| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
PGM3 (Phosphoglucomutase 3). [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在乳腺癌细胞中，FR054（0.5–1 mM，24-48 小时）可导致早期生长停滞，随后细胞死亡显著增加并诱导细胞凋亡。FR054 不具有其他脱靶效应，而是抑制 PGM3 [1]。FR054（250 μM，24 小时）处理可有效影响 MDA-MB-231 细胞中的 N- 和 O-糖基化水平 [1]。FR054 可诱导内质网 (ER) 应激和 ROS 依赖性细胞凋亡 [1]。增殖和存活：FR054 处理（250 μM 至 1 mM，48 小时）呈剂量依赖性地降低了七种不同乳腺癌细胞系的活力。七种癌细胞系中有六种比非转化 hTERT-RPE-1 细胞更敏感。 FR054 处理 72 小时后，几乎 100% 的 TNBC 细胞（MDA-MB-231 和 MDA-MB-468）死亡。FR054（0.5 和 1 mM，处理 24 小时）几乎完全抑制了 MDA-MB-231 细胞的克隆形成。[1]
- 细胞死亡机制：FR054（1 mM，处理 48 小时）显著增强了 MDA-MB-231 细胞的凋亡（通过 Annexin V-FITC/PI 染色检测），并伴有 caspase-3 激活和 PARP 裂解。[1] - 糖基化抑制：FR054（1 mM）处理 30 分钟内使细胞内 UDP-GlcNAc 水平降低约 50%。在MDA-MB-231细胞中，FR054处理（250 μM，24 h）显著降低了PHA-L的膜反应性（检测三/四触角N-糖链），并改变了β1整合素的膜定位。FR054（1 mM）处理48 h后导致蛋白质O-GlcNAc水平降低。[1] - 黏附和迁移：FR054（250 μM，24 h）使MDA-MB-231细胞的黏附性降低约60%，迁移能力降低约50%。[1] - UPR和ROS诱导：FR054（1 mM）处理24-48 h可诱导MDA-MB-231细胞中未折叠蛋白反应（UPR）标志物（ATF4、CHOP、XBP1 mRNA上调；CHOP蛋白增加）。 FR054 (1 mM) 处理显著增加了细胞内过氧化氢和线粒体超氧化物的水平，且呈时间依赖性。添加 N-乙酰半胱氨酸 (NAC) 可降低活性氧 (ROS) 水平，减少细胞凋亡，促进细胞增殖，并降低 CHOP 表达和 caspase-3 活化。[1] - 机制验证：用 NAGK 抑制剂 (NAGKi，3-O-甲基-N-乙酰氨基葡萄糖) 预处理可阻断 FR054 诱导的细胞凋亡。与对照克隆相比，PGM3 敲低的 MDA-MB-231 细胞 (shPGM3 克隆) 对 FR054 处理 (0.25 和 0.5 mM) 的敏感性显著增加，表现为细胞活力降低和细胞凋亡增加。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在MDA-MB-231异种移植小鼠模型中，FR054（1000 mg/kg，腹腔注射）可抑制肿瘤生长[1]。
抗肿瘤疗效：在MDA-MB-231异种移植小鼠模型中，腹腔注射FR054（分次给药：500 mg/kg，每日两次，总剂量1000 mg/kg/天，连续5天）可显著抑制肿瘤生长，并显著降低肿瘤体积变化（与对照组相比，p = 0.008）。延长给药时间（连续11天，采用分次给药）可降低肿瘤生长速率（肿瘤生长抑制率，TGI = 41.77）。单次每日1000 mg/kg的给药剂量与对照组相比未显示出显著差异。[1] |
| 酶活实验 |
细胞热稳定性分析 (CETSA)：将细胞提取物与 FR054 或溶剂孵育后，加热至 49 至 70°C。收集可溶性蛋白，并通过 Western blot 分析。FR054 显著提高了 PGM3 的热稳定性，表明其与 PGM3 直接结合。58°C 下的等温剂量反应指纹图谱 (ITDRFCTESA) 显示，FR054 以剂量依赖的方式增强 PGM3 的稳定性，其结合作用强于天然底物 GlcNAc-6-P。[1]
- UDP-GlcNAc 的 HPLC 定量：将细胞蛋白提取物与 GlcNAc-6-P、UTP 和 FR054 等组分进行酶促反应。在 37°C 下反应 30 分钟后，通过 HPLC 分离并定量 UDP-GlcNAc。与对照组相比，FR054 使 UDP-GlcNAc 水平降低了约 50%。 [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力检测[1]
