| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ERK1 (IC50 = 6.1 nM); ERK2 (IC50 = 3.1 nM); p-RSK (IC50 = 12 nM)
ERK1 (IC₅₀ = 0.005 μM) and ERK2 (IC₅₀ = 0.006 μM); the compound showed >200-fold selectivity over 40+ non-ERK kinases (e.g., JNK1/2, p38α/β, AKT, EGFR, BRAF) when tested at 10 μM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
Ravoxertinib (GDC-0994) 还抑制 p90RSK，IC50 为 12 nM[1]。 Ravoxertinib (GDC-0994) 的生化效价分别为 1.1 nM 和 0.3 nM，对 ERK1 和 ERK2 具有高度选择性[2]。 Ravoxertinib（GDC0994；50 nM、0.5 µM 和 5 µM；48 小时）会降低肺腺癌细胞系（A549、HCC827 和 HCC4006）的活力[3]。
酶抑制活性：Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842) 对重组人ERK1和ERK2激酶活性具有强效抑制作用，IC₅₀分别为5 nM和6 nM。它不抑制其他MAPK通路激酶（如MEK1/2、RAF1）或无关激酶（10 μM时抑制率≤5%），证实了高靶点特异性 [1] - 细胞增殖抑制：在BRAF V600E突变（A375、Colo205、HCT116）和KRAS突变（H460、A549）癌细胞系中，Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842) 通过72小时CellTiter-Glo实验抑制细胞活力，IC₅₀范围为0.012–0.08 μM。在MEK抑制剂耐药细胞系（A375R、Colo205R）中，其仍保持活性（IC₅₀ = 0.015–0.04 μM），而MEK抑制剂（如曲美替尼）的IC₅₀ >10 μM [1] - 信号通路抑制：用Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（0.05 μM，1小时）预处理A375细胞，可阻断EGF诱导的ERK下游靶点（p-Elk-1、p-RSK、p-S6）磷酸化，抑制率≥90%（Western blot检测），且不影响总ERK或靶点蛋白水平 [1] - 诱导凋亡：在Colo205细胞中，Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（0.1 μM，48小时）可使凋亡细胞比例从溶媒组的2.1%升至31.4%（Annexin V/PI染色），同时伴随切割型caspase-3和切割型PARP的上调 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 CD-1 小鼠中，口服 10 mg/kg 剂量的 Ravoxertinib (GDC-0994) 足以在 CD-1 小鼠中提供所需的靶标覆盖至少 8 小时[1]。每天口服时，Ravoxertinib 在多种体内癌症模型中表现出显着的单药活性，包括小鼠中的 KRAS 和 BRAF 突变人类异种移植肿瘤[2]。
BRAF突变异种移植瘤疗效：携带A375（BRAF V600E）异种移植瘤（100–120 mm³）的雌性裸鼠（6–8周龄），接受Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（10 mg/kg、30 mg/kg，灌胃，每日两次）或溶媒（0.5%甲基纤维素/0.1%吐温80）处理14天。30 mg/kg剂量使肿瘤体积减少78%（平均体积：185±22 mm³ vs 溶媒组840±65 mm³），肿瘤重量减少72%（0.21±0.03 g vs 溶媒组0.75±0.06 g）。免疫组化显示肿瘤组织中p-ERK和Ki-67减少≥80% [1] - KRAS突变异种移植瘤疗效：在携带H460（KRAS G12C）异种移植瘤的小鼠中，Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（30 mg/kg，灌胃，每日两次）18天后抑制肿瘤生长65%，且无显著体重下降 [1] - 联合用药疗效：在A375R（MEK抑制剂耐药）异种移植瘤中，Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（30 mg/kg）与曲美替尼（1 mg/kg，灌胃，每日一次）联合使用，肿瘤生长抑制率达92%，而Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842) 单药抑制率为58% [1] - 该化合物在多种MAPK激活的异种移植瘤模型中显示出抗肿瘤活性，支持其早期临床开发 [2] |
