| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
CYP3A4 enzyme. It inhibits the debenzylation activity of CYP3A4 with an IC50 value of 24.92 μM [1].
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
根据 ABTS 和 DPPH 试验，佛手柑醇（0-800 ppm）表现出明确的活性[1]。在 RAW264.7 细胞中，50 μg/mL 的佛手柑醇可抑制 LPS 诱导的 NO、IL-6 和 TNF 的产生，作用时间为 24 小时。此外，佛手柑醇还能抑制 RAW264.7 细胞中 LPS 诱导的 MAPK 磷酸化和 NF-κB 活化[3]。佛手柑醇对 CYP3A4 酶表现出强效的抑制活性。在 0.1 mM 的浓度下，它对该酶的脱苄基活性抑制率达到 98.9 ± 0.75%[1]。佛手柑醇还表现出浓度依赖性的自由基清除活性。在ABTS自由基清除试验中，该化合物在浓度分别为200、400和800 ppm时，自由基清除率分别为29.7%、60.9%和91.1%。在DPPH自由基清除试验中，该化合物在相同浓度下，自由基清除率分别为42.5%、65.2%和82.9%[1]。
|
| 体内研究 (In Vivo) |
在LPS处理的小鼠中，每天一次在睡眠期间腹腔注射佛手柑醇（10-40 mg/kg）可改善其认知功能[Disorder 4]。
在LPS（40 μg/kg）海马内注射诱导的神经炎症小鼠模型中，腹腔注射佛手柑醇（20和40 mg/kg，每天一次，持续两周）可显著改善LPS诱导的认知障碍，表现为逃避潜伏期缩短和Morris水迷宫测试中目标象限停留时间增加。10 mg/kg剂量未显示出显著效果[4]。 佛手柑醇治疗（20和40 mg/kg）可显著减少LPS诱导的海马CA1区神经元损伤，如H&E染色和尼氏染色所示。它还减轻了海马锥体神经元树突棘密度的降低（高尔基染色），并恢复了突触蛋白PSD-95和突触素-1的表达（免疫荧光）[4]。 Bergaptol治疗（20和40 mg/kg）显著降低了LPS处理小鼠海马中TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平和蛋白释放，RT-PCR和ELISA检测结果证实了这一点[4]。 免疫荧光分析显示，Bergaptol治疗显著降低了LPS处理小鼠海马中Iba-1阳性小胶质细胞的密度，表明其抑制了小胶质细胞的活化[4]。 |
| 酶活实验 |
采用CYP3A4酶抑制试验测定佛手柑内酯对CYP3A4活性的影响。在96孔微孔板中，分别加入12.5 μL不含荧光素的水（阳性对照）、酮康唑（阳性抑制对照）和浓度均为4倍的待测化合物。然后，加入12.5 μL对照反应混合物和浓度均为4倍的含CYP3A4的膜制剂。混匀后，于37℃预孵育10分钟。向所有孔中加入25 μL 2× NADPH再生系统启动CYP3A4测定反应。混匀后，于37℃孵育30分钟。孵育结束后，向所有孔中加入50 μL复溶的荧光素检测试剂。将反应板短暂混匀后，于 37°C 孵育 20 分钟。使用发光仪记录发光值，单位为相对光单位 (RLU)。抑制率基于阳性对照的相对活性（设定为 100%）计算。抑制率的计算公式为：100 - [(CYP 相对活性/阳性对照相对活性) × 100]。IC50 值使用 GraphPad Prism 软件计算 [1]。
|
| 细胞实验 |
Western Blot 分析[3]
细胞类型： LPS-α 的产生[3]。RAW264.7 细胞的诱导 测试浓度： 50 μg/mL 孵育时间： 24 小时 实验结果： 抑制 JNK 磷酸化和 NF-κB 活化。抑制 NF-κB P65 从细胞质向细胞核的转位。 所有实验均使用 RAW264.7 小鼠巨噬细胞。细胞在含 10% FBS 的 DMEM 培养基中，于 37°C、5% CO₂ 条件下培养。将佛手柑内酯（Bergaptol）溶于DMSO，并用DMEM稀释至终浓度为3.13-50 μg/mL（终DMSO浓度<0.1%）[3]。 为检测细胞因子生成，将细胞接种于24孔板中，用LPS（1 μg/mL）处理24小时，处理组分别添加或不添加佛手柑内酯（BER）。收集上清液，并使用Griess试剂测定NO含量。IL-6、TNF-α和IL-1β的含量使用ELISA试剂盒进行定量[3]。 为检测基因表达，使用Trizol试剂提取总RNA，进行逆转录，并使用SYBR Green染料进行qPCR分析。引物序列见补充信息。GAPDH用作管家基因[3]。 为进行蛋白质印迹分析，将细胞在冰上用RIPA裂解缓冲液裂解。