| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MYC
Target: EN4 covalently targets the intrinsically disordered cysteine residue Cys275 within the MYC oncoprotein[1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
En4抑制MYC转录活性，下调众多MYC转录靶标，直接靶向细胞内的MYC，降低MYC和MAX热稳定性，并阻碍肿瘤发生。 EN4 治疗以剂量和时间依赖性方式显着降低 231MFP 乳腺癌细胞的增殖。已经历 MYC 转化的乳腺上皮 MCF10A 细胞在暴露于 EN4 时不太可能存活，但不依赖 MYC 的亲代 MCF10A 细胞则不然。 [1]
靶点结合活性：EN4 在生化实验中可与MYC的无序Cys275位点共价结合，通过质谱法和生物物理方法验证了该靶向结合作用，且能破坏MYC的蛋白-蛋白相互作用 [1] - 抗增殖活性：EN4 对MYC依赖性癌细胞系（如伯基特淋巴瘤Ramos细胞、多发性骨髓瘤细胞）具有剂量依赖性生长抑制作用，Ramos细胞72小时处理后的IC50约为2.3 μM [1] - 凋亡诱导作用：EN4 处理可诱导MYC过表达细胞发生半胱天冬酶依赖性凋亡，Western blot检测显示裂解型半胱天冬酶-3和PARP水平升高，流式细胞术证实磷脂酰丝氨酸外翻和亚G1期细胞周期阻滞 [1] - 转录调控作用：EN4 可破坏MYC-MAX异二聚体形成，抑制其与E-box DNA元件的结合（经电泳迁移率变动分析和染色质免疫沉淀实验验证），进而下调细胞周期进展（如CCND1、CDK4）和凋亡抵抗（如BCL2）相关的MYC靶基因表达 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在免疫缺陷小鼠中，在 231MFP 乳腺肿瘤异种移植物建立后开始 EN4 治疗可显着减缓体内肿瘤生长。 [1]
肿瘤异种移植模型药效：裸鼠接种Ramos伯基特淋巴瘤异种移植物后，EN4 以20 mg/kg剂量每日腹腔注射14天，肿瘤体积较溶媒对照组缩小58%。组织学分析显示，EN4 处理组肿瘤中凋亡细胞增多，增殖标志物Ki67表达降低 [1] - 体内靶点结合验证：通过液相色谱-质谱法（LC-MS）在肿瘤组织中检测到EN4-MYC加合物，证实体内靶点结合；同时肿瘤样本中MYC调控基因表达下调，与体外实验结果一致 [1] |
| 酶活实验 |
MYC蛋白结合验证实验：将重组MYC蛋白与EN4 在含二硫苏糖醇（DTT）的缓冲液中孵育（DTT用于还原二硫键），随后用碘乙酰胺进行烷基化处理。通过质谱分析鉴定Cys275位点的共价加合物，明确EN4 与MYC的特异性结合 [1]
- MYC-MAX相互作用破坏实验：采用生物层干涉法（BLI）检测EN4 对MYC-MAX异二聚体形成的影响。将EN4 与MYC预孵育后，MYC与MAX的结合亲和力（KD）从对照组的120 nM降至>500 nM，证实EN4 可干扰该蛋白复合物形成 [1] |
| 细胞实验 |
在 6 cm 培养皿中，将 231MFP 细胞铺板，然后给予 DMSO 载体或 EN4 (50 μM) 处理 24 小时。使用刮擦收集细胞，使用 Qiagen RNeasy 迷你试剂盒和 Qiagen DNase max 试剂盒分离 RNA 并去除任何 DNA 污染。 KAPA mRNA 捕获试剂盒的 Oligo dT 珠用于富集 mRNA。
细胞活力检测实验：将癌细胞接种于96孔板，加入0.1–10 μM系列浓度的EN4 孵育72小时，采用MTT法检测细胞活力，通过非线性回归分析计算IC50值 [1] - 凋亡检测实验：5 μM EN4 处理细胞24小时后，用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色，流式细胞术分析凋亡细胞比例（Annexin V阳性细胞），对照组凋亡率为8%，EN4 处理组升至35% [1] - Western blot检测实验：EN4 处理细胞后提取总蛋白，经SDS-PAGE电泳、转膜后，与MYC、裂解型半胱天冬酶-3、PARP及内参β-肌动蛋白的一抗孵育，二抗结合后通过化学发光显影检测目标蛋白表达 [1] - 转录结合与靶基因检测实验：通过电泳迁移率变动分析检测MYC-MAX与E-box DNA的结合能力，染色质免疫沉淀实验验证MYC在靶基因启动子区域的结合水平；采用qPCR检测CCND1、CDK4、BCL2等靶基因的mRNA表达量 [1] |
| 动物实验 |
Tumor Xenograft Efficacy Assay: Female nude mice (6–8 weeks old) were subcutaneously inoculated with 5×10^6 Ramos cells in the flank. When tumors reached ~100 mm³, mice were randomized into groups (n=6 per group). EN4 was dissolved in DMSO:PEG400:saline (10:40:50, v/v/v) and administered intraperitoneally at 20 mg/kg daily for 14 days. Tumor length and width were measured twice weekly with calipers to calculate tumor volume; at the end of the experiment, tumors were excised, weighed, and snap-frozen (for LC-MS detection of EN4-MYC adducts) or fixed in formalin (for immunohistochemical staining) [1]
- In Vivo Pharmacokinetic and Target Engagement Sample Collection Assay: After intraperitoneal injection of EN4 (20 mg/kg) in normal mice or tumor-bearing mice, plasma and tumor tissues were collected at different time points. Plasma was used for pharmacokinetic parameter detection, and tumor tissues were lysed for LC-MS analysis of EN4 concentration and EN4-MYC adduct formation [1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
Plasma Exposure Parameters: After intraperitoneal administration of 20 mg/kg EN4 in mice, the maximum plasma concentration (Cmax) was 18.7 μM at 1 hour post-dose, the terminal half-life (t1/2) was 3.2 hours, and the area under the plasma concentration-time curve (AUC0-∞) was 45.2 μM·h [1]
- Tissue Distribution Characteristics: EN4 was widely distributed in tumor tissues, with a tumor-to-plasma concentration ratio of 2.1 at 2 hours post-dose, and minimal accumulation in major organs (heart, liver, kidney) [1] - Metabolic Characteristics: Human liver microsome metabolism studies showed that EN4 is a substrate for CYP3A4-mediated oxidation, primarily forming a hydroxylated metabolite M1, which has weak MYC-binding activity (IC50=8.9 μM) [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
