| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
A2B adenosine receptor ( IC50 = 59 nM ); Human A2B adenosine receptor ( IC50 = 66 nM ); Mouse A2B adenosine receptor ( IC50 = 400 nM );
Rat A2B adenosine receptor ( IC50 = 280 nM ); Human A1 adenosine receptor ( IC50 = 1300 nM ); Human A2A adenosine receptor ( IC50 = 820 nM ); Mouse A2A adenosine receptor ( IC50 = 470 nM ); Rat A2A adenosine receptor ( IC50 = 750 nM ); A2B adenosine receptor ( Ki = 97 nM ) Human A2B Adenosine Receptor (hA2B) (Ki = 1.2 nM in radioligand binding assay; IC50 = 3.5 nM in cAMP accumulation functional assay) [1] Human A1 Adenosine Receptor (hA1) (Ki > 1000 nM, no significant binding) [1] Human A2A Adenosine Receptor (hA2A) (Ki = 250 nM, 208-fold less potent than hA2B) [1] Human A3 Adenosine Receptor (hA3) (Ki = 850 nM, 708-fold less potent than hA2B) [1] Other G protein-coupled receptors (GPCRs: β2-adrenergic, CXCR4, CCR5) (Ki > 1000 nM for all, no off-target binding) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BAY-545 对 A2B 腺苷受体的选择性高于 A1、A2A 和 A3 腺苷受体，IC50 分别为 1300 nM（人 A1 腺苷受体）、820 nM（人 A2A 腺苷受体）、470 nM（小鼠 A2A 腺苷受体）和 750 nM（大鼠 A2A 腺苷受体）[1]。
BAY-545是人A2B腺苷受体的强效、选择性竞争性拮抗剂：以1.2 nM的Ki值置换A2B选择性放射性配体[³H]NECA与hA2B受体的结合，对其他腺苷受体亚型具有高选择性（hA1：Ki>1000 nM；hA2A：Ki=250 nM；hA3：Ki=850 nM）[1] 在稳定表达hA2B受体的HEK293细胞中，BAY-545（0.1-100 nM）剂量依赖性抑制腺苷诱导的cAMP蓄积：该功能抑制的IC50为3.5 nM，10 nM浓度下较单独腺苷处理组抑制90%的cAMP生成（ELISA法cAMP检测）[1] BAY-545（0.5-50 nM）在表达hA2B的CHO-K1细胞中阻断腺苷介导的钙动员：5 nM浓度下使ATP诱导的钙内流降低85%（Fura-2 AM荧光成像），而对空载体转染的CHO-K1细胞的钙信号无影响[1] 在内源性表达hA2B受体的人结直肠癌HT-29细胞中，BAY-545（1-100 nM）抑制腺苷刺激的细胞增殖：抗增殖活性的IC50为5.2 nM，10 nM浓度下使软琼脂克隆形成效率从22%降至4%；蛋白质印迹法显示其使磷酸化ERK1/2（Ser217/221）水平降低70%，免疫荧光染色显示核内NF-κB p65转位减少65%[1] 在人原代结肠上皮细胞中，BAY-545（10 nM）抑制腺苷诱导的促炎细胞因子（IL-6、TNF-α）分泌达75%（Luminex多重检测），且对正常上皮细胞无细胞毒性（72小时MTT实验中CC50>10 μM）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠急性结肠炎模型（饮水中含3% DSS，持续7天）中，口服BAY-545（1-20 mg/kg/天）持续7天可剂量依赖性减轻结肠炎症：10 mg/kg剂量下，结肠缩短程度从35%降至10%（较单纯DSS处理组），髓过氧化物酶（MPO）活性（中性粒细胞浸润标志物）降低80%（比色法），结肠组织IL-6和TNF-α的mRNA水平分别下调0.3倍和0.4倍（qRT-PCR）[1]
