| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| 体外研究 (In Vitro) |
乙二胺四乙酸三钠盐 (EDTA) 从阴离子交换柱上洗脱下来的高浓度组分可以抑制 Mg²⁺ 依赖性聚合酶链式反应 (PCR)。当将含有富集 EDTA 的组分(浓度为 22 mM,是流动相原始浓度 0.1 mM 的 220 倍)的 2 µl 溶液添加到 PCR 反应中时,它完全抑制了 EGFP 基因的扩增,这与不含 EDTA 峰的组分不同。[1]
蛋白质纯化缓冲液中的 EDTA 会干扰阴离子交换色谱 (AEC)。当用含有 EDTA 的缓冲液平衡 AEC 柱(例如 MonoQ)并上样时,EDTA 会结合到树脂上,并在盐梯度洗脱过程中作为一个尖锐的峰被洗脱。这个浓缩的 EDTA 峰(根据树脂和 pH 不同,在约 240-275 mM NaCl 浓度下洗脱)会掩盖在 215 nm 处检测到的蛋白峰,置换弱结合的蛋白质(例如 EGFP),并降低树脂的蛋白质结合容量。用 EDTA 饱和树脂(例如,通过上样 5 mM EDTA)可以阻止后续蛋白质如 EGFP 的结合,在此条件下只有约 7% 的蛋白质被吸附。相反,将高浓度 EDTA (5 mM) 上样到已结合有 EGFP 的柱子上,可以置换大约 95% 的蛋白质。[1] 作为体外抗凝剂,乙二胺四乙酸三钠盐 (EDTA) 通过螯合凝血级联反应所必需的钙离子来防止血液凝固。它是血液学检测(全血细胞计数)的推荐抗凝剂,因为它能最佳地保存细胞成分和血细胞形态。[2] EDTA对血样中不稳定的分子具有稳定作用。例如,推荐使用EDTA血浆测量促肾上腺皮质激素(ACTH)、甲状旁腺激素(PTH)、胰高血糖素、C肽等激素,因为它能抑制降解。PTH在EDTA血浆中比在血清中更稳定。[2] EDTA可以抑制补体激活,当添加到反应缓冲液中时,可以稳定免疫测定中的某些蛋白质。[2] EDTA是分子生物学应用(如PCR、HIV-1 RNA定量)的首选抗凝剂,因为它能稳定核酸,并且与肝素不同,不抑制DNA扩增。在室温下,EDTA抗凝血中的HCV-RNA浓度可稳定长达5天。[2] EDTA会导致特定诊断检测的干扰:在某些免疫测定中,它可能导致肌钙蛋白T(TnT)被低估高达18%,并且通过螯合复合物所需的Ca²⁺来干扰肌钙蛋白I(TnI)的活性。不推荐使用EDTA测量这些指标。[2] EDTA可能导致某些肌红蛋白免疫测定的不同程度干扰。[2] 对于利钠肽(ANP、BNP),推荐使用EDTA血浆(含或不含抗蛋白水解物质)进行采集,并建议在EDTA管中冷藏保存。然而,EDTA血浆中的NT-proBNP浓度可能比血清或肝素血浆低10%。[2] 推荐将EDTA用于蛋白质组学研究,因为其螯合作用可抑制金属依赖性蛋白酶,有助于稳定蛋白质谱。[2] 推荐使用EDTA测量某些药物,如氨基糖苷类和一些抗癫痫药物。它可以作为肝素或血清的替代品,用于测量几种抗癫痫药物、抗心律失常药物、水杨酸盐、对乙酰氨基酚和茶碱。但是,不应使用EDTA测量3,4-二羟基苯丙氨酸(DOPA),因为EDTA会引发其快速降解。[2] 在临床化学中,由于EDTA螯合金属离子(如Ca、Mg、Fe),传统上不适合用于一般分析。然而,它是特定测试的首选抗凝剂,如氨、肌酸激酶(CK)同工酶(其中锌螯合至关重要)和同型半胱氨酸测定。EDTA血浆也可用于测量总胆固醇、HDL-C、LDL-C和载脂蛋白,但根据分析技术的不同,其浓度可能被低估。[2] EDTA可导致多种假象:它可引起血小板形状随时间发生变化(盘状变为球形),导致阻抗分析仪测得的平均血小板体积(MPV)增加,因此需要在采血后固定时间进行测量。[2] EDTA可诱发假性血小板减少症,其特征是体外血小板聚集或粘附于白细胞,导致血小板计数假性降低。这通常由针对血小板糖蛋白IIb/IIIa的IgM自身抗体介导,EDTA改变了该糖蛋白的构象。在普通人群中的患病率接近0.1%。[2] EDTA与其他罕见现象有关,如白细胞聚集、红细胞凝集和假性白细胞增多。[2] 在全血测定中,EDTA抑制脂多糖(LPS)诱导的细胞因子(如TNF-α)产生,因此不适合在此类情况下测量TNF-α。[2] |
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
乙二胺四乙酸三钠盐是一种无臭白色结晶粉末。pH值(1%水溶液)为9.3,pH值(10%水溶液)约为8.3-8.7。(NTP,1992)
乙二胺四乙酸三钠盐是乙二胺四乙酸(EDTA)的有机钠盐,其中三个钠离子与一个EDTA三阴离子结合。它含有一个EDTA(3-)离子。 乙二胺四乙酸三钠盐(EDTA)广泛用作蛋白质纯化缓冲液的添加剂。其功能包括螯合二价和三价阳离子以降低金属离子依赖性蛋白酶活性,减少金属离子催化的蛋白质氧化损伤,稳定还原剂(如DTT),以及减少二硫键的形成。 [1] EDTA 是一种多价阴离子,其电荷随 pH 值变化(其羧酸的 pKa 值分别为 2.0、2.7、6.2 和 10.3)。它与阴离子交换树脂(包括强“Q”型和弱“DEAE”型)具有很强的相互作用。当流动相中存在 EDTA 时,在柱平衡和样品上样过程中,EDTA 会被吸附并富集在这些树脂上。在 pH 7.9 的条件下,当 NaCl 浓度约为 205-254 mM(取决于树脂)时,EDTA 会在盐梯度洗脱中以明显的峰形式洗脱出来。柱上富集效应可使洗脱液中 EDTA 的浓度比其在进样或缓冲液中的初始浓度高 10 至 220 倍。 [1] 这种富集作用会在蛋白质纯化和下游应用中造成多种假象:它会降低树脂对蛋白质的结合能力,置换弱结合的蛋白质,在215 nm吸光度监测时掩盖蛋白质峰,在添加Ca²⁺后导致pH值异常下降,并抑制金属依赖性检测(如PCR)。与EDTA峰共洗脱的组分可能含有“神秘抑制剂”。[1] 为了减轻这些影响,文献建议:在不含EDTA的流动相中平衡AEC柱,并在上样前切换到含EDTA的缓冲液;在流动相中使用低浓度EDTA(0.1-0.5 mM);同时在280 nm和215 nm处监测洗脱情况;向EDTA峰之前洗脱的组分中添加EDTA至所需浓度;以及使用仅含缓冲液的样品进行对照实验,以确定EDTA峰的位置和浓度。在最终精制步骤中,EDTA 可从流动相中省略,直接添加到洗脱后收集的馏分中。