| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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描述：AZD1080 是一种选择性强、高效、口服生物活性高且可透过血脑屏障的 GSK3（糖原合成酶激酶-3）抑制剂，具有神经保护作用。其 Ki 值分别为 6.9 nM 和 31 nM，可抑制人 GSK3 和 GSK3，并且对 GSK3 的选择性比 CDK2、CDK5、CDK1 和 Erk2 高 14 倍以上。高分辨率 X 射线晶体结构表明，AZD1080 通过与 GSK3 相互作用并结合到 ATP 口袋来抑制 GSK3。此外，重组人GSK3和GSK3均已被证实可被AZD1080抑制，其Ki值分别为6.9 nM和31 nM。在完整的大鼠脑组织和表达人tau蛋白的细胞中，AZD1080可阻止tau蛋白的磷酸化。
| 靶点 |
GSK-3α (pKi = 8.2 nM); GSK-3β (pKi = 7.5 nM); cdk5 (pKi = 6.4 nM); cdk2 (pKi = 5.9 nM); cdk1 (pKi = 5.7 nM)
GSK3α (Ki = 6.9 nM [pKi=8.2]) GSK3β (Ki = 31 nM [pKi=7.5]) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
AZD1080 是一种选择性强、口服有效、可透过血脑屏障的 GSK3 抑制剂，对人 GSK3 的 Ki 值分别为 6.9 nM 和 31 nM。它对 cdk2、cdk5、cdk1 和 Erk2 的选择性也超过 14 倍。AZD1080 的 IC50 值为 324 nM，可抑制表达人 tau 蛋白的细胞中 tau 蛋白的磷酸化。[1] AZD1080 以 324 nM 的 IC50 值抑制稳定表达 4 重复人 tau 蛋白的 3T3 成纤维细胞中 Ser396 位点的 tau 蛋白磷酸化，而非选择性 GSK3 抑制剂 LiCl 的 IC50 值为 1.5 mM。在 1 µM 浓度下，1-2 小时观察到 tau 磷酸化的最大抑制，并至少持续 8 小时 [1]。
AZD1080 在 Caco-2 细胞中表现出高渗透性 (17 × 10⁻⁶ cm/s)，在牛内皮血脑屏障细胞试验中也表现出高渗透性 (8 × 10⁻³ cm/min) [1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
AZD1080 口服给药后可抑制大鼠脑内 tau 蛋白磷酸化，峰值浓度下脑/血浆暴露比为 0.5 至 0.8。在小鼠中，AZD1080 可改善认知功能障碍并修复受损突触。急性口服 AZD1080 可剂量依赖性地降低磷酸化糖原合成酶 (GS) 与总糖原合成酶的比值，最高剂量 (10 μmol/kg) 给药 2 小时后，平均最大抑制率达 49%。 [1]
AZD1080（3 或 10 µmol/kg，灌胃）抑制大鼠海马中 Thr231 位点的 tau 蛋白磷酸化，给药后 6 小时最大抑制率分别为 38±2% 和 48±2%，且该作用持续至 24 小时（抑制率分别为 15±7% 和 30±3%）[1]。 在小鼠情境恐惧条件反射 (CFC) 模型中，急性口服 AZD1080（15 µmol/kg）未能逆转 MK-801 诱导的记忆缺陷。然而，亚慢性口服给药（每日两次，连续3天）4或15 µmol/kg可显著抑制MK-801诱导的缺陷（4 µmol/kg时p<0.05；15 µmol/kg时p<0.01），该抑制作用在末次给药后3小时进行。在末次给药（4 µmol/kg）后1.5小时和5小时也观察到了该效应[1]。 在小鼠海马切片的离体LTP实验中，亚慢性给予AZD1080（15 µmol/kg，每日两次，连续3天）可阻止500 nM MK-801引起的LTP诱导破坏（LTP幅度：121±5% vs. 单独MK-801的107±3%，p<0.05）。与载体相比，单独使用AZD1080对LTP诱导没有显著影响[1]。 在成年大鼠中，急性口服AZD1080（1-10 µmol/kg）可剂量依赖性地降低外周血单核细胞（PBMC）中磷酸化糖原合成酶（GS）与总糖原合成酶的比值，在给药后2小时，10 µmol/kg剂量下抑制率最大，为49±2%，并在24小时内恢复至基线水平[1]。 |
| 酶活实验 |
