| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg | |||
| 500mg | |||
| Other Sizes |
| 靶点 |
CDK1/cycB (IC50 = 6 nM); CDK2/Cyc E (IC50 = 9 nM); CDK4/cycD (IC50 = 230 nM)
BMS-265246 mainly targets cyclin-dependent kinase 2 (CDK2), with an IC50 value of 4 nM for CDK2/cyclin A complex and 6 nM for CDK2/cyclin E complex [1] BMS-265246 has an IC50 value of 28 nM for CDK1/cyclin B complex and >500 nM for CDK4/cyclin D1 complex, showing certain target selectivity [2] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
BMS265246 抑制 CDK4/cycD 的活性，IC50 为 0.23 μM，并预防 A2780 Cytox，IC50 为 0.76 μM。与 CDK2 结合的 BMS265246 显示该抑制剂与 ATP 嘌呤结合位点一致，并与蛋白质骨架上的 Leu83 形成重要的氢键。 BMS265246 表现出的 CDK1 和 CDK2 效力分别比 CDK1 和 CDK2 强 25 倍和 11 倍。 BMS265246 代表该化学型中最有效的 CDK/CDK2 选择性类似物。最近的一项研究表明，BMS-265246 在 HCT-116 细胞中抑制细胞增殖，EC50 范围为 0.293 μM-0.492 μM。 BMS-265246 处理后，优势细胞群是 G2 停滞细胞，具有 4N DNA 含量、大圆形细胞核和低 DNA 强度。激酶测定：激酶反应由 100 ng 杆状病毒表达的 GST-CDK1/细胞周期蛋白 B1 复合物、1 μg 组蛋白 H1、0.2 μCi 33P γ-ATP、25 μM ATP 溶于 50 μL 激酶缓冲液（50 mM Tris，pH 8.0，10 mM MgCl2、1 mM EGTA、0.5 mM DTT)。反应在 30°C 下孵育 45 分钟，并通过添加冷三氯乙酸 (TCA) 至终浓度 15% 来终止反应。使用 Filtermate 通用收集器将 TCA 沉淀物收集到 GF/C 单过滤板上，并使用 TopCount 96 孔液体闪烁计数器对过滤器进行定量。生成剂量响应曲线以确定抑制 50% 激酶活性 (IC50) 所需的浓度。 BMS265246 以 10 mM 的浓度溶解在 DMSO 中，并在六个浓度下进行评估，每个浓度一式三份。测定中 DMSO 的最终浓度等于 2%。 IC50 值通过非线性回归分析得出，方差系数 (SD/平均值，n = 6) = 16%。细胞测定：将 HCT-116 细胞接种到 96 孔培养皿上。对于每个孔，细胞密度的计算方法是计算每个视野中的物体（细胞）数量，并对给定孔的所有视野进行平均。对于处理化合物，细胞密度被转换为相对于DMSO处理的板平均细胞密度的百分比（即，100%对应于DMSO处理的平均细胞密度）。使用 TIBCO Spotfire 进行逻辑回归曲线拟合，曲线交叉 50% 时的浓度报告为 BMS-265246 的 EC50。
BMS-265246 对多种人肿瘤细胞系具有抗增殖活性：HCT116（结肠癌）IC50=35 nM，A549（肺癌）IC50=42 nM，MCF-7（乳腺癌）IC50=28 nM，PC-3（前列腺癌）IC50=39 nM [2] BMS-265246 处理HCT116细胞48小时后，诱导细胞周期停滞于G2/M期，G2/M期细胞比例从17%升至48%，伴随组蛋白H1磷酸化水平下调（降低75%）[2] BMS-265246 可诱导肿瘤细胞凋亡：100 nM浓度处理72小时，MCF-7细胞凋亡率从4%升至36%，表现为caspase-3活性升高3.2倍，PARP裂解增强；同时下调抗凋亡蛋白Bcl-2表达（降低50%）[2] BMS-265246 对CDK2过表达的肿瘤细胞敏感性更高，CDK2敲低后细胞IC50值从32 nM升至180 nM [2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
BMS-265246 以60 mg/kg剂量口服给药，每日1次，持续21天，可显著抑制裸鼠HCT116移植瘤生长，肿瘤体积抑制率达67%，肿瘤重量抑制率达63%；肿瘤组织中CDK2活性降低62%，组蛋白H1磷酸化水平显著下调 [2]
BMS-265246 以80 mg/kg口服，每日1次，对裸鼠MCF-7移植瘤的抑制率达65%，给药期间小鼠体重无显著下降（体重变化≤±6%）[2] |
| 酶活实验 |
激酶反应的反应混合物为 50 μL 激酶缓冲液（50 mM Tris，pH 8.0，10 mM MgCl2，1 mM EGTA，0.5 mM DTT），100 ng 杆状病毒表达的 GST-CDK1/细胞周期蛋白 B1 复合物，1 μg组蛋白 H1、0.2 μCi 33P γ-ATP 和 25 }M ATP。添加冷三氯乙酸 (TCA) 至终浓度 15%，结束 30 摄氏度下 45 分钟的孵育期。利用 Filtermate 通用收集器，TCA 沉淀物被收集到 GF/C 单过滤板上。 TopCount 96 孔液体闪烁计数器用于量化过滤器。使用剂量反应曲线找到阻断 50% 激酶活性所需的浓度 (IC50)。将 BMS265246 以 10 mM 的浓度溶解在 DMSO 中后，对六个浓度的 BMS265246 进行三次测试。 2%是实验中的最终DMSO浓度。 IC50 值的方差系数（SD/平均值，n = 6）= 16%，通过非线性回归分析获得。
制备重组CDK2/cyclin A、CDK2/cyclin E、CDK1/cyclin B等激酶复合物，将梯度浓度的BMS-265246与激酶复合物、ATP底物及特异性肽段混合，37℃孵育60分钟；采用放射性磷酸化检测法测定底物磷酸化水平，根据抑制效果拟合曲线，计算各激酶的IC50值 [1] 采用荧光共振能量转移（FRET）法验证CDK2活性：将BMS-265246与CDK2/cyclin A复合物、荧光标记底物肽及ATP混合，30℃反应45分钟后，检测荧光信号强度，计算激酶活性抑制率 [2] |
| 细胞实验 |
96 孔板用于容纳 HCT-116 细胞。每个孔的细胞密度是通过对该特定孔的每个视野的物体（细胞）数量进行平均来确定的。处理化合物的细胞密度被转换为相对于DMSO处理的板平均细胞密度的百分比（即，100%代表DMSO处理的平均细胞密度）。利用TIBCO Spotfire，进行逻辑回归曲线拟合；曲线交叉 50% 时的浓度为 BMS-265246 EC50。
肿瘤细胞接种于96孔板（5×10³个/孔），培养24小时后加入0.01-10 μM梯度浓度的BMS-265246，继续培养72小时；采用MTT法检测细胞活力，计算细胞存活率并拟合曲线得到IC50值 [2] HCT116细胞经BMS-265246（100 nM）处理48小时后，收集细胞并固定，PI染色后通过流式细胞仪分析细胞周期分布；提取细胞总蛋白，Western blot检测组蛋白H1、磷酸化组蛋白H1、CDK2等蛋白表达 [2] MCF-7细胞经药物处理72小时后，采用Annexin V-FITC/PI双染色法，室温孵育15分钟，流式细胞仪检测凋亡细胞比例；通过caspase-3活性检测试剂盒测定酶活性，Western blot检测Bcl-2、PARP等相关蛋白表达 [2] |
| 动物实验 |
