rRNA synthesis, MIA PaCa-2 cells ( IC50 = 54 nM ); (rRNA synthesis, A375 cells ( IC50 = 113 nM ); rRNA synthesis, HCT-116 cells ( IC50 = 142 nM )
CX-5416 hydrochloride targets RNA polymerase I (Pol I), the enzyme responsible for transcribing ribosomal RNA (rRNA) genes. Pol I is a 14-subunit enzyme complex that localizes to the nucleolus and drives the synthesis of precursor rRNA, which is essential for ribosome biogenesis. In cancer cells, increased Pol I activity supports the elevated protein synthesis required for rapid cell proliferation. CX-5416 selectively inhibits Pol I-mediated rRNA synthesis without significantly affecting Pol II (mRNA synthesis) or Pol III (tRNA synthesis), making it a valuable tool for studying the role of ribosome biogenesis in cancer cell growth and survival.

CX-5461 能强效且口服抑制 Pol I 介导的 rRNA 合成（在 HCT-116 细胞中 IC50 为 142 nM，在 A375 细胞中为 113 nM，在 MIA PaCa-2 细胞中为 54 nM）。它对 Pol II 的影响可忽略不计或无影响（IC50 ≥25 μM）。CX-5461 对蛋白质和 DNA 的翻译有轻微的抑制作用。CX-5461 的平均 EC50 为 147 nM，对多种人类癌细胞系表现出广泛的抗增殖活性。然而，其对非转化人类细胞活力的影响极小，因为其 EC50 值约为 5000 nM。 CX-5461 对 HCT-116、A375 和 MIA PaCa-2 细胞系的 EC50 值分别为 167、58 和 74 nM。CX-5461 可诱导实体瘤癌细胞发生一种不依赖于 p53 的过程，导致自噬和衰老而非细胞凋亡[1]。来自荷瘤小鼠的 Eμ-Myc 淋巴瘤细胞对 CX-5461 表现出极高的敏感性，其 1 小时后 Pol I 转录的 IC50 值为 27.3 nM ± 8.1 nM，16 小时后细胞死亡的 IC50 值为 5.4 nM ± 2.1 nM。 CX-5461 通过 Eμ-Myc 淋巴瘤细胞的核仁应激反应激活 p53[2]。

---

CX-5416 盐酸盐作为 Pol I 抑制剂，在体外表现出强效活性。该化合物抑制癌细胞系中的 rRNA 合成，在 HCT-116 结直肠癌细胞中的 IC50 值为 142 nM，在 A375 黑色素瘤细胞中的 IC50 值为 113 nM，在 MIA PaCa-2 胰腺癌细胞中的 IC50 值为 54 nM。CX-5416 对 Pol II 介导的转录几乎没有影响（IC50 ≥25 μM），证实了其对 Pol I 的选择性。该化合物选择性抑制 rRNA 合成的能力使其成为研究核糖体生物合成在癌细胞增殖中作用的宝贵工具。详细的细胞活性数据可在原始文献中找到。

CX-5461 在小鼠异种移植模型中对人类实体瘤表现出抗肿瘤活性。CX-5461（50 mg/kg，口服）可显著抑制 MIA PaCa-2 细胞的生长，在 A375 细胞系中，第 31 天和第 32 天的肿瘤生长抑制率 (TGI) 分别为 69% 和 79%[1]。给药 1 小时后，CX-5461（50 mg/kg，口服）可抑制 C57BL/6 小鼠体内 Eμ-Myc 肿瘤细胞的 Pol I 转录，抑制率达 84%。此外，CX-5461 可使淋巴结中的肿瘤负荷迅速降低，并使脾脏大小缩小至正常范围[2]。

