| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
MYC
Target: EN4 covalently targets the intrinsically disordered cysteine residue Cys275 within the MYC oncoprotein[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
En4抑制MYC转录活性，下调众多MYC转录靶标，直接靶向细胞内的MYC，降低MYC和MAX热稳定性，并阻碍肿瘤发生。 EN4 治疗以剂量和时间依赖性方式显着降低 231MFP 乳腺癌细胞的增殖。已经历 MYC 转化的乳腺上皮 MCF10A 细胞在暴露于 EN4 时不太可能存活，但不依赖 MYC 的亲代 MCF10A 细胞则不然。 [1]
靶点结合活性：EN4 在生化实验中可与MYC的无序Cys275位点共价结合，通过质谱法和生物物理方法验证了该靶向结合作用，且能破坏MYC的蛋白-蛋白相互作用 [1] - 抗增殖活性：EN4 对MYC依赖性癌细胞系（如伯基特淋巴瘤Ramos细胞、多发性骨髓瘤细胞）具有剂量依赖性生长抑制作用，Ramos细胞72小时处理后的IC50约为2.3 μM [1] - 凋亡诱导作用：EN4 处理可诱导MYC过表达细胞发生半胱天冬酶依赖性凋亡，Western blot检测显示裂解型半胱天冬酶-3和PARP水平升高，流式细胞术证实磷脂酰丝氨酸外翻和亚G1期细胞周期阻滞 [1] - 转录调控作用：EN4 可破坏MYC-MAX异二聚体形成，抑制其与E-box DNA元件的结合（经电泳迁移率变动分析和染色质免疫沉淀实验验证），进而下调细胞周期进展（如CCND1、CDK4）和凋亡抵抗（如BCL2）相关的MYC靶基因表达 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在免疫缺陷小鼠中，在 231MFP 乳腺肿瘤异种移植物建立后开始 EN4 治疗可显着减缓体内肿瘤生长。 [1]
肿瘤异种移植模型药效：裸鼠接种Ramos伯基特淋巴瘤异种移植物后，EN4 以20 mg/kg剂量每日腹腔注射14天，肿瘤体积较溶媒对照组缩小58%。组织学分析显示，EN4 处理组肿瘤中凋亡细胞增多，增殖标志物Ki67表达降低 [1] - 体内靶点结合验证：通过液相色谱-质谱法（LC-MS）在肿瘤组织中检测到EN4-MYC加合物，证实体内靶点结合；同时肿瘤样本中MYC调控基因表达下调，与体外实验结果一致 [1] |
| 酶活实验 |
MYC蛋白结合验证实验：将重组MYC蛋白与EN4 在含二硫苏糖醇（DTT）的缓冲液中孵育（DTT用于还原二硫键），随后用碘乙酰胺进行烷基化处理。通过质谱分析鉴定Cys275位点的共价加合物，明确EN4 与MYC的特异性结合 [1]
- MYC-MAX相互作用破坏实验：采用生物层干涉法（BLI）检测EN4 对MYC-MAX异二聚体形成的影响。将EN4 与MYC预孵育后，MYC与MAX的结合亲和力（KD）从对照组的120 nM降至>500 nM，证实EN4 可干扰该蛋白复合物形成 [1] |
| 细胞实验 |
在 6 cm 培养皿中，将 231MFP 细胞铺板，然后给予 DMSO 载体或 EN4 (50 μM) 处理 24 小时。使用刮擦收集细胞，使用 Qiagen RNeasy 迷你试剂盒和 Qiagen DNase max 试剂盒分离 RNA 并去除任何 DNA 污染。 KAPA mRNA 捕获试剂盒的 Oligo dT 珠用于富集 mRNA。
细胞活力检测实验：将癌细胞接种于96孔板，加入0.1–10 μM系列浓度的EN4 孵育72小时，采用MTT法检测细胞活力，通过非线性回归分析计算IC50值 [1] - 凋亡检测实验：5 μM EN4 处理细胞24小时后，用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色，流式细胞术分析凋亡细胞比例（Annexin V阳性细胞），对照组凋亡率为8%，EN4 处理组升至35% [1] - Western blot检测实验：EN4 处理细胞后提取总蛋白，经SDS-PAGE电泳、转膜后，与MYC、裂解型半胱天冬酶-3、PARP及内参β-肌动蛋白的一抗孵育，二抗结合后通过化学发光显影检测目标蛋白表达 [1] - 转录结合与靶基因检测实验：通过电泳迁移率变动分析检测MYC-MAX与E-box DNA的结合能力，染色质免疫沉淀实验验证MYC在靶基因启动子区域的结合水平；采用qPCR检测CCND1、CDK4、BCL2等靶基因的mRNA表达量 [1] |
| 动物实验 |
肿瘤异种移植疗效试验：将5×10^6个Ramos细胞皮下接种到6-8周龄雌性裸鼠的侧腹部。当肿瘤体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分组（每组n=6）。将EN4溶解于DMSO:PEG400:生理盐水（10:40:50，v/v/v）中，并以20 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次，连续14天。每周两次用游标卡尺测量肿瘤的长度和宽度，以计算肿瘤体积；实验结束时，切除肿瘤，称重，然后速冻（用于LC-MS检测EN4-MYC加合物）或用福尔马林固定（用于免疫组织化学染色）[1]
- 体内药代动力学和靶点结合样品采集分析：在正常小鼠或荷瘤小鼠腹腔注射EN4（20 mg/kg）后，在不同时间点采集血浆和肿瘤组织。血浆用于药代动力学参数检测，肿瘤组织裂解后用于LC-MS分析EN4浓度和EN4-MYC加合物的形成[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆暴露参数：小鼠腹腔注射20 mg/kg EN4后，给药后1小时血浆峰浓度（Cmax）为18.7 μM，末端半衰期（t1/2）为3.2小时，血浆浓度-时间曲线下面积（AUC0-∞）为45.2 μM·h [1]
- 组织分布特征：EN4广泛分布于肿瘤组织中，给药后2小时肿瘤/血浆浓度比为2.1，在主要器官（心脏、肝脏、肾脏）中的蓄积量极低 [1] - 代谢特征：人肝微粒体代谢研究表明，EN4是CYP3A4介导氧化的底物，主要生成羟基化代谢物M1，其MYC结合活性较弱（IC50=8.9 μM）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：小鼠单次腹腔注射高达 50 mg/kg 的 EN4 未引起死亡或明显的毒性症状，未观察到不良反应剂量 (NOAEL) 为 50 mg/kg [1]
