| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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描述：多那非尼（索拉非尼D3；Bay 43-9006 D3；CM-4307；Zepsun）是索拉非尼的三氘代（末端CD3）形式，是一种新型、高效且口服生物利用度高的多激酶抑制剂，已于2021年在中国获批用于治疗不可切除的肝癌患者。它抑制Raf激酶和受体酪氨酸激酶，具有潜在的抗癌活性。多那非尼曾在中国进行晚期肝细胞癌（HCC）患者的临床试验。索拉非尼是一种多激酶抑制剂，对Raf-1、B-Raf和VEGFR-3的IC50值分别为6 nM、20 nM和22 nM。
| 靶点 |
BAY 43-9006 is a dual-action inhibitor targeting multiple kinases involved in tumor proliferation and angiogenesis. It inhibits Raf-1 kinase (IC50 6 nmol/L), wild-type BRAF (IC50 22 nmol/L), and V599E mutant BRAF (IC50 38 nmol/L). It also potently inhibits receptor tyrosine kinases including murine VEGFR-2 (flk-1, IC50 15 nmol/L), human VEGFR-2 (IC50 90 nmol/L), murine VEGFR-3 (IC50 20 nmol/L), murine PDGFR-β (IC50 57 nmol/L), Flt-3 (IC50 58 nmol/L), and c-KIT (IC50 68 nmol/L). FGFR-1 is inhibited with IC50 580 nmol/L. The compound does not significantly inhibit (>10,000 nmol/L) MEK-1, ERK-1, EGFR, HER-2, IGFR-1, c-met, PKB, PKA, cdk1/cyclinB, PKCα, PKCγ, or pim-1 [1].
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| 体外研究 (In Vitro) |
药物化合物经过修饰，引入了氢、碳和其他元素的稳定重同位素。这些同位素主要用作药物研发过程中的定量示踪剂。暮光化合物的一个潜在优势是其半衰期延长。暮光物质有可能延长化合物的药代动力学特征，即其未来的半衰期。这些药物的耐受性、安全性和有效性(2) 提高肠道生物利用度。氘代物质能够减少脐带和肠壁中不必要的代谢（首过代谢），从而增加到达目标作用部位的未代谢药物量。高生物利用度决定了药物在低剂量下具有更好的耐受性和活性。(3) 更好的代谢特性。衍生化化合物可以增强药物代谢，并减少活性或危险分子。(4) 提高安全性。氘代化合物无害，并且能够减轻或消除药物化合物的副作用。 (5) 保持顺序。氘代化合物与早期研究中的氢类似物具有相当的生物活性。
BAY 43-9006抑制肿瘤细胞系中RAF/MEK/ERK通路的激活。在MDA-MB-231乳腺癌细胞中，它抑制基础MEK 1/2磷酸化（IC50 40 nmol/L）和ERK 1/2磷酸化（IC50 90-100 nmol/L）。它抑制LOX黑色素瘤细胞（IC50 880 nmol/L）、BxPC-3胰腺癌细胞（IC50 1,200 nmol/L）和结肠癌细胞系（HCT 116、DLD-1、Colo-205，IC50 2,000-4,000 nmol/L）中的ERK磷酸化。未观察到对PKB通路的影响，表明其具有选择性。非小细胞肺癌细胞系NCI-H460和A549（KRAS突变）对ERK抑制剂不敏感[1]。 BAY 43-9006在细胞实验中能有效抑制受体酪氨酸激酶的自身磷酸化。它能抑制HUVEC细胞（IC50 ~100 nmol/L）和NIH 3T3-VEGFR-2细胞（IC50 ~30 nmol/L）中的VEGFR-2自身磷酸化。它能抑制HUVEC细胞中VEGF刺激的ERK磷酸化（IC50 60 nmol/L）。它能抑制人主动脉平滑肌细胞（HAoSMC）中PDGFR-β的自身磷酸化（IC50 80 nmol/L）以及PDGF刺激的HAoSMC增殖（IC50 280 nmol/L）。它还能抑制HEK-293细胞中mVEGFR-3的自身磷酸化（IC50 100 nmol/L）和Flt-3 (ITD)的自身磷酸化（IC50 20 nmol/L）[1]。 BAY 43-9006在体外抑制肿瘤细胞增殖。在MDA-MB-231细胞（10% FCS）中，其增殖抑制IC50为2600 nmol/L，高于ERK抑制IC50，这是由于血清蛋白结合所致（添加血清后ERK抑制IC50增加至630 nmol/L）[1]。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