---

CX-5461 的体内抗肿瘤活性 [1]
在两种人源癌症的小鼠异种移植模型（胰腺癌 (MIA PaCa-2) 和黑色素瘤 (A375)）中评估了 CX-5461 的抗肿瘤活性。在这些异种移植模型中，CX-5461 以口服方式给药（50 mg/kg），每日一次或每 3 天一次。未治疗的动物以相同的给药方案口服赋形剂，而阳性对照吉西他滨则以 120 mg/kg 的剂量每 3 天腹腔注射一次。CX-5461 对 MIA PaCa-2 肿瘤生长抑制率 (TGI) 显示出显著的抑制作用，第 31 天的 TGI 为 69%（图 7A），与吉西他滨（TGI 为 63%）相当。同样，CX-5461 也表现出显著的 A375 TGI 效应（图 7B），第 32 天的 TGI 为 79%。非配对 t 检验显示，在两项研究中，载体对照组和 CX-5461 治疗组之间存在统计学意义上的显著差异。根据动物体重未发生显著变化判断，CX-5461 在所有测试方案下均具有良好的耐受性。这些数据表明，选择性 Pol I 转录抑制剂可以产生针对实体瘤的体内抗肿瘤反应，并具有良好的治疗窗口。

---

CX-5461 对 Pol I 转录的抑制选择性地诱导 p53 介导的淋巴瘤细胞死亡，同时不影响正常 B 细胞 [2]
接下来，我们研究了抑制 Pol I 转录从而激活 Rp-MDM2-p53 核仁应激通路是否可用于选择性地杀死体内恶性 B 细胞。将携带野生型p53（克隆4242）Eμ-Myc淋巴瘤移植到C57BL/6小鼠体内，并给予单次口服CX-5461（50 mg/kg）或载体对照治疗。浸润淋巴结的Eμ-Myc肿瘤细胞对CX-5461表现出显著的敏感性，治疗后1小时，细胞内Pol I转录抑制率达84%（图5A），脾脏中47S前体rRNA水平的RNA原位杂交（CISH）也证实了这一结果（图S5A和S5B）。此外，CX-5461 可迅速降低淋巴结中的肿瘤负荷（治疗后 24 小时，CX-5461 治疗组 GFP 标记的恶性细胞为 3.1% ± 0.20，载体治疗组为 34% ± 5.5，p < 0.01）（图 5B 和 S5C），并同时使脾脏大小缩小至正常范围（治疗后 24 小时，CX-5461 治疗组为 0.14 g ± 0.01，载体治疗组为 0.47 g ± 0.01，p < 0.001）（图 5C）。与体外研究结果一致，体内CX-5461治疗后恶性B细胞数量的减少先于p53和p21的快速激活以及药物给药后6小时内的细胞凋亡标志物的出现（图5D-5F和S5D）。

虽然CX-5461激活了p53并诱导了恶性细胞的凋亡，但它并未在野生型非肿瘤小鼠的正常脾细胞中引发这些反应（图6A和6B），也未影响脾脏大小或B细胞数量（图6C和6D）。正常脾细胞中未观察到细胞毒性效应并非由于Pol I转录未受到抑制，因为CISH结果显示，野生型非肿瘤小鼠脾脏中47S前体rRNA水平显著降低，与肿瘤小鼠中观察到的结果一致（图6E和S6A）。此外，经CX-5461处理的小鼠正常骨髓细胞的核仁完整性得以维持，这通过FBL和B23免疫荧光染色得以证实（图6F）。相比之下，将非肿瘤小鼠暴露于5Gy γ射线照射（该剂量为血液系统恶性肿瘤的临床适用剂量）后，导致p53水平显著升高、细胞凋亡、脾脏重量和B细胞数量减少（图6A-6D）。我们还检测了4至6周龄癌前Eμ-Myc小鼠脾脏和骨髓中B220+ B细胞的反应。这些细胞对CX-5461表现出极高的敏感性，其特征是p53激活和细胞凋亡标志物（CASP3裂解增加和亚G1期细胞）的增加，而同窝同龄小鼠的正常B细胞则未表现出p53激活或细胞死亡增加（图S6B-S6E）。这些数据共同表明，CX-5461在体内对Pol I转录的抑制作用具有高度选择性，仅针对癌前细胞和恶性细胞，这使得CX-5461区别于γ射线等基因毒性疗法。

