| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PI3Kα (IC50 = 6.8 nM); PI3Kβ (IC50 = 166 nM); PI3Kδ (IC50 = 240.3 nM); PI3Kγ (IC50 = 3020 nM)
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| 体外研究 (In Vitro) |
CNX-1351 通过有效 (EC50<100 nM) 抑制 PI3Kα 支持系统中的信号传导，表现出强大的抗增殖作用 (GI50<100 nM)。 CNX-1351 抑制 SKOV3 细胞中的 PI3K 信号传导 利用 CNX-1351 并跟踪细胞生长，以研究抑制 PI3Kα 的功能效应。当 CNX-1351 暴露于两种 PIK3CA 驱动的细胞系 96 小时（GI50 分别为 78 和 55 nM）时，细胞系的增殖受到抑制 [1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
在小鼠脾脏中，CNX-1351 与 PI3Kα 结合并悬浮 p-AktSer473。连续五天，将 CNX-1351 以 100 mg/kg 的浓度每天一次挂入每组三只裸鼠的腹腔中。在最后一次治疗后，按照预定的时间间隔（1-24 小时）取出小鼠的脾脏，并通过免疫印迹法测量 P-AktSer473 或 PI3Kα 的占用率。 PI3K 臂信号传导抑制的最后一个迹象是 P-AktSer473)。一小时和四小时后，减少[1]。
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| 酶活实验 |
CNX-1351 在一组 10 种脂质激酶中进行了测试。 CNX-1351s 在 10 个浓度的 IC50 曲线中进行测试，从 1 μM 开始进行 3 倍连续稀释。在 10 μM ATP 下进行反应。对于 PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kγ 和 PI3Kδ，采用 HTRF 检测形式；对于其他激酶，采用 ADP-GLO 测定格式。磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸是 HTRF 的底物，鞘氨醇是 SPHK1 和 SPHK2 的底物，磷脂酰肌醇是所有其他 ADP-GLO 酶的底物。 CNX-1351 在激酶选择性面板中运行，使用 HotSpot 技术和基于放射性同位素的 P81 过滤来实现一般激酶选择性。使用纯 DMSO 将 CNX-1351 溶解至最终测试浓度 1 μM。每天为针对 CNX-1351 底物测试的各种激酶提供新鲜制备的反应缓冲液。添加激酶后，将任何必需的辅因子添加到底物溶液中，然后在室温下预孵育 30 分钟。通过向反应混合物中添加 10 μM 33P-ATP 开始反应。然后反应在室温下进行接下来的两个小时。停止反应，使用 0.1% 磷酸去除所有尚未反应的磷酸盐，然后使用特殊技术进行检测。研究中使用一种称为 10 M 星形孢菌素的非选择性 ATP 竞争性激酶抑制剂作为阳性对照，该研究一式两份进行[1]。
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| 细胞实验 |
将 SKOV3 增殖测定培养基（补充有 5-10% FBS 和 pen/strep 的 DMEM）与 SKOV3 细胞或 MCF-7 细胞以每孔 180 μL 体积、5000 个细胞的密度铺在 Costar 2 号中。 3610 白色 96 孔透明平底板。然后将板在潮湿培养箱中于 37°C 培养过夜。在不同的平板中建立细胞计数范围为 10,000 至 50,000 的标准曲线并使其粘附在平板上 4-6 小时后，使用 Cell Titer-Glo 进行平板显色。第二天早上，在含有 1% DMSO 的增殖培养基中进行 10,000 至 40 nM 之间的 3 倍化合物稀释。为了创建 1000 至 4 nM 的剂量反应曲线，将每种稀释液 20 μL 添加到前一天铺板的 SKOV3 或 MCF-7 细胞中。 Cell Titer Glo 用于培养 96 小时孵育后的细胞。利用测定开始时产生的标准曲线，计算测定结束时的细胞计数。以下公式用于确定 GI50 值并计算生长抑制[1]。
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| 动物实验 |
Mice：Compound (GDC-0941 or CNX-1351) delivered ip at 100 mg/kg once daily for 5 straight days is given to female nu/nu (n=3/group). Spleens from treated animals are removed at 1, 4, and 24 hours after the last dose has been administered. Spleens are instantly put in liquid nitrogen to freeze. Samples are kept at -80°C until homogenates processing. To create homogenates, mix approximately 100 μL of spleen sample with 300 μL of cell extraction buffer, Complete protease inhibitor, and PhosStop phosphatase inhibitor in a Precellys homogenizing tube that has been kept on ice. The sample is first homogenized for 15 seconds in a Precellys 24 homogenizer, then centrifuged at 16000 g for 20 minutes at 4 °C. The supernatant is transferred to a new tube, and the BCA Assay is used to calculate the protein concentration.
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| 参考文献 |
[1]. Nacht M, et al. Discovery of a potent and isoform-selective targeted covalent inhibitor of the lipid kinase PI3Kα. J Med Chem. 2013 Feb 14;56(3):712-21
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| 分子式 |
C30H35N7O3S
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|---|---|
| 分子量 |
573.71
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| 精确质量 |
573.25221
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| 元素分析 |
C, 62.81; H, 6.15; N, 17.09; O, 8.37; S, 5.59
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| CAS号 |
1276105-89-5
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| 相关CAS号 |
1276105-89-5
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| 外观&性状 |
solid powder
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| SMILES |
C/C(C)=C/C(CCC(N1CCN(CC2=CC3=NC(C4=CC=CC5=C4C=NN5)=NC(N6CCOCC6)=C3S2)CC1)=O)=O
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| InChi Key |
DLNUPKDFXMWRFP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C30H35N7O3S/c1-20(2)16-21(38)6-7-27(39)36-10-8-35(9-11-36)19-22-17-26-28(41-22)30(37-12-14-40-15-13-37)33-29(32-26)23-4-3-5-25-24(23)18-31-34-25/h3-5,16-18H,6-15,19H2,1-2H3,(H,31,34)
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| 化学名 |
1-(4-((2-(1H-indazol-4-yl)-4-morpholinothieno[3,2-d]pyrimidin-6-yl)methyl)piperazin-1-yl)-6-methylhept-5-ene-1,4-dione
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| 别名 |
CNX-1351; CNX 1351; CNX1351
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外) |
DMSO: ~100 mg/mL (174.3 mM)
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| 溶解度 (体内) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.36 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.7430 mL | 8.7152 mL | 17.4304 mL | |
| 5 mM | 0.3486 mL | 1.7430 mL | 3.4861 mL | |
| 10 mM | 0.1743 mL | 0.8715 mL | 1.7430 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PI3Kδ-IN-12
PITCOIN4
PI3K-IN-41
PI3Kδ-IN-14
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