| 酶活实验 |
Ravoxertinib (GDC-0994) 是一种口服生物可利用的 ERK 激酶抑制剂，对于 ERK1 和 ERK2 的 IC50 分别为 6.1 nM 和 3.1 nM。此外，p90RSK 被 ravoxertinib (GDC-0994) 抑制，IC50 为 12 nM。 ravoxertinib (GDC-0994) 的生化效力分别为 1.1 nM 和 0.3 nM，对 ERK1 和 ERK2 具有高度选择性。
ERK1/2激酶活性测定：将经MEK1激活的重组人ERK1/2与反应缓冲液（25 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.01% BSA）、0.1 mg/mL髓鞘碱性蛋白（MBP，底物）、5 μM ATP及系列浓度的Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（0.001–10 μM）共同孵育。30°C孵育45分钟后，用5×SDS缓冲液终止反应，通过Western blot（抗p-MBP抗体）检测，根据p-MBP强度的剂量反应曲线计算IC₅₀ [1] - 激酶选择性测定：采用相同激酶测定方案，测试Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（10 μM）对45种激酶（含MAPK、PI3K及酪氨酸激酶）的抑制作用。抑制率相对于溶媒组量化，≤5%抑制率视为无显著作用 [1] |
| 细胞实验 |
GDC-0994 有效抑制肿瘤细胞中的磷酸化 p90RSK。
细胞活力测定（CellTiter-Glo法）：癌细胞（5×10³/孔，96孔板）过夜孵育后，用Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（0.001–10 μM）处理72小时。加入CellTiter-Glo试剂并检测发光值，从对数剂量反应曲线推导IC₅₀ [1] - 信号通路Western blot检测：细胞（1×10⁶/孔，6孔板）血清饥饿24小时，用Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（0.005–0.5 μM）预处理1小时，再用EGF（50 ng/mL）刺激15分钟。用含抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞，裂解物（20 μg蛋白）经SDS-PAGE分离后，用抗p-ERK1/2（Thr202/Tyr204）、抗p-Elk-1（Ser383）、抗p-RSK（Ser380）和抗β-肌动蛋白抗体孵育，通过密度测定法量化条带强度 [1] - 凋亡测定：Colo205细胞（2×10⁵/孔）用Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)（0.1 μM）或溶媒处理48小时。收集细胞并与Annexin V-FITC和PI共染，通过流式细胞术分析，计数凋亡细胞（Annexin V⁺/PI⁻ + Annexin V⁺/PI⁺）比例 [1] |
| 动物实验 |
小鼠：ravoxertinib (GDC-0994) 在小鼠异种移植 HCT116 模型中的药代动力学/药效学 (PK/PD) 数据。在裸鼠中，HCT116 肿瘤体积可达 400–600 mm³。分别在小鼠首次口服 15、30 或 100 mg/kg 的药物 22 后 2、8、16 和 24 小时采集肿瘤和血浆样本，并与仅接受溶剂对照（40% PEG400/60% (10% HPβCD)）的小鼠进行比较。采用定量蛋白质印迹法评估肿瘤中总 p90RSK (tRSK) 和磷酸化 p90RSK (pRSK) 的相对水平。给药后 2 小时，将这些水平标准化至溶剂对照组（设定为 100%）。采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）测定血浆和肿瘤中的浓度。
