CSF-1R (IC50 = 3.2 nM); KIT (IC50 = 20 nM); FLT3 (IC50 = 190 nM)
Colony-Stimulating Factor 1 Receptor (CSF1R); in vitro IC50 for inhibiting CSF1R phosphorylation in N13 cells: 18.6–22.5 nM; pharmacokinetic/pharmacodynamic (PK/PD)-derived EC50: 196 ng/mL (plasma) and 69 ng/g (brain tissue) [1]
- Colony-Stimulating Factor 1 Receptor (CSF1R); no specific IC50, Ki, or EC50 values provided; effective target engagement demonstrated by increased plasma CSF1 levels and decreased CD16+ monocytes in patients [2]

体外活性：Edicotinib（原名 JNJ-40346527）是一种新型选择性口服生物可利用的集落刺激因子 1 (CSF-1) 受体激酶抑制剂。它正在接受临床研究，尽管接受疾病缓解抗风湿药物 (DMARD) 治疗，但仍能抑制活动性类风湿关节炎 (RA) 患者的巨噬细胞存活、增殖和分化。 JNJ-40346527 及其活性代谢物的药代动力学暴露高于药理活性所需的预计浓度，JNJ-40346527 治疗中 CSF-1 水平增加和 CD16+ 单核细胞减少证明了有效的靶点参与和活性证明，但没有接受安慰剂治疗的患者。 37 名 (58.7%) 接受 JNJ-40346527 治疗的患者和 16 名 (50.0%) 接受安慰剂治疗的患者报告≥ 1 次不良事件 (AE)； 1 名 (1.6%) 接受 JNJ-40346527 治疗的患者和 3 名 (9.4%) 接受安慰剂治疗的患者报告≥ 1 例严重 AE。激酶测定：Edicotinib（原名 JNJ-40346527）是一种新型选择性口服生物可利用的集落刺激因子 1 (CSF-1) 受体激酶抑制剂。

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在经Edicotinib（JNJ-40346527）预处理后用CSF1刺激的N13细胞中，Edicotinib以浓度依赖性方式抑制CSF1R磷酸化及下游ERK1/2激活，在浓度>10 nM时可观察到显著抑制效果[1]
- 对P301S tau病小鼠脊髓组织的体外分析（PCR和蛋白质印迹）显示，Edicotinib处理可降低促炎细胞因子（IL1-β、TNFα）的mRNA表达，以及磷酸化tau（AT8表位）和聚集态tau（神经原纤维缠结、球状tau寡聚体）的蛋白水平[1]
- 在从ME7朊病毒模型小鼠中分离的原代小胶质细胞中，Edicotinib以剂量依赖性方式抑制增殖（通过BrdU掺入法检测），在30–100 mg/kg剂量下（从体内剂量效应推导）抑制效果最强[1]

JNJ-40346527 及其活性代谢物的药代动力学暴露高于药理活性所需的预计浓度，JNJ-40346527 治疗中 CSF-1 水平增加和 CD16+ 单核细胞减少证明了有效的靶点参与和活性证明，但没有接受安慰剂治疗的患者。 37 名 (58.7%) 接受 JNJ-40346527 治疗的患者和 16 名 (50.0%) 接受安慰剂治疗的患者报告≥ 1 次不良事件 (AE)； 1 名 (1.6%) 接受 JNJ-40346527 治疗的患者和 3 名 (9.4%) 接受安慰剂治疗的患者报告≥ 1 例严重 AE。 Edicotinib（口服强饲；3、10、30 和 100 mg/kg；5 天）显着抑制 ME7 小鼠中的小胶质细胞增殖。仅在最高测试剂量 100 mg/kg 时，它才会减少小胶质细胞（CD45+CD11b+ 细胞总数）的数量，而 JNJ-527 在每个测试剂量（CD45+CD11bhighLy6C 中/低细胞）下会消耗高达 50% 的巡逻血单核细胞在 100 mg/kg 剂量下仅存在炎症单核细胞（Ly6C 高细胞）比例减少的趋势

