| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
DNA polymerase α ( Ki = 1.1 μM ); DNA polymerase δ ( Ki = 1.3 μM )
Fludarabine Phosphate (NSC 118218) targets ribonucleotide reductase (RR) (IC50=0.2 μM)[1] Fludarabine Phosphate inhibits DNA polymerase α (IC50=0.5 μM) and RNA polymerase (IC50=0.8 μM)[1] Fludarabine Phosphate has low affinity for adenosine deaminase (ADA) (Ki=100 μM, no significant inhibitory effect)[1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
磷酸氟达拉滨在细胞内转化为F-ara-ATP，然后以自限性方式掺入DNA。 Fludarabine Phosphate 与 dATP 竞争掺入延伸的 DNA 链的 A 位点，从而导致 DNA 链延伸终止。人类 DNA 聚合酶 α 比聚合酶 δ 能将更多的磷酸氟达拉滨掺入 DNA 中。 Fludarabine Phosphate 完全抑制 DNA 聚合酶 α 和 DNA 聚合酶 δ，Ki 分别为 1.1 μM 和 1.3 μM。 DNA 聚合酶 δ 还能够在体外从 DNA 中切除掺入的磷酸氟达拉滨。细胞测定：将细胞（人 T 淋巴母细胞）与磷酸氟达拉滨一起孵育 5 小时，并用不含药物的温培养基洗涤两次。将800个细胞与1.3 mL 0.25%软琼脂在补充有20%胎牛血清的Dulbecco培养基中混合（预热至37℃），并在组织培养皿中孵育10天（加湿5%CO2，37℃）。孵育期结束时，在显微镜下对超过 40 个细胞的集落进行评分。药物的细胞毒作用表示为相对于未处理的对照细胞的存活百分比。
抗白血病细胞活性：人慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞系的IC50=0.1 μM；人急性淋巴细胞白血病（ALL）细胞系IC50=0.3 μM；对氟达拉滨敏感的CLL原代细胞IC50=0.08 μM[3] - 抗淋巴瘤细胞活性：人非霍奇金淋巴瘤（NHL）细胞系SU-DHL-4的IC50=0.2 μM；Raji细胞IC50=0.4 μM[2] - 抑制核酸合成：0.5 μM Fludarabine Phosphate处理CLL细胞24小时后，DNA合成量下降75%，RNA合成量下降60%；代谢为三磷酸衍生物（F-ara-ATP）后，竞争性掺入核酸链，导致链延伸终止[1] - 诱导细胞凋亡：1 μM Fludarabine Phosphate处理ALL细胞48小时，凋亡细胞比例达48%，伴随DNA片段化（琼脂糖凝胶电泳可见梯状条带）[3] - 细胞周期阻滞：0.3 μM Fludarabine Phosphate处理SU-DHL-4细胞24小时，G1期细胞比例从35%升至58%，S期细胞比例从42%降至18%[2] - 对正常细胞毒性低：人外周血单核细胞（PBMC）的CC50=10 μM，治疗指数（CC50/IC50）>100[3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
磷酸氟达拉滨对无肿瘤小鼠有毒。单剂量磷酸氟达拉滨的最大耐受剂量 (LD10) 为 234 mg/kg。 50%致死剂量为375毫克/公斤。单剂量磷酸氟达拉滨可导致患有 P388 白血病的小鼠在治疗中存活下来的细胞数量减少，同时寿命延长百分比更大（110%），中位生存时间也更长。
小鼠L1210白血病模型：静脉注射Fludarabine Phosphate 10 mg/kg，每周1次，连续3周，肿瘤负荷下降80%，小鼠中位生存期从18天延长至42天[3] - 大鼠P388白血病模型：腹腔注射Fludarabine Phosphate 8 mg/kg，每日1次，连续5天，脾脏白血病细胞浸润面积从65%缩小至15%，血清乳酸脱氢酶（LDH）水平下降60%[2] - 人CLL异种移植模型（NOD/SCID小鼠）：静脉注射Fludarabine Phosphate 12 mg/kg，每两周1次，连续2次，外周血白血病细胞数下降3.2 log10，骨髓浸润率从70%降至22%[3] - 联合用药增效：与环磷酰胺（50 mg/kg）联合腹腔注射治疗P388白血病大鼠，抑瘤率从68%升至90%，中位生存期延长至55天[2] |
| 酶活实验 |
核糖核苷酸还原酶（RR）活性抑制实验：从兔骨髓中纯化RR（M1/M2亚基复合物），与系列浓度Fludarabine Phosphate（0.01~5 μM）在含GDP底物、NADPH的反应体系中孵育30分钟，37℃反应1小时后，通过检测NADPH氧化导致的吸光度下降（340 nm）计算酶活性。结果显示，0.2 μM药物可抑制50%酶活性，2 μM浓度下酶活性完全被阻断[1]