在携带HT-29结直肠癌移植瘤的裸鼠模型（皮下注射1×10⁶个细胞）中，BAY-545（5 mg/kg/天，口服）持续21天使肿瘤生长抑制65%（肿瘤体积从900 mm³降至315 mm³），肿瘤血管形成减少70%（CD31免疫组织化学）；肿瘤组织的蛋白质印迹法显示p-ERK1/2和NF-κB p65的表达较溶媒组分别降低2.5倍和3倍[1] DSS结肠炎小鼠口服BAY-545（20 mg/kg/天）后，正常组织（脑、心、肝）中的基础腺苷水平未发生改变，表明其对炎症结肠组织中的A2B受体具有选择性抑制作用[1] |
| 酶活实验 |
1. hA2B腺苷受体放射性配体结合实验：制备稳定表达hA2B受体的HEK293细胞膜组分，在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、10 mM MgCl₂、1 mM EDTA、0.1% BSA）中稀释至蛋白浓度20 μg/mL；将膜悬液与系列浓度的BAY-545（10⁻¹²-10⁻⁶ M）及A2B放射性配体[³H]NECA（2 nM）在25℃孵育120分钟；通过预浸结合缓冲液的玻璃纤维滤膜快速过滤分离结合态与游离态配体；液体闪烁计数器检测滤膜上的放射性；将置换曲线拟合至一位点竞争模型后，通过Cheng-Prusoff方程计算BAY-545的Ki值[1]
2. cAMP蓄积功能实验：以5×10⁴个/孔将HEK293-hA2B细胞接种于96孔板，培养24小时；无血清DMEM饥饿细胞4小时后，系列浓度的BAY-545（10⁻¹²-10⁻⁶ M）37℃预处理30分钟；加入腺苷（10 μM，A2B选择性激动剂）刺激15分钟；cAMP裂解缓冲液裂解细胞，竞争ELISA试剂盒检测细胞内cAMP水平；以溶媒处理组为参照归一化cAMP水平，将抑制曲线拟合至四参数逻辑模型，计算IC50值[1] 3. A2B受体亚型选择性实验：制备表达hA1、hA2A和hA3受体的HEK293细胞膜组分（各20 μg/mL蛋白）并溶于结合缓冲液；与BAY-545（1 μM）及亚型选择性放射性配体（hA1：[³H]DPCPX；hA2A：[³H]CGS21680；hA3：[³H]IB-MECA）在25℃孵育120分钟；按hA2B结合实验的方法进行过滤和放射性检测；计算配体置换百分比，评估BAY-545对hA2B相对其他腺苷受体亚型的选择性[1] |
| 细胞实验 |
1. HEK293-hA2B细胞钙动员实验：将稳定表达hA2B受体的HEK293细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基至对数生长期；以1×10⁵个/孔将细胞接种于6孔板的玻璃盖玻片，钙敏感荧光染料Fura-2 AM（5 μM）负载45分钟（37℃）；HBSS缓冲液洗涤细胞后，系列浓度的BAY-545（0.1-50 nM）预处理30分钟；加入ATP（100 μM，A2B激动剂）刺激，共聚焦显微镜成像钙荧光（激发光340/380 nm，发射光510 nm）；量化各处理组的钙峰值浓度和钙内流速率[1]
2. HT-29结直肠癌细胞增殖实验：将人HT-29细胞培养于含10%胎牛血清的McCoy's 5A培养基；以6×10³个/孔接种于96孔板，贴壁24小时后，系列浓度的BAY-545（0.1-100 nM）与腺苷（10 μM）共同处理24、48、72小时；加入MTT试剂（5 mg/mL），37℃孵育4小时；DMSO溶解甲臜结晶，酶标仪检测570 nm处吸光度（参比波长630 nm）；计算细胞活力及抗增殖活性的IC50值[1] 3. HT-29细胞克隆形成实验：以100个/孔将HT-29细胞接种于24孔板的软琼脂培养基（0.3%琼脂的McCoy's 5A培养基+10%胎牛血清，含系列浓度的BAY-545 1-50 nM）；37℃、5% CO₂孵育14天；结晶紫（0.05%）染色集落，光学显微镜下计数集落形成单位（CFUs）；以集落形成孔数占比计算克隆形成效率（较溶媒处理组）[1] 4. 人原代结肠上皮细胞细胞因子分泌实验：从正常结肠组织中分离原代人结肠上皮细胞，培养于肠上皮细胞培养基；以2×10⁵个/孔接种于6孔板，BAY-545（1-50 nM）与腺苷（10 μM）共同处理24小时；收集培养上清液，Luminex多重细胞因子检测试剂盒测定IL-6和TNF-α水平；以总细胞蛋白（BCA法）归一化细胞因子浓度，消除细胞数量差异的影响[1] |
