BAM 7

别名: BAM 7; BAM7; BAM-7 3-甲基-1-(4-苯基-2-噻唑)-1H-吡唑-4,5-二酮 4-[2-(2-乙氧基苯基)肼酮]; 3-甲基-1-(4-苯基-2-噻唑基)-1H-吡唑-4,5-二酮 4-[2-(2-乙氧基苯基)腙]; 3-甲基-1-(4-苯基-2-噻唑基)-1H-吡唑-4,5-二酮4-(2-(2-乙氧基苯基)腙;BAM7
目录号: V8454 纯度: ≥98%
BAM 7 是一种 Bax 激活剂 (EC50 = 3.3 μM)。
BAM 7 CAS号: 331244-89-4
产品类别: Bcl-2
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
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产品描述
BAM 7 是一种 Bax 激活剂 (EC50 = 3.3 μM)。 BCL-2 家族蛋白是细胞凋亡途径的关键调节因子。为了保持细胞存活,抗凋亡成员结合促凋亡成员的 BCL-2 同源性 3 (BH3) 死亡结构域,例如 BAX。为了成功地重新激活癌症中的细胞凋亡,抗细胞凋亡的 BH3 结合沟已成为目标。
生物活性&实验参考方法
靶点
Bax (IC50 = 3.3 μM)
体外研究 (In Vitro)
BAM7 直接结合 BAX N 端面先前未表征的 BH3 结合凹槽。在 BAX 的 N 端面,BH3 结合凹槽被 BAM7 特异性识别。事实上,BAM7 在 BIM BH3 螺旋激活 BAX 的表面直接与 BAX 相互作用。 BAX 的功能激活是 BAM7 的结果。 BAM7 以剂量和时间响应的方式导致 BAX 从单体转变为寡聚体,BAX:BAM7 的剂量比为 1:8 时动力学接近饱和。体外 BAX 寡聚化、BAX 介导的孔形成和 BAX 依赖性细胞死亡都是由 BAM7 引发的。 BAM7 通过触发细胞内 BAX 激活的标志特征来选择性诱导 BAX 介导的细胞凋亡。 BAX 介导的细胞凋亡的生化和形态学特征仅由含有 BAX 的细胞系中的 BAM7 诱导。 [1]
酶活实验
为了创建直接结合曲线,FITC-BIM SAHB (50 nM) 首先与全长 BAX、BCL-XLΔC、MCL-1ΔNΔC、BFL-1/A1ΔC 或 BAKΔC 或 BAKC 的系列稀释液一起孵育,并具有荧光偏振20 分钟后在 SpectraMax M5 酶标仪上进行测量。对于竞争测定,将小分子或乙酰化 BIM SAHB (Ac-BIM SAHB) 与 FITC-BIM SAHB (50 nM) 混合,然后以 ~EC75 浓度添加重组蛋白(BAX、BAKΔC:500 nM;BCL-XLΔC) 、MCL-1ΔNΔC、BFL-1/A1ΔC:200 nM)通过直接结合测定确定。 IC50值是在荧光偏振测量20分钟后使用Prism软件通过竞争性结合曲线的非线性回归分析来确定的。
细胞实验
将 MEF(每孔 2.5 × 103 个细胞)接种到 96 孔不透明板中 18-24 小时,然后在 37 °C 下孵育,最终体积为 100 L,并用 BAM7、ANA-BAM16 或 BAM7、ANA-BAM16 进行连续稀释。载体(0.15%(v/v)DMSO)。根据制造商的说明,添加 CellTiter-Glo 试剂以测定 24 小时的细胞活力,并使用 SpectraMax M5 酶标仪测量发光。进行至少三次活力测定重复,然后将数据标准化为载体处理的对照孔。
参考文献

[1]. Nat Chem Biol . 2012 Jul;8(7):639-45.

*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C21H19N5O2S
分子量
405.476
精确质量
405.1259
元素分析
C, 62.21; H, 4.72; N, 17.27; O, 7.89; S, 7.91
CAS号
331244-89-4
相关CAS号
331244-89-4
外观&性状
Solid powder
SMILES
CCOC1=CC=CC=C1N=NC2=C(NN(C2=O)C3=NC(=CS3)C4=CC=CC=C4)C
InChi Key
WRLVHADVOGFZOZ-UHFFFAOYSA-N
InChi Code
InChI=1S/C21H19N5O2S/c1-3-28-18-12-8-7-11-16(18)23-24-19-14(2)25-26(20(19)27)21-22-17(13-29-21)15-9-5-4-6-10-15/h4-13,25H,3H2,1-2H3
化学名
4-[(2-ethoxyphenyl)diazenyl]-5-methyl-2-(4-phenyl-1,3-thiazol-2-yl)-1H-pyrazol-3-one
别名
BAM 7; BAM7; BAM-7
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外)
DMSO: 2~5 mg/mL (4.9~12.3 mM)
溶解度 (体内)
Solubility in Formulation 1: ≥ 0.5 mg/mL (1.23 mM) (saturation unknown) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (add these co-solvents sequentially from left to right, and one by one), clear solution.
For example, if 1 mL of working solution is to be prepared, you can add 100 μL of 5.0 mg/mL clear DMSO stock solution to 900 μL of corn oil and mix evenly.

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.4662 mL 12.3311 mL 24.6621 mL
5 mM 0.4932 mL 2.4662 mL 4.9324 mL
10 mM 0.2466 mL 1.2331 mL 2.4662 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
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配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • n silico screen for small-molecule binders of the BAX trigger site identifies BAM7. Nat Chem Biol . 2012 Jul;8(7):639-45.
  • BAM7 directly engages the BAX trigger site. Nat Chem Biol . 2012 Jul;8(7):639-45.
  • BAM7 triggers in vitro BAX oligomerization, BAX-mediated pore formation and BAX-dependent cell death. Nat Chem Biol . 2012 Jul;8(7):639-45.
  • BAM7 induces the biochemical and morphologic features of BAX-mediated apoptosis in Bak−/− MEFs. Nat Chem Biol . 2012 Jul;8(7):639-45.
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