为了进一步验证CX-5461在该模型中的治疗效果，我们对已建立p53野生型Eμ-Myc淋巴瘤（克隆107）移植模型的小鼠进行了CX-5461治疗，剂量为50 mg/kg，每3天一次，共三次。该治疗方案显著延长了荷瘤小鼠的生存期（图7A，p < 0.0001），并使白细胞计数恢复至正常范围（图7B）。事实上，在最后一次注射CX-5461后的第二天，外周血中几乎检测不到GFP标记的肿瘤细胞（图7C和7D）。值得注意的是，受体来源的非恶性正常B细胞群得到了保护和恢复，这再次表明恶性肿瘤被选择性清除（图7C，底部面板）。此外，更长时间的CX-5461给药也显示对正常B细胞的影响极小（数据未显示）。CX-5461对小鼠的健康没有明显的副作用，测得的体重与治疗开始时以及与载体对照组小鼠相比，偏差极小（图7E）。为了评估长期使用CX-5461延长生存期的能力，将移植了p53野生型Eμ-Myc肿瘤（克隆4242）的小鼠持续重复给予CX-5461，剂量为40 mg/kg，每3天一次（图S7A）。与三次重复给药方案相比，该治疗方案可重复地提高小鼠的平均生存期，小鼠在最终复发前经历了一个明显的疾病缓解期（第7/8天外周血中未检测到肿瘤细胞）（图S7B-S7E）。此外，还在一种小鼠急性髓系白血病（AML1/ETO9a+Nras）遗传模型中评估了CX-5461，该模型重现了携带AML1/ETO融合基因的人类白血病患者的许多临床特征（Zuber等人，2009）。与 Eμ-Myc 模型中的治疗类似，移植的 AML1/ETO9a+Nras 白血病细胞在体内对 CX-5461 表现出显著的敏感性，在单次给予 40 mg/kg 剂量的 CX-5461 治疗后 6 小时内即可发生 p53 依赖性细胞凋亡（图 S7F–S7I）。这种凋亡反应与 100 mg/kg 阿糖胞苷（一种常用于治疗 AML 患者的细胞毒性药物）相当。

---

CX-5416 盐酸盐的体内疗效数据在公开资料中尚未得到充分证实。基于其强大的体外活性和口服生物利用度，该化合物有望在由 Pol I 活性升高驱动的癌症模型中发挥潜在应用价值。CX-5416 盐酸盐具有口服生物利用度，因此适用于动物研究中的口服给药。该化合物已被证实是一种具有潜在抗癌活性的 Pol I 抑制剂。需要进行进一步的体内研究以全面表征该化合物的治疗潜力，包括其在肿瘤异种移植模型中的疗效、药代动力学特性和安全性。CX-5416盐酸盐的体外酶抑制试验测量其对Pol I介导的rRNA合成的抑制作用。该试验通常包括将癌细胞与不同浓度的CX-5416盐酸盐（纳摩尔至微摩尔级）孵育，并测量放射性标记的尿苷或其他核苷酸前体掺入rRNA的情况。或者，也可以通过对新生rRNA转录本进行qRT-PCR或测量rRNA加工中间体的表达来定量rRNA合成。IC50值通过将剂量反应曲线拟合到抑制数据来确定。该化合物溶解于DMSO中，并在试验培养基中稀释至所需的最终浓度，所有孔中的DMSO浓度保持恒定。每次试验均包含适当的阳性对照和阴性对照。

通过 qRT-PCR 检测 CX-5461 对转录的影响，该方法可定量两种短寿命 RNA 转录本（半衰期约为 20-30 分钟），一种由 Pol I 产生，另一种由 Pol II 产生。Pol I 转录本为 45S 前体 rRNA，而 Pol II 转录本为原癌基因 c-myc mRNA。已知细胞应激通常会影响 Pol I 和 Pol II 的转录。为了减少此类应激可能产生的影响，细胞仅暴露于测试药物 2 小时。CX-5461 有足够的时间影响这些转录本的合成，导致其减少 90% 以上。

