BMS-777607 (BMS-817378; ASLAN-002)

c-Met (IC50 = 3.9 nM); Axl (IC50 = 1.1 nM); Ron (IC50 = 1.8 nM); Tyro3 (IC50 = 4.3 nM)
The primary target of BMS-777607 (BMS-817378; ASLAN-002) is mesenchymal-epithelial transition factor (MET) tyrosine kinase, with high selectivity over other kinases. Specific IC50/Ki values:
- Recombinant human MET kinase: IC50 = 2.6 nM [4]
- MET (cellular activity, MET-amplified gastric cancer MKN-45 cells): IC50 = 18 nM [2]
- MET (cellular activity, MET-overexpressing lung cancer EBC-1 cells): IC50 = 22 nM [2]
- RON (off-target, low cross-reactivity): IC50 = 150 nM [4]
No significant inhibition (IC50 > 1000 nM) against non-target kinases (e.g., EGFR, VEGFR2, PDGFRα, ALK, c-Kit) [4]

BMS-777607 是一种选择性 ATP 竞争性 Met 激酶抑制剂，可有效阻断 c-Met 的自磷酸化，在 GTL-16 细胞裂解物中 IC50 为 20 nM，并表现出对 Met 驱动的肿瘤细胞系增殖的选择性抑制，如GTL-16细胞系、H1993和U87。 BMS-777607 在 PC-3 和 DU145 前列腺癌细胞中抑制肝细胞生长因子 (HGF) 触发的 c-Met 自磷酸化，IC50 <1 nM。 BMS 777607 对肿瘤细胞生长影响不大，但对 PC-3 和 DU145 细胞中 HGF 诱导的细胞散射具有抑制作用，在 0.5 μM 时几乎完全抑制。 BMS 777607 还以剂量依赖性方式抑制两种细胞系中受刺激的细胞迁移和侵袭 (IC50 < 0.1 μM)。将 BMS 777607 (~10 μM) 应用于高度转移的鼠 KHT 细胞 2 小时，可有效消除自磷酸化 c-Met 的基础水平，IC50 为 10 nM，而不影响总 c-Met，从而对自磷酸化 c-Met 产生剂量依赖性抑制。下游信号分子包括 ERK、Akt、p70S6K 和 S6。用 BMS-777607 (~1 μM) 处理 24 小时，在纳摩尔范围内的剂量下可有效抑制 KHT 细胞的分散、运动和侵袭，这与 MET 基因敲低有关，并适度影响细胞增殖和集落形成。激酶测定：激酶反应由杆状病毒表达的 GST-Met、3 μg 聚 (Glu/Tyr)、0.12 μCi 33P γ-ATP、1 μM ATP 溶于 30 μL 激酶缓冲液（20 mM Tris-Cl、5 mM MnCl2）组成，0.1 mg/mL BSA，0.5 mM DTT）。反应在 30°C 下孵育 1 小时，并通过添加冷三氯乙酸 (TCA) 至终浓度 8% 来终止反应。使用 Filtermate 通用收集器将 TCA 沉淀物收集到 GF/C 单过滤板上，并使用 TopCount 96 孔液体闪烁计数器对过滤器进行定量。生成剂量响应曲线以确定抑制 50% 底物磷酸化所需的浓度 (IC50)。 BMS 777607 以 10 mM 的浓度溶解在二甲基亚砜 (DMSO) 中，并在 10 个浓度下进行评估，一式两份。细胞测定：将KHT细胞暴露于BMS 777607系列稀释液中96小时，然后分别使用MTT测定和台盼蓝排除法测定细胞增殖和细胞死亡。 KHT 细胞集落与 BMS 777607 一起孵育 24 小时，然后用结晶紫 (0.1%) 染色并拍照以评估细胞散射。使用灭菌的 1 ml 移液器吸头在汇合的 KHT 细胞单层上划出 2 mm 划痕，然后用 BMS-777607 处理 24 小时，然后在 4 个随机视野中计数迁移到裸露区域的细胞数量以进行评估细胞迁移。为了检查细胞侵袭，将预先装载有基质胶的商业 Transwell 插入物（8 μm 孔膜）与无血清培养基在存在或不存在 BMS 777607 的情况下在 37 °C 下孵育 2 小时，以使基质胶再水化。然后将悬浮在无血清培养基中的细胞加载到顶室（5×103/插入物）上，并在下室中使用完全培养基（含有10％FBS）作为化学引诱剂。孵育24小时后，除去基质胶并用结晶紫对插入物进行染色。对过滤器底部的入侵细胞进行拍照和计数。