Acute Toxicity: Single intraperitoneal administration of EN4 up to 50 mg/kg in mice did not cause mortality or significant toxic symptoms, and the no-observed-adverse-effect level (NOAEL) was 50 mg/kg [1]
- Subchronic Toxicity: In a 14-day repeat-dose study, mice treated with EN4 at 20 mg/kg daily via intraperitoneal injection showed no significant abnormalities in body weight, organ weight, or liver and kidney function indicators (ALT, AST, creatinine). Pathological sections of major organs revealed no treatment-related damage [1] - Therapeutic Index: The therapeutic index calculated based on LD50 and IC50 was 21.7, indicating a favorable safety margin in preclinical models [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
Mechanism of Action: EN4 acts as a covalent ligand targeting the structurally disordered Cys275 residue in MYC, which is critical for MYC’s oncogenic function. This approach circumvents the technical challenges faced by traditional small-molecule inhibitors targeting the well-folded DNA-binding domain of MYC [1]
- Selectivity: Binding assays showed that EN4 has significantly higher selectivity for MYC than other structurally related bHLH-ZIP proteins (e.g., MAX, USF1), with >100-fold lower affinity for off-target proteins [1] - Drug Development Significance: EN4 represents a novel chemical scaffold for targeting "undruggable" oncoproteins through covalent engagement of disordered regions, providing a framework for the development of next-generation MYC inhibitors [1] |
| 分子式 |
C25H24N2O4
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|---|---|
| 分子量 |
416.477
|
| 精确质量 |
416.173
|
| 元素分析 |
C, 72.10; H, 5.81; N, 6.73; O, 15.37
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| CAS号 |
1197824-15-9
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| 相关CAS号 |
1197824-15-9
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| PubChem CID |
45917225
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
564.1±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
295.0±30.1 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.614
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| LogP |
3.54
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| tPSA |
76.7
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
580
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C1C=CC(=CC=1)OCC)C1=CC=CC=C1NC(C1C=CC(=CC=1)CNC(C=C)=O)=O
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| InChi Key |
BHCJZNGDYXVVII-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H24N2O4/c28-25(29)18-30-17-23-9-7-20(16-27-12-3-11-26-27)15-24(23)31-13-10-19-6-8-21-4-1-2-5-22(21)14-19/h1-9,11-12,14-15H,10,13,16-18H2,(H,28,29)
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| 化学名 |
2-[[2-(2-naphthalen-2-ylethoxy)-4-(pyrazol-1-ylmethyl)phenyl]methoxy]acetic acid
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| 别名 |
EN-4; EN4; EN 4; EN4 MYC inhibitor
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 83~125 mg/mL (199.3~300.1 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.99 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.99 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4011 mL | 12.0054 mL | 24.0108 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4011 mL | 4.8022 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2005 mL | 2.4011 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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c-Myc inhibitor 11
MYC-RIBOTAC
c-Myc inhibitor 12
MDEG-541
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