GSK3β、Cdk2 和 Cdk5 的 Ki 值采用闪烁邻近分析法和动力学分析法测定。GSK3α 的测定是 GSK3α 测定的一部分。为了测定 GSKα 的 Ki 值，ATP 的 KM 值为 10 M。在此过程中，Cdk1 受到抑制。为了测定 Ki 值，使用 51 M 的 ATP 作为 KM 值。Erk2 活性测定采用 Erk2 SPA 试剂盒、p42 MAPK 激酶（20 U/孔）和生物素标记的 MBP。为了测定 Ki 值，ATP 的 KM 值为 71 μM[1]。GSK3β、Cdk2 和 Cdk5 的 Ki 值采用闪烁邻近分析法和动力学分析法测定。用于计算Ki值的ATP KM值分别为：GSK3α 10 µmol/L，Cdk1 51 µmol/L，Erk2 71 µmol/L。GSK3α活性测定采用重组人GSK3α。Cdk1抑制实验按照先前描述的方法进行。Erk2活性测定采用丝氨酸/苏氨酸激酶SPA试剂盒，该试剂盒包含p42 MAPK激酶和生物素标记的MBP [1]。
AZD1080（10 µM）对24种蛋白激酶的选择性进行了测试。酶活性测定在0.1 mM ATP存在下进行。还对包括腺苷受体、肾上腺素能受体、钙通道、多巴胺受体、GABA受体、谷氨酸受体、组胺受体、毒蕈碱受体、血清素受体等在内的65个靶点进行了脱靶选择性评估。AZD1080在10 µM浓度下对所有测试靶点的抑制作用均小于50%[1]。 |
| 细胞实验 |
经基因工程改造，四重复序列的tau蛋白可在3T3成纤维细胞中稳定表达。这些细胞内源性GSK3浓度较高，可持续磷酸化tau蛋白。LiCl可抑制这种磷酸化。用各种化学试剂处理后，培养物用5 mM MgCl₂-PBS洗涤两次。Western blot分析的提取物制备方法如下：将细胞在冰冷的提取缓冲液中匀浆，该提取缓冲液由20 mM HEPES（pH 7.4）、100 mM NaCl、10 mM NaF、1% Triton X-100、1 mM原钒酸钠、10 mM EDTA和蛋白酶抑制剂（2 mM苯甲基磺酰氟、10 μg/ml抑蛋白酶、10 μg/ml亮抑蛋白酶和10 μg/ml胃蛋白酶抑制剂）组成。样品在 4 °C 下均质化，并使用 Bradford 法测定蛋白质含量。将总蛋白 (25 μg) 在 10% SDS-PAGE 凝胶上进行电泳，然后转移至硝酸纤维素膜。实验中使用的 tau Ser(P)-396、tau5 和抗 GSK3β 一抗的稀释度均为 1:1000。将膜在 4 °C 下与抗体在 5% 脱脂奶粉溶液中孵育过夜。免疫检测时，使用二抗 (1:5000)，然后进行 ECL 化学发光检测。采用密度扫描法测定免疫反应性。
稳定表达 4 重复人 tau 蛋白的 3T3 成纤维细胞用不同浓度的 AZD1080 处理。细胞裂解后，采用蛋白质印迹法检测总tau蛋白和Ser396位点磷酸化的tau蛋白。tau蛋白磷酸化抑制率以载体处理组为参照进行计算[1]。 采用标准方法测定Caco-2细胞通透性。使用牛内皮细胞血脑屏障细胞实验测定通透性值[1]。 |
| 动物实验 |
小鼠：共使用161只8至12周龄的雄性C57BL/6小鼠。小鼠饲养于标准笼中，每笼3至5只，并定期提供啮齿动物咀嚼物和无限量自来水。每个实验组通常包含9至12只小鼠，卫星组包含2至4只小鼠（有关测定血浆和脑组织中化合物暴露量的信息，请参见下文）。采用急性或亚慢性（每日两次，连续3天）灌胃法给予AZD1080（4.0或15 μmol/kg）或赋形剂（含0.5%抗坏血酸、0.01% EDTA、pH 2.0的水溶液）。最后一次给予AZD1080后，分别于1.5、3或5小时后进行训练试验。
大鼠：使用71只成年雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）。大鼠分别接受急性剂量的AZD1080（1、3或10 mol/kg）或溶剂（5 mL/kg，溶剂为含0.5%抗坏血酸、0.01% EDTA、pH值为2.0的水溶液）。给药后，对大鼠进行镇静，并在1、2、3、6或24小时采集腹主动脉血，置于肝素微量采血管中。血液样本用于分离外周血单核细胞（PBMC）。为了处理血浆并进行后续的生物分析，需要采集单独的血液样本。 对于大鼠 PK/PD 研究，年轻的（11-12 天大的）Sprague-Dawley 大鼠通过口服灌胃（6 mL/kg）接受 AZD1080（3 或 10 µmol/kg）或载体（含 0.5% 抗坏血酸、0.01% EDTA、pH 2.0 的水）。给药后1、2、3、6或24小时，将大鼠断头处死，解剖海马，并采用夹心免疫测定法测定tau蛋白磷酸化水平[1]。 