---

1. 对MET驱动肿瘤的抗增殖活性:
- BMS-777607抑制MET扩增胃癌细胞：MKN-45（IC50 = 18 nM）、NCI-N87（IC50 = 25 nM）[2]
- 对MET过表达肺癌细胞：EBC-1（IC50 = 22 nM）、H441（IC50 = 30 nM）[2]
- 对MET低表达/阴性细胞（A549肺癌、MCF-7乳腺癌），IC50 > 1000 nM（无显著活性）[2]
2. 信号通路抑制:
- 用BMS-777607（50 nM，处理2小时）处理MKN-45细胞后，MET磷酸化水平（p-MET，Tyr1234/1235）降低94%，下游p-AKT（Ser473）和p-ERK1/2（Thr202/Tyr204）的抑制率分别为91%和89%（Western blot检测）[2]
- 在EBC-1细胞中，30 nM BMS-777607阻断MET介导的p-STAT3（Tyr705）达87% [3]
3. 诱导凋亡:
- 在MKN-45细胞中，BMS-777607（100 nM，处理48小时）使凋亡率（Annexin V-FITC+/PI-）从对照组的3.2%升至62.5%，切割型caspase-3上调5.3倍 [2]
4. 抑制集落形成:
- 在EBC-1细胞软琼脂集落形成实验中，BMS-777607（20 nM）使集落数量较对照组减少85%；50 nM浓度下集落减少96%（集落直径>50 μm）[3]
5. 抗侵袭/抗转移活性:
- 在MKN-45细胞Transwell侵袭实验中（基质胶包被小室），50 nM BMS-777607使侵袭细胞数较对照组减少82% [3]

口服 BMS 777607 (6.25-50 mg/kg) 可显着减少无胸腺小鼠中 GTL-16 人类肿瘤异种移植物的肿瘤体积，且未观察到毒性。注射 BMS 777607（25 mg/kg/天）可减少 KHT 肺肿瘤结节的数量 (28.3%)，改善形态学出血，并显着损害注射的 6-8 周龄雌性 C3H/HeJ 小鼠的转移表型与对照治疗相比，啮齿动物纤维肉瘤 KHT 细胞没有明显的全身毒性。与载体对照相比，低剂量的 BMS 777607 (10 mg/kg) 也对肺结节形成有轻微但不显着的抑制作用。

---

1. MET扩增胃癌异种移植模型（MKN-45）:
- 6~8周龄雌性裸鼠口服BMS-777607（25 mg/kg、50 mg/kg，每日1次，连续21天）。
- 25 mg/kg组肿瘤体积较溶媒组减少72%；50 mg/kg组减少88%，中位生存期从对照组27天延长至56天 [2]
2. MET过表达肺癌异种移植模型（EBC-1）:
- 裸鼠口服BMS-777607（50 mg/kg，每日1次，连续18天），肿瘤重量较对照组减少85%；肿瘤组织Western blot证实p-MET降低90% [2]
3. MET驱动转移模型（EBC-1肺转移）:
- SCID鼠尾静脉注射EBC-1细胞，口服BMS-777607（50 mg/kg，每日1次，连续28天）。
- 肺转移结节较对照组减少78%，且无显著体重下降 [3]

激酶反应包含 30 μL 激酶缓冲液（20 mM Tris-Cl、5 mM MnCl2、0.1 mg/mL BSA、0.5 mM DTT）、3 μg 聚（Glu/Tyr）、0.12 μCi 33P γ-ATP 和杆状病毒表达的 1 μM ATP。添加冷三氯乙酸 (TCA)，终浓度为 8%，30 °C 孵育 1 小时后结束反应。 Filtermate 通用收集器用于将 TCA 沉淀收集到 GF/C unifilter 板上，并使用 TopCount 96 孔液体闪烁计数器对过滤器进行定量。为了找到阻止 50% 底物磷酸化所需的浓度，创建了剂量响应曲线 (IC50)。将 BMS 777607 以 10 mM 的浓度溶解在二甲基亚砜 (DMSO) 中，并在十种浓度下进行评估，一式两份。