将蛋白质（40 μg）通过 SDS-PAGE 电泳分离，转移至 PVDF 膜上，用 5% BSA 封闭，然后与针对 ERK、p-ERK、JNK、p-JNK、P38、p-P38、P65、p-P65、p-IκBα、p-IκBα/β、COX-2、ABCA1、ABCG1、SRB1、SRA1、CD36 和 GAPDH 的一抗于 4°C 孵育过夜。之后，将膜与 HRP 标记的二抗孵育，并用 ECL 试剂进行检测。使用 ImageJ 软件分析条带密度 [3]。 对于油红 O 染色，细胞用 4% 多聚甲醛固定 30 分钟，用 0.5% 油红 O（溶于 60% 异丙醇）染色 30 分钟，并通过显微镜观察 [3]。 对于 Dil-ox-LDL 摄取，细胞与 Dil-ox-LDL (10 μg/mL) 在有或无 BER 的情况下孵育 4 小时，用 PBS 洗涤，并通过共聚焦显微镜观察。采用流式细胞术定量分析摄取情况[3]。 对于BODIPY染色，细胞用4%多聚甲醛固定，在37°C下用BODIPY（10 μg/mL）染色30分钟，用DAPI（100 ng/mL）复染15分钟，然后用共聚焦显微镜观察[3]。 对于25-NBD胆固醇摄取，细胞与ox-LDL和BER孵育24小时，然后用25-NBD胆固醇（5 μg/mL）标记4小时。用0.1% Triton X-100裂解细胞并进行超声处理。荧光强度在激发/发射波长 469/537 nm 处测定 [3]。 对于胆固醇外流实验，细胞先用氧化低密度脂蛋白 (ox-LDL) 和碱基切除修复 (BER) 处理 24 小时，再用 25-NBD 胆固醇标记 4 小时，最后用高密度脂蛋白 (HDL，50 μg/mL) 刺激 4 小时。测定培养基和细胞裂解液中的荧光强度，并计算外流效率 [3]。 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： LPS（40 μg/kg，脑室内注射）处理的小鼠[4] ]
剂量： 10-40 mg/kg 给药途径： 腹腔注射，每日一次，持续两周 实验结果： LPS诱导的海马CA1区神经元减少，核固定和溶解（H&E染色）。小鼠树突棘密度增加。抑制LPS诱导的神经炎症。 雄性C57BL/6小鼠（6周龄）随机分为5组：假手术组、LPS组、LPS+佛手柑内酯（10 mg/kg）组、LPS+佛手柑内酯（20 mg/kg）组和LPS+佛手柑内酯（40 mg/kg）组。小鼠麻醉后固定于立体定位仪上。使用微量注射器将LPS（40 μg/kg）或等体积的生理盐水注射到海马CA1区（坐标：前囟后方0.8 mm，侧方±1.4 mm，深度4 mm）。佛手柑内酯溶于生理盐水中配制成4 mg/mL的溶液，每日腹腔注射一次，连续两周。假手术组和LPS组均注射等体积的生理盐水[4]。 治疗后，进行Morris水迷宫实验以评估小鼠的学习和记忆能力。小鼠连续6天接受训练以寻找隐藏平台，然后在第7天进行空间探测测试，移除平台，并记录60秒内的游泳轨迹[4]。 收集脑组织进行组织学分析。对于高尔基-考克斯染色，将脑组织浸入浸渍液中两周，切片（100 μm），然后染色。对于苏木精-伊红染色和尼氏染色，制备石蜡切片，并用苏木精-伊红或1%甲苯胺蓝染色。免疫荧光染色中，切片先与针对 Iba-1、PSD-95 或突触素-1 的一抗孵育，再与荧光标记的二抗孵育，最后通过共聚焦显微镜观察[4]。 将海马组织匀浆后进行 RNA 提取（RT-PCR）和蛋白提取（ELISA），以检测 TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的水平[4]。 将 6 周龄雄性 C57BL/6 小鼠随机分为 5 组：假手术组、LPS 组、LPS + 佛手柑内酯 (10 mg/kg) 组、LPS + 佛手柑内酯 (20 mg/kg) 组和 LPS + 佛手柑内酯 (40 mg/kg) 组。小鼠麻醉后固定于立体定位仪上。使用微量注射器将LPS（40 μg/kg）或等体积的生理盐水注射到海马CA1区（坐标：前囟后方0.8 mm，侧方±1.4 mm，深度4 mm）。将Bergaptol溶于生理盐水中配制成4 mg/mL的溶液，并腹腔注射，每日一次，持续两周。假手术组和LPS组注射等体积的生理盐水[4]。 治疗后，进行Morris水迷宫实验以评估学习和记忆能力。小鼠连续6天接受训练以寻找隐藏平台，然后在第7天进行空间探测测试，移除平台，并记录60秒内的游泳轨迹[4]。 收集脑组织进行组织学分析。对于Golgi-Cox染色，将脑组织浸入浸渍液中两周，切片（100 μm），然后进行染色。对于苏木精-伊红 (H&E) 和尼氏染色，制备石蜡切片，并用苏木精-伊红或 1% 甲苯胺蓝染色。对于免疫荧光染色，将切片与针对 Iba-1、PSD-95 或突触素-1 的一抗孵育，随后与荧光二抗孵育，并通过共聚焦显微镜观察 [4]。 将海马组织匀浆后用于 RNA 提取（RT-PCR）和蛋白质提取（ELISA），以检测 TNF-α、IL-6 和 IL-1β 的水平 [4]。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
