Microtubule/Tubulin

体外活性：秋水仙碱通过与微管的主要成分可溶性微管蛋白异二聚体结合来发挥其生物学作用。总结了多种来源的微管蛋白的秋水仙碱结合能力，深入探讨了秋水仙碱与脑微管蛋白结合的机制。秋水仙素结构与微管蛋白结合活性之间的关系提供了对负责与微管蛋白高亲和力结合的秋水仙碱结构特征的深入了解，并对秋水仙碱系列中的类似物进行了审查。根据结合机制描述和评估了缔合的热力学和动力学方面。秋水仙碱与微管蛋白的结合导致秋水仙碱低能电子光谱的异常改变。根据秋水仙碱-微管蛋白复合物的性质讨论了与微管蛋白结合的秋水仙碱的光谱特征。尝试定位微管蛋白上的高亲和力秋水仙碱结合位点。给予吲哚美辛 24 小时后的损伤指数表明，秋水仙碱治疗可抑制吲哚美辛引起的小肠损伤达 86%（1 mg/kg）和 94%（3 mg/kg）。秋水仙碱抑制裂解的 caspase-1 和成熟 IL-1β 的蛋白表达，而不影响 NLRP3 和 IL-1β 的 mRNA 表达。激酶测定：暴露于 1μM 秋水仙碱（一种微管破坏剂）会引发大鼠小脑颗粒细胞 (CGC) 细胞凋亡。秋水仙碱治疗还会导致 Ca2+ 对化学去极化的反应发生改变，并导致静息细胞内 Ca2+ 浓度适度但进行性增加[1]。秋水仙碱通过与微管的主要成分可溶性微管蛋白异二聚体结合来发挥其生物学作用。总结了多种来源的微管蛋白的秋水仙碱结合能力，深入探讨了秋水仙碱与脑微管蛋白结合的机制。秋水仙素结构与微管蛋白结合活性之间的关系提供了对负责与微管蛋白高亲和力结合的秋水仙碱结构特征的深入了解，并对秋水仙碱系列中的类似物进行了审查。根据结合机制描述和评估了缔合的热力学和动力学方面。秋水仙碱与微管蛋白的结合导致秋水仙碱低能电子光谱的异常改变。根据秋水仙碱-微管蛋白复合物的性质讨论了与微管蛋白结合的秋水仙碱的光谱特征。尝试定位微管蛋白上的高亲和力秋水仙碱结合位点[2]。给予吲哚美辛 24 小时后的损伤指数表明，秋水仙碱治疗可抑制吲哚美辛引起的小肠损伤达 86%（1 mg/kg）和 94%（3 mg/kg）。秋水仙碱抑制裂解的 caspase-1 和成熟 IL-1β 的蛋白表达，而不影响 NLRP3 和 IL-1β 的 mRNA 表达。细胞测定：

在吲哚美辛给药前 30 分钟口服秋水仙碱 (1 mg/kg)。给予吲哚美辛24小时后，秋水仙碱处理的小鼠小肠中伊文思蓝染色的病变比载体处理的小鼠小。此外，组织学检查表明，与媒介物处理的小鼠相比，秋水仙碱处理的小鼠粘膜炎症和溃疡较少，病变的大小和数量减少。与赋形剂治疗相比，秋水仙碱治疗在 1 mg/kg 和 3 mg/kg 剂量下显着降低病变指数（分别降低 86% 和 94%）。秋水仙碱处理在 1 mg/kg 和 3 mg/kg 剂量下显着抑制成熟 IL-1β 的蛋白水平（分别抑制 56% 和 69%），而不影响 pro-IL-1β 的蛋白水平。秋水仙碱处理还在 1 mg/kg 和 3 mg/kg 剂量下显着抑制裂解的 caspase-1 的蛋白水平（分别抑制 26% 和 39%），而不影响 pro-caspase-1 的蛋白水平。

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秋水仙碱治疗对吲哚美辛诱导的小肠损伤的预防作用[3]
我们证实，不含吲哚美辛的赋形剂治疗不会提前导致小肠损伤。在吲哚美辛给药前30分钟口服赋形剂或秋水仙碱（1mg/kg）。服用吲哚美辛24小时后，Colchicine/秋水仙碱治疗的小鼠小肠中伊文思蓝染色的病变比赋形剂治疗的小鼠小。此外，组织学检查显示，与赋形剂治疗的小鼠相比，秋水仙素治疗的小鼠的粘膜炎症和溃疡较少，病变的大小和数量也有所减少（图2a）。与赋形剂治疗相比，秋水仙碱治疗在1 mg/kg和3 mg/kg剂量下显著降低了病变指数（分别降低了86%和94%）（图2b）
接下来，我们研究了秋水仙碱对吲哚美辛给药后6小时炎性小体成分mRNA水平的影响。与赋形剂治疗相比，Colchicine/秋水仙碱治疗在1 mg/kg和3 mg/kg的剂量下没有显著改变NLRP3（图2c）、IL-1β（图2d）或胱天蛋白酶-1（图2e）的mRNA水平。

此外，我们研究了秋水仙素治疗对吲哚美辛给药后6小时成熟IL-1β（p17）和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（p10）蛋白表达的影响。秋水仙素治疗在1mg/kg和3mg/kg的剂量下显著抑制了成熟IL-1β的蛋白质水平（分别降低了56%和69%），而不影响前IL-1β的蛋白水平。秋水仙素治疗在1 mg/kg和3 mg/kg的剂量下也显著抑制了切割的胱天蛋白酶-1的蛋白质水平（分别降低了26%和39%），而不影响前胱天蛋白酶1的蛋白质水平。（图2f-j）。