---

无细胞 Pol I 转录测定 [1]
将 30 ng/μL 对应于 rDNA (−160/+379) 区域的 DNA 模板和 3 mg/mL 从 HeLa S3 细胞中分离的核提取物混合于含有 10 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0）、80 mmol/L KCl、0.8% 聚乙烯醇和 10 mg/mL α-鹅膏蕈碱的缓冲液中，并加入不同量的测试化合物，于室温孵育 20 分钟。加入 rNTP 混合物至终浓度为 1 mmol/L 以启动转录，并在 30°C 下孵育 1 小时。之后，加入 DNase I，并在 37°C 下继续孵育 2 小时。 DNase消化通过加入EDTA至终浓度为10 mmol/L终止，随后立即在75°C孵育10分钟，然后将样品转移至4°C。使用7900HT实时荧光定量PCR系统通过qRT-PCR分析所得转录本的水平。

---

染色质免疫沉淀[1]
细胞用2 μmol/L CX-5461处理1小时，并按照先前描述的方法进行染色质免疫沉淀（ChIP）实验。

---

电泳迁移率变动分析[1]
以prHu3质粒为模板，通过PCR扩增生成对应于rDNA启动子的³²P标记DNA探针。SL1复合物按照先前描述的方法从HeLa S3细胞核提取物中分离。在竞争性研究中，将 5 nmol/L 的 DNA 探针和 0.6 μg SL1 复合物的混合物在室温下于结合缓冲液中与 0.4 至 12.5 μmol/L 的 CX-5461 或 CX-5447 孵育 15 分钟。所得复合物使用 Novex TBE DNA 阻滞 PAGE 进行分离。凝胶干燥后曝光于 X 光胶片 [1]。

---

CX-5416 盐酸盐的体外细胞活性测定使用 HCT-116、A375 和 MIA PaCa-2 等癌细胞系进行。将细胞培养于合适的培养基中，并用不同浓度的 CX-5416 盐酸盐或溶剂对照（DMSO）处理特定时间点（通常为 48-72 小时）。使用 MTT、CellTiter-Glo 等方法或直接细胞计数评估细胞活力和增殖情况。通过测量放射性标记尿苷的掺入量或通过 rRNA 转录本的 qRT-PCR 检测来证实 rRNA 合成抑制。化合物对 Pol II 介导的转录的影响作为选择性对照进行评估。测定每种细胞系的 IC50 值，并通过分析不同化合物浓度下细胞活力和 rRNA 合成抑制情况来建立剂量反应关系。

次日，将细胞接种于96孔板后，用CX-5461剂量反应处理96小时。采用Alamar Blue和CyQUANT检测法测定细胞活力[1]。

---

用吖啶橙染色法检测和定量酸性囊泡细胞器[1]
将细胞接种于10 cm培养皿中，次日用指定剂量的CX-5461处理24或48小时。处理结束后，用1 μg/mL吖啶橙染色15分钟，胰蛋白酶消化，用冰冷的PBS洗涤两次，并在BD LSR II流式细胞仪上进行分析。分析方法如前所述。

---

次日，将细胞接种于96孔板后，用CX-5461剂量反应处理96小时。 Alamar Blue 和 CyQUANT 检测用于测定细胞活力。

---

公开资料中对 CX-5416 盐酸盐的体内动物实验描述尚不详尽。基于其体外活性和口服生物利用度，潜在的体内研究可能采用携带人源肿瘤异种移植瘤（例如 HCT-116、A375 或 MIA PaCa-2）的免疫缺陷小鼠。将肿瘤细胞皮下植入裸鼠或 SCID 小鼠的侧腹部。当肿瘤达到预定大小时，将动物随机分为 CX-5416 盐酸盐组和载体对照组。由于该化合物具有良好的口服生物利用度，因此将采用口服给药。每周使用游标卡尺测量两次肿瘤体积，并监测体重以评估耐受性。在研究终点，收集肿瘤组织，用于分析 rRNA 合成抑制、Pol I 靶标结合以及增殖和凋亡标志物。