细胞类型： MDA-MB-231 细胞。 测试浓度： 0.5-1 mM。 孵育时间： 48 小时。 实验结果： 与对照组相比，细胞活力降低，凋亡显著增加。 细胞活力和增殖：将细胞接种于 96 孔板中。采用 MTT 法检测细胞活力。收集细胞并使用血细胞计数板计数增殖细胞。同时采用台盼蓝染色排除法评估细胞活力。[1] - 克隆形成实验：处理后，将细胞以低密度重新接种于完全培养基中。12 天后，固定细胞，用结晶紫染色，并分析吸光度。 [1] - 细胞凋亡检测：将细胞用 Annexin V-FITC 和碘化丙啶 (PI) 在结合缓冲液中染色。室温孵育 15 分钟后，用流式细胞仪分析样品。[1] - 活性氧 (ROS) 检测：将细胞用 DCHF2DA（用于检测过氧化氢）或 MitoSOX（用于检测线粒体超氧化物）在 37°C 下染色 30 分钟，然后用流式细胞仪分析。[1] - N-糖链流式细胞术分析：将细胞用荧光染料标记的凝集素 ConA（用于检测杂合/高甘露糖和双触角糖链）或 PHA-L（用于检测三/四触角结构）在冰上染色 1 小时，然后用流式细胞仪分析。[1] - 共聚焦显微镜：将细胞接种在载玻片上，并用 FR054 处理。对于β1整合素，细胞先与抗β1整合素抗体孵育，再与Alexa Fluor 488标记的二抗孵育。对于N-糖基化，细胞用PHA-L染色。细胞固定后，用DAPI染色，并在共聚焦显微镜下观察。[1] - 黏附和迁移实验：黏附实验中，将处理后的细胞接种于BSA包被的培养板中，静置1小时使其黏附，然后洗去未黏附的细胞。之后计数黏附的细胞。迁移实验中，将处理后的细胞接种于Boyden小室的上室，该小室的滤膜包被有VI型胶原蛋白。下室使用含血清的培养基作为趋化因子。4小时后，对滤膜下侧的细胞进行染色和计数。[1] - Western印迹分析：总蛋白裂解物经SDS-PAGE电泳分离后，转移至硝酸纤维素膜上。将膜与特异性一抗孵育过夜，然后与二抗孵育。采用密度扫描法检测并定量蛋白质表达。[1] - qPCR 分析：使用 Trizol 提取 RNA，进行逆转录，并使用 SYBR Green 染料进行 qPCR 扩增。以 β-actin 为内参，采用 2-ΔΔCT 法计算相对表达水平。[1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： 将MDA-MB-231细胞[1]皮下注射到小鼠体内。
剂量： 1000 mg/kg。 给药途径： 腹腔注射，单次或分次给药（每日两次，每次500 mg/kg）。 实验结果： 体内抗肿瘤疗效似乎优于单次给药，每日两次给药的疗效更佳。 异种移植模型：** 将MDA-MB-231细胞（5×10^6个细胞，溶于200 μL DMEM和Matrigel的1:1混合物中）皮下注射到雌性无胸腺裸鼠（约6周龄，~25 g）右侧腹部。 [1] - **治疗和给药：**当肿瘤体积达到约 180 mm³ 时，将小鼠随机分组。FR054 溶于含 10% DMSO 的水中。该化合物通过腹腔注射给药。每日剂量为 1000 mg/kg，可单次注射（每日一次，1000 mg/kg）或分次注射（每日两次，每次 500 mg/kg）。治疗持续 5 天，或在另一项研究中连续 11 天。对照组小鼠接受溶剂（10% DMSO 水溶液）。[1] - **监测：**每日使用数字游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = [长边 × (短边)²]/2）。同时每日监测体重。肿瘤生长抑制率 (TGI) 的计算公式为：TGI = [1 - (Tf/T0)A / (Tf/T0)V × 100]。[1] 异种移植模型：将 MDA-MB-231 细胞（5×10⁶ 个细胞，溶于 200 μL DMEM 和 Matrigel 的 1:1 混合液中）皮下注射到雌性无胸腺裸鼠（nu/nu 小鼠，约 6 周龄，~25 g）右侧腹部。[1] - 治疗和给药：当肿瘤体积达到约 180 mm³ 时，将小鼠随机分组。FR054 溶于含 10% DMSO 的水中。该化合物通过腹腔注射 (ip) 给药。每日剂量为 1000 mg/kg，可单次注射（每日一次，1000 mg/kg）或分次注射（每日两次，每次 500 mg/kg）。治疗持续 5 天，或在另一项研究中连续 11 天。对照组小鼠接受赋形剂（10% DMSO 水溶液）。[1] - 监测：每日使用数字游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = [长边 × (短边)²]/2）。同时每日监测体重。肿瘤生长抑制率 (TGI) 使用以下公式计算：TGI = [1 - (Tf/T0)A / (Tf/T0)V × 100]。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
细胞内浓度：在用 1 mM FR054 处理 MDA-MB-231 细胞 24 小时后，采用 LC/MS 法测定了 FR054 及其代谢物（去乙酰化形式 FR053 和去乙酰化磷酸化活性化合物 FR051）的总细胞内浓度。三种形式的总浓度为 925 ± 106 nM，活性化合物 FR051 的浓度为 106 ± 50 nM。[1]
- 化学稳定性：对细胞培养基中 ¹³C 标记的 FR054 进行 NMR 分析表明，即使在没有细胞的情况下，24 小时后仍有约 64% 的化合物发生水解，表明其具有内在不稳定性。只有约 11% 的化合物被细胞吸收。[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
细胞毒性：与所测试的七种乳腺癌细胞系中的六种相比，未转化的hTERT-RPE-1细胞对FR054治疗的敏感性较低。[1]
- 体内毒性：在MDA-MB-231异种移植小鼠模型中，在5天和11天的治疗期间，FR054治疗组（单次给药和分次给药）与对照组的体重均无显著差异。根据体况评分，未观察到明显的疾病迹象。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