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秋水仙素治疗对受损小肠中切割胱天蛋白酶-1表达和定位的预防作用[3]
使用免疫荧光测定切割的胱天蛋白酶-1蛋白的定位和表达水平，结果表明切割的胱天蛋白酶-1在小肠黏膜固有层中广泛表达6 服用吲哚美辛后h，而用Colchicine/秋水仙素治疗的小鼠表现出切割的胱天蛋白酶-1表达的显著降低（图3a）。用CD68对切割的胱天蛋白酶-1进行双重染色表明，表达切割的胱天蛋白酶-1的大多数细胞是巨噬细胞和单核细胞（图3b）。

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外源性IL-1β和Colchicine/秋水仙素治疗对吲哚美辛诱导的小肠损伤的影响[3]
为了研究IL-1β在非甾体抗炎药诱导的小肠损伤发展中的作用，小鼠在吲哚美辛治疗后3小时接受小鼠重组IL-1β（0.1μg/kg）的载体或腹腔注射。在吲哚美辛激发前给予重组IL-1β在宏观（即损伤指数）和微观评估中消除了秋水仙素对吲哚美痛诱导的损伤的预防作用，但补充IL-1β不影响载体治疗小鼠的损伤严重程度（图4a，b）。

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秋水仙素治疗的预防作用是通过抑制NLRP3炎性小体来介导的[3]
确认NLRP3炎性小体/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1/IIL-1β轴参与Colchicine/秋水仙素、赋形剂或秋水仙素（1或3 mg/kg）在给予吲哚美辛之前给予NLRP3基因紊乱的小鼠（NLRP3-/-小鼠）。与之前的研究一致23，吲哚美辛诱导的NLRP3-/-小鼠小肠损伤在宏观上很轻微。秋水仙碱治疗并没有进一步抑制NLRP3-/-小鼠的小肠损伤（图5a）。与野生型小鼠相比，使用损伤指数评估的吲哚美辛诱导的NLRP3-/-小鼠小肠损伤显著减少了77%，我们证实，1 mg/kg和3 mg/kg剂量的秋水仙碱治疗未能抑制NLRP3-/-小鼠的小肠损伤（图5b）。

我们研究了秋水仙素治疗（1 mg/kg和3 mg/kg）对NLRP3-/-小鼠炎症组分mRNA水平的影响。与野生型小鼠相比，NLRP3-/-小鼠的IL-1β（图5c）和胱天蛋白酶-1（图5d）的mRNA水平没有显著变化。在NLRP3-/-小鼠中，与赋形剂治疗相比，1 mg/kg和3 mg/kg剂量的秋水仙素治疗没有显著改变IL-1β（图5c）和胱天蛋白酶-1（图5d）的mRNA水平

我们研究了秋水仙素治疗对NLRP3-/-小鼠成熟IL-1β（p17）和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（p10）蛋白表达的影响。与野生型小鼠相比，NLRP3-/-小鼠中成熟IL-1β和切割的胱天蛋白酶-1的蛋白质水平分别显著降低了33%和57%。与野生型小鼠相比，NLRP3-/-小鼠中pro-IL-1β和pro-capase-1的蛋白质水平没有变化。这些蛋白质的表达水平在接受秋水仙素治疗和不接受秋水仙碱治疗的NLRP3-/-小鼠中相似（图5e-i）。

在1μM的时间里，在大鼠小脑颗粒细胞（CGC）中，微管破坏剂秋水仙碱引起细胞凋亡。此外，施用秋水仙碱会导致静息细胞内 Ca2+ 浓度逐渐但适度升高，以及 Ca2+ 对化学去极化的反应发生变化 [...]。通过与可溶性微管蛋白异二聚体（微管的主要组成部分）结合，秋水仙碱具有其生物学效应。对秋水仙碱与脑微管蛋白结合的机制进行了广泛的检查，并总结了微管蛋白结合所有来源的秋水仙碱的能力。通过秋水仙素类结构与微管蛋白结合活性之间的相关性，可以深入了解秋水仙碱使其能够与微管蛋白高亲和力结合的结构特征。秋水仙碱系列类似物也检验了这种关系。结合机制讨论和评估了缔合的动力学和热力学特征。秋水仙碱的低能电子光谱在与微管蛋白结合后表现出特殊的变化。结合秋水仙碱与微管蛋白结合的光谱特征讨论了秋水仙碱-微管蛋白复合物的性质。人们尝试鉴定微管蛋白的高亲和力秋水仙碱结合位点[2]。给予吲哚美辛24小时后的损伤指数表明，秋水仙碱治疗可抑制86%（1mg/kg）和94%（3mg/kg）吲哚美辛引起的小肠损伤。秋水仙碱在不影响 NLRP3 和 IL-1β mRNA 表达的情况下，抑制成熟 IL-1β 和裂解 caspase-1 的蛋白表达。

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秋水仙素通过与微管的主要成分可溶性微管蛋白异二聚体结合来发挥其生物学作用。总结了各种来源的微管蛋白的秋水仙素结合能力，并深入探讨了秋水仙素与脑微管蛋白结合的机制。秋水仙素类结构和微管蛋白结合活性之间的关系提供了对秋水仙素与微管蛋白高亲和力结合的结构特征的深入了解，并对秋水仙碱系列中的类似物进行了综述。根据结合机制描述和评估了缔合的热力学和动力学方面。秋水仙素与微管蛋白的结合导致秋水仙素的低能电子光谱发生异常变化。根据秋水仙素-微管蛋白复合物的性质，讨论了秋水仙素与微管蛋白结合的光谱特征。本文介绍了定位微管蛋白上高亲和力秋水仙素结合位点的尝试[2]。

