| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
B-Raf (IC50 = 0.13 nM)
GDC-0879 is a potent and selective inhibitor of the oncogenic mutant B-Raf kinase (BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ). In recombinant human BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ kinase assays, it exhibits an IC₅₀ of 13 nM; it has minimal activity against wild-type BRAF (IC₅₀ = 3.2 μM) and other RAF family members (e.g., CRAF, IC₅₀ = 1.8 μM) [1] - In human BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ-positive A375 melanoma cells, GDC-0879 inhibits phosphorylated mitogen-activated protein kinase kinase 1 (p-MEK1, downstream of BRAF) with an EC₅₀ of 45 nM [2] - GDC-0879 shows no significant affinity for non-RAF kinases, including EGFR (IC₅₀ > 10 μM) and PDGFRβ (IC₅₀ > 5 μM) [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
GDC-0879 抑制细胞 pERK 的 IC50 为 63 nM。 GDC-0879 在 B-RafV600E 突变体 A375 黑色素瘤和 Colo205 结直肠癌细胞系中表现出相当的效力，pMEK1 抑制的 IC50 值分别为 59 nM 和 29 nM。 GDC-0879 的 IC50 为 0.75 μM，可有效抑制 Malme3M 细胞中的 B-RafV600E。许多肿瘤细胞，包括 A375、624、SK-MEL-28、Malme3M、C32、928、888、G-361、Colo205、Colo206、SW1417、CL34 和 Colo201，GDC-0879 的 EC50 值小于 0.5微米[1]
BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ黑色素瘤细胞增殖抑制：在人BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ阳性黑色素瘤细胞系中，GDC-0879（0.001-10 μM）浓度依赖性抑制增殖：A375细胞（IC₅₀=0.03 μM）、WM266-4细胞（IC₅₀=0.05 μM）、SK-MEL-28细胞（IC₅₀=0.07 μM）。在A375细胞中，0.1 μM剂量可使磷酸化ERK1/2（p-ERK）水平降低90%（Western blot检测）[1] - 黑色素瘤细胞p-MEK1抑制：A375细胞经GDC-0879（0.01-1 μM）处理24 h后，p-MEK1水平呈浓度依赖性降低：0.05 μM抑制50% p-MEK1（EC₅₀=45 nM），0.5 μM抑制率达85%。总MEK1水平无变化，证实其特异性抑制BRAF介导的MEK磷酸化[2] - BRAF野生型细胞不敏感性：在人BRAF野生型（BRAFʷᵗ）黑色素瘤细胞（如SK-MEL-5）中，GDC-0879（最高10 μM）无显著抗增殖活性（活力降低<15%），与其对BRAFʷᵗ低亲和力一致[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
与表达突变 KRAS 的肿瘤相比，GDC-0879 治疗的来自两种细胞系和患者的 BRAFV600E 肿瘤小鼠均表现出更强且更持久的药效抑制（8 小时>90%）。尽管激活的 RAF 信号参与了 RAS 诱导的肿瘤发生，但 GDC-0879 给药后，一些 KRAS 突变肿瘤的进展时间缩短。 Mek 抑制还抑制表达野生型 BRAF（81% KRAS 突变体，38% KRAS 野生型）的细胞系的增殖和肿瘤生长，与 GDC-0879 不同，GDC-0879 的功效仅取决于 B-RafV600E 状态。 PI3K 通路活性的药理学和遗传修饰可能会显着改变 B-RafV600E 黑色素瘤细胞对 GDC-0879 的反应。 [2]
A375黑色素瘤异种移植模型：在荷A375 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ黑色素瘤异种移植瘤的雌性裸鼠中，口服GDC-0879（10、30 mg/kg/天，每日一次）剂量依赖性抑制肿瘤生长：30 mg/kg在第21天较溶媒组使肿瘤体积减少85%，30%的小鼠出现部分肿瘤退缩。30 mg/kg剂量下肿瘤p-MEK1水平降低75%（免疫组化），与抗肿瘤疗效相关[2] - 药效动力学关联：在荷A375异种移植瘤的裸鼠中，GDC-0879 血浆浓度≥0.1 μg/mL（10 mg/kg/天可达到）是实现肿瘤p-MEK1抑制>50%及肿瘤生长抑制的必要条件。30 mg/kg/天剂量下，血浆Cmax达0.4 μg/mL，p-MEK1抑制作用维持>12 h[2] |
| 酶活实验 |
GDC-0879 是一种有效的选择性 B-Raf 抑制剂，IC50 为 0.13 nM。
重组BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ激酶实验：将重组人BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ或BRAFʷᵗ蛋白（50 ng/孔）与激酶缓冲液（25 mM Tris-HCl pH7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、20 μM ATP）、生物素化MEK1衍生肽（底物，2 μM）及不同浓度的GDC-0879（0.001-50 μM）在30°C孵育60 min。采用均相时间分辨荧光（HTRF）实验（铕标记抗磷酸化MEK抗体+链霉亲和素-别藻蓝蛋白）检测磷酸化底物。激酶活性归一化为溶媒对照组，通过非线性回归计算IC₅₀值[1] |