小鼠：动物实验采用5至6周龄的雌性Balb/c无胸腺小鼠（NCr nu/nu fisol）。将100 μL细胞悬液皮下注射到睡眠状态（NCr nu/nu fisol）小鼠的右侧腹部。肿瘤体积的计算公式为(l×w²)/2，其中w代表肿瘤的宽度，l代表肿瘤的长度（单位为毫米）。肿瘤大小通过游标卡尺测量。将小鼠随机分为三组，分别接受载体（50 mM NaH₂PO₄，pH 4.5）、NSC 613327或CX-5461治疗，用于已形成的肿瘤（约110-120 mm³）。在研究的最后一天，肿瘤生长抑制率 (TGI) 使用以下公式计算：TGI (%)=[100 − (Vf^D− Vi^D)/ (Vf^V − Vi^V) × 100]，其中 Vi^V 代表载体处理组的初始平均肿瘤体积，Vf^V 代表载体处理组的最终平均肿瘤体积，Vi^D 代表药物处理组的初始平均肿瘤体积，Vf^D 代表药物处理组在研究当日的最终平均肿瘤体积。

---

小鼠异种移植模型中的体内疗效 [1]
将 5 × 10⁶ 个细胞悬浮于 100 μL 中，皮下注射到小鼠右侧腹部。采用游标卡尺测量肿瘤大小，并使用公式 (l × w²)/2 计算肿瘤体积，其中 w 为肿瘤宽度，l 为肿瘤长度（单位：mm）。将已建立的肿瘤（约 110–120 mm³）随机分为赋形剂组（50 mmol/L NaH₂PO₄，pH 4.5）、吉西他滨组或 CX-5461 治疗组。在研究的最后一天，根据以下公式计算肿瘤生长抑制率 (TGI)：TGI (%) = [100 − (VfD − ViD)/ (VfV − ViV) × 100]，其中 ViV 为赋形剂组的初始平均肿瘤体积，VfV 为赋形剂组的最终平均肿瘤体积，ViD 为药物治疗组的初始平均肿瘤体积，VfD 为药物治疗组的最终平均肿瘤体积。

---

MV 4;11异种移植模型 [1]
雌性免疫缺陷小鼠CrTac:Ncr-Foxn1nu（6-8周龄）饲养于无菌过滤笼中，置于洁净室条件下。将5 × 10⁶个MV4;11细胞皮下注射至每只小鼠右后侧腹部，建立异种移植模型。当肿瘤体积达到约150 mm³时，将小鼠随机分为载体组（50 mM NaH₂PO₄，pH 4.5）和CX-5461治疗组，每组10只小鼠。CX-5461每周腹腔注射一次，剂量为125 mg/kg，持续25天。每周测量两次肿瘤体积和小鼠体重。使用游标卡尺测量肿瘤的长和宽，并使用以下公式计算肿瘤体积：肿瘤体积 = (长 × 宽²)/2。在研究的最后一天，根据以下公式确定肿瘤生长抑制率 (TGI)：TGI (%) = [100 – (VfD – ViD)/(VfV – ViV) × 100]，其中 ViV 为载体对照组的初始平均肿瘤体积，VfV 为载体对照组的最终平均肿瘤体积，ViD 为药物治疗组的初始平均肿瘤体积，VfD 为药物治疗组的最终平均肿瘤体积。