HeLa 细胞在 6 孔板中生长，两小时后用 100 μM EBI 处理。之后，用不同浓度的 KXO1、长春花碱或秋水仙碱处理它们。使用radioimmuno_x005f?沉淀测定缓冲液提取总蛋白后，使用Western blot分析β~-微管蛋白。上样对照是 GAPDH。进行蛋白质印迹过程。

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电生理学[4]
在室温（20-24°C）下，在-60 mV的保持电位下，在全细胞电压钳配置中记录EGFP阳性转染的HEK 293细胞的甘氨酸诱发电流（Lara等人，2019）。贴片电极（3-4 mΩ）从硼硅酸盐玻璃中拔出，并填充（单位为mM）：120 CsCl、8 EGTA、10 HEPES（pH 7.4）、4 MgCl2、0.5 GTP和2 ATP。外部溶液含有（以mM计）140 NaCl、5.4 KCl、2.0 CaCl2、1.0 MgCl2、10 HEPES（pH 7.4）和10葡萄糖。使用Axoclamp 200B放大器进行全细胞记录，并使用Clampex 10.1或Axopatch 10.0软件采集。使用Clampfit 10.1离线进行数据分析。使用手动施加激动剂脉冲（3-4s）和定制设计的重力馈送微灌注系统的出口管（内径200μm）获得外源性甘氨酸诱发电流，该系统位于距离记录细胞50-100μm的位置。用于细胞附着配置中α3GlyR单通道记录的方法先前已发表（Marabelli等人，2013；Lara等人，2019）。贴片移液管的尖端电阻为10-20mΩ，并在微锻件中手动火抛光。数据经过滤波（1kHz低通8极巴特沃斯），并使用Axopatch 200B放大器和1322A Digidata在5-20kHz下采集。使用pClamp软件获取数据，并使用Clampfit 10.1进行离线分析秋水仙素原液在高纯度蒸馏水中制备，随后在实验当天稀释到记录溶液中。在全细胞实验中，使用手动施加脉冲（1-2s）将秋水仙素与甘氨酸共同施加。在细胞附着记录中，将Colchicine与甘氨酸一起应用于移液管内溶液。

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暴露于1微摩尔的Colchicine（一种微管破坏剂）会引发大鼠小脑颗粒细胞（CGC）的凋亡。12小时后开始出现凋亡核，随后出现寡核苷酸DNA梯状条带，而当大多数细胞已经有凋亡核时，线粒体3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四氮唑溴化物代谢的抑制在18至24小时之间变得显著。在这些事件之前，tau蛋白丢失，α和β微管蛋白断裂秋水仙碱治疗还导致Ca2+对化学去极化反应的改变，以及静息细胞内Ca2+浓度的中度但渐进性增加。Colchicine处理后，几乎所有的神经元都表达了c-Fos。然而，尽管在部分细胞群中c-Fos水平随后下降，但在经历凋亡的神经元中，该蛋白仍然表达，但细胞内定位异常。在12小时时也检测到组成型一氧化氮合酶（NOS-I）的表达增加，随后亚硝酸盐的产生增加。用100nM紫杉醇处理以稳定微管，可防止秋水仙素诱导的DNA梯状条带和凋亡体形成。相比之下，用N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801或L型Ca2+通道阻断剂预处理并不能阻止秋水仙碱诱导的CGC凋亡。NOS抑制剂在防止凋亡小体形成和DNA梯状条带方面也无效，但它们延迟了二次细胞裂解。这些结果支持秋水仙素诱导的细胞骨架改变直接引发导致CGC凋亡的遗传和结构修饰的观点[1]。

小鼠：本研究使用8周龄雄性小鼠，这些小鼠不携带特定病原体。研究对象包括NLRP3^?/?小鼠和C57BL/6背景的野生型C57BL/6小鼠。在给予吲哚美辛前30分钟，分别口服给予赋形剂或1或3 mg/kg的秋水仙碱，以研究秋水仙碱对非甾体抗炎药（NSAID）诱导的小肠损伤的影响。给予吲哚美辛3小时后，小鼠腹腔注射小鼠重组IL-1β（0.1 μg/kg）或无菌磷酸盐缓冲液。在给予NLRP3^?/?小鼠吲哚美辛前，也给予赋形剂或秋水仙碱（1或3 mg/kg）。在给予吲哚美辛24小时后评估损伤指数，并在6小时后检测炎症小体组分的mRNA和蛋白表达。