CCK-8 检测 BV-2 细胞的结果显示，浓度高达 20 μg/mL 的佛手柑内酯 (Bergaptol) 未表现出明显的细胞毒性。体内实验表明，小鼠连续两周接受高达 40 mg/kg 剂量的佛手柑内酯治疗后，未观察到明显的不良反应 [4]。
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
佛手柑内酯属于补骨脂素类化合物，是一种5-羟基呋喃香豆素。它是佛手柑内酯(1-)的共轭酸。据报道，佛手柑内酯存在于白芷、多斯滕尼亚属植物以及其他具有相关数据的生物体中。
佛手柑醇是一种从葡萄柚汁和葡萄柚皮油中分离得到的呋喃香豆素化合物。其结构通过广泛的核磁共振研究（包括一维和二维实验，例如DQF-COSY、编辑HSQC、HMBC和1,1-ADEQUATE）和质谱分析得以阐明。它的分子量为202，紫外吸收峰值分别位于268、248和313 nm [1]。 呋喃香豆素类化合物，如佛手柑内酯，是葡萄柚汁效应的成因，它能显著提高多种药物的口服生物利用度，其机制是通过抑制肠道中CYP3A4介导的首过代谢。佛手柑内酯强大的CYP3A4抑制活性归因于其结构中呋喃环的存在，该呋喃环参与了生物活化并与酶发生共价相互作用[1]。 本研究首次报道了从葡萄柚中分离、鉴定佛手柑内酯，并对其自由基清除活性和CYP3A4抑制特性进行了评价[1]。 |
| 分子式 |
C11H6O4
|
|---|---|
| 分子量 |
202.165
|
| 精确质量 |
202.026
|
| CAS号 |
486-60-2
|
| PubChem CID |
5280371
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
311.9±11.0 °C at 760 mmHg
|
| 熔点 |
287-290ºC
|
| 闪点 |
142.4±19.3 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±0.7 mmHg at 25°C
|
| 折射率 |
1.711
|
| LogP |
0.93
|
| tPSA |
63.58
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
| 可旋转键数目(RBC) |
0
|
| 重原子数目 |
15
|
| 分子复杂度/Complexity |
312
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| InChi Key |
GIJHDGJRTUSBJR-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C11H6O4/c12-10-2-1-6-9(15-10)5-8-7(11(6)13)3-4-14-8/h1-5,13H
|
| 化学名 |
4-hydroxyfuro[3,2-g]chromen-7-one
|
| 别名 |
Psoralin, 5-hydroxy- 5-Hydroxypsoralen
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 50 mg/mL (~247.33 mM)
H2O : ~0.67 mg/mL (~3.31 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (12.37 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 4.9463 mL | 24.7317 mL | 49.4633 mL | |
| 5 mM | 0.9893 mL | 4.9463 mL | 9.8927 mL | |
| 10 mM | 0.4946 mL | 2.4732 mL | 4.9463 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
|
|
CYP1B1-IN-10
CYP1B1-IN-11
CYP1B1-IN-12
Aspergillusidone F
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
粤公网安备 44011102003439号
463611831
