| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| Other Sizes |
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PD：BDP9066 (BDP-9066) 是一种新型、高效且选择性的 MRCK（肌强直营养不良相关 Cdc42 结合激酶）抑制剂，具有抗癌活性。在 SCC12 细胞中，其对 MRCKβ 的 IC50 值为 64 nM，对 MRCKα/β 的 Ki 值分别为 0.0136 nM 和 0.0233 nM（内部测定）。其作用机制是通过降低底物磷酸化水平。BDP9066 可导致癌细胞形态改变，并抑制其运动和侵袭能力。它通过降低底物磷酸化水平对皮肤癌具有治疗作用。
| 靶点 |
MRCKα and MRCKβ (myotonic dystrophy-related Cdc42-binding kinases).
In vitro enzyme assays showed BDP9066 inhibited MRCKα and MRCKβ with Kᵢ values of 0.34 nM and 0.78 nM, respectively, under in-house optimized conditions. Against ROCK1 and ROCK2, Kᵢ values were >1277 nM and >2553 nM, respectively. [1] In a competitive binding assay against DMPK, BDP9066 had a Kd of 0.98 nM. [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BDP9066 具有抗增殖特性，对血癌细胞的活性最高。BDP9066 通过抑制 MLC 磷酸化来阻止 SCC12 鳞状细胞癌的运动和侵袭 [1]。
BDP9066 以剂量依赖的方式抑制 SCC12 细胞中 MLC2 的磷酸化，EC₅₀ 为 64 nM。[1] 在 SCC12 细胞中，BDP9066 处理（0.5 µM，2 小时）诱导了形态学变化，包括细胞长度、宽度和面积增加，以及细胞圆度降低，这些变化通过高内涵分析确定。[1] BDP9066（1 µM，约 18 小时）减少了 SCC12 细胞皮质和胞质区域丝状肌动蛋白的聚集。 [1] BDP9066 (0.4 µM) 显著降低了 SCC12 细胞的随机迁移，6 小时内平均细胞速度和累积距离降低了 21%，平均欧氏距离降低了 18%。[1] 在类器官侵袭实验中，BDP9066 (0.4 µM) 与 DMSO 对照组相比，显著降低了 SCC12 细胞的侵袭百分比 50%。[1] 用 1 µM BDP9066 处理表达 FLAG 标签 MRCKα 的 HEK293 细胞 2 小时，可阻断 pS1003 免疫反应性。[1] 在体外激酶实验中，BDP9066 可阻断去磷酸化 MRCKα 的自身磷酸化 (pS1003) 和 MLC2 的磷酸化。 [1] BDP9066在757种人类癌细胞系中均表现出抗增殖作用，其中血液系统癌症最为敏感。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
局部应用BDP9066可显著降低磷酸化MRCKα S1003染色和肿瘤体积[1]。
在小鼠背部皮肤局部应用BDP9066（2天内，每天4次，每次25 µg）可显著降低表皮MRCKα pS1003阳性染色。[1] 在DMBA/TPA两阶段化学致癌小鼠鳞状细胞癌（SCC）模型中，与DMSO溶剂对照组相比，局部应用BDP9066（每周5次，每次25 µg，持续14周）可显著降低每只小鼠的总肿瘤体积和平均乳头状瘤体积。 [1] 在同一DMBA/TPA模型中，BDP9066治疗与治疗部位皮肤和乳头状瘤中MRCKα pS1003免疫组化染色显著降低相关。[1] |
| 酶活实验 |
使用重组激酶蛋白与FAM标记的肽底物和ATP孵育，进行MRCKα和MRCKβ激酶活性测定。孵育后，加入结合试剂以结合磷酸化肽，并测量荧光偏振。抑制率的计算采用无抑制剂（0%）或无酶（100%）对照。[1] 激酶选择性分析由外包供应商使用基于FRET的检测方法进行。将激酶与肽底物和ATP在指定浓度的BDP9066存在下孵育。[1] 使用竞争性LanthaScreen Eu时间分辨FRET（TR-FRET）激酶结合检测方法，测试BDP9066是否能置换与DMPK ATP结合位点结合的荧光示踪剂。BDP9066的Kd值使用Cheng-Prusoff方程计算。 [1]
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| 细胞实验 |
将SCC12人鳞状细胞癌细胞进行培养，并用不同剂量的BDP9066或DMSO溶剂进行处理。进行Western blot分析时，处理后裂解细胞，并用SDS-PAGE分析裂解液。[1]
进行细胞活力检测时，将SCC12细胞接种于培养皿中，用不同剂量的BDP9066处理24小时，并使用发光细胞活力检测法测定细胞活力。[1] 进行形态学分析时，将SCC12细胞用BDP9066或DMSO处理2小时，固定、透化后，用鬼笔环肽、DAPI和全细胞染料染色。使用高内涵成像系统对细胞进行成像和分析。 [1] 免疫荧光实验中，将SCC12细胞接种于盖玻片上，用1 µM BDP9066或DMSO处理1小时，然后固定、透化，并用荧光鬼笔环肽染色F-肌动蛋白。使用共聚焦显微镜成像。[1] 随机迁移实验中，将SCC12细胞用0.4 µM BDP9066或DMSO处理1小时，然后置于活细胞成像仪中，每15分钟成像一次，持续6小时。使用图像分析软件分析细胞迁移轨迹。[1] 类器官侵袭实验中，将SCC12细胞培养于由癌相关成纤维细胞处理的3D大鼠尾胶原基质上。用0.4 µM BDP9066或DMSO处理细胞，并测量侵袭细胞的百分比。 [1] 用FLAG-MRCKα转染的HEK293细胞用1 µM BDP9066处理2小时，然后裂解细胞，并通过Western blot分析pS1003的表达。[1] 体外激酶活性测定中，将免疫沉淀的MRCKα与ATP和重组MLC2在激酶缓冲液中孵育，并加入或不加入BDP9066。反应通过加入沸腾的SDS终止，并通过Western blot分析样品。[1] |
| 动物实验 |
在药代动力学和药效学研究中，FVB小鼠局部涂抹BDP9066（25 µg溶于50 µL 80% DMSO）或赋形剂（50 µL 80% DMSO），连续2天，共4次。末次给药2小时后处死小鼠，采集皮肤和血液样本用于浓度测定和免疫组织化学分析。[1]