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为了研究秋水仙碱对非甾体抗炎药（NSAID）诱导的小肠损伤的影响，在给予吲哚美辛前30分钟，分别口服给予赋形剂或秋水仙碱（1或3 mg/kg；日本和光纯药株式会社，京都）。在给予吲哚美辛3小时后，小鼠腹腔注射无菌磷酸盐缓冲液或小鼠重组IL-1β（0.1 μg/kg；美国R&D Systems公司，明尼阿波利斯）。在给予吲哚美辛前，也向NLRP3−/−小鼠给予赋形剂或秋水仙碱（1或3 mg/kg）。我们在吲哚美辛给药后24小时评估了损伤指数，并在吲哚美辛给药后6小时检测了炎症小体组分的mRNA和蛋白表达。[3]炎症小体是一个大型多蛋白复合物，由核苷酸结合寡聚化结构域样受体（NLR）、含有caspase募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白以及前体caspase-1组成。炎症小体的激活导致前体caspase-1裂解为裂解的caspase-1，进而促进前白细胞介素（IL）-1β加工成成熟的IL-1β。我们研究了秋水仙碱对非甾体抗炎药（NSAID）诱导的小肠损伤和NLR家族pyrin结构域蛋白3（NLRP3）炎症小体激活的影响。秋水仙碱治疗可抑制吲哚美辛诱导的小肠损伤，1 mg/kg 组抑制率达 86%，3 mg/kg 组抑制率达 94%（以吲哚美辛给药后 24 小时的损伤指数为指标）。秋水仙碱抑制了裂解型 caspase-1 和成熟型 IL-1β 的蛋白表达，但并不影响 NLRP3 和 IL-1β 的 mRNA 表达。虽然重组 IL-1β (0.1 μg/kg) 治疗并未改变小肠损伤的严重程度，但补充相同剂量的重组 IL-1β 可消除秋水仙碱的预防作用。在 NLRP3(-/-) 小鼠中，吲哚美辛诱导的小肠损伤减少了 77%（以损伤指数为指标），而秋水仙碱治疗未能抑制 NLRP3(-/-) 小鼠的小肠损伤。这些结果表明，秋水仙碱通过抑制NLRP3炎症小体的激活来预防非甾体抗炎药（NSAIDs）引起的小肠损伤。[3]秋水仙碱是一种广泛用作治疗药物的植物生物碱。人们普遍认为，秋水仙碱主要通过其微管聚合抑制活性来改变细胞骨架动力学，从而减少炎症介质的产生。然而，其他证据表明，秋水仙碱对离子通道的功能具有直接作用，而这种作用独立于细胞骨架的改变。秋水仙碱能够调节多种五聚体配体门控离子通道的功能，包括甘氨酸受体（GlyRs）。先前的电生理学研究表明，秋水仙碱是GlyRs α1亚基的拮抗剂。此外，最近的研究表明，秋水仙碱可以直接与GlyRs的α3亚基结合。有趣的是，其他研究表明α3GlyR在慢性炎症性疼痛中发挥着重要作用。然而，秋水仙碱对α3GlyR功能的具体影响尚不清楚。本文利用电生理技术和生物信息学方法，证实秋水仙碱能够抑制α3GlyR的功能。秋水仙碱在微摩尔浓度范围内即可对α3GlyR产生浓度依赖性的抑制作用，并降低其对甘氨酸的表观亲和力。单通道记录显示，秋水仙碱的抑制作用与离子通道开放概率的降低相关。分子对接实验表明，秋水仙碱优先结合于离子通道关闭状态下的正构位点。综上所述，我们的研究结果表明秋水仙碱是α3GlyR的竞争性拮抗剂。[4]

吸收、分布和排泄
秋水仙碱口服后可迅速经胃肠道吸收。秋水仙碱的生物利用度约为45%：一项研究表明，秋水仙碱的生物利用度差异很大，范围在24%至88%之间。在健康成人中，空腹单次给药后1至2小时（范围0.5至3小时）即可达到平均血药浓度峰值（Cmax），为2.5 ng/mL（范围1.1至4.4 ng/mL）。在一项每日1 mg秋水仙碱的多剂量研究中，给药后第8天达到稳态血药浓度。秋水仙碱与食物同服不影响其吸收率，但会使秋水仙碱的吸收量降低约15%。
在一项健康受试者口服1毫克秋水仙碱的药代动力学研究中，约40%至65%的剂量以原形药物的形式从尿液中排出。秋水仙碱可经肠肝循环和胆汁排泄。