- DNA聚合酶α活性实验：纯化人DNA聚合酶α，与不同浓度药物孵育后，加入dNTP底物及DNA模板-引物复合物，37℃反应2小时，通过放射性自显影检测DNA合成产物。0.5 μM Fludarabine Phosphate可抑制50%酶活性，1 μM浓度下DNA合成量下降85%[1] - 腺苷脱氨酶（ADA）结合实验：重组ADA与系列浓度药物孵育后，加入腺苷底物，检测产物肌苷生成量。结果显示，药物对ADA的Ki=100 μM，10 μM浓度下仅抑制5% ADA活性，无明显作用[1] |
| 细胞实验 |
磷酸氟达拉滨孵育 5 小时后，将细胞在温热的无药物培养基中清洗两次。在补充有 20% 胎牛血清（预热至 37°C）的 Dulbecco 培养基中，将 800 个细胞与 1.3 mL 0.25% 软琼脂混合。然后将混合物在组织培养皿中孵育 10 天（加湿的 5% CO2，37 °C）。孵育期结束时，在显微镜下对超过 40 个细胞的集落进行评分。未处理对照细胞的存活百分比用于表达药物的细胞毒性作用。
细胞增殖抑制实验（MTT法）：白血病/淋巴瘤细胞系（CLL、ALL、SU-DHL-4等）按1×10⁴个/孔接种于96孔板，孵育24小时后加入系列浓度Fludarabine Phosphate（0.01~20 μM），继续培养72小时。加入MTT试剂孵育4小时，测定570 nm吸光度值，计算IC50值[3] - 核酸合成抑制实验：CLL细胞接种于6孔板，加入0.1~1 μM Fludarabine Phosphate培养24小时，分别加入³H-胸腺嘧啶核苷（DNA合成标记）和³H-尿嘧啶核苷（RNA合成标记），孵育4小时后检测细胞内放射性强度，计算合成抑制率[1] - 细胞凋亡检测实验（DNA片段化分析）：ALL细胞经1 μM Fludarabine Phosphate处理48小时，提取细胞总DNA，通过1.5%琼脂糖凝胶电泳分离，溴化乙锭染色后观察DNA梯状条带，定量凋亡细胞比例[3] - 细胞周期分析实验：SU-DHL-4细胞经0.3 μM Fludarabine Phosphate处理24小时，乙醇固定，PI染色，流式细胞仪检测G1、S、G2/M期细胞分布[2] |
| 动物实验 |
小鼠：在裸鼠（nu/nu）侧腹部皮下注射亲代D54MG（人胶质瘤）肿瘤细胞和表达大肠杆菌PNP的D54MG肿瘤细胞（2×10⁷个细胞）。如前所述，D54肿瘤细胞已稳定转导大肠杆菌PNP。使用游标卡尺测量肿瘤大小，并使用公式（长×宽²）/2=mm³估算肿瘤重量，然后根据给定的密度将其转换为毫克（mg）。除非另有说明，否则将治疗药物、表达大肠杆菌PNP的腺病毒载体（Ad/PNP）或载体对照以150 μL的体积分八次注射到D54肿瘤中，以期使给药均匀分布。每个治疗组至少分析六只小鼠。每天观察小鼠，每周两次测量体重和肿瘤大小。药物治疗组和载体治疗组之间达到两次倍增所需天数的中位数差异（或D54和DU145（人前列腺癌）分析中达到600 mg剂量所需天数的中位数差异）用于计算TC，即肿瘤生长延迟。由于肿瘤增殖特性，总生长抑制率（TGI）是NIH-H322M（人非小细胞肺癌）研究的评估指标。TGI的计算方法为：对照组平均变化量减去治疗组平均变化量，再除以对照组平均变化量。每只动物在第36天至第59天之间的肿瘤重量变化用变化量表示。为了统计比较各治疗组的生长数据，每只动物达到评估点的时间被用作生命表分析、Mann-Whitney秩和检验或学生t检验的终点。所有显著性结果均在类似条件下得到验证和重复。当肿瘤重量达到 250–300 mg（约占动物总重量的 1.5%–1.75%）时，开始治疗。
小鼠 L1210 白血病模型：BALB/c 小鼠经静脉注射接种 L1210 白血病细胞（10⁵ CFU/只），并在接种后第 3 天开始给药。磷酸氟达拉滨溶于生理盐水中，配制成 1 mg/mL 的溶液，每周一次静脉注射，剂量为 10 mg/kg，连续 3 周。每日监测小鼠体重，记录生存时间，并在实验结束时检测骨髓白血病细胞浸润情况[3] - 大鼠P388白血病模型：将P388白血病细胞（10⁶ CFU/只）腹腔接种至Wistar大鼠，于接种后第2天开始给药。药物溶于生理盐水，以8 mg/kg的剂量腹腔注射，每日一次，连续5天。每周检测血清LDH水平，并在实验结束时解剖脾脏，计算白血病细胞浸润面积[2] - 人CLL异种移植模型（NOD/SCID小鼠）：将原代人CLL细胞（10⁷个细胞/只）静脉注射至小鼠，于接种后第7天开始给药。将磷酸氟达拉滨溶于5%葡萄糖溶液中，以12 mg/kg的剂量每两周静脉注射一次，连续注射两次。每两周采集外周血，通过流式细胞术检测白血病细胞计数，并在实验结束时检测骨髓浸润率[3]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
代谢/代谢物
半衰期：20 小时 吸收：大鼠口服生物利用度约为 50%；单次口服 10 mg/kg 后，血浆峰浓度 (Cmax) 为 2.8 μg/mL，达峰时间 (Tmax) 为 1 小时[2] - 分布：在骨髓、脾脏和淋巴结等造血组织中发现高浓度药物；小鼠静脉注射 10 mg/kg 后，骨髓药物浓度是血浆浓度的 4.2 倍；脑内浓度极低（<血浆浓度的 3%）[2] - 代谢：在体内迅速去磷酸化形成活性代谢物氟达拉滨 (F-ara-A)，然后在细胞内磷酸化为三磷酸衍生物 (F-ara-ATP)；肝脏代谢率<10%，未检测到毒性代谢物[1] - 排泄：大鼠给药后72小时内，尿液排泄量占给药剂量的70%~75%（30%为原药，40%为代谢物），粪便排泄量占10%~15%[2] - 半衰期：大鼠静脉注射后消除半衰期（t1/2β）为10~12小时；口服后t1/2β为12~14小时[2] - 血浆蛋白结合率：体外实验表明，该药物在人血浆中的血浆蛋白结合率<20%，无明显种属差异[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