| 细胞实验 |
使用 A375 和 Colo205 细胞测定 GDC-0879 对 pMEK 抑制的体外 IC50 估计值。简而言之，GDC-0879 在一定浓度范围（0.5 nM 至 6.75 μM）下与 A375 或 Colo205 细胞一起孵育 25 分钟。裂解细胞，并将裂解物在 16,100 g 下离心 30 分钟以确定总蛋白水平。在 96 孔板中，使用酶联免疫吸附测定试剂盒测定 pMEK1 和总 MEK1 蛋白的水平。每孔含有 20 μg 蛋白质，样品进行一式两份检查。将 450 nm 处获得的光密度转换为单位每毫升（对于 pMEK1）或纳克每毫升（对于总 MEK1）时，使用重组 pMEK1 或 MEK1 创建的标准曲线作为参考。一旦转换为每纳克单位，即可计算 pMEK1/总 MEK1 比率。 GraphPad Prism 4.02 版用于通过非线性回归估计 pMEK1 抑制的 IC50 值。
黑色素瘤细胞增殖实验：A375/WM266-4/SK-MEL-5细胞以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，用含10%胎牛血清（FBS）的DMEM培养基培养。贴壁24 h后加入GDC-0879（0.001-10 μM），孵育72 h。MTT法（570 nm吸光度）检测细胞活力，使用GraphPad Prism计算IC₅₀值[1] - p-MEK1/p-ERK Western Blot实验：A375细胞以2×10⁵个细胞/孔接种于6孔板，用GDC-0879（0.01-1 μM）处理24 h。细胞用含蛋白酶/磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，裂解液（每泳道20 μg蛋白）经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用抗p-MEK1、总MEK1、p-ERK1/2及总ERK1/2一抗孵育，随后加入HRP标记二抗。化学发光法显影条带，密度分析法量化p-MEK1/p-ERK相对总蛋白的水平[2] |
| 动物实验 |
小鼠：将GDC-0879以15、25、50、100和200 mg/kg的剂量口服给予雌性无胸腺裸鼠（nu/nu，体重25-28 g）。给药后0.5、1、2、4、8和24小时，通过心脏穿刺（终末采血）采集血样（约1 mL），并置于含有K2EDTA抗凝剂的试管中。血液采集后立即与K2EDTA混合，然后冷却。在4℃下以1000-1500g离心5分钟后，于30分钟内从血液样本中提取血浆。不使用时，血浆样本保存在-80°C。
A375黑色素瘤异种移植方案：将悬浮于Matrigel（1:1 v/v）中的A375细胞（5×10⁶个细胞/只）皮下注射到雌性裸鼠（6-7周龄，18-22 g）的右侧腹部。当肿瘤体积达到100-120 mm³时，将小鼠随机分为3组（每组n=8）：载体组（0.5%甲基纤维素+0.2% Tween 80，口服）、GDC-0879 10 mg/kg组（口服，每日一次）、GDC-0879 30 mg/kg组（口服，每日一次）。GDC-0879溶解于载体中（注射体积：10 mL/kg）。治疗持续21天。每3天测量一次肿瘤体积（V = π×L×W²/6）和体重。研究结束时，切除肿瘤：一半用福尔马林固定用于p-MEK1免疫组织化学染色，另一半冷冻用于蛋白质提取[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服吸收：在雌性裸鼠中，口服 GDC-0879（10、30 mg/kg）显示出剂量比例吸收：10 mg/kg 剂量在 1.5 小时（Tmax）达到血浆峰浓度 (Cmax) 0.12 μg/mL；30 mg/kg 剂量在 2 小时达到 Cmax = 0.4 μg/mL。绝对口服生物利用度约为 45%（通过比较口服和静脉注射剂量的 AUC₀₋∞ 计算得出）[2]
- 半衰期和清除率：在裸鼠中，GDC-0879 的末端消除半衰期 (t₁/₂) 为 3.8 小时（口服 30 mg/kg）。系统清除率 (CL) 为 12 mL/min/kg，分布容积 (Vd) 为 0.8 L/kg [2] - 组织分布：在口服 GDC-0879 (30 mg/kg) 的小鼠中，给药后 4 小时肿瘤与血浆浓度比为 1.5，且肿瘤浓度在 12 小时内维持在 p-MEK1 抑制的体外 EC₅₀ 值 (>0.045 μg/mL) 以上 [2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
血浆蛋白结合率：在小鼠血浆中（通过超滤法测定），GDC-0879 在浓度为 0.01–1 μg/mL 时蛋白结合率为 95%，且与浓度无关 [2]
- 急性毒性：在接受 GDC-0879 治疗（剂量高达 30 mg/kg/天，持续 21 天）的裸鼠中，未观察到死亡或严重毒性。体重保持稳定（与基线相比变化 <5%），血清 ALT/AST（肝脏标志物）和肌酐（肾脏标志物）均在正常范围内 [2] - 器官病理学：研究结束时，在接受 GDC-0879（30 mg/kg/天）治疗的小鼠的肝脏、肾脏、心脏或肺组织中未发现组织病理学病变，证实其器官毒性较低 [2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GDC-0879 属于吡唑类化合物，其结构为 1-(2-羟乙基)吡唑，在 3 位和 4 位分别连接有 4-吡啶基和 1-(羟基亚氨基)茚满-5-基取代基。它是一种 B-Raf 抑制剂和抗肿瘤药物。GDC-0879 属于吡唑类、吡啶类、茚满类、酮肟类和伯醇类化合物。GDC-0879 是一种研究级选择性 BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ 抑制剂，被开发为研究 BRAF 介导的信号通路和抗肿瘤作用的工具化合物，用于临床前模型研究。该药物尚未获准用于临床[1,2]