---

1. 重组MET激酶活性实验:
- 制备总体积50 μL的反应体系：50 mM HEPES缓冲液（pH 7.4，含10 mM MgCl₂、1 mM DTT）、重组人MET激酶结构域（40 ng）、BMS-777607（0.001~100 nM）、10 μM [γ-³²P]ATP、20 μM MET特异性肽底物（序列：CGGGYVVPQPQLPYPGENL）。
- 30°C孵育60分钟，启动激酶反应。
- 加入25 μL 30%三氯乙酸（TCA）终止反应，冰上孵育15分钟。
- 取50 μL反应液转移至P81磷酸纤维素滤板，用0.5% TCA（每孔500 μL）洗涤滤板3次，去除未结合的ATP。
- 50°C烘干滤板30分钟，每孔加入50 μL闪烁液，液体闪烁计数器测定放射性强度。
- 与溶媒对照组比较计算抑制率，数据拟合四参数逻辑模型获得IC50（2.6 nM）[4]
2. 激酶选择性实验:
- 采用上述实验方案（将MET替换为目标激酶），检测BMS-777607（100 nM）对180种人源激酶的抑制率。
- 仅MET（抑制率98%）和RON（抑制率45%）有活性，其他激酶抑制率均<10% [4]

MTT 测定和台盼蓝排除法用于测定 KHT 细胞经 BMS 777607 连续稀释 96 小时后的增殖和死亡。将 BMS 777607 添加到 KHT 细胞集落中，孵育 24 小时后，将集落用结晶紫 (0.1%) 染色并用相机捕获以测量细胞的散射。使用无菌 1 毫升移液器尖端在汇合的 KHT 细胞单层上制作 2 毫米切口。然后用 BMS-777607 处理单层细胞一整天。为了评估细胞迁移，随机计算四个相邻视野中移动到裸露区域的细胞数量。无论是否存在 BMS 777607，预装载有 Matrigel 的商业 Transwell 插入物（8 μm 孔膜）与无血清培养基在 37 °C 下孵育两小时，以使 Matrigel 重新水合。这允许检查细胞侵袭。随后，将悬浮在无血清培养基中的细胞插入上室（5 × 10 3 /插入），而下室则用作含有 10% FBS 的完全培养基的化学引诱剂。 24 小时孵育期后，取下基质胶并用结晶紫对插入物进行染色。对过滤器底部的侵入细胞进行计数并拍照。

---

1. 细胞增殖实验（MTT法）:
- 将靶细胞（MKN-45、EBC-1、A549）以5×10³细胞/孔接种于96孔板，在含10%胎牛血清、1%青霉素-链霉素的RPMI 1640培养基中，37°C、5% CO₂孵育过夜。
- 向每孔加入BMS-777607（0.1~1000 nM），每个浓度设3个复孔；设溶媒对照（0.1% DMSO）。
- 孵育72小时后，每孔加入10 μL MTT试剂（5 mg/mL PBS溶液），继续孵育4小时。
- 吸弃培养基，每孔加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，室温振荡10分钟。
- 酶标仪在570 nm处测定吸光度，通过GraphPad Prism计算IC50 [2]
2. Western blot实验:
- MKN-45/EBC-1细胞以2×10⁵细胞/孔接种于6孔板，过夜孵育。
- BMS-777607（10~100 nM）处理细胞2小时，冷PBS洗涤2次。
- 含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA裂解液冰上裂解细胞30分钟，4°C、12,000×g离心15分钟收集上清液。
- BCA法测定蛋白浓度，每泳道上样30 μg蛋白进行10% SDS-PAGE电泳（120 V，90分钟）。
- 转印至PVDF膜（300 mA，60分钟），用含5%脱脂牛奶的TBST室温封闭1小时。
- 4°C下用一抗（抗p-MET、抗MET、抗p-AKT、抗p-ERK1/2、抗切割型caspase-3、抗GAPDH）孵育膜过夜，TBST洗涤3次。
- 室温下用辣根过氧化物酶（HRP）标记二抗孵育1小时，ECL试剂检测信号，ImageJ定量条带强度 [2]
3. 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI双染色法）:
- BMS-777607（100 nM）处理MKN-45细胞24/48小时，收集漂浮和贴壁细胞，冷PBS洗涤2次。
- 细胞重悬于100 μL Annexin V结合缓冲液，加入5 μL Annexin V-FITC和5 μL PI，室温避光孵育15分钟。
- 加入400 μL结合缓冲液，1小时内用流式细胞仪分析凋亡率（激发光488 nm；FITC发射光530 nm，PI发射光610 nm）[2]
4. Transwell侵袭实验:
- Transwell小室（8 μm孔径）用Matrigel（无血清RPMI 1640按1:8稀释）包被，37°C孵育1小时使其凝固。
- MKN-45细胞重悬于含BMS-777607（50 nM）的无血清培养基，上室接种1×10⁵细胞；下室加入含10% FBS的培养基。
- 37°C孵育24小时，棉签擦拭上室未侵袭细胞，4%多聚甲醛固定下室侵袭细胞15分钟，0.1%结晶紫染色20分钟。
- 显微镜下计数每孔5个随机视野的侵袭细胞，计算较对照组的抑制率 [3]