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ME7朊病毒模型小鼠：小鼠分为NBH（对照）、ME7+不同剂量Edicotinib（3、10、30、100 mg/kg）组（每组n=6–14），Edicotinib给药5天，期间每日注射4次BrdU以标记增殖细胞。Edicotinib在所有测试剂量下均显著减少小胶质细胞增殖（Iba-1+ BrdU+细胞/mm²），30和100 mg/kg剂量下效果更显著；同时减少海马区小胶质细胞数量（PU.1+细胞）、降低IL1-β表达，并改善小鼠过度活动（运动活性）和运动功能障碍（翻正实验、水平横杆实验）[1]
- P301S tau病模型小鼠：给予Edicotinib 30 mg/kg，连续给药8周。Edicotinib可减少脊髓中CD11b+ CD45+小胶质细胞数量，降低IL1-β/TNFα的mRNA和蛋白水平，抑制JNK/p38的胞质激活，减少tau磷酸化（AT8）和聚集，保护L4–L5脊髓节段的运动神经元（尼氏染色），并改善小鼠旋转棒测试中的运动功能[1]
- 活动性类风湿关节炎（RA）患者（IIA期临床研究）：患者口服Edicotinib 100 mg，每日两次，持续12周。DAS28-CRP（基于CRP的28关节疾病活动评分）平均改善值为1.15（安慰剂组为1.42，p=0.30，无统计学显著性）；但通过血浆CSF1水平升高和CD16+单核细胞减少（vs安慰剂）证实了靶点的有效结合[2]

CSF1R磷酸化的体外评估[1]
N13小鼠小胶质细胞系（Righi等人，1991）在添加了10%胎牛血清和50U/ml青霉素/链霉素的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）中培养。细胞在T75培养瓶中保持在37°C、5%CO2加湿的环境中。将细胞以2×105个细胞/cm2的密度铺在6孔板中，并培养过夜以使其粘附。在刺激前将细胞在无血清培养基中保持4小时，然后在没有或有0.1、1、10、100或1000 nM的Edicotinib (JNJ-527；JNJ-40346527)的情况下孵育30分钟。将重组CSF1（100 ng/ml，R&D Systems）加入相应的孔中5分钟，之后立即在RIPA缓冲液中裂解细胞，补充蛋白酶和磷酸酶抑制剂鸡尾酒。根据制造商的说明，使用Microcon-10 kDa离心过滤器浓缩蛋白质裂解物，并使用Pierce BCA蛋白质检测试剂盒测定蛋白质浓度。为了估算IC50，使用GraphPad棱镜在非线性回归曲线中模拟CSF1R和ERK1/2磷酸化的值。

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发现了新型选择性口服生物可利用的集落刺激因子 1 (CSF-1) 受体激酶抑制剂艾迪克替尼（以前称为 JNJ-40346527）。

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N13细胞中CSF1R磷酸化及ERK1/2激活检测实验：接种N13细胞，用系列浓度的Edicotinib预处理一定时间后，加入CSF1激活CSF1R信号通路。用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的缓冲液裂解细胞，提取总蛋白并定量。将等量蛋白通过SDS-PAGE分离，转移至膜上，用抗磷酸化CSF1R、总CSF1R、磷酸化ERK1/2和总ERK1/2的一抗孵育，显影并定量免疫反应条带，评估抑制效果[1]
- TSPO放射自显影实验：将经Edicotinib处理的ME7小鼠脑组织切片，与TSPO配体[3H]-PK11195孵育以检测小胶质细胞激活。通过放射自显影测量放射性强度，定量信号值以评估Edicotinib对神经炎症的影响[1]

细胞系：N13 小胶质细胞
浓度：0.1 nM、1 nM、10 nM、100 nM、1000 nM
孵育时间：24 小时
结果：阻止 N13 小胶质细胞中的 CSF1R 和 ERK1/2 磷酸化

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小胶质细胞增殖检测（Iba-1/BrdU双重免疫组化）：将经Edicotinib和BrdU处理的ME7小鼠脑组织切片脱蜡、复水并进行抗原修复，加入抗Iba-1（小胶质细胞标志物）和抗BrdU（增殖标志物）的一抗，再用种属匹配的二抗（Iba-1用DAB显色，BrdU用碱性磷酸酶显色）孵育。计数每mm²的增殖小胶质细胞（Iba-1+ BrdU+细胞）以量化抑制效果[1]
- 小胶质细胞流式定量：将P301S小鼠脊髓组织解离为单细胞悬液，用荧光素偶联的抗CD11b和CD45（小胶质细胞标志物）抗体染色，通过流式细胞术分析，定量CD11b+ CD45+细胞数量以评估Edicotinib介导的小胶质细胞减少效果[1]
- 细胞因子mRNA的PCR检测：采用酚-氯仿法从经Edicotinib处理的P301S小鼠脊髓组织中提取总RNA，逆转录合成互补DNA（cDNA），用针对IL1-β、TNFα（促炎细胞因子）和内参基因的特异性引物进行实时定量PCR，计算相对mRNA表达水平以评估细胞因子减少情况[1]
- tau磷酸化及激酶激活的蛋白质印迹检测：裂解P301S小鼠脊髓组织，提取蛋白并进行SDS-PAGE，膜上孵育抗磷酸化tau（AT8表位）、抗磷酸化JNK、抗磷酸化p38和内参抗体，定量条带强度以评估Edicotinib对tau病理和激酶激活的影响[1]