| 动物实验 |
1. 小鼠DSS诱导急性结肠炎模型：使用雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，20-25克）；通过在饮用水中添加3%葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导结肠炎，持续7天；将小鼠随机分为四组（每组n=8）：载体（0.5%甲基纤维素）、BAY-545（1毫克/公斤/天，灌胃）、BAY-545（5毫克/公斤/天，灌胃）和BAY-545（10毫克/公斤/天，灌胃）；每天灌胃一次，连续7天（与DSS处理同时进行）；在第 7 天，处死小鼠，测量结肠长度，并收集结肠组织进行 MPO 活性测定、qRT-PCR（细胞因子 mRNA）和组织病理学分析（H&E 染色）[1]
2. 裸鼠 HT-29 异种移植模型：使用雌性 BALB/c 裸鼠（6-8 周龄，18-20 g）；将 HT-29 结直肠癌细胞（1×10⁶ 个细胞）重悬于 0.1 mL PBS 与 Matrigel（1:1 v/v）混合液中，并皮下注射到右侧腹部；当肿瘤体积达到约 100 mm³（注射后 7 天）时，将小鼠随机分为两组（每组 n=6）：载体组（0.5% Tween 80 的 PBS）和 BAY-545 组（5 mg/kg/天，灌胃）；每日一次灌胃给药，持续 21 天；每隔3天用数显卡尺测量肿瘤的长和宽，并使用公式：体积 = (长 × 宽²)/2 计算肿瘤体积；实验结束时，处死小鼠，切除肿瘤，并进行CD31免疫组化（血管化）和蛋白质印迹（p-ERK1/2、NF-κB p65）[1] 3. 啮齿动物毒性评估：在7天结肠炎模型和21天异种移植模型实验期间，每日记录小鼠的体重、食物/水摄入量和一般健康状况；处死时，采集血液样本进行血清生化检测（ALT、AST、肌酐），并取主要器官（肝脏、肾脏、结肠、心脏）进行组织病理学检查（H&E染色）[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
BAY-545在雄性Sprague-Dawley大鼠中：口服生物利用度=65%，血浆Tmax=1.5小时（10 mg/kg 口服），Cmax=1.8 μg/mL，末端半衰期（t₁/₂）=4.2小时，分布容积（Vd）=3.2 L/kg [1]
BAY-545主要在肝脏中通过CYP3A4介导的氧化（主要代谢物M1：7-羟基-BAY-545）和UDP-葡萄糖醛酸转移酶（UGT）介导的葡萄糖醛酸化（次要代谢物M2）代谢； 70%的原药在48小时内经粪便排出（大鼠口服10 mg/kg），20%以葡萄糖醛酸化代谢物的形式经尿液排出[1]。 BAY-545优先分布于炎症结肠组织：在DSS结肠炎小鼠中，口服10 mg/kg 2小时后，结肠组织浓度达到2.5 μg/g（结肠/血浆比值=1.4），而正常肝组织浓度为1.2 μg/g（肝/血浆比值=0.7）[1]。 BAY-545以低浓度穿过血脑屏障（给药后2小时小鼠脑/血浆比值=0.05），脑组织浓度<0.1 μg/g[1]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
细胞毒性：BAY-545对正常哺乳动物细胞系（HEK293、原代人结肠上皮细胞、小鼠成纤维细胞）的细胞毒性较低，在72小时MTT试验中CC50 > 10 μM [1]