BAY 43-9006在人肿瘤异种移植模型中展现出广谱口服抗肿瘤活性。每日口服7.5-60 mg/kg，连续9天，可产生剂量依赖性的肿瘤生长抑制，且无毒性（无明显体重减轻或死亡）。在HT-29、Colo-205、DLD-1结肠癌和A549非小细胞肺癌模型中，30-60 mg/kg剂量下观察到肿瘤完全停止生长。NCI-H460非小细胞肺癌模型显示肿瘤生长受到抑制，但未达到完全停止生长。MDA-MB-231乳腺癌模型在≤30 mg/kg剂量下显示肿瘤消退[1]。
免疫组织化学分析显示，BAY 43-9006在体内抑制MAPK通路和血管生成。在HT-29肿瘤中，治疗与ERK磷酸化抑制以及微血管密度和面积（CD31染色）的显著抑制（50-80%）相关。在Colo-205肿瘤中，ERK磷酸化未被抑制，但观察到新生血管生成显著抑制，表明抗血管生成作用有助于抑制肿瘤生长。在MDA-MB-231肿瘤中，同时观察到ERK磷酸化抑制和抗血管生成作用，并在第5天出现广泛的肿瘤细胞坏死[1]。 |
| 酶活实验 |
对于 RAF 激酶活性测定，将重组 Raf-1（氨基酸残基 305-648）、野生型 BRAF（氨基酸残基 409-765）或 V599E 突变型 BRAF（氨基酸残基 409-765）与 MEK-1 (1 μg) 在含有 BAY 43-9006（终浓度 1% DMSO）的测定缓冲液 [20 mmol/L Tris (pH 8.2)、100 mmol/L NaCl、5 mmol/L MgCl2、0.15% β-巯基乙醇] 中孵育。加入 25 μL 10 μmol/L γ-[³³P]ATP (400 Ci/mol) 启动反应，并在 32°C 下孵育 25 分钟。将磷酸化的 MEK-1 过滤到磷酸纤维素上收集，用 1% 磷酸洗涤，并通过 β 板计数器进行定量 [1]。
对于受体酪氨酸激酶测定，在 96 孔不透明板中进行时间分辨荧光能量转移 (TR-FRET) 测定。最终反应条件：1-10 μmol/L ATP，25 nmol/L poly GT-生物素，2 nmol/L 铕标记的磷酸酪氨酸抗体 (PY20)，10 nmol/L APC，1-7 nmol/L 胞质激酶结构域（溶于 1% DMSO），50 mmol/L HEPES (pH 7.5)，10 mmol/L MgCl2，0.1 mmol/L EDTA，0.015% Brij-35，0.1 mg/mL BSA 和 0.1% β-巯基乙醇。反应体系 (100 μL) 通过加入酶启动。反应开始后 1.5-2.0 小时，在 615 nm 和 665 nm 波长处读取吸光度值。信号值计算公式为 (665 nm/615 nm) × 10,000 [1]。 |
| 细胞实验 |
为了检测细胞内 MEK/ERK/PKB 的激活，将肿瘤细胞系（12 孔板中每孔 2×10⁵ 个细胞）培养过夜，洗涤后，用含 0.1% 无脂肪酸 BSA 的 DMEM 培养基中的 BAY 43-9006（0.01-10 μmol/L）处理 120 分钟。然后用含蛋白酶抑制剂的 1% Triton X-100 裂解细胞，进行 SDS-PAGE 电泳，转移至硝酸纤维素膜，并用磷酸化特异性抗体（pMEK1/2 Ser²¹⁷/²²¹、pERK1/2 Thr²⁰²/Tyr²⁰⁴、pPKB Ser⁴⁷³）和总蛋白抗体进行检测。使用 HRP 标记的二抗和 ECL 试剂进行印迹显色 [1]。
对于 VEGFR-2 自磷酸化，将 HUVEC 或 NIH 3T3-VEGFR-2 细胞进行血清饥饿处理，用 BAY 43-9006 预孵育（HUVEC 为 1 小时，NIH 3T3 为 30 分钟），然后用 VEGF₁₆₅（30 ng/mL，10 分钟）刺激。裂解物用抗 pVEGFR-2 (pTyr-1054/1059) 和抗 VEGFR-2 抗体进行免疫印迹分析 [1]。 对于 PDGFR-β 检测，人主动脉平滑肌细胞 (HAoSMC) 在无血清条件下过夜饥饿，用 BAY 43-9006 处理 (1 小时)，用 PDGF-BB (10 ng/mL, 7 分钟) 刺激，裂解，用抗 PDGFR-β 抗体进行免疫沉淀，并用抗 pPDGFR-β (Tyr⁸⁵⁷) 抗体进行免疫印迹分析。对于增殖实验，HAoSMCs经血清饥饿处理后，用化合物处理（1小时），再用PDGF-BB（10 ng/mL）刺激，孵育24小时，最后用BrdUrd ELISA法进行分析[1]。 对于mVEGFR-3和Flt-3的检测，HEK-293细胞（转染mVEGFR-3或表达Flt-3 ITD）用BAY 43-9006处理（Flt-3处理2小时，VEGFR-3处理30分钟），裂解后，用抗pFlt-3（Cell Signaling 3466）或抗p-mVEGFR-3（4G10）抗体进行免疫印迹分析[1]。 |
| 动物实验 |
