])=C([H])C(=C1[H])N1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])[H])C([H])([H])C1([H])[H])N([H])C1=NC([H])=C([H])C(C2=C([H])N(C([H])([H])[H])C3C([H])=NC([H])=C([H])C2=3)=N1
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| InChi Key |
ZYVXTMKTGDARKR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H27N7O/c1-29-10-12-31(13-11-29)17-4-5-21(23(14-17)32-3)28-24-26-9-7-20(27-24)19-16-30(2)22-15-25-8-6-18(19)22/h4-9,14-16H,10-13H2,1-3H3,(H,26,27,28)
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| 化学名 |
N-[2-methoxy-4-(4-methylpiperazin-1-yl)phenyl]-4-(1-methylpyrrolo[2,3-c]pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.82 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.82 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3282 mL | 11.6409 mL | 23.2818 mL | |
| 5 mM | 0.4656 mL | 2.3282 mL | 4.6564 mL | |
| 10 mM | 0.2328 mL | 1.1641 mL | 2.3282 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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COA
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