年轻健康患者的平均表观分布容积约为5-8升/公斤。已知秋水仙碱可通过胎盘屏障并分布到乳汁中。研究发现，秋水仙碱可分布于多种组织，主要分布于胆汁、肝脏和肾脏组织。在心脏、肺、肠道组织和胃中也检测到了少量秋水仙碱。
在一项药代动力学研究中，受试者单次口服0.6 mg秋水仙碱，结果显示，年轻健康成人的清除率为0.0321 ± 0.0091 mL/min，60至70岁成人的清除率为0.0292 ± 0.0071 mL/min。终末期肾功能不全患者的秋水仙碱清除率降低了75%。在一项针对家族性地中海热（FMF）患者的药代动力学研究中，计算出的表观平均清除率为0.726 ± 0.110 L/h/kg。
秋水仙碱吸收迅速但个体差异较大。给药后0.5至2小时达到血浆峰浓度。血浆中50%的秋水仙碱与蛋白质结合。存在显著的肠肝循环。秋水仙碱的确切代谢途径尚不清楚，但似乎涉及肝脏的脱乙酰作用。仅有10%至20%的秋水仙碱经尿液排出，但肝病患者的尿液排泄量会增加。肾脏、肝脏和脾脏中也含有高浓度的秋水仙碱，但心脏、骨骼肌和大脑似乎很少吸收秋水仙碱。秋水仙碱的血浆半衰期约为9小时，但单次静脉注射后，至少9天内仍可在白细胞和尿液中检测到秋水仙碱。
…… 报告了两例服用法国市售药物自杀的案例。案例1中，仅对尸体进行外部检查后采集了心脏血。案例2中，进行了尸检，并采集了心脏血、尿液、胃内容物和胆汁进行毒理学分析。采用高效液相色谱-二极管阵列检测器（HPLC-DAD）法测定生物样本中的秋水仙碱含量。提取前，使用pH 8的二氯甲烷，并以普拉西泮作为内标（IS）。分析在Symetry C-8色谱柱上进行。流动相为乙腈/pH 3.8磷酸盐缓冲液梯度洗脱。秋水仙碱的保留时间为13.1 min，该方法在血液、尿液和胆汁中的线性范围为4-1000 ng/mL。定量限（LOQ）为4 ng/mL。检测到的秋水仙碱浓度分别为：病例1：心血13 ng/mL；病例2：心血66 ng/mL，尿液500 ng/mL，胃内容物12 ng/mL，胆汁5632 ng/mL。我们的检测结果与先前报道的致死浓度范围相符，但与摄入药物的量无关。即使大量服用过量，也可能无法在血液中检测到秋水仙碱。由于秋水仙碱在经胆汁和粪便排泄前会经历广泛的肠肝循环，因此胆汁是需要分析的目标样本。我们得出结论，在这两例病例中，死因均为服用秋水仙碱自杀。进行尸检以获取胆汁、尿液、心血和股静脉血样本显得尤为重要。
口服后，血浆浓度在0.5至2小时内达到峰值，随后在2小时内迅速下降。血浆半衰期为60分钟。秋水仙碱可在组织中停留长达10天。
在5例病例中，我们获得了尿液排泄信息。尿液中的浓度比血浆中的浓度高10至80倍。摄入剂量的4%至25%在3至10天内经尿液排出。摄入后最初24小时内的排泄量尤其高。秋水仙碱在服用后十天内主要经尿液排出。
有关秋水仙碱（共12种）的更多吸收、分布和排泄（完整）数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
秋水仙碱在肝脏代谢。它经CYP3A4介导的去甲基化作用，生成主要代谢物2-O-去甲基秋水仙碱和3-O-去甲基秋水仙碱。此外，它还生成一种次要代谢物10-O-去甲基秋水仙碱（秋水仙碱）。这些代谢物的血浆浓度低于原药的5%。
秋水仙碱在肝脏中部分代谢。秋水仙碱在肝脏中部分脱乙酰化。大量秋水仙碱及其代谢物经肠肝循环。这或许可以解释摄入后 5 至 6 小时观察到的第二个血浆峰浓度。
利用增强型在线液相色谱-精确放射性同位素计数技术，在大鼠胆汁中鉴定出三种新的秋水仙碱结合代谢物。已知的 2-和 3-去甲基秋水仙碱 (DMC) 除了之前报道的 O-葡萄糖醛酸化外，还发生了 O-硫酸酯结合。2-DMC 优先发生 O-葡萄糖醛酸化，而 3-DMC 主要生成 O-硫酸酯结合物，表明存在 II 期结合的区域选择性。此外，M1 被鉴定为一种新的谷胱甘肽结合物，并提出了其可能的生物转化途径。已知的 2-DMC (M6)、3-DMC (M7)、2-DMC 葡萄糖醛酸苷 (M4) 和新的 3-DMC 硫酸酯 (M3) 被证实为主要代谢物。 ...