[1]乙二胺四乙酸三钠盐 (EDTA) 是一种多元酸,含有四个羧酸基团和两个胺基,可螯合金属离子。在诊断应用中,它主要用作体外抗凝剂。[2]常用的 EDTA 盐包括 Na₂EDTA、K₂EDTA 和 K₃EDTA。国际血液学标准化委员会 (ICSH) 推荐 K₂EDTA 作为血液学检测的首选抗凝剂。与 K₃EDTA 相比,K₂EDTA 引起的细胞收缩更少。推荐浓度为 1.5 mg/mL 血液(或 4.55 mmol/L)。[2]EDTA 试管通常采用颜色编码,并配有淡紫色塞子。 [2] EDTA血浆不适用于测定钙、镁、铁、钠或钾等电解质(因为它是以钠盐或钾盐的形式使用)。[2] EDTA抗凝血的血液学参数通常较为稳定:血红蛋白在4°C下可稳定长达48小时,红细胞参数可稳定长达24小时。网织红细胞分析建议在24小时内进行。[2] 为减轻EDTA引起的假性血小板减少症,可使用其他抗凝剂,例如柠檬酸钠、肝素或CTAD(柠檬酸盐、茶碱、腺苷、葡萄糖)进行血小板计数。在EDTA样本中添加氨基糖苷类抗生素(例如卡那霉素)可以预防和分离体外血小板聚集。[2] 对于细胞因子测定,建议使用EDTA进行样本采集和稳定,直至离心,离心应迅速进行。然而,EDTA不推荐用于LPS刺激试验中可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、可溶性转铁蛋白受体(sTfR)或TNF-α的测定。[2] 该综述探讨了“通用抗凝剂”在简化实验室工作流程方面的潜力,并指出EDTA因其稳定性而被考虑用于此用途,甚至可用于服用口服抗凝剂患者的凝血检测。然而,水蛭素和合成凝血酶抑制剂(例如,阿加曲班、PPACK)等替代方案也得到了探索。[2] 该综述中的总结表提供了以下建议:EDTA推荐用于血细胞计数、易酶降解的蛋白质/肽、蛋白质组学、分子生物学、病毒学以及特定的临床化学检测(氨、CK同工酶)。不建议将其用于一般临床化学、肌钙蛋白测定或金属蛋白酶分析。[2] |
| 分子式 |
C10H16N2O8.NA+
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|---|---|
| 分子量 |
315.23244
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| 精确质量 |
358.036
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| CAS号 |
150-38-9
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| 相关CAS号 |
EDTA dipotassium dihydrate;25102-12-9;Ethylenediaminetetraacetic acid;60-00-4
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| PubChem CID |
9008
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
614.2ºC at 760 mmHg
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| 熔点 |
237 °C
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| 闪点 |
325.2ºC
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| 蒸汽压 |
1.15E-16mmHg at 25°C
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| tPSA |
182.63
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
10
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
|
| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
351
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
QZKRHPLGUJDVAR-UHFFFAOYSA-K
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H16N2O8.3Na/c13-7(14)3-11(4-8(15)16)1-2-12(5-9(17)18)6-10(19)20;;;/h1-6H2,(H,13,14)(H,15,16)(H,17,18)(H,19,20);;;/q;3*+1/p-3
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| 化学名 |
trisodium;2-[2-[bis(carboxylatomethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetate
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中,避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~50 mg/mL (~139.59 mM)
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (139.59 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1723 mL | 15.8614 mL | 31.7229 mL | |
| 5 mM | 0.6345 mL | 3.1723 mL | 6.3446 mL | |
| 10 mM | 0.3172 mL | 1.5861 mL | 3.1723 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。