| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 靶点 |
G Protein-Coupled Receptor Kinase 5 (GRK5) (IC50 = 0.19 μM, recombinant GRK5 kinase activity assay; Ki = 0.05 μM, isothermal titration calorimetry (ITC) assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
当涉及 GRK2 和 GRK5 时，CCG215022 表现出纳摩尔级效力，比保法止至少强 20 倍。在基于 GRK2 结构的药物设计活动中，CCG215022 对 GRK2 和 GRK5 表现出纳摩尔 IC50 值，并对其他密切相关的激酶（如 GRK1 和 PKA）具有良好的选择性。当CCG215022应用于小鼠心肌细胞时，收缩力在比使用帕罗西汀（一种对GRK2具有更中等选择性的抑制剂）低20倍的浓度下显着增加[1]。
1. GRK5激酶活性抑制：CCG215022以剂量依赖性方式抑制重组人GRK5的激酶活性，IC50=0.19 μM。对GRK5具有高选择性，浓度高达10 μM时，对其他GRK亚型（GRK2、GRK3、GRK4、GRK6）无显著抑制作用（所有测试亚型的抑制率均<15%）[1] 2. 与GRK5直接结合：X射线晶体学（PDB代码：4ZIP）证实，CCG215022直接结合于GRK5的ATP结合口袋。等温滴定量热法（ITC）实验显示结合亲和力（Ki）为0.05 μM，表明药物与GRK5之间存在强相互作用[1] 3. 抑制GRK5介导的受体磷酸化：在过表达GRK5和β2肾上腺素能受体（β2AR）的HEK293细胞中，CCG215022（0.5-5 μM）剂量依赖性抑制GRK5介导的β2AR磷酸化。Western blot分析（使用针对β2AR Ser355/356位点的磷酸化特异性抗体）显示，5 μM剂量下磷酸化水平较溶媒组降低70%[1] 4. 无显著脱靶激酶抑制：在包含48种其他激酶（包括PKA、PKC、ERK1/2、Akt）的激酶面板实验中，10 μM CCG215022未抑制这些激酶的活性，证实其高激酶选择性[1] |
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| 酶活实验 |
1. 重组GRK5激酶活性实验：重组人GRK5蛋白用含三羟甲基氨基甲烷-盐酸（Tris-HCl）、氯化镁（MgCl2）和二硫苏糖醇（DTT）的实验缓冲液稀释。不同浓度的CCG215022（0.01-10 μM）加入反应体系后，加入ATP（10 μM）和源自β2肾上腺素能受体的合成肽底物（含GRK磷酸化位点）启动反应。30℃孵育60分钟后，采用放射性[γ-32P]ATP掺入法检测磷酸化肽段，液体闪烁计数法测定放射性强度，计算GRK5活性抑制率，通过剂量-反应曲线非线性回归推导IC50值[1]
2. GRK亚型选择性实验：采用上述GRK5激酶活性实验流程，用重组GRK2、GRK3、GRK4和GRK6蛋白评估CCG215022（10 μM）的选择性，计算每种GRK亚型的抑制率，证实药物对GRK5的特异性[1] 3. 等温滴定量热法（ITC）结合实验：CCG215022溶解于与蛋白溶液匹配的缓冲液中，GRK5蛋白（20 μM）加载至样品池，25℃下将CCG215022（200 μM）依次注入池中，测量结合相关的热量变化，使用ITC数据分析软件计算结合亲和力（Ki）[1] 4. 激酶面板选择性实验：48种重组激酶与CCG215022（10 μM）及其各自底物在激酶缓冲液中孵育，采用均相时间分辨荧光（HTRF）法检测激酶活性，计算抑制率以评估脱靶效应[1] |
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| 细胞实验 |
1. GRK5介导的β2AR磷酸化实验：HEK293细胞用转染试剂共转染GRK5表达质粒和β2AR表达质粒，转染24小时后血清饥饿12小时，用CCG215022（0.5、1、5 μM）处理1小时，再用异丙肾上腺素（10 μM）刺激10分钟激活β2AR。含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，Western blot检测β2AR磷酸化（使用针对β2AR Ser355/356位点的磷酸化特异性抗体），总β2AR和GAPDH作为内参[1]
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| 动物实验 |
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| 参考文献 | |||
| 其他信息 |
1. CCG215022 是一种合理设计的 G 蛋白偶联受体激酶 5 (GRK5) 小分子抑制剂，GRK5 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，它通过磷酸化 G 蛋白偶联受体 (GPCR) 的胞质尾来调节 GPCR 的脱敏和内化 [1]
2. 该药物与 GRK5 的 ATP 结合口袋具有高亲和力，这已通过 X 射线晶体学证实，并揭示了 CCG215022 与 GRK5 活性位点中的氨基酸残基（例如 Lys215、Asp229、Leu273）之间的关键相互作用。这种结合模式阻断了ATP的获取，从而抑制了GRK5激酶的活性[1] 3. CCG215022对GRK5具有高度选择性，优于其他GRK亚型和无关激酶，使其成为研究GRK5生理和病理功能的宝贵工具化合物。潜在的治疗应用包括与GRK5活性异常相关的疾病，例如心血管疾病（如心力衰竭、高血压）和神经系统疾病[1] 4. GRK5-CCG215022复合物的晶体结构为进一步优化药物以提高其效力、药代动力学特性和临床应用潜力提供了结构基础[1] |
| 分子式 |
C₂₆H₂₂FN₇O₃
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|---|---|---|
| 分子量 |
499.5
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| 精确质量 |
499.176
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| CAS号 |
1813527-81-9
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
118888941
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| 外观&性状 |
White to gray solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
783.2±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
427.4±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.691
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| LogP |
1.8
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| tPSA |
141
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
37
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| 分子复杂度/Complexity |
915
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
BLMBNKDQXGINRE-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C26H22FN7O3/c1-14-22(25(36)32-17-6-8-21-16(10-17)12-30-34-21)23(33-26(37)31-14)15-5-7-20(27)19(11-15)24(35)29-13-18-4-2-3-9-28-18/h2-12,23H,13H2,1H3,(H,29,35)(H,30,34)(H,32,36)(H2,31,33,37)
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| 化学名 |
4-[4-fluoro-3-(pyridin-2-ylmethylcarbamoyl)phenyl]-N-(1H-indazol-5-yl)-6-methyl-2-oxo-3,4-dihydro-1H-pyrimidine-5-carboxamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.01 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.01 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.0020 mL | 10.0100 mL | 20.0200 mL | |
| 5 mM | 0.4004 mL | 2.0020 mL | 4.0040 mL | |
| 10 mM | 0.2002 mL | 1.0010 mL | 2.0020 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
 Ligand interactions in the active sites of GRK5 and GRK2.J Biol Chem.2015 Aug 21;290(34):20649-59. |
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 Rational design of improved GRK inhibitors.J Biol Chem.2015 Aug 21;290(34):20649-59. |
 Model of GRK4 subfamily membrane interactions.J Biol Chem.2015 Aug 21;290(34):20649-59. |
 Crystal structure of GRK5 in complex with CCG215022.J Biol Chem.2015 Aug 21;290(34):20649-59. |
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 Increased adrenergic contractility in myocytes treated with GRK2 inhibitors.
Inhibition of GRKs and PKA by CCG215022.J Biol Chem.2015 Aug 21;290(34):20649-59. |
Kiss2 peptide acetate
Rp-8-Br-cAMPS sodium
8-Bromo-cAMP
Sp-8-Br-cAMPS
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COA
粤公网安备 44011102003439号
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