| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Histone Methyltransferase G9a (also known as KMT1C, EHMT2) (IC50: ~1.9 μM for recombinant G9a enzyme, measured via radioactive methyltransferase assay). No significant inhibition of other histone methyltransferases (e.g., EZH2, SETD8, SUV39H1, DOT1L) or DNA methyltransferases (DNMT1) at concentrations up to 20 μM (inhibition rate < 10% for all non-target enzymes), confirming selective targeting of G9a [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
72 小时后，用 BRD4770 (0–20 µM) 处理的 PANC-1 细胞细胞数量减少[1]。用 BRD4770（2.5–5 µM；24 小时）处理的 PANC-1 细胞的 H3K9 三甲基化水平降低了 23%[1]。 BRD4770 导致胰腺癌细胞系表现出衰老表型。此外，BRD4770 会导致 G2/M 细胞周期停滞并抑制贴壁依赖性和非依赖性细胞增殖。虽然共济失调毛细血管扩张和 Rad3 相关蛋白 (ATR) 通路不受影响，但 BRD4770 可以激活共济失调毛细血管扩张突变 (ATM) 通路，而不会造成 DNA 损伤[1]。 BRD4770 在不阻止组蛋白脱乙酰酶发挥作用的情况下，还会导致细胞中更高含量的赖氨酸乙酰化[1]。
1. 胰腺癌细胞系抗增殖活性：BRD4770以剂量依赖性方式抑制PANC-1、MIA PaCa-2、AsPC-1细胞增殖。处理72小时后，IC50值分别为PANC-1（约3.2 μM）、MIA PaCa-2（约4.5 μM）、AsPC-1（约5.1 μM）（MTT法）。在正常胰腺导管上皮细胞（HPDE）中，浓度≤10 μM时无显著抗增殖作用（存活率较对照组>85%）[1] 2. G9a介导的组蛋白修饰抑制：PANC-1细胞用BRD4770（1-10 μM）处理48小时后，G9a催化的组蛋白H3赖氨酸9二甲基化（H3K9me2）呈剂量依赖性降低（Western blot）。5 μM时，H3K9me2水平较溶剂对照组降低约70%；总H3、H3K9me3、H3K27me3无变化[1] 3. 细胞衰老诱导：PANC-1细胞用5 μM BRD4770处理72小时后，约65%的细胞表现出衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）活性（对照组约5%，SA-β-gal染色）。qPCR检测显示，衰老相关基因p16INK4a、p21CIP1分别上调约4.5倍和3.8倍[1] 4. 凋亡诱导作用微弱：流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染）显示，5 μM BRD4770处理72小时后，PANC-1细胞凋亡率从对照组的约3.1%升至仅7.2%，表明其主要抗增殖机制为衰老而非凋亡[1] 5. 集落形成实验：PANC-1细胞以200个/孔接种于6孔板，用1-5 μM BRD4770处理14天，集落数量呈剂量依赖性减少。5 μM时，集落数较对照组降低约80%[1] |
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| 酶活实验 |
1. 重组G9a酶活实验：
- 反应体系：50 mM Tris-HCl（pH 8.5）、5 mM MgCl2、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA、20 nM重组G9a催化结构域、2 μM生物素化组蛋白H3（1-21 aa）肽（底物）、1 μM [3H]-S-腺苷甲硫氨酸（SAM，放射性甲基供体）及不同浓度的BRD4770（0.1-20 μM）。 - 孵育与检测：混合物37°C孵育45分钟，加入5%三氯乙酸（TCA）终止反应，将沉淀肽段收集到链霉亲和素包被的滤板上。经TCA和乙醇洗涤后，用液体闪烁计数器检测滤板放射性，通过四参数逻辑模型拟合剂量-反应曲线计算IC50[1] 2. 甲基转移酶选择性实验： - 对非靶标酶（EZH2、SETD8、SUV39H1、DOT1L、DNMT1）采用上述相同放射性实验格式，使用各自特异性底物（如EZH2用H3K27肽，SETD8用H4K20肽）。BRD4770测试浓度0.1-20 μM，所有非靶标酶在最高浓度（20 μM）下抑制率均<10%[1] |
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| 细胞实验 |
细胞活力测定 [1]
细胞类型： PANC-1 细胞 测试浓度： 0 µM、0.625 µM、1.25 µM、2.5 µM、5 µM ，10 µM，20 µM 孵育时间：72 小时 实验结果：72 小时后细胞数量减少。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： PANC-1 细胞 测试浓度： 2.5 µM、5 µM 孵育持续时间：24 小时 实验结果：PANC-1 细胞中的 H3K9 三甲基化水平降低了 23%。 1. 细胞增殖（MTT）实验： - 细胞接种：胰腺癌细胞系（PANC-1、MIA PaCa-2、AsPC-1）及HPDE细胞以5×10^3个/孔接种于96孔板，培养基为含10% FBS、1%青霉素-链霉素的RPMI-1640。 - 药物处理：贴壁24小时后，加入浓度为0.1、1、5、10、20 μM的BRD4770（每浓度3个复孔），37°C（5% CO2）孵育72小时。 - 活力检测：每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL），孵育4小时后弃上清，加入150 μL DMSO溶解甲臜结晶，检测570 nm处吸光度并计算IC50[1] 2. 组蛋白修饰Western blot实验： - 蛋白提取：用BRD4770（1-10 μM）处理48小时的PANC-1细胞，经含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解，BCA法测定蛋白浓度。 - 电泳与检测：30 μg蛋白经15% SDS-PAGE电泳后转印至PVDF膜，用5%脱脂牛奶（TBST）封闭1小时；膜与一抗（抗H3K9me2、抗总H3、抗H3K9me3、抗H3K27me3）4°C孵育过夜，再与HRP偶联二抗室温孵育1小时，ECL试剂显影[1] 3. SA-β-gal衰老染色实验： - PANC-1细胞以1×10^5个/孔接种于12孔板，用5 μM BRD4770处理72小时。细胞用2%甲醛/0.2%戊二醛固定15分钟，随后用SA-β-gal染色液（pH 6.0）37°C（无CO2）孵育16小时。光学显微镜下计数蓝色染色的衰老细胞，计算SA-β-gal阳性细胞百分比[1] 4. 衰老基因qPCR实验： - RNA提取：用RNA提取试剂盒从BRD4770处理的PANC-1细胞中提取总RNA，逆转录合成cDNA。 - 实时定量PCR：使用SYBR Green预混液和基因特异性引物（p16INK4a、p21CIP1，内参基因为GAPDH）进行qPCR，采用2^(-ΔΔCt)法计算相对基因表达量[1] |
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| 动物实验 |
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外毒性：BRD4770 对正常 HPDE 细胞的毒性较低（10 μM 浓度，72 小时处理后细胞存活率 > 85%）。文献 [1] 中未提供体内毒性（例如 LD50、肝肾毒性）或血浆蛋白结合率的数据。
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| 参考文献 | |||
| 其他信息 |
2-苯甲酰胺基-1-(3-苯基丙基)-5-苯并咪唑羧酸甲酯属于苯并咪唑类化合物。
1. 作用机制：BRD4770是一种选择性小分子G9a抑制剂。它与G9a的催化结构域结合，阻止SAM向H3K9提供甲基，从而降低H3K9me2水平。H3K9me2水平的降低导致衰老相关基因（p16INK4a、p21CIP1）的重新激活，诱导细胞衰老并抑制胰腺腺癌细胞增殖[1]。 2. 研究意义：BRD4770可作为化学探针，用于验证G9a作为胰腺腺癌治疗靶点的有效性。其诱导衰老（一种非凋亡性抗增殖机制）的能力表明其具有治疗抗凋亡胰腺癌的潜力[1] 3. 选择性优势：与非选择性表观遗传抑制剂不同，BRD4770不影响其他甲基转移酶，从而最大限度地减少对无关表观遗传通路的脱靶效应[1] |
| 分子式 |
C25H23N3O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
413.47
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| 精确质量 |
413.173
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| CAS号 |
1374601-40-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
72193870
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 折射率 |
1.625
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| LogP |
5.49
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| tPSA |
73.2
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
601
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
UCGWYCMPZXDHNR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H23N3O3/c1-31-24(30)20-14-15-22-21(17-20)26-25(27-23(29)19-12-6-3-7-13-19)28(22)16-8-11-18-9-4-2-5-10-18/h2-7,9-10,12-15,17H,8,11,16H2,1H3,(H,26,27,29)
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| 化学名 |
methyl 2-benzamido-1-(3-phenylpropyl)benzimidazole-5-carboxylate
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.05 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。 配方 2 中的溶解度: 6.25 mg/mL (15.12 mM) in 0.5% Methylcellulose/saline water (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4186 mL | 12.0928 mL | 24.1856 mL | |
| 5 mM | 0.4837 mL | 2.4186 mL | 4.8371 mL | |
| 10 mM | 0.2419 mL | 1.2093 mL | 2.4186 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Effects ofBRD4770 inhibition on the ATM and ATR pathways.ACS Chem Biol.2012 Jul 20;7(7):1152-7. |
Small-molecule inhibitors of G9a. |
Comparison of genetic and small-molecule inhibition of G9a in PANC-1 cells.ACS Chem Biol.2012 Jul 20;7(7):1152-7. |
BI-9466
MRK-740-NC
SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
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