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生物半衰期
每日两次，每次服用0.6毫克秋水仙碱数次后，秋水仙碱的平均消除半衰期为26.6至31.2小时。另一项研究报告的消除半衰期为20至40小时。
单次静脉注射治疗剂量后（截至2008年8月，美国已不再销售静脉注射制剂），秋水仙碱迅速从血浆中清除；血浆半衰期约为20分钟。该药物在白细胞中的半衰期约为60小时。
消除半衰期个体差异较大，正常患者的半衰期为4.4小时，而老年患者的半衰期可达30小时或更长。肾功能不全患者的治疗剂量半衰期为18.8小时。
单次静脉注射2毫克后，平均血浆半衰期为20分钟。严重肾脏疾病患者的血浆半衰期延长（40 分钟），而严重肝脏疾病患者的血浆半衰期缩短（9 分钟）。

毒性概述
识别：秋水仙碱是一种抗痛风制剂。秋水仙碱有片剂，在某些国家也有注射液剂型。秋水仙碱是秋水仙（Colchicum autumnale，又名秋番红花、草地番红花）的生物碱。秋水仙也存在于嘉兰（Gloriosa superba）中。秋水仙碱为淡黄色无味粉末或鳞片状，遇光变黑。秋水仙碱用于治疗急性痛风发作，以减轻疼痛和炎症。也可长期服用以预防或减少痛风发作的频率。长期服用秋水仙碱可预防发热和复发性多浆膜炎。秋水仙碱可有效预防该疾病中的淀粉样变性。秋水仙碱已被证明可有效治疗关节、皮肤和黏膜症状。秋水仙碱曾用于治疗硬皮病和结节病。人体暴露：主要风险和靶器官：秋水仙碱具有多器官毒性。主要毒性作用与其对细胞分裂的影响有关，导致腹泻、骨髓抑制和脱发。其他急性效应包括低血容量、休克和凝血功能障碍，这些都可能导致死亡。临床效应概述：中毒症状通常在摄入或肠外给药后2至12小时出现。症状发展分为三个阶段：第一阶段（第1至3天）胃肠道和循环系统期：严重的胃肠道刺激：恶心、呕吐、腹部绞痛、严重腹泻。脱水、低血容量、休克。可能发生心源性休克，并可能在最初72小时内导致死亡。低通气，急性呼吸窘迫综合征。第二阶段（第3至10天）骨髓再生障碍期：骨髓再生障碍伴粒细胞缺乏症。凝血功能障碍伴弥漫性出血。横纹肌溶解、多发性神经炎、肌病、急性肾功能衰竭和感染。第三阶段（10天后）恢复期：脱发。给药途径：口服：口服吸收是中毒最常见的原因。肠外给药：肠外给药后中毒罕见，但其毒性剂量似乎低于口服毒性剂量。一名70岁男性在5天内静脉注射10毫克秋水仙碱后发生致命性骨髓再生障碍。将秋水仙碱滴入阴茎尿道治疗尖锐湿疣后发生多系统反应中毒。吸收途径：口服：经胃肠道迅速吸收。口服后0.5至2小时达到血浆峰浓度。吸收半衰期为15分钟。吸收可能受pH值、胃内容物和肠道蠕动的影响。秋水仙碱不能完全吸收。存在显著的肝脏首过效应。秋水仙碱的分布容积大于其在体内的分布容积。在严重的肾脏或肝脏疾病中，其分布容积会减小。秋水仙碱会在肾脏、肝脏、脾脏、胃肠道壁和白细胞中蓄积，但似乎不会进入心脏、大脑和骨骼肌。秋水仙碱可通过胎盘，并且在母乳中也有发现。不同给药途径的生物半衰期：肠外给药：单次静脉注射2毫克后，平均血浆半衰期为20分钟。严重肾脏疾病会延长血浆半衰期（40分钟），而严重肝脏疾病会缩短血浆半衰期（9分钟）。口服：口服给药后，血浆浓度在0.5至2小时内达到峰值，随后在2小时内迅速下降。血浆半衰期为60分钟。秋水仙碱可在组织中停留长达10天。代谢：秋水仙碱在肝脏中代谢。秋水仙碱在肝脏中部分脱乙酰化。大量秋水仙碱及其代谢物经肠肝循环。这可以解释在摄入后5至6小时观察到的第二个血浆峰浓度。经暴露途径的消除：秋水仙碱以原形（10%至20%）或代谢物的形式排出体外。口服：尿液排泄量为给药剂量的16%至47%。50%至70%的秋水仙碱以原形排出，30%至50%以代谢物的形式排出。给药后24小时内，20%的剂量经尿液排出；48小时内，27.5%的剂量经尿液排出。服用后7至10天内，尿液中仍可检测到秋水仙碱。肝功能受损患者的尿液排泄量会增加。胆汁：10%至25%的秋水仙碱经胆汁排出。粪便：大量药物经粪便排出。乳汁：秋水仙碱可能经乳汁排出。静脉注射：粪便：静脉注射后48小时内，10%至56%的药物经粪便排出。乳汁：秋水仙碱可能经乳汁排出。作用机制：秋水仙碱与微管蛋白结合，阻止其聚合形成微管。这种结合是可逆的，秋水仙碱-微管蛋白复合物的半衰期为36小时。秋水仙碱会损害微管的多种细胞功能：有丝分裂过程中染色体对的分离（因为秋水仙碱会将有丝分裂阻滞在中期）、变形虫运动和吞噬作用。有丝分裂阻滞会导致腹泻、骨髓抑制和脱发。秋水仙碱可能对肌肉、周围神经系统和肝脏有直接毒性作用。然而，细胞功能抑制并不能解释严重过量服用秋水仙碱所致的所有器官衰竭。药效学：痛风炎症是由组织内的尿酸盐结晶引发的。结晶被中性粒细胞吞噬，但这会导致酶的释放和细胞的破坏。趋化因子被释放并吸引更多的中性粒细胞。秋水仙碱的作用机制可能是通过抑制吞噬作用、趋化因子的释放和中性粒细胞的反应。秋水仙碱还具有其他特性，例如解热、呼吸抑制、血管收缩和高血压。成人：口服：中毒的严重程度和死亡率与摄入剂量直接相关。静脉注射：曾报道一例70岁患者因静脉注射秋水仙碱而发生致命性骨髓再生障碍。静脉注射秋水仙碱毒性增强可能是由于其在肠外给药后生物利用度更高。致畸性：秋水仙碱禁用于妊娠期，因为已有唐氏综合征和自然流产的报道。应在受孕前三个月停用秋水仙碱。药物相互作用：曾报道一例秋水仙碱引起的急性环孢素肾毒性病例。秋水仙碱可能通过增强环孢素的吸收或降低其肝脏代谢，从而增加环孢素的血浆浓度，进而干扰环孢素的药代动力学。主要不良反应：胃肠道症状是长期服用秋水仙碱的常见并发症。静脉注射秋水仙碱后曾有死亡病例报道。胃肠道：呕吐、腹泻、腹部不适、麻痹性肠梗阻、伴有脂肪泻的吸收不良综合征。血液系统：骨髓抑制伴粒细胞缺乏症、急性髓单核细胞白血病、多发性骨髓瘤、血小板减少症。神经系统：周围神经炎、肌病和横纹肌溶解症。皮肤：过敏反应罕见，可出现荨麻疹；可见水肿。长期治疗后曾有脱发报道。生殖系统：曾有可逆性完全性无精子症的报道。代谢：秋水仙碱可导致维生素B12吸收的可逆性障碍。曾有迟发性皮肤卟啉症的报道。其他：曾有报道称，一名 58 岁女性服用秋水仙碱后出现高血糖，并发展为短暂性糖尿病。高脂血症：曾有短暂性高脂血症的报道。高尿酸血症：也曾有短暂性高尿酸血症的报道。高热：发热的发生可能与感染并发症有关，尤其是在再生障碍性贫血期。特殊风险：妊娠：曾有两例唐氏综合征患儿的报道。曾报道 36 名患有家族性地中海热的女性长期服用秋水仙碱 3 至 12 年，并记录了她们的产科病史。28 例妊娠中有 7 例以流产告终。13 名女性曾出现不孕。所有 16 名在孕期服用秋水仙碱的母亲所生的婴儿均健康。作者不建议在计划妊娠前停用秋水仙碱，但建议进行羊膜穿刺术以进行染色体核型分析并消除疑虑。哺乳：由于秋水仙碱会从母乳中排出，因此应避免哺乳。