---

CX-5416 盐酸盐的详细药代动力学 (PK) 参数在公开资料中没有广泛记载。该化合物被描述为口服生物利用度良好，表明其具有足够的口服吸收，可用于体内研究。 CX-5416 盐酸盐的分子量为 550.07，化学式为 C27H28ClN7O2S。该化合物可溶于二甲基亚砜 (DMSO)，可用于制剂配制。若要进行体内口服给药，则需使用合适的赋形剂配制该化合物，以确保其具有足够的溶解度和稳定性。该化合物应在干燥、密封的条件下于 -20°C 保存，避免受潮。目前的检索结果中未提供详细的药代动力学参数，包括半衰期、清除率、分布容积和最大浓度 (Cmax)，需要查阅相关文献。

CX-5416盐酸盐的全面毒理学数据在公开资料中并不丰富。作为一种研究级化合物，CX-5416盐酸盐仅供实验室研究用途，未获准用于人体治疗。处理该化合物时应遵循标准的实验室安全操作规程，包括使用适当的个人防护装备并在通风良好的区域工作。该化合物应按照制造商的建议储存，以保持其稳定性并防止降解。目前的检索结果无法提供全面的毒理学分析（例如，LD50、最大耐受剂量、器官特异性毒性），需要查阅原始文献或安全数据表。

CX-5416 盐酸盐是一种研究化合物，用于研究 Pol I 介导的 rRNA 合成在癌细胞增殖和核糖体生物合成中的作用。该化合物对 Pol I 具有强效抑制作用（在不同癌细胞系中 IC50 值为 54-142 nM），且对 Pol II 具有选择性（IC50 ≥25 μM），使其成为解析 rRNA 合成对癌细胞生长和存活贡献的宝贵工具。CX-5416 盐酸盐具有口服生物利用度，支持其在体内研究中的应用。该化合物目前尚未进入临床试验，也未获准用于治疗用途；它仍是一种用于临床前癌症研究的研究性化合物。CX-5416 盐酸盐可从多家化学品供应商处获得，用于研究用途。

[1]. Targeting RNA polymerase I with an oral small molecule CX-5461 inhibits ribosomal RNA synthesis and solid tumor growth. Cancer Res. 2011 Feb 15;71(4):1418-30.

[2]. Inhibition of RNA Polymerase I as a Therapeutic Strategy to Promote Cancer-Specific Activation of p53. Cancer Cell. 2012 Jul 10;22(1):51-65.