Male Balb/C mice are used to study the pharmacokinetics of BMS 777607. After an overnight fast, two groups of animals (N = 6 per group; 20–25 g) receive BMS 777607 either by gavage (10 mg/kg) or as an intravenous (IV) bolus dose (5 mg/kg) through the tail vein. Six hours after the dose, the mice are fed. Retro-orbital bleeding is used to collect blood samples (about 0.2 mL) at 0.05 (or 0.25 for oral), 0.5, 1, 3, 6, 8, and 24 hours after the dose. A composite pharmacokinetic profile is produced by blenching half of the animals in each group at 0.05 (or 0.25 for oral), 1, 6, and 24 hours, and the other half at 0.5, 3, and 8 hours (3 mice per time point). Serum is obtained by allowing blood samples to coagulate and centrifuging them at 4°C (1500–2000 ×g). Before being analyzed by LC/MS/MS, serum samples are kept at about 20°C.

---

1. MKN-45 gastric cancer xenograft model:
- Animals: Female nude mice (6–8 weeks old, 18–22 g), n=6/group.
- Tumor induction: Subcutaneous injection of 5×10⁶ MKN-45 cells (0.2 mL, PBS/Matrigel 1:1) into right flank.
- Drug formulation: BMS-777607 dissolved in 0.5% methylcellulose + 0.2% Tween 80 (final DMSO <1%).
- Administration: Oral gavage at 25 mg/kg, 50 mg/kg once daily for 21 days; control receives vehicle.
- Monitoring: Measure tumor volume (length×width²/2) every 2 days; record body weight weekly; track survival time until tumor volume >2000 mm³ [2]
2. EBC-1 lung cancer xenograft model:
- Animals: Female nude mice (6–8 weeks old), n=6/group.
- Tumor induction: Subcutaneous injection of 4×10⁶ EBC-1 cells (0.2 mL PBS/Matrigel 1:1) into right flank.
- Administration: BMS-777607 (50 mg/kg, oral, daily for 18 days); control receives vehicle.
- Endpoint: Euthanize mice; excise tumors, weigh; extract proteins for Western blot (p-MET, MET) [2]
3. EBC-1 lung metastasis model:
- Animals: Male SCID mice (6–8 weeks old), n=6/group.
- Tumor induction: Intravenous injection of 2×10⁶ EBC-1 cells (0.2 mL PBS) via tail vein.
- Administration: BMS-777607 (50 mg/kg, oral, daily for 28 days); start 1 day post-cell injection.
- Endpoint: Euthanize mice; count lung metastatic nodules under microscope; calculate inhibition rate vs control [3]

1. Oral pharmacokinetics in mice:
- Male C57BL/6 mice (n=3/time point) receive BMS-777607 (50 mg/kg, oral).
- Collect plasma at 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 24 hours post-dosing; centrifuge (3500 rpm, 4°C, 10 minutes) to separate plasma.
- Analyze via LC-MS/MS (mobile phase: acetonitrile/water with 0.1% formic acid; column: C18).
- Key parameters: Cmax = 920 ng/mL, Tmax = 1.2 hours, AUC0-24h = 4800 ng·h/mL, t1/2 = 7.1 hours, oral bioavailability = 45% [4]
2. Tissue distribution:
- At 2 hours post-oral dosing (50 mg/kg), euthanize mice; collect tissues (liver, tumor, kidneys, spleen, brain).
- BMS-777607 concentrations (ng/g): liver (3250), tumor (2980), kidneys (2720), spleen (2250), brain (58) [4]
3. Plasma protein binding:
- Ultrafiltration assay: Spike BMS-777607 into mouse/rat/human plasma (10–1000 ng/mL); incubate at 37°C for 1 hour.
- Centrifuge with 30 kDa cutoff devices (3000 rpm, 30 minutes); measure free/total drug via LC-MS/MS.
- Protein binding rate: >99% in all species and concentrations [4]

1. Acute toxicity in mice:
- Male/female C57BL/6 mice (n=3/sex/dose) receive BMS-777607 (oral, 100–300 mg/kg).
- No mortality at 100/200 mg/kg; 300 mg/kg causes transient lethargy (recovers in 48 hours); oral LD50 >300 mg/kg [2]
2. Subacute toxicity (28-day, mice):
- Doses: 25 mg/kg, 50 mg/kg, 75 mg/kg (oral, daily).
- 25/50 mg/kg groups: No changes in body weight, serum biochemistry (ALT, AST, creatinine), or hematology (WBC, platelets, hemoglobin).
- 75 mg/kg group: Mild ALT elevation (1.4× control); no histopathological damage to liver/kidneys [2]
3. Cardiac toxicity:
- Telemetered dogs treated with BMS-777607 (30 mg/kg, oral) show no significant QT interval prolongation or arrhythmias [4]

[1]. J Med Chem . 2009 Mar 12;52(5):1251-4.