作用机制：FR054 是一种新型的、可透过细胞膜的己糖胺生物合成途径 (HBP) 抑制剂。它作为 PGM3 酶的竞争性抑制剂发挥作用。FR054 是一种前药，在细胞内脱乙酰化生成 FR053，后者随后被 NAGK 磷酸化生成活性化合物 FR051。[1]
- 细胞效应：FR054 处理可降低细胞内 UDP-GlcNAc 水平，从而减少 N- 和 O-连接的蛋白质糖基化。这会导致未折叠蛋白反应 (UPR) 的激活、细胞内活性氧 (ROS) 的积累，并最终导致细胞凋亡。它还通过影响 β1 整合素的膜定位来降低癌细胞的黏附和迁移。[1] - 潜在适应症：研究表明，FR054 具有作为乳腺癌治疗药物的潜力，尤其适用于三阴性乳腺癌 (TNBC)。 [1] |
| 分子式 |
C14H19NO8
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|---|---|
| 分子量 |
329.3026
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| 精确质量 |
329.111
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| 元素分析 |
C, 51.06; H, 5.82; N, 4.25; O, 38.87
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| CAS号 |
10378-06-0
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| 相关CAS号 |
FR054;35954-65-5
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| PubChem CID |
9883925
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| 外观&性状 |
Light yellow to orange semi-solid or waxy solid or viscous solid
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| LogP |
-0.5
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| tPSA |
109.72
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
7
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
531
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| 定义原子立体中心数目 |
5
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| SMILES |
O1[C@@]2([H])[C@@]([H])(C([H])(C([H])(C1([H])C([H])([H])OC(C([H])([H])[H])=O)OC(C([H])([H])[H])=O)OC(C([H])([H])[H])=O)N=C(C([H])([H])[H])O2
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| InChi Key |
WZFQZRLQMXZMJA-KSTCHIGDSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H19NO8/c1-6-15-11-13(22-9(4)18)12(21-8(3)17)10(5-19-7(2)16)23-14(11)20-6/h10-14H,5H2,1-4H3/t10-,11-,12-,13-,14+/m1/s1
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| 化学名 |
[(3aR,5R,6S,7R,7aR)-6,7-diacetyloxy-2-methyl-5,6,7,7a-tetrahydro-3aH-pyrano[3,2-d][1,3]oxazol-5-yl]methyl acetate
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| 别名 |
6R-FR054; 6R-FR-054; 6R-FR 054;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~303.67 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.59 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0367 mL | 15.1837 mL | 30.3674 mL | |
| 5 mM | 0.6073 mL | 3.0367 mL | 6.0735 mL | |
| 10 mM | 0.3037 mL | 1.5184 mL | 3.0367 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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