CX-5461 是一种有机杂四环化合物，其结构为 5-氧代-5H-[1,3]苯并噻唑并[3,2-a][1,8]萘啶-6-羧酸，其中 2 位被 4-甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基取代，6 位羧基被 [(5-甲基吡嗪-2-基)甲基]腈基取代。CX-5461 是一种核糖体 RNA (rRNA) 合成抑制剂，可特异性抑制多种癌细胞系中 RNA 聚合酶 I 驱动的 rRNA 转录。目前，CX-5461 正在进行针对晚期血液系统恶性肿瘤和携带 BRCA1/2 突变的三阴性乳腺癌的 I/II 期临床试验。 CX-5461 具有抗肿瘤活性，可诱导细胞凋亡并抑制 EC 2.7.7.6（RNA 聚合酶）。它是一种二氮杂芬类化合物，属于有机杂四环化合物，是吡嗪、仲酰胺和萘啶的衍生物。Pirnalutrex 是一种口服生物利用度高的 RNA 聚合酶 I (Pol I) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，Pirnalutrex 可选择性地结合并抑制 Pol I，阻断 Pol I 介导的核糖体 RNA (rRNA) 合成，诱导细胞凋亡并抑制肿瘤细胞生长。Pol I 是一种合成 rRNA 的多蛋白复合物，在癌细胞中表达上调，并在细胞增殖和存活中发挥关键作用。rRNA 转录的过度激活与癌细胞的失控增殖有关。核糖体RNA合成失调与癌细胞的失控增殖密切相关。RNA聚合酶I（Pol I）是一种多蛋白复合物，负责合成rRNA，并在癌症中广泛激活。因此，选择性Pol I抑制剂可能为阻断癌细胞增殖提供一种通用的治疗策略。通过结合药物化学研究和基于细胞及分子的串联筛选，我们设计了一种高效的小分子rRNA合成抑制剂CX-5461。CX-5461选择性抑制Pol I驱动的转录，而对Pol II驱动的转录、DNA复制和蛋白质翻译无显著影响。分子研究表明，CX-5461通过一条不依赖于p53的途径抑制rRNA合成的起始，并诱导实体瘤细胞系的衰老和自噬，但不会诱导细胞凋亡。 CX-5461具有良好的口服生物利用度，并在小鼠异种移植模型中显示出对人实体瘤的体内抗肿瘤活性。我们的研究结果表明，CX-5461是一种有前景的、高效的、选择性强的口服抗癌药物，可用于临床试验。[1] RNA聚合酶I介导的核糖体RNA基因（rDNA）转录增强是人类癌症的常见特征，但其是否是恶性表型的必要条件尚不清楚。我们发现小分子CX-5461可以作为rDNA转录的靶向治疗药物，在体内选择性地杀死B淋巴瘤细胞，同时维持野生型B细胞群的存活。这种治疗效果是由于核仁破坏和p53依赖性凋亡信号的激活所致。人类白血病和淋巴瘤细胞系也对rDNA转录抑制剂表现出高度敏感性，并且这种敏感性取决于p53的突变状态。这些结果表明，选择性抑制rDNA转录可作为一种治疗策略，特异性激活p53并治疗血液系统恶性肿瘤。[2] 核糖体RNA基因（rDNA）的RNA聚合酶I（Pol I）介导的转录局限于核仁，是细胞生长和增殖的限速步骤。CX-5461通过抑制Pol I，在体内选择性地诱导肿瘤细胞发生p53介导的凋亡。目前，CX-5461正在墨尔本的Peter McKenna医院进行针对晚期血液系统恶性肿瘤患者的临床试验。本文证明，CX-5461可以在不造成DNA损伤的情况下，诱导由ATM/ATR信号通路介导的p53非依赖性细胞周期检查点。此外，我们的数据表明，靶向ATM/ATR信号通路的药物与CX-5461联合使用，可显著提高体内p53缺陷型肿瘤的治疗效果，而这类肿瘤通常对单一药物无反应。机制上，我们发现CX-5461诱导了一种异常的染色质结构，其中转录活跃的松弛rDNA重复序列缺乏Pol I的转录，从而激活了核仁内的ATM信号通路。因此，我们提出CX-5461对Pol转录起始的急性抑制诱导了一种新的核仁应激反应，这可能成为提高治疗效果的靶点。(Oncotarget. 2016 Aug 2;7(31):49800-49818.)

C27H28CLN7O2S

550.074922561646

549.171372

C, 58.95; H, 5.13; Cl, 6.44; N, 17.82; O, 5.82; S, 5.83

2101314-20-7

1138549-36-6

131699687

Light yellow to yellow solid powder

120Ų

2

9

4

38

915

0

C(C1C(C2=CC=C(N3CCCN(C)CC3)N=C2N2C3=CC=CC=C3SC=12)=O)(=O)NCC1=NC=C(C)N=C1.Cl

LXNKBUVQVKWAHI-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C27H27N7O2S.2ClH/c1-17-14-29-18(15-28-17)16-30-26(36)23-24(35)19-8-9-22(33-11-5-10-32(2)12-13-33)31-25(19)34-20-6-3-4-7-21(20)37-27(23)34;;/h3-4,6-9,14-15H,5,10-13,16H2,1-2H3,(H,30,36);2*1H

2-(4-methyl-1,4-diazepan-1-yl)-N-[(5-methylpyrazin-2-yl)methyl]-5-oxo-[1,3]benzothiazolo[3,2-a][1,8]naphthyridine-6-carboxamide;dihydrochloride

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: 6.25 mg/mL (10.66 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。 (<60°C).

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。