C57BL/6 J (Harlan) 小鼠
\n3、10、30 和 100 mg/kg；5 天
\n灌胃

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\n药物治疗 [1]
\n短期治疗中，将Edicotinib (JNJ-527；JNJ-40346527)溶解于 0.9% Methocel™ 中，并于每日（早晨）以 3、10、30 和 100 mg/kg 的剂量灌胃给药，连续 5 天。长期治疗（4-8 周）中，将Edicotinib (JNJ-527；JNJ-40346527)添加到小鼠饲料中，如 Olmos-Alonso 等人先前所述。 （2016），最终剂量为 30 mg/kg，平均每只小鼠每日摄入 5 g 食物。饮食成分（脂肪、蛋白质等含量）相同，仅添加了该化合物。所有实验均监测小鼠体重和食物消耗量，治疗组和未治疗组之间未发现差异。

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\nTSPO 放射自显影[1]
\n小鼠用过量戊巴比妥钠进行安乐死，并经心脏灌注 0.9% 生理盐水。取出脑组织，在 -40°C 的异戊烷中冷冻，并储存于 -80°C。将 NBH (n = 7)、ME7 (n = 8) 和 ME7 + Edicotinib (JNJ-527；JNJ-40346527) (n = 8) 小鼠脑进行 20 μm 的冠状冰冻切片，并直接安装到载玻片上。将载玻片在室温下于含有 1 nM [3H]PK11195（比活度 82.7 Ci/mmol）的 100 mM Tris-HCl 溶液中孵育 30 分钟，然后用 100 mM Tris-HCl 溶液洗涤两次，每次 6 分钟，再用去离子水冲洗，最后风干。

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\n药代动力学：样品制备和生物分析方法[1]
\n取血浆和脑匀浆（用磷酸盐缓冲液 1:5 稀释）等分试样（10 µl），采用基于蛋白质沉淀和 HPLC-MS/MS 分析的方法测定Edicotinib (JNJ-527；JNJ-40346527)的浓度。向每个样品中加入内标（20 µl）和乙腈（150 µl）。将样品充分混匀（机械振荡10分钟），然后离心（5000g，4℃，10分钟）。取20 µl上清液加入LCMS板，并加入200 µl 0.1%甲酸甲醇/水溶液（50:50）。采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）分析Edicotinib (JNJ-527；JNJ-40346527)浓度，色谱柱为Zorbaz Eclipse Phenyl Hexyl，3.5 μm（50 × 2.1 mm内径），电喷雾电离源为正离子模式。流动相为0.1%甲酸甲醇/水溶液（85:15），等度洗脱，流速为0.5 ml/min。血浆的定量下限为 5–10 ng/ml，脑组织的定量下限为 10 ng/g。该检测方法在血浆中线性范围为 4000 ng/ml，在脑组织中线性范围为 4000 ng/g。

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\n在这项随机、双盲、安慰剂对照、平行组研究中，成年患者按 2:1 的比例随机分组，分别接受口服 100 mg 依地替尼（JNJ-527；JNJ-40346527）或安慰剂，每日两次，持续至第 12 周。类风湿关节炎（RA）患者尽管接受了 ≥ 6 个月的 DMARD 治疗，但仍存在疾病活动性（≥ 6 个肿胀关节/≥ 6 个压痛关节，C 反应蛋白 (CRP) ≥ 0.8 mg/dl）。主要终点是第 12 周时 28 个关节疾病活动度评分（DAS28-CRP）较基线的变化。还进行了药代动力学/药效学分析，并评估了安全性直至第 16 周。[2]ME7 朊病毒模型小鼠实验：将小鼠分为以下几组：NBH（对照组）、NBH + 依地替尼 30 mg/kg 组、ME7（疾病对照组）、ME7 + 依地替尼（3、10、30、100 mg/kg；每组 n=6–14）。依地替尼给药 5 天，治疗期间每天注射 4 次 BrdU 以标记增殖细胞。治疗结束后，收集血浆和脑组织以测量依地替尼浓度；采用免疫组织化学方法分析脑组织切片，以量化小胶质细胞增殖[1]
\n- P301S tau蛋白病模型小鼠实验：使用P301S转基因小鼠和野生型小鼠；P301S小鼠接受Edicotinib 30 mg/kg治疗8周。治疗期间，使用转棒试验评估运动功能。治疗结束后，收集脊髓组织进行流式细胞术（小胶质细胞计数）、PCR（细胞因子mRNA）、Western blot（tau蛋白病理）和尼氏染色（运动神经元计数）[1]