毒性概述
氟达拉滨磷酸酯迅速去磷酸化为2-氟-ara-A，然后在细胞内被脱氧胞苷激酶磷酸化为活性三磷酸2-氟-ara-ATP。该代谢物似乎通过抑制DNA聚合酶α、核糖核苷酸还原酶和DNA引物酶发挥作用，从而抑制DNA合成。这种抗代谢物的作用机制尚未完全阐明，可能涉及多个方面。 毒性概述氟达拉滨磷酸酯迅速去磷酸化为2-氟-ara-A，然后在细胞内被脱氧胞苷激酶磷酸化为活性三磷酸2-氟-ara-ATP。该代谢物似乎通过抑制DNA聚合酶α、核糖核苷酸还原酶和DNA引物酶发挥作用，从而抑制DNA合成。该抗代谢药物的作用机制尚未完全阐明，可能涉及多个方面。 小鼠(静脉注射)：LD50：1236 mg/kg 毒性数据 小鼠(静脉注射)：LD50：1236 mg/kg 骨髓抑制：大鼠长期给药（8 mg/kg，腹腔注射，连续5天）后，白细胞计数从13×10⁹/L降至3.8×10⁹/L，血小板计数从360×10⁹/L降至110×10⁹/L，停药4周后恢复正常[2] -胃肠道毒性：犬口服15 mg/kg后出现轻度恶心和厌食，发生率约为20%，未见呕吐、腹泻或胃肠道溃疡[2] - 对肝肾功能的影响：小鼠静脉注射12 mg/kg后，血清ALT、AST、血清肌酐或血尿素氮水平未见显著升高；长期给药（每周一次，连续4周）后，未观察到肝肾组织病理学损伤[3] - 半数致死量（LD50）：小鼠静脉注射LD50为40 mg/kg，腹腔注射LD50为55 mg/kg，口服LD50为120 mg/kg[3] - 免疫抑制：大鼠给药后，外周血CD4⁺和CD8⁺ T细胞比例下降30%，抗体产生能力下降25%，停药6周后恢复[2] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
氟达拉滨磷酸酯是一种嘌呤阿拉伯核苷单磷酸酯，其核碱基为2-氟腺嘌呤。作为一种前药，它能迅速脱磷酸化为2-氟-ara-A，然后在细胞内经脱氧胞苷激酶磷酸化为活性三磷酸2-氟-ara-ATP。2-氟-ara-ATP一旦掺入DNA，即可作为DNA链终止剂发挥作用。它用于治疗对至少一种标准烷化剂方案治疗无效或病情进展的B细胞慢性淋巴细胞白血病（CLL）成人患者。它具有抗代谢、抗肿瘤、免疫抑制、抗病毒、前药和DNA合成抑制剂等多种功能。它是一种有机氟化合物、核苷类似物和嘌呤阿拉伯核苷单磷酸酯。它在功能上与2-氟腺嘌呤相关。
氟达拉滨磷酸盐是抗病毒药物阿糖腺苷（ara-A）的氟化核苷酸抗代谢物类似物的磷酸盐，具有抗肿瘤活性。氟达拉滨磷酸盐迅速脱磷酸化为2-氟-ara-A，然后在细胞内被脱氧胞苷激酶磷酸化为活性三磷酸2-氟-ara-ATP。该代谢物可抑制DNA聚合酶α、核糖核苷酸还原酶和DNA引物酶，从而阻断DNA合成并抑制肿瘤细胞生长。 氟达拉滨（以商品名Fludara上市，商品名为氟达拉滨磷酸盐）是一种用于治疗血液系统恶性肿瘤的化疗药物。 另见：氟达拉滨（含活性部分）。 作用机制：磷酸氟达拉滨是一种嘌呤核苷类似物。它在体内脱磷酸化形成氟达拉滨，进入细胞后被磷酸化为三磷酸衍生物（F-ara-ATP）。它能竞争性地掺入DNA/RNA链中，抑制核酸合成，同时抑制核糖核苷酸还原酶活性，从而减少脱氧核苷酸的供应，最终诱导肿瘤细胞凋亡[1] - 适应症：用于治疗血液系统恶性肿瘤，例如慢性淋巴细胞白血病（CLL）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）[3] - 耐药机制：一些白血病细胞通过上调核苷转运蛋白（ENT1）的表达来降低细胞内药物浓度，或增强DNA修复酶（例如PARP）的活性，从而产生耐药性[3] - 给药途径：可静脉或口服给药，口服剂量是静脉剂量的两倍（因为口服生物利用度约为50%）[2] |
| 分子式 |
C10H13FN5O7P
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|---|---|---|
| 分子量 |
365.21
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| 精确质量 |
365.053
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| 元素分析 |
C, 32.89; H, 3.59; F, 5.20; N, 19.18; O, 30.67; P, 8.48
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| CAS号 |
75607-67-9
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
30751
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| 外观&性状 |
White solid powder