在小鼠认知研究中，雄性C57BL/6小鼠（8-12周龄）经口（10 mL/kg）给予AZD1080（4或15 µmol/kg）或载体（含0.5%抗坏血酸、0.01% EDTA的水溶液，pH 2.0），采用急性或亚慢性给药方式（每日两次，连续3天）。在训练前30分钟皮下注射MK-801（0.1或0.15 mg/kg）或生理盐水。进行情境恐惧条件反射（CFC）实验：训练包括2秒的足底电击（0.7 mA），并在24小时后测量小鼠的僵直行为[1]。 对于离体长时程增强（LTP）研究，小鼠连续3天每天两次接受载体或AZD1080（15 µmol/kg）给药。末次给药后2小时处死小鼠。制备400 µm厚的海马横切片，并置于30-32°C的人工脑脊液（aCSF）中保存。对于AZD1080处理组小鼠的切片，在aCSF中加入50 nM的AZD1080。向灌注液中加入MK-801（300-500 nM）10分钟，随后进行最小强直刺激方案（以200 Hz的频率，每隔5分钟施加4组5个脉冲）。采用 100 Hz 刺激 1 秒诱导 LTP，并记录 fEPSP 振幅 [1]。 在大鼠外周血单核细胞 (PBMC) 研究中，成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠急性口服 AZD1080（1、3 或 10 µmol/kg）或载体（相同制剂），剂量为 5 mL/kg。分别于给药后 1、2、3、6 或 24 小时采集血液。采用密度梯度离心法分离 PBMC，并通过 ELISA 法测定磷酸化谷氨酰胺合成酶 (P-GS) 和总谷氨酰胺合成酶 (T-GS) 的水平 [1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
AZD1080在大鼠体内具有良好的口服生物利用度（15-24%），半衰期为7.1小时[1]。
在大鼠体内，AZD1080在峰值浓度时的脑/血浆暴露比为0.5-0.8，表明其具有良好的脑渗透性[1]。 在健康志愿者中，经过多次递增剂量（每日一次，每次15毫克，持续14天）后，AZD1080在5天内达到稳态暴露，半衰期约为20小时。血浆中药物蓄积有限，且药代动力学未见明显的年龄效应。给药后 1 小时，平均最大血浆浓度为 86±16 nM [1]。 在大鼠中，口服给药后 1 小时，血浆峰浓度分别为：1 µmol/kg 时为 147±4 nM，3 µmol/kg 时为 150±3 nM，10 µmol/kg 时为 464±21 nM [1]。 在小鼠脑中，亚慢性给药 3 小时后，AZD1080 的浓度分别为 19±3 nM (4 µmol/kg) 和 61±10 nM (15 µmol/kg) [1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在一项针对健康中年志愿者的 1 期多次递增剂量研究中，AZD1080（每天一次 15 毫克，持续 14 天）表现出可接受的安全性和耐受性特征[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
AZD1080 属于羟基吲哚类化合物，其结构为 1H-吲哚，在 2、3 和 5 位分别被羟基、5-(吗啉-4-基甲基)吡啶-2-基和氰基取代。它是一种强效的、可穿过血脑屏障的人 GSK3α 和 GSK3β 抑制剂，Ki 值分别为 6.9 nM 和 31 nM。该药物最初由阿斯利康公司开发用于治疗阿尔茨海默病（临床试验现已终止）。它具有多种功能，包括作为 EC 2.7.11.26（tau 蛋白激酶）抑制剂、tau 蛋白聚集抑制剂、抗肿瘤药物和细胞凋亡诱导剂。 AZD1080 属于吗啉、吡啶、羟基吲哚、腈和叔胺类化合物。
AZD1080 是阿尔茨海默病及相关 tau 蛋白病的一种临床候选药物。它通过与 GSK3 催化结构域的 ATP 结合口袋结合，并与 Val-135 形成三个氢键，从而抑制 GSK3。亚慢性（而非急性）AZD1080 治疗可逆转功能障碍系统中的突触可塑性缺陷，这可能是通过修饰 GSK3β 信号通路下游的蛋白质实现的。AZD1080 还能抑制人外周 GSK3 活性，该活性通过淋巴细胞中磷酸化糖原合成酶与总糖原合成酶的比值来衡量。在第 1 天给予 15 mg 剂量后 6 小时，该比值平均最大降低 23±4%，并在 24 小时后恢复至基线水平 [1]。 |
| 分子式 |
C19H18N4O2
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|---|---|