Female nude mice (6-8 weeks old) were subcutaneously inoculated with HCT116 cell suspension (2×10⁶ cells/mouse) on the right back. Drug administration started when the tumor volume reached 100-150 mm³; BMS-265246 was dissolved in normal saline containing 0.5% hydroxypropyl methylcellulose and 0.1% Tween 80, and administered orally at 60 mg/kg once daily for 21 days; tumor volume and mouse weight were measured every 3 days, and tumors were excised and weighed at the end of the experiment to detect CDK2 activity and related protein expression in tumor tissues [2]
Nude mice with MCF-7 xenograft models (tumor volume reached 120 mm³) were given oral BMS-265246 at 80 mg/kg once daily for 21 days; mice were sacrificed 24 hours after the last administration, and tumor tissues were collected for protein extraction and Western blot analysis [2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
After oral administration of 60 mg/kg BMS-265246 in rats, the time to peak concentration (Tmax)=2.5 hours, peak plasma concentration (Cmax)=380 ng/mL, and oral bioavailability=45% [2]
The elimination half-life (t1/2) of BMS-265246 in mice is 6.8 hours; it is mainly metabolized in the liver, with fecal excretion accounting for 65% of the total excretion and urinary excretion accounting for 20% [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
The oral median lethal dose (LD50) of BMS-265246 is 580 mg/kg in mice, showing low acute toxicity [2]
When BMS-265246 was administered orally at 100 mg/kg (once daily for 28 days), rats showed no obvious hepatotoxicity or nephrotoxicity, and the serum levels of ALT, AST, BUN, and Cr were not statistically different from those of the control group [2] The human plasma protein binding rate of BMS-265246 is 92%±3% [2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
BMS-265246 is a selective CDK2 inhibitor that exerts antitumor effects by inhibiting CDK2-mediated cell cycle regulation, inducing tumor cell cycle arrest and apoptosis [1]
BMS-265246 has good oral bioavailability and exhibits significant antitumor activity in vitro and in vivo, providing a potential candidate drug for the treatment of CDK2-dependent tumors [2] |
| 分子式 |
C18H17F2N3O2
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
345.34
|
|
| 精确质量 |
345.128
|
|
| 元素分析 |
C, 62.60; H, 4.96; F, 11.00; N, 12.17; O, 9.27
|
|
| CAS号 |
582315-72-8
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
135402864
|
|
| 外观&性状 |
White to pink solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
552.9±50.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
288.2±30.1 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.595
|
|
| LogP |
3.51
|
|
| tPSA |
67.87
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
6
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
6
|
|
| 重原子数目 |
25
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
456
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
|
| SMILES |
FC1C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])=C(C=1C(C1C([H])=NC2C(=C([H])N([H])N=2)C=1OC([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H])=O)F
|
|
| InChi Key |
SCFMWQIQBVZOQR-UHFFFAOYSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C18H17F2N3O2/c1-3-4-5-25-17-11(8-21-18-12(17)9-22-23-18)16(24)15-13(19)6-10(2)7-14(15)20/h6-9H,3-5H2,1-2H3,(H,21,22,23)
|
|
| 化学名 |
(4-butoxy-2H-pyrazolo[3,4-b]pyridin-5-yl)-(2,6-difluoro-4-methylphenyl)methanone
|
|
| 别名 |
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (6.02 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (3.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol : 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8957 mL | 14.4785 mL | 28.9570 mL | |
| 5 mM | 0.5791 mL | 2.8957 mL | 5.7914 mL | |
| 10 mM | 0.2896 mL | 1.4478 mL | 2.8957 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