为了研究给药方案，小鼠局部涂抹BDP9066（溶于80% DMSO）单次，剂量分别为10 µg或25 µg；或每日4次，每次25 µg；或每日8次（用药4天，停药2天，再用药4天）。末次给药后，在不同时间点（2、4、8、24小时）处死小鼠。 [1] 在DMBA/TPA皮肤癌模型中，FVB小鼠于第1天局部涂抹25 µg DMBA。从第5天起，每周三次涂抹4.7 µg TPA。同样从第5天起，小鼠每周五次接受25 µg BDP9066（溶于50 µL 80% DMSO）或溶剂对照治疗，持续14周。每周监测小鼠体重和一般状况，并记录肿瘤大小和数量。实验人员对分组情况不知情。当乳头状瘤直径达到12 mm时，处死小鼠。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠皮肤上局部涂抹 25 µg BDP9066（2 天内共 4 次）后，皮肤中的平均浓度为 26 µM，血液中的平均浓度为 0.04 µM。[1]
单次 10 µg 给药后，皮肤和血液中的药物浓度均可检测到。重复 25 µg 给药（2 天内共 4 次）导致皮肤浓度比单次 10 µg 给药高 2.8 倍，血液浓度高 4 倍，但低于总剂量 10 倍的差异。[1] 单次 25 µg 给药或 8 次给药（给药 4 天，停用 2 天，再给药 4 天）后，在最后一次给药后 24 小时，皮肤中检测到浓度 >16 µM 的 BDP9066，而血液中 24 小时未检测到药物。 [1] 在DMBA/TPA疗效研究的终点，局部应用BDP9066后，血液中化合物浓度无法检测，皮肤中平均浓度>1 µM。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在能显著抑制底物磷酸化的浓度下，BDP9066 对 SCC12 细胞的毒性相对较低。浓度高达 0.5 µM 时，BDP9066 处理 24 小时后对 SCC12 细胞的活力没有影响，仅在 1 µM 浓度下观察到活力下降 25%。[1] 在 DMBA/TPA 小鼠模型中，局部应用 BDP9066（25 µg，每周 5 次，持续 14 周）未观察到明显的全身毒性，因为在实验终点时血液中化合物浓度无法检测到，并且监测了小鼠的体重和一般状况。[1]
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BDP9066是一种高效且选择性的MRCK抑制剂，它是通过对7-氮杂吲哚-3-腈类化合物进行结构导向的片段延伸而发现的。[1]
该化合物通过与ATP结合位点结合、与铰链区（Asp154和Tyr156）形成氢键以及与口袋水分子相互作用来抑制MRCK。螺环部分起到“塞子”的作用，阻止ATP结合位点的开放。[1] BDP9066对MRCK的抑制作用导致MLC2磷酸化水平降低、细胞形态改变以及细胞运动和侵袭能力下降，且在低浓度下对细胞活力无显著影响。[1] 该研究提供了临床前概念验证，表明使用BDP9066抑制MRCK是治疗皮肤癌的有效策略。[1] |
| 分子式 |
C20H24N6
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|---|---|
| 分子量 |
348.444763183594
|
| 精确质量 |
348.21
|
| 元素分析 |
C, 68.94; H, 6.94; N, 24.12
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| CAS号 |
2226507-04-4
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| 相关CAS号 |
(R)-BDP9066;2284549-25-1
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| PubChem CID |
132275018
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| 外观&性状 |
White to light brown solid powder
|
| LogP |
2.2
|
| tPSA |
69.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
487
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
N1CCCC[C@@]21CN(C1C=CN=C3C=1C(C1C=CN=CN=1)=CN3)CCC2
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| InChi Key |
UELSMLDRSQFVHG-FQEVSTJZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H24N6/c1-2-8-25-20(6-1)7-3-11-26(13-20)17-5-10-22-19-18(17)15(12-23-19)16-4-9-21-14-24-16/h4-5,9-10,12,14,25H,1-3,6-8,11,13H2,(H,22,23)/t20-/m0/s1
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| 化学名 |
(6S)-8-(3-pyrimidin-4-yl-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-4-yl)-1,8-diazaspiro[5.5]undecane
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| 别名 |
BDP9066; BDP-9066; BDP 9066
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~10 mg/mL (~28.70 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1 mg/mL (2.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 10.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8699 mL | 14.3497 mL | 28.6993 mL | |
| 5 mM | 0.5740 mL | 2.8699 mL | 5.7399 mL | |
| 10 mM | 0.2870 mL | 1.4350 mL | 2.8699 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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