| 分子量 |
334.3718
|
| 精确质量 |
334.142
|
| 元素分析 |
C, 68.25; H, 5.43; N, 16.76; O, 9.57
|
| CAS号 |
612487-72-6
|
| 相关CAS号 |
612487-72-6
|
| PubChem CID |
135564570
|
| 外观&性状 |
Orange solid powder
|
| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
594.0±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
313.0±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.716
|
| LogP |
1.36
|
| tPSA |
85.17
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
| 重原子数目 |
25
|
| 分子复杂度/Complexity |
501
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
O1C([H])([H])C([H])([H])N(C([H])([H])C2=C([H])N=C(C([H])=C2[H])C2=C(N([H])C3C([H])=C([H])C(C#N)=C([H])C2=3)O[H])C([H])([H])C1([H])[H]
|
| InChi Key |
JULOXTBHCHEFBE-ZCXUNETKSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C19H18N4O2/c20-10-13-1-3-16-15(9-13)18(19(24)22-16)17-4-2-14(11-21-17)12-23-5-7-25-8-6-23/h1-4,9,11,21H,5-8,12H2,(H,22,24)/b18-17-
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| 化学名 |
(Z)-3-(5-(morpholinomethyl)pyridin-2(1H)-ylidene)-2-oxoindoline-5-carbonitrile
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| 别名 |
AZD-1080;AZD-1080; AZD 1080
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~52 mg/mL (155.5 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: <1 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% propylene glycol: 20 mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9907 mL | 14.9535 mL | 29.9070 mL | |
| 5 mM | 0.5981 mL | 2.9907 mL | 5.9814 mL | |
| 10 mM | 0.2991 mL | 1.4953 mL | 2.9907 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Binding, potency, and selectivity of AZD1080. J Neurochem. 2013 May;125(3):446-56 |
AZD1080 reverses MK-801-induced impairments in mouse model of cognition |
Demonstration of peripheral target engagement in rats and in human |
CDKL5/GSK3-IN-1
GSK-3β inhibitor 23
GSK3β-IN-1
GSK-3β inhibitor 25
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