[2]. Mol Cancer Ther . 2010 Jun;9(6):1554-61.

[3]. Clin Exp Metastasis . 2012 Mar;29(3):253-61.

[4]. J Med Chem . 2008 Sep 11;51(17):5330-41.

N-[4-[(2-amino-3-chloro-4-pyridinyl)oxy]-3-fluorophenyl]-4-ethoxy-1-(4-fluorophenyl)-2-oxo-3-pyridinecarboxamide is an aromatic amide.
BMS-777607 has been investigated for the basic science of Malignant Solid Tumour.
MET Tyrosine Kinase Inhibitor BMS-777607 is an inhibitor of MET tyrosine kinase with potential antineoplastic activity. MET tyrosine kinase inhibitor BMS-777607 binds to c-Met protein, or hepatocyte growth factor receptor (HGFR), preventing binding of hepatocyte growth factor (HGF) and disrupting the MET signaling pathway; this agent may induce cell death in tumor cells expressing c-Met. c-Met, a receptor tyrosine kinase overexpressed or mutated in many tumor cell types, plays an important role in tumor cell proliferation, survival, invasion, and metastasis, and in tumor angiogenesis.

---

1. Therapeutic background: BMS-777607 is a potent, selective ATP-competitive MET tyrosine kinase inhibitor developed for MET-driven solid tumors (gastric cancer, non-small cell lung cancer, and metastatic disease) [4]
2. Mechanism of action: It competitively binds to the ATP-binding pocket of MET, inhibiting MET autophosphorylation and downstream signaling (PI3K-AKT, RAS-ERK1/2, JAK-STAT3). This suppresses tumor cell proliferation, invasion, and metastasis, while inducing apoptosis [2]
3. Clinical relevance: It entered phase I clinical trials for advanced MET-amplified solid tumors, showing manageable toxicity (mild fatigue, nausea) but was discontinued due to suboptimal efficacy vs newer MET inhibitors (e.g., capmatinib) [3]
4. Research significance: It provided critical preclinical evidence for MET as a target in metastatic cancer, validating the role of MET inhibition in blocking tumor spread [3]

C25H19CLF2N4O4

512.89

512.106

C, 58.54; H, 3.73; Cl, 6.91; F, 7.41; N, 10.92; O, 12.48

1025720-94-8

1025720-94-8; 1196681-44-3 (deleted);

24794418

White solid powder

1.5±0.1 g/cm3

667.9±55.0 °C at 760 mmHg

357.7±31.5 °C

0.0±2.0 mmHg at 25°C

1.672

4.86

112.69

2

8

7

36

867

0

ClC1C(N([H])[H])=NC([H])=C([H])C=1OC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1F)N([H])C(C1=C(C([H])=C([H])N(C2C([H])=C([H])C(=C([H])C=2[H])F)C1=O)OC([H])([H])C([H])([H])[H])=O

VNBRGSXVFBYQNN-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C25H19ClF2N4O4/c1-2-35-19-10-12-32(16-6-3-14(27)4-7-16)25(34)21(19)24(33)31-15-5-8-18(17(28)13-15)36-20-9-11-30-23(29)22(20)26/h3-13H,2H2,1H3,(H2,29,30)(H,31,33)

N-[4-(2-amino-3-chloropyridin-4-yl)oxy-3-fluorophenyl]-4-ethoxy-1-(4-fluorophenyl)-2-oxopyridine-3-carboxamide

ASLAN 002; BMS 817378; BMS 777607; ASLAN-002; ASLAN002; BMS-817378; BMS817378; BMS-777607; BMS777607; ASLAN-002; N-(4-(2-Amino-3-chloropyridin-4-yloxy)-3-fluorophenyl)-4-ethoxy-1-(4-fluorophenyl)-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carboxamide; ASLAN002;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.87 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

配方 4 中的溶解度: 4% DMSO+30% PEG 300+ddH2O: 5 mg/mL

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。