- 作用机制：其抗肿瘤作用是通过特异性抑制BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ激酶活性介导的，从而阻断下游MAPK（RAF-MEK-ERK）信号通路——该通路在BRAFⁿᵉᵗ/ᵛ⁶⁰⁰ᴱ阳性癌症中持续激活，驱动细胞增殖和存活[1,2] - 药效学意义：临床前研究证实，GDC-0879的抗肿瘤疗效与肿瘤p-MEK1（BRAF的直接下游靶点）的持续抑制相关，从而建立了BRAF抑制剂的“靶点结合-疗效”关系[2] - 研究应用：GDC-0879广泛用于研究BRAF抑制的耐药机制（例如，MEK）。重新激活）并验证黑色素瘤模型中的联合策略（例如，BRAF + MEK 抑制剂）[1,2] |
| 分子式 |
C19H18N4O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
334.37
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| 精确质量 |
334.142
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| 元素分析 |
C, 68.25; H, 5.43; N, 16.76; O, 9.57
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| CAS号 |
905281-76-7
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
11717001
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| 外观&性状 |
Light yellow to light brown solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
562.6±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
294.0±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.705
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|
| LogP |
1.12
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|
| tPSA |
83.53
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
480
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
ON=C1CCC2C1=CC=C(C1C(C3C=CN=CC=3)=NN(CCO)C=1)C=2
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| InChi Key |
DEZZLWQELQORIU-RELWKKBWSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H18N4O2/c24-10-9-23-12-17(19(21-23)13-5-7-20-8-6-13)15-1-3-16-14(11-15)2-4-18(16)22-25/h1,3,5-8,11-12,24-25H,2,4,9-10H2/b22-18+
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| 化学名 |
2-[4-[(1E)-1-hydroxyimino-2,3-dihydroinden-5-yl]-3-pyridin-4-ylpyrazol-1-yl]ethanol
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.48 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 View More
配方 3 中的溶解度: 0.5% methylcellulose+0.2% Tween 80: 8 mg/mL 配方 4 中的溶解度: 3.23 mg/mL (9.66 mM) in 0.5% CMC-Na 0.5% Tween-80 (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶 (<60°C). 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9907 mL | 14.9535 mL | 29.9070 mL | |
| 5 mM | 0.5981 mL | 2.9907 mL | 5.9814 mL | |
| 10 mM | 0.2991 mL | 1.4953 mL | 2.9907 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
GDC-0879 is a potent and selective RAF kinase inhibitor. Cancer Res. 2009 Apr 1;69(7):3042-51. |
BRAFV600E mutation predicts for enhanced sensitivity of melanoma, colon, and lung cancer cell lines to RAF inhibitors in vitro. |
Wild-type BRAF melanoma tumors have an attenuated pharmacodynamic response to GDC-0879 treatment relative to BRAFV600E tumor xenografts. |
RAF-IN-2
BRAF ligand-1
CST905
BRAFV600E-IN-2
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COA
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