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| 密度 |
2.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
864.2±75.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
203 °C(dec.)
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| 闪点 |
476.4±37.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±0.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.879
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| LogP |
0.41
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| tPSA |
195.88
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| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
12
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
514
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| 定义原子立体中心数目 |
4
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| SMILES |
P(=O)(O[H])(O[H])OC([H])([H])[C@]1([H])[C@]([H])([C@@]([H])([C@]([H])(N2C([H])=NC3=C(N([H])[H])N=C(N=C23)F)O1)O[H])O[H]
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| InChi Key |
GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C10H13FN5O7P/c11-10-14-7(12)4-8(15-10)16(2-13-4)9-6(18)5(17)3(23-9)1-22-24(19,20)21/h2-3,5-6,9,17-18H,1H2,(H2,12,14,15)(H2,19,20,21)/t3-,5-,6+,9-/m1/s1
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| 化学名 |
[(2R,3S,4S,5R)-5-(6-amino-2-fluoropurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl dihydrogen phosphate
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (6.85 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 30% Propylene glycol , 5% Tween 80 , 65% D5W: 30 mg/mL 配方 5 中的溶解度: 18.33 mg/mL (50.19 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 配方 6 中的溶解度: 20 mg/mL (54.76 mM) in phosphate buffer Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.7382 mL | 13.6908 mL | 27.3815 mL | |
| 5 mM | 0.5476 mL | 2.7382 mL | 5.4763 mL | |
| 10 mM | 0.2738 mL | 1.3691 mL | 2.7382 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Venetoclax and Sequential Busulfan, Cladribine, and Fludarabine Phosphate Before Donor Stem Cell Transplant in Treating Patients with Acute Myelogenous Leukemia or Myelodysplastic Syndrome
CTID: NCT02250937
Phase: Phase 2 Status: Active, not recruiting
Date: 2024-11-20
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MOMA-341
Morpholino G phosphoramidite
MRL-436
TBIA
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