| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Bax (Kd = 15.0 μM)
BAI1 targets BAX (Bcl-2-associated X protein). The dissociation constant (Kd) for BAX binding is 15.0 ± 4 μM as determined by microscale thermophoresis. IC50 for inhibition of tBID-induced BAX-mediated membrane permeabilization is 3.3 μM. IC50 for inhibition of tBID-induced BAX membrane translocation is 5 ± 1 μM; for BIM SAHB-induced translocation, IC50 = 2 ± 1 μM. IC50 for inhibition of TNFα/cycloheximide-mediated caspase 3/7 activation in wild-type MEFs is 1.8 μM [1]. |
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| 体外研究 (In Vitro) |
BAX激活抑制剂1 (BAI1) 以剂量依赖的方式抑制tBID诱导的BAX介导的膜通透性增加，IC50值为3.3 μM。BAI1通过其独特的变构位点与单体BAX结合。虽然BAI1并不直接与激活剂竞争抑制溶液中BAX的构象激活和寡聚化，但它是通过一种有利于非活性BAX的变构机制来实现的。此外，BAI1以剂量依赖的方式抑制tBID (IC50 = 5 ± 1 μM) 或BIM SAHB (IC50 = 2 ± 1 μM) 诱导的BAX膜结合和转位，其IC50值与BAX介导的脂质体释放相当。 BAI1仅抑制BAX依赖性细胞死亡[1]。
BAI1直接与非活性BAX结合，Kd值为15.0 ± 4 μM（MST）。它抑制tBID诱导的BAX介导的脂质体膜通透性，IC50值为3.3 μM。BAI1在脂质体膜存在下抑制tBID诱导的BAX寡聚化和二聚化，这可通过BMH交联和SDS-PAGE检测。它抑制tBID诱导的BAX膜转位，IC50值为5 ± 1 μM；抑制BIM SAHB诱导的转位，IC50值为2 ± 1 μM。在基于核磁共振（NMR）的激活实验中，BAI1（100 μM）能显著抑制BIM SAHB诱导的BAX构象激活和寡聚化，在24小时和12天时分别保留约80%和50%的单体BAX。BAI1在抗BH3结构域抗体的下拉实验中抑制了BIM SAHB诱导的BAX BH3结构域的暴露。BAI1提高了BAX的热稳定性，使其激活温度升高约10°C（从约50°C提高到约60°C）。氢氘交换质谱和顺磁弛豫增强（PRE）实验表明，BAI1保护了BAI位点周围的区域以及α5螺旋的疏水核心残基[1]。 |
| 酶活实验 |
通过配体检测的一维 1H-NMR、STD、CPMG 实验和二维 1H-15N HSQC NMR 评估了 BAI1 与 BAX 的结合。对于配体检测 NMR，将 100-150 μM 的 BAI1 与未标记的 BAX (10-15 μM) 在 50 mM 磷酸钾、50 mM NaCl、pH 6.0、10% D2O 中孵育。STD 实验使用 -2000 Hz 的离共振频率和 450 Hz 的共振频率，饱和时间为 0.5-2 s。CPMG 实验使用 200 ms 的弛豫延迟。对于 HSQC，用浓度高达 150 μM 的 BAI1 滴定 15N 标记的 BAX (50 μM)。在 600 MHz 光谱仪上于 25°C 下采集光谱，并计算化学位移扰动 (CSP)。微尺度热泳 (MST)：将 100 nM 标记的 BAX 与浓度递增的 BAI1 (150-0.5 μM) 在 MST 缓冲液（100 mM 磷酸钾，pH 7.4，150 mM NaCl）中孵育，超声处理 10 秒，装入毛细管，并使用 Monolith NT.115 进行分析，LED 功率为 30%，红外激光功率分别为 40% 和 60%；使用 1:1 结合模型确定 Kd。氢氘交换质谱 (HXMS)：将 1 mg/ml BAX 单体或含 BAI1 (2 mg/ml) 的 BAX 稀释于 D2O 缓冲液（8.3 mM Tris，150 mM NaCl，pDread 7.2）中，于 0°C 孵育 10 s、100 s 和 1000 s，淬灭，冷冻，并进行分析。顺磁弛豫增强 (PRE)：将 50 μM 15N 标记的 BAX 与 200 μM BAI1 和 10 mM hy-TEMPO 混合，进行 HSQC 采集，循环延迟时间为 5 s；PRE 计算为有/无 hy-TEMPO 时的峰强度比值 [1]。
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| 细胞实验 |
在促凋亡因子TNF/CHX处理8小时后，检测野生型MEF细胞的Caspase 3/7活性，并比较是否同时给予推荐剂量的BAI1。
BAI1在基于细胞的实验中进行了测试。将野生型MEF细胞、BAK KO MEF细胞和BAX KO MEF细胞（96孔板，每孔1×10^4个细胞）用TNFα（促凋亡因子）和环己酰亚胺（CHX）处理8小时，同时给予或不给予指定剂量的BAI1。使用Caspase-Glo 3/7化学发光试剂检测Caspase-3/7的激活情况。BAI1抑制了野生型MEF细胞（IC50 = 1.8 μM）和BAK KO MEF细胞的凋亡，但对BAX KO MEF细胞没有抑制作用。将 OCI-AML3 细胞（2.5×10^3 个细胞/孔，接种于 384 孔板）在无血清培养基中用 BTSA1（BAX 直接激活剂）和 BAI1 或 DMSO 处理 2.5 小时，然后加入 10% FBS；6 小时后用 CellTiter-Glo 检测细胞活力。BAI1 呈剂量依赖性地抑制 BTSA1 诱导的细胞死亡。线粒体去极化测定：将用人 BAX 重组的 BAX-/- BAK-/- MEF（384 孔板中每孔 5,000 个细胞）用 BAI1（5、2.5、1.25 μM）或 DMSO 处理 2 小时，洗涤，然后用 JC-1（2 μM）、寡霉素（0.02 mg/ml）、洋地黄皂苷（0.05 mg/ml）、2-巯基乙醇（0.01 M）在 MEB 溶液（150 mM 甘露醇、10 mM HEPES-KOH、50 mM KCl、0.02 mM EGTA、0.02 mM EDTA、0.1% BSA、5 mM 琥珀酸，pH 7.5）中染色，然后用 5 μM BIM BH3 肽处理；在 545/590 nm 处测量荧光；BAI1 剂量依赖性地抑制 BIM BH3 诱导的线粒体去极化 [1]。 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1-(3,6-二溴-9-咔唑基)-3-(1-哌嗪基)-2-丙醇属于溴苯类和联苯类化合物。