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药物相互作用
秋水仙碱已被证实可引起维生素B12的可逆性吸收不良，这显然是通过改变回肠黏膜的功能实现的。
动物研究结果表明，秋水仙碱可能增强对拟交感神经药和中枢神经系统抑制剂的反应。
(1) 肾功能衰竭（无论是既往存在的还是由肾毒性药物引起的）都会增加服用秋水仙碱患者发生不良反应的风险；(2) 秋水仙碱类药物与大环内酯类抗生素（螺旋霉素除外）合用有发生危及生命的血细胞减少症的风险；(3) 与环孢素合用可加重秋水仙碱的神经肌肉不良反应；(4) 秋水仙碱与降脂药（他汀类药物和贝特类药物）合用可引起肌病； (5) 已发现多种机制与此相关：与细胞色素P450或P-糖蛋白竞争、叠加不良反应（尤其对肌肉）以及因肾脏排泄减少导致的秋水仙碱蓄积；(6) 痛风患者仅在对症治疗无效后方可使用秋水仙碱，对症治疗包括冰敷、对乙酰氨基酚，以及可能使用的布洛芬（一种不良反应已得到充分证实的非甾体抗炎药）；(7) 如果仍需使用秋水仙碱，则应使用最小有效剂量。需要密切的临床监测，以便及早发现不良反应的迹象，尤其是腹泻，腹泻是肾功能衰竭患者和老年患者最早出现的症状。秋水仙碱和3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A (HMG-CoA) 还原酶抑制剂均已知可引起肌病。这两种药物的肌毒性均与剂量相关；因此，症状的出现通常需要数月或数年。我们报告了一例慢性肾功能衰竭患者的病例，该患者服用辛伐他汀2年，在开始使用秋水仙碱治疗复发性痛风2周后出现急性肌无力。肌电图和肌酶升高提示其症状由肌病引起。停用两种药物后，患者的肌无力症状迅速缓解。秋水仙碱与辛伐他汀联合用药引起的急性肌病较为罕见。对于慢性肾功能衰竭患者，秋水仙碱与辛伐他汀合用可能加速肌病的发生，因为CYP3A4（细胞色素P450的一部分）在这两种药物的代谢中起着关键作用。对于肾功能不全的患者，若需在包含HMG-CoA还原酶抑制剂的药物治疗方案中添加秋水仙碱，则应选择在CYP3A4系统之外代谢的药物（例如，氟伐他汀和普伐他汀）。
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非人类毒性值
猫静脉注射LD50：0.25 mg/kg
小鼠口服LD50：5886 μg/kg
小鼠腹腔注射LD50：2 mg/kg
小鼠静脉注射LD50：4.13 mg/kg
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[1]. Colchicine induces apoptosis in cerebellar granule cells. Exp Cell Res. 1995 May;218(1):189-200.

[2]. Interactions of colchicine with tubulin. Pharmacol Ther. 1991;51(3):377-401.

[3]. Colchicine prevents NSAID-induced small intestinal injury by inhibiting activation of the NLRP3 inflammasome. Sci Rep. 2016 Sep 2;6:32587.

[4]. Inhibition of the Glycine Receptor alpha 3 Function by Colchicine. Front Pharmacol. 2020 Jul 30;11:1143.