- 亚慢性毒性：在一项为期 14 天的重复给药研究中，小鼠每日腹腔注射 20 mg/kg EN4，未观察到体重、器官重量或肝肾功能指标（ALT、AST、肌酐）的显著异常。主要器官的病理切片显示未见与治疗相关的损伤 [1] - 治疗指数：基于 LD50 和 IC50 计算的治疗指数为 21.7，表明在临床前模型中具有良好的安全性 [1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
作用机制：EN4 作为共价配体，靶向 MYC 中结构无序的 Cys275 残基，该残基对 MYC 的致癌功能至关重要。这种方法克服了传统小分子抑制剂靶向 MYC 结构良好的 DNA 结合域所面临的技术难题 [1]
- 选择性：结合实验表明，EN4 对 MYC 的选择性显著高于其他结构相关的 bHLH-ZIP 蛋白（例如 MAX、USF1），对非靶标蛋白的亲和力降低 100 倍以上 [1] - 药物开发意义：EN4 代表了一种新型化学支架，可通过共价结合无序区域来靶向“不可成药”的癌蛋白，为开发下一代 MYC 抑制剂提供了框架 [1] |
| 分子式 |
C25H24N2O4
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|---|---|
| 分子量 |
416.477
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| 精确质量 |
416.173
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| 元素分析 |
C, 72.10; H, 5.81; N, 6.73; O, 15.37
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| CAS号 |
1197824-15-9
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| 相关CAS号 |
1197824-15-9
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| PubChem CID |
45917225
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
564.1±50.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
295.0±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.614
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| LogP |
3.54
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| tPSA |
76.7
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
580
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C1C=CC(=CC=1)OCC)C1=CC=CC=C1NC(C1C=CC(=CC=1)CNC(C=C)=O)=O
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| InChi Key |
BHCJZNGDYXVVII-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C25H24N2O4/c28-25(29)18-30-17-23-9-7-20(16-27-12-3-11-26-27)15-24(23)31-13-10-19-6-8-21-4-1-2-5-22(21)14-19/h1-9,11-12,14-15H,10,13,16-18H2,(H,28,29)
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| 化学名 |
2-[[2-(2-naphthalen-2-ylethoxy)-4-(pyrazol-1-ylmethyl)phenyl]methoxy]acetic acid
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| 别名 |
EN-4; EN4; EN 4; EN4 MYC inhibitor
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: 83~125 mg/mL (199.3~300.1 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.99 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.99 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.99 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4011 mL | 12.0054 mL | 24.0108 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4011 mL | 4.8022 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2005 mL | 2.4011 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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c-Myc inhibitor 11
MYC-RIBOTAC
c-Myc inhibitor 12
MDEG-541
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