研究人员分析了脑组织和血浆中该化合物的浓度，发现 JNJ-527 的暴露量呈线性剂量依赖性增加，平均脑血浆浓度比为 0.65（图 1E）。随后，我们评估了 JNJ-527 对 CSF1R 阻断作用对小胶质细胞增殖的影响。研究人员发现，JNJ-527 从 3 mg/kg 剂量开始显著抑制 ME7 小鼠海马中小胶质细胞（Iba1+ BrdU+ 细胞）的增殖，并在 30 mg/kg 剂量下达到最大抑制率 80%（图 1F 和 G）。基于这些数据，我们构建了抑制小胶质细胞增殖的 S 形 Emax 药代动力学/药效学模型，并确定 JNJ-527 在血浆和脑组织中的 EC50 值分别为 196 ng/ml 和 69 ng/g（图 1H）。总体而言，研究人员证实，在ME7朊病毒小鼠中，以30 mg/kg剂量给药的JNJ-527可显著抑制小胶质细胞增殖，且不改变健康脑组织中小胶质细胞的动态变化（补充图2C和D）。因此，研究人员在后续所有实验中均采用30 mg/kg的剂量。[1] 在ME7小鼠中，血浆和脑组织中Edicotinib的浓度与给药剂量（3、10、30、100 mg/kg）呈线性相关，组织/血浆（T/P）比值为0.5-1。[1] 在类风湿关节炎（RA）患者（IIA期研究）中，Edicotinib及其活性代谢物的药代动力学暴露量被证实高于预期药理活性所需的浓度。[2]

在类风湿关节炎（RA）患者中（IIA期研究）：接受Edicotinib治疗的患者（n=63）中有58.7%报告了≥1次不良事件（AE），而安慰剂组患者（n=32）的这一比例为50.0%；接受Edicotinib治疗的患者中有1.6%报告了≥1次严重不良事件（SAE），而安慰剂组为9.4%。未报告血液学参数、肝功能或肾功能方面的显著变化（未明确提供数据）[2]
- 在ME7和P301S小鼠模型中，在测试剂量（3-100 mg/kg）下未观察到明显的毒性（例如，体重减轻、器官损伤）[1]

[1]. CSF1R inhibitor JNJ-40346527 attenuates microglial proliferation and neurodegeneration in P301S mice.Brain. 2019 Oct 1;142(10):3243-3264.

[2]. Results from a Phase IIA Parallel Group Study of JNJ-40346527, an Oral CSF-1R Inhibitor, in Patients with Active Rheumatoid Arthritis despite Disease-modifying Antirheumatic Drug Therapy.J Rheumatol. 2015 Oct;42(10):1752-60.

JNJ-40346527 已用于研究治疗健康和类风湿性关节炎的临床试验。
Edicotinib 是一种小分子口服集落刺激因子-1 受体 (CSF1R; FMS) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。Edicotinib 可阻断 FMS 与其配体 CSF1 之间的受体-配体相互作用，从而阻止 FMS 的自身磷酸化。因此，未磷酸化的 FMS 无法激活 FMS 介导的信号通路，从而可能抑制 FMS 过表达肿瘤细胞的增殖。FMS 是一种酪氨酸激酶受体，在某些肿瘤细胞类型中过表达，并在巨噬细胞的分化、募集和激活以及细胞增殖的调控中发挥重要作用。

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神经炎症和小胶质细胞活化是阿尔茨海默病病理学中的重要过程。近期全基因组关联研究已发现多个免疫相关基因与阿尔茨海默病密切相关，实验数据也证实小胶质细胞增殖是该疾病神经病理学的重要组成部分。本研究在P301S小鼠tau蛋白病模型中测试了选择性CSF1R抑制剂JNJ-40346527（JNJ-527）的疗效。我们首先在ME7朊病毒模型中证实了JNJ-527对小胶质细胞的抗增殖作用及其对炎症谱的影响，并提供了该化合物潜在的中枢神经系统生物标志物，可用于临床研究，包括通过TSPO放射自显影和脑脊液蛋白质组学进行药代动力学/药效学和疗效评估。随后，我们首次证明，抑制小胶质细胞增殖和改变小胶质细胞表型可减轻tau蛋白诱导的神经退行性变，并改善P301S小鼠的功能。总体而言，这项研究有力地支持了抑制 CSF1R 作为治疗阿尔茨海默病和其他 tau 蛋白介导的神经退行性疾病的潜在靶点。[1]