将人肿瘤细胞（MDA-MB-231、Colo-205、HT-29、DLD-1、NCI-H460、A549）皮下植入6-8周龄的雌性无胸腺小鼠体内。待肿瘤体积达到75-150 mg（疗效研究）或100-250 mg（机制研究）后进行治疗。将BAY 43-9006溶解于Cremophor EL/乙醇（50:50）混合溶液中，配制成最高剂量的4倍（每3天新鲜配制一次原液，室温下用铝箔包裹保存）。每日用原液稀释配制最终给药溶液。较低剂量则用Cremophor EL/乙醇/水（12.5:12.5:75）混合溶液稀释1倍浓度的原液。每日口服给药一次，持续9天（疗效研究）或5天（机制研究）。肿瘤重量计算公式为长度 × (宽度)²/2。致死率 >20% 或净体重减轻 >20% 的治疗被认为具有毒性 [1]。
免疫组织化学染色中，在末次给药后 3 小时收集肿瘤组织，切片并染色。微血管检测中，使用 Dako 自动染色仪，用抗 CD31 抗体（山羊多克隆抗体，1:750）对石蜡切片进行染色。使用 ImagePro Plus 软件（每切片 4 个视野，每个视野 0.644 mm²）对微血管面积和密度进行定量分析。为了检测 pERK，使用 Envision Plus HRP 系统 [1] 和抗 pERK1/2 抗体 (1:100) 对切片进行染色。 将人肿瘤细胞（MDA-MB-231、Colo-205、HT-29、DLD-1、NCI-H460、A549）皮下植入 6-8 周龄的雌性无胸腺小鼠体内。在治疗前，肿瘤体积达到 75-150 mg（疗效研究）或 100-250 mg（机制研究）。BAY 43-9006 以最高剂量的 4 倍溶于 Cremophor EL/乙醇 (50:50) 混合溶液中（每 3 天新鲜配制一次原液，室温下用铝箔包裹保存）。最终给药溶液每日用清水稀释原液配制。低剂量溶液的制备方法是将1×溶液用Cremophor EL/乙醇/水（12.5:12.5:75）稀释。治疗方案为每日口服一次，持续9天（疗效研究）或5天（机制研究）。肿瘤重量计算公式为长度×（宽度）²/2。致死率>20%或净体重减轻>20%的治疗被认为具有毒性[1]。 免疫组织化学方面，在末次给药后3小时收集肿瘤组织，进行切片和染色。微血管检测方面，使用Dako自动染色仪，用抗CD31抗体（山羊多克隆抗体，1:750）对石蜡切片进行染色。使用ImagePro Plus软件对微血管面积和密度进行定量分析（每切片4个视野，每个视野0.644 mm²）。为了检测pERK，使用Envision Plus HRP系统[1]对切片进行抗pERK1/2抗体（1:100）染色。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在异种移植研究中，每日口服剂量高达 60 mg/kg 的 BAY 43-9006，连续 9 天，未观察到毒性反应，毒性指标包括与对照组动物相比的体重减轻增加或药物相关死亡率。死亡率超过 20% 或净体重减轻超过 20% 的治疗被认为具有毒性，而所有测试剂量均未达到这些标准 [1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
CM-4307 正在临床试验 NCT03602495（多那非尼治疗 131I 难治性分化型甲状腺癌）中进行研究。多那非尼是一种口服多激酶抑制剂，靶向 Raf 激酶和多种受体酪氨酸激酶 (RTK)，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，多那非尼与 Raf 激酶结合并阻断其活性，从而抑制 Raf 介导的信号转导通路。这可以抑制表达 Raf 的肿瘤细胞的增殖。此外，该药物可能抑制其他未知的 RTK，进一步抑制易感肿瘤细胞的增殖。Raf 是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在 Raf/丝裂原活化蛋白激酶激酶 (MEK)/细胞外信号调节激酶 (ERK) 信号通路中发挥关键作用。该通路失调通常会导致肿瘤细胞增殖和存活。
BAY 43-9006 (N-(3-三氟甲基-4-氯苯基)-N'-(4-(2-甲基氨基甲酰基吡啶-4-基)氧基苯基)脲) 是一种新型双芳基脲化合物，可作为双重作用抑制剂，靶向 RAF/MEK/ERK 通路（通过抑制 Raf-1、BRAF 和突变型 BRAF）和促血管生成受体酪氨酸激酶（VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β、Flt-3、c-KIT）。该化合物与BRAF共结晶，结果表明其远端吡啶环与ATP腺嘌呤结合口袋内的三个氨基酸相互作用，而脲基部分与酶形成氢键，从而促进BRAF的非活性构象[1]。 在异种移植模型中观察到的广谱抗肿瘤活性似乎源于两种互补机制：一是通过阻断MAPK通路直接抑制肿瘤细胞增殖（在敏感细胞系中），二是通过阻断VEGFR/PDGFR抑制肿瘤血管生成。每种机制的相对贡献因肿瘤类型而异。基于这些临床前数据，在本文发表时，BAY 43-9006正在进行肾细胞癌的III期临床试验和多种肿瘤类型的II期临床试验[1]。 |
| 分子式 |
C21H13D3CLF3N4O3
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|---|---|