BAI1 是一种小分子变构抑制剂，可与螺旋α3、α4、α5和α6交界处的新型口袋（BAI位点）结合，该位点不同于N端触发位点和典型的BH3沟槽。它能稳定BAX的非活性构象，从而阻止BH3诱导的构象变化、BH3结构域暴露、线粒体转位和寡聚化。BAI1 选择性抑制BAX依赖性（而非BAK依赖性）细胞死亡。它最初是通过BAX介导的细胞色素c释放试验筛选发现的。结构-活性关系 (SAR) 表明，二溴取代的咔唑环和哌嗪-丙醇延伸对活性至关重要。BAI1 是研究 BAX 激活机制的有效工具，并具有治疗 BAX 依赖性细胞死亡介导的疾病（如心肌梗死、中风和神经退行性疾病）的潜力 [1]。 |
| 分子式 |
C19H21BR2N3O
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|---|---|
| 分子量 |
540.11942
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| 精确质量 |
536.958
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| 元素分析 |
C, 48.85; H, 4.53; Br, 34.21; N, 8.99; O, 3.42
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| CAS号 |
335165-68-9
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| 相关CAS号 |
335165-68-9
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| PubChem CID |
2729027
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
388.1ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
188.5ºC
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| LogP |
5.456
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| tPSA |
40.43
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
422
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
OC(CN1CCNCC1)CN2C3=C(C4=C2C=CC(Br)=C4)C=C(Br)C=C3
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| InChi Key |
KUUJEXLRLIPQQJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H21Br2N3O/c20-13-1-3-18-16(9-13)17-10-14(21)2-4-19(17)24(18)12-15(25)11-23-7-5-22-6-8-23/h1-4,9-10,15,22,25H,5-8,11-12H2
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| 化学名 |
1-(3,6-dibromocarbazol-9-yl)-3-piperazin-1-ylpropan-2-ol
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| 别名 |
BAI1; BAI 1; BAI-1; Brain-specific angiogenesis inhibitor 1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~18 mg/mL (~38.5 mM)
Ethanol: ~3 mg/mL (~6.4 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.87 mg/mL (4.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 18.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.87 mg/mL (4.00 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 18.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8514 mL | 9.2572 mL | 18.5144 mL | |
| 5 mM | 0.3703 mL | 1.8514 mL | 3.7029 mL | |
| 10 mM | 0.1851 mL | 0.9257 mL | 1.8514 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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粤公网安备 44011102003439号
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