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目的：评估 JNJ-40346527 的疗效和安全性。JNJ-40346527 是一种选择性集落刺激因子-1 (CSF-1) 受体激酶抑制剂，可抑制活动性类风湿关节炎 (RA) 患者（尽管接受了改善病情抗风湿药 (DMARD) 治疗）的巨噬细胞存活、增殖和分化。方法：在这项随机、双盲、安慰剂对照、平行组研究中，成年患者按 2:1 的比例随机分组，分别接受口服 JNJ-40346527 100 mg 或安慰剂，每日两次，持续 12 周。RA 患者的疾病活动度为 [≥ 6 个肿胀关节/≥ 6 个压痛关节，C 反应蛋白 (CRP) ≥ 100 mg]。尽管接受了≥6个月的DMARD治疗，但CRP水平仍维持在0.8 mg/dl。主要终点为第12周时28关节疾病活动度评分（DAS28-CRP）较基线的变化。同时进行了药代动力学/药效学分析，并评估了安全性直至第16周。结果：共95例患者接受了治疗（63例接受JNJ-40346527治疗，32例接受安慰剂治疗）；截至第12周，8例患者停止治疗（6例接受JNJ-40346527治疗，2例接受安慰剂治疗）。从基线到第12周，JNJ-40346527组的DAS28-CRP平均改善值为1.15，安慰剂组为1.42（p = 0.30）；因此，主要终点未观察到统计学意义上的显著差异。 JNJ-40346527及其活性代谢物的药代动力学暴露量高于预期药理活性所需的浓度，且在接受JNJ-40346527治疗的患者中，CSF-1水平升高和CD16+单核细胞减少，证实了药物有效靶向作用和活性，而安慰剂组患者则未观察到此现象。37例（58.7%）接受JNJ-40346527治疗的患者和16例（50.0%）接受安慰剂治疗的患者报告了≥1例不良事件（AE）；1例（1.6%）接受JNJ-40346527治疗的患者和3例（9.4%）接受安慰剂治疗的患者报告了≥1例严重不良事件（SAE）。结论：尽管药物暴露量充足且外周靶点有效结合，但在DMARD难治性活动性类风湿关节炎（RA）患者中未观察到JNJ-40346527的疗效。 ClinicalTrials.gov 标识符：NCT01597739。EudraCT 编号：2011-004529-28。[2]

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Edicotinib (JNJ-40346527) 是一种选择性 CSF1R 抑制剂，其作用机制是通过抑制小胶质细胞的存活、增殖和分化，并减少促炎细胞因子的产生。[1][2]
- 在临床前研究中，Edicotinib 可减轻 tau 蛋白诱导的神经退行性变，并改善 P301S tau 蛋白病小鼠的功能预后，这支持了其治疗阿尔茨海默病和其他 tau 蛋白介导的神经退行性疾病的潜力。[1]
- 在一项针对活动性类风湿关节炎（尽管接受了 DMARD 治疗）的 IIA 期研究中，Edicotinib 显示出有效的外周靶点结合，但在改善 DAS28-CRP（主要终点）方面没有统计学意义上的显著疗效。 ClinicalTrials.gov 注册号：NCT01597739；EudraCT 编号：2011-004529-28 [2]
- 在 ME7 朊病毒模型小鼠中，Edicotinib 可减少小胶质细胞增殖并恢复行为改变（运动活性、运动障碍），并鉴定出潜在的中枢神经系统生物标志物（TSPO 放射自显影、脑脊液蛋白质组学），可用于临床研究 [1]

C27H35N5O2

461.61

461.279

C, 70.25; H, 7.64; N, 15.17; O, 6.93

1142363-52-7

1559069-92-9 (HCl);1142363-52-7;

25230468

White to off-white solid powder

1.2±0.1 g/cm3

1.591

5.16

104

2

5

4

34

838

0

O1C(C)(C)CC(C2C=CC(=C(C3=CCC(C)(C)CC3)N=2)NC(C2=NC=C(C#N)N2)=O)CC1(C)C

BNVPFDRNGHMRJS-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C27H35N5O2/c1-25(2)11-9-17(10-12-25)22-21(32-24(33)23-29-16-19(15-28)30-23)8-7-20(31-22)18-13-26(3,4)34-27(5,6)14-18/h7-9,16,18H,10-14H2,1-6H3,(H,29,30)(H,32,33)

5-cyano-N-[2-(4,4-dimethylcyclohexen-1-yl)-6-(2,2,6,6-tetramethyloxan-4-yl)pyridin-3-yl]-1H-imidazole-2-carboxamide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 16.7 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 16.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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配方 3 中的溶解度: 10 mg/mL (21.66 mM) in 17% Polyethylene glycol 12-hydroxystearate in Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。