| 分子量 |
467.843
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| 精确质量 |
467.105
|
| CAS号 |
1130115-44-4
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| 相关CAS号 |
Sorafenib;284461-73-0;Sorafenib-d4;1207560-07-3;Sorafenib-13C,d3;1210608-86-8
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| PubChem CID |
25191001
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
6.086
|
| tPSA |
92.35
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
5
|
| 重原子数目 |
32
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| 分子复杂度/Complexity |
646
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
[2H]C([2H])([2H])NC(=O)C1=NC=CC(=C1)OC2=CC=C(C=C2)NC(=O)NC3=CC(=C(C=C3)Cl)C(F)(F)F
|
| InChi Key |
MLDQJTXFUGDVEO-FIBGUPNXSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H16ClF3N4O3/c1-26-19(30)18-11-15(8-9-27-18)32-14-5-2-12(3-6-14)28-20(31)29-13-4-7-17(22)16(10-13)21(23,24)25/h2-11H,1H3,(H,26,30)(H2,28,29,31)/i1D3
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| 化学名 |
4-[4-[[4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl]carbamoylamino]phenoxy]-N-(trideuteriomethyl)pyridine-2-carboxamide
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~213.75 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.1375 mL | 10.6874 mL | 21.3748 mL | |
| 5 mM | 0.4275 mL | 2.1375 mL | 4.2750 mL | |
| 10 mM | 0.2137 mL | 1.0687 mL | 2.1375 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT05262959 | COMPLETED | Drug: Donafenib, PD-1 Procedure: TACE |
Donafenib | Shanghai Zhongshan Hospital | 2021-12-01 | Phase 2 |
| NCT05205629 | UNKNOWN STATUS | Drug: Donafenib combined with TACE | Donafenib Hepatocellular Carcinoma |
Shanghai Zhongshan Hospital | 2022-01-30 | |
| NCT04402723 | TERMINATED | Drug: Donafenib | Acute Myeloid Leukemia (AML) | Suzhou Zelgen Biopharmaceuticals Co.,Ltd | 2018-11-06 | Phase 1 |
| NCT05161143 | NOT YET RECRUITING | Drug: Donafenib | Hepatocellular Carcinoma | Peking Union Medical College Hospital | 2021-12 | Phase 2 |
| NCT02229071 | COMPLETED | Drug: Donafenib(200mg) Drug: Donafenib(300mg) |
HCC | Suzhou Zelgen Biopharmaceuticals Co.,Ltd | 2014-04 | Phase 1 Phase 2 |
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