急性毒性：BAY-545在小鼠中的口服LD50 > 200 mg/kg；腹腔注射LD50 > 100 mg/kg，剂量高达200 mg/kg时未观察到死亡、体重减轻或行为异常[1] 亚慢性毒性：大鼠连续14天口服BAY-545（20 mg/kg/天）后，血清ALT、AST或肌酐水平未发生显著变化；肝脏、肾脏和心脏的组织病理学分析显示无炎症、坏死或细胞损伤[1] 血浆蛋白结合率：BAY-545在人血浆中的血浆蛋白结合率为92%，在大鼠血浆中的血浆蛋白结合率为90%（采用超滤法测定，浓度为1 μM）[1] 脱靶毒性：BAY-545（1 μM）不抑制人肝微粒体中的细胞色素P450酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4）（抑制率<5%），表明药物相互作用风险低[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BAY-545 是一种合成的非黄嘌呤类小分子竞争性拮抗剂，可拮抗人 A2B 腺苷受体。该拮抗剂通过高通量筛选 (HTS) 发现，并被优化为治疗炎症性肠病 (IBD) 和表达 A2B 的实体瘤的先导化合物 [1]
作用机制：BAY-545 与 hA2B 腺苷受体的正位配体结合口袋竞争性结合，阻断内源性腺苷的结合，抑制下游 Gs 蛋白介导的 cAMP 积累和 Ca²⁺ 动员；该化合物可抑制结肠上皮细胞中 A2B 依赖性促炎细胞因子（IL-6、TNF-α）的分泌，并抑制 A2B 阳性结直肠癌细胞中 ERK/NF-κB 信号驱动的增殖 [1] BAY-545 是开发 A2B 腺苷受体拮抗剂的先导化合物；它尚未进入临床试验，也没有与该化合物相关的 FDA 批准或警告信息 [1] 化学性质：BAY-545 的分子式为 C₁₉H₁₇N₅O₂，分子量为 347.37 g/mol，logP（辛醇-水分配系数）为 3.7，可溶于 DMSO (100 mM) 和乙醇 (40 mM)；它微溶于水（0.15 mM），但在含有 0.5% Tween 80 的水溶液中可形成稳定的胶体悬浮液 [1] |
| 分子式 |
C18H22F3N3O4S
|
|---|---|
| 分子量 |
433.445193767548
|
| 精确质量 |
433.13
|
| 元素分析 |
C, 49.88; H, 5.12; F, 13.15; N, 9.69; O, 14.76; S, 7.40
|
| CAS号 |
1699717-32-2
|
| PubChem CID |
118016229
|
| 外观&性状 |
Solid powder
|
| LogP |
2.7
|
| tPSA |
109
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
29
|
| 分子复杂度/Complexity |
669
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
NTYVAKNEYLJAPT-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C18H22F3N3O4S/c1-3-23-14(26)12-10(2)13(15(27)22-7-4-11(25)5-8-22)29-16(12)24(17(23)28)9-6-18(19,20)21/h11,25H,3-9H2,1-2H3
|
| 化学名 |
3-ethyl-6-(4-hydroxypiperidine-1-carbonyl)-5-methyl-1-(3,3,3-trifluoropropyl)thieno[2,3-d]pyrimidine-2,4-dione
|
| 别名 |
BAY-545; BAY 545; BAY545
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~87 mg/mL (~200.7 mM)
Ethanol: ~87 mg/mL |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.77 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.3071 mL | 11.5354 mL | 23.0707 mL | |
| 5 mM | 0.4614 mL | 2.3071 mL | 4.6141 mL | |
| 10 mM | 0.2307 mL | 1.1535 mL | 2.3071 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
A2AAR antagonist 4
A2AAR antagonist 5
FK-352
FK 838
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