治疗用途
痛风抑制剂
秋水仙碱也用于预防复发性痛风性关节炎。秋水仙碱对血浆尿酸浓度或尿液排泄无影响；因此，必须同时服用别嘌醇或促尿酸排泄剂（例如，丙磺舒、磺吡酮）以降低血清尿酸浓度。应在开始服用别嘌醇或促尿酸排泄剂之前给予预防剂量的秋水仙碱，因为血清尿酸浓度的突然变化可能诱发急性痛风发作。当血清尿酸浓度降至所需水平且3-6个月（一些临床医生建议1-12个月）未发生急性痛风发作后，可停用秋水仙碱，患者可单独使用降尿酸药物治疗。秋水仙碱常与丙磺舒联合使用，用于慢性痛风性关节炎患者的预防性治疗。然而，市售固定剂量制剂的疗效有限，因为其中秋水仙碱的含量超过了大多数患者的需求量。/美国产品标签上的用法说明/
秋水仙碱用于缓解急性痛风性关节炎发作。非甾体类抗炎药（NSAIDs）（例如，吲哚美辛、布洛芬、萘普生、舒林酸、吡罗昔康、酮洛芬）与常用剂量的秋水仙碱在短期缓解急性痛风性关节炎发作方面疗效相当，且耐受性更好。皮质类固醇也用于缓解急性痛风性关节炎发作。秋水仙碱被视为二线药物；对于对推荐疗法（例如非甾体抗炎药、皮质类固醇）无反应或无法耐受的急性痛风性关节炎患者，可使用秋水仙碱进行治疗。/美国产品标签中包含的用法/
本研究纳入96例年龄在15岁及以上的完全性或不完全性白塞氏病患者，这些患者的视力为20/40或更低，且在研究开始前16周内至少发生过2次眼部发作。其中47例患者每日接受环孢素（10 mg/kg）治疗，49例患者每日接受秋水仙碱（1 mg/kg）治疗，疗程为16周。环孢素组的眼部发作频率较秋水仙碱组显著降低（p < 0.001）。环孢素治疗后眼部发作的严重程度也低于秋水仙碱治疗后（p < 0.001）。秋水仙碱缓解了10例（20%）患者的口腔溃疡。秋水仙碱组中15%的患者皮肤病变得到缓解。秋水仙碱组中33%的患者临床症状有所改善，10例患者病情加重。研究前秋水仙碱组的OKT4/OKT8比值为1.44，治疗后为1.46。秋水仙碱的常见副作用为多毛症（2例）和肾功能障碍（2例）。2例秋水仙碱患者因肝功能障碍而停止治疗。
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药物警告
秋水仙碱注射液自20世纪50年代以来已在美国上市，用于治疗急性痛风发作。市售的秋水仙碱注射剂均未获得美国食品药品监督管理局（FDA）的批准。接受秋水仙碱注射的患者曾报告出现严重不良事件，其中一些甚至导致死亡。鉴于未经批准的秋水仙碱注射剂可能带来严重的健康风险，FDA于2008年2月8日宣布，将对所有试图生产、运输或交付秋水仙碱注射剂的公司（包括配药药房）采取执法行动（例如，查封、禁令或其他司法程序）。自2008年2月8日起，FDA将对所有试图生产或运输未获得国家药品代码（NDC）编号的秋水仙碱注射剂产品的公司采取执法行动。对于已获得NDC编号的秋水仙碱注射剂产品，FDA将对所有试图在2008年3月10日起生产此类产品的公司以及在2008年8月6日起运输此类产品的公司采取执法行动。
据报道，使用治疗剂量的秋水仙碱会导致骨髓抑制、白细胞减少症、粒细胞减少症、血小板减少症、全血细胞减少症和再生障碍性贫血。
据报道，长期使用治疗剂量的秋水仙碱会导致神经肌肉毒性和横纹肌溶解症。肾功能不全患者和老年患者，即使肾功能和肝功能正常，风险也会增加。
最常见的不良反应是腹泻（23%）。接受痛风急性发作治疗的患者中，3%出现咽喉疼痛。胃肠道不良反应是服用秋水仙碱患者最常见的副作用，通常在24小时内出现，接受治疗剂量的患者中发生率高达20%。典型症状包括痉挛、恶心、腹泻、腹痛和呕吐。如果这些不良反应严重，应将其视为剂量限制性因素，因为它们可能预示着更严重毒性的发生。
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药效学
秋水仙碱可缓解痛风和家族性地中海热的症状。它具有抗炎、抗纤维化和心血管保护作用。研究表明，秋水仙碱具有抗癌特性，例如抑制癌细胞迁移和血管生成。秋水仙碱的治疗窗较窄。

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炎症小体是一种大型多蛋白复合物，由核苷酸结合寡聚化结构域样受体 (NLR)、含有 caspase 募集结构域的凋亡相关斑点样蛋白以及前体 caspase-1 组成。炎症小体的激活导致前体 caspase-1 裂解为裂解的 caspase-1，进而促进前白细胞介素 (IL)-1β 加工成成熟的 IL-1β。我们研究了秋水仙碱对非甾体抗炎药 (NSAID) 诱导的小肠损伤以及 NLR 家族吡啶结构域蛋白 3 (NLRP3) 炎症小体激活的影响。秋水仙碱治疗可抑制吲哚美辛诱导的小肠损伤，1 mg/kg 组抑制率达 86%，3 mg/kg 组抑制率达 94%（以吲哚美辛给药后 24 小时的损伤指数为指标）。秋水仙碱抑制了裂解型 caspase-1 和成熟型 IL-1β 的蛋白表达，但并不影响 NLRP3 和 IL-1β 的 mRNA 表达。虽然重组 IL-1β (0.1 μg/kg) 治疗并未改变小肠损伤的严重程度，但补充相同剂量的重组 IL-1β 可消除秋水仙碱的预防作用。在 NLRP3(-/-) 小鼠中，吲哚美辛诱导的小肠损伤减少了 77%（以损伤指数为指标），而秋水仙碱治疗未能抑制 NLRP3(-/-) 小鼠的小肠损伤。这些结果表明，秋水仙碱通过抑制 NLRP3 炎症小体的激活来预防 NSAID 引起的小肠损伤。[3]

C22H25NO6

399.44

399.168

C, 66.15; H, 6.31; N, 3.51; O, 24.03

64-86-8

Colchicine-d6;1217651-73-4;Colchicine-d3;1217625-62-1

6167

White to light yellow solid powder

1.3±0.1 g/cm3

726.0±60.0 °C at 760 mmHg

150-160 °C (dec.)(lit.)

392.9±32.9 °C

0.0±2.4 mmHg at 25°C

1.585

0.92

83.09

1

6

5

29

740

1

O(C([H])([H])[H])C1C(=C(C([H])=C2C=1C1=C([H])C([H])=C(C(C([H])=C1[C@]([H])(C([H])([H])C2([H])[H])N([H])C(C([H])([H])[H])=O)=O)OC([H])([H])[H])OC([H])([H])[H])OC([H])([H])[H]

IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N

InChI=1S/C22H25NO6/c1-12(24)23-16-8-6-13-10-19(27-3)21(28-4)22(29-5)20(13)14-7-9-18(26-2)17(25)11-15(14)16/h7,9-11,16H,6,8H2,1-5H3,(H,23,24)/t16-/m0/s1

N-[(7S)-1,2,3,10-tetramethoxy-9-oxo-6,7-dihydro-5H-benzo[a]heptalen-7-yl]acetamide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 2.78 mg/mL (6.96 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。