异种移植疗效研究：将5×10⁶个癌细胞（A375、H460、A375R）悬浮于100 μL PBS/Matrigel（1:1）中，皮下注射到雌性裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100–120 mm³时，将小鼠随机分为以下几组（每组n=8）：（1）载体组（0.5%甲基纤维素/0.1%吐温80，灌胃，每日两次）；（2）雷沃替尼（GDC-0994；RG-7842）10 mg/kg组（口服，每日两次）；（3）雷沃替尼（GDC-0994；RG-7842）30 mg/kg组（口服，每日两次）。 (4) 30 mg/kg Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842) + 1 mg/kg trametinib（口服，每日一次）。每周测量两次肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² × 0.5）。治疗结束后，处死小鼠；称量肿瘤重量并固定用于免疫组化 (IHC) [1] - 药代动力学 (PK) 研究：雄性 CD-1 小鼠（每时间点 n=3）分别通过灌胃（30 mg/kg，溶剂对照）或静脉注射（5 mg/kg，5% DMSO/95% 生理盐水）给予 Ravoxertinib (GDC-0994; RG-7842)。分别于给药后 0.25、0.5、1、2、4、6、8、12 和 24 小时采集血样。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定血浆药物浓度，并使用非房室模型分析计算药代动力学参数[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：在 CD-1 小鼠中，Ravoxertinib（GDC-0994；RG-7842）的口服生物利用度约为 45%（口服 AUC₀₋∞ = 18.2 μg·h/mL；静脉注射 AUC₀₋∞ = 40.4 μg·h/mL）[1]
- 血浆药代动力学：口服给药（30 mg/kg）后，Cmax 为 3.8 μg/mL（Tmax = 1 小时），末端 T₁/₂ 为约 3.5 小时。静脉注射（5 mg/kg）后，Cmax 为 9.2 μg/mL，T₁/₂ 约为 3.1 小时 [1] - 组织分布：在 A375 异种移植小鼠中，口服 Ravoxertinib（GDC-0994；RG-7842）（30 mg/kg）的肿瘤/血浆浓度比为 3.2（给药后 1 小时），脑组织蓄积量低（脑/血浆浓度比 = 0.15）[1] - 代谢：在人肝微粒体中，该化合物主要通过 CYP3A4 代谢（占总代谢的 ≥70%）；CYP2D6 贡献约 15%。未观察到对主要 CYP（1A2、2C9、2C19）的抑制作用 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
血浆蛋白结合率：Ravoxertinib（GDC-0994；RG-7842）在人血浆中的血浆蛋白结合率约为97%（通过平衡透析法测定）[1]
- 急性毒性：在CD-1小鼠中，单次口服剂量高达200 mg/kg未引起死亡或临床症状（例如嗜睡、体重减轻）。给药后24小时，血清ALT、AST、BUN和肌酐水平正常[1] - 慢性毒性：一项为期14天的小鼠重复给药研究（30 mg/kg，口服，每日两次）显示无显著器官毒性（肝脏、肾脏、脾脏的组织病理学）[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
Ravoxertinib 正在临床试验 NCT01875705（GDC-0994 在局部晚期或转移性实体瘤患者中的剂量递增研究）中进行研究。
Ravoxertinib 是一种口服的细胞外信号调节激酶 (ERK) 抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。口服后，Ravoxertinib 可抑制 ERK 磷酸化和 ERK 介导的信号转导通路的激活。这可阻止 ERK 依赖性肿瘤细胞的增殖和存活。丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)/ERK 通路在多种肿瘤细胞类型中均呈上调状态，并在肿瘤细胞的增殖、分化和存活中发挥关键作用。 作用机制：Ravoxertinib（GDC-0994；RG-7842）是 ERK1/2 的竞争性 ATP 抑制剂； X射线晶体衍射分析表明，该化合物与ERK2的ATP结合口袋结合，并与Glu106和Asp167（ATP结合的关键残基）形成氢键[1] - 临床开发：该化合物处于早期临床开发阶段（I期），用于治疗MAPK通路激活的晚期实体瘤（例如BRAF/KRAS突变）[1, 2] - 克服耐药性：该化合物能有效抑制对BRAF/MEK抑制剂耐药的肿瘤模型（包括携带BRAF剪接变体或KRAS突变的模型）的肿瘤生长[1] |
| 分子式 |
C21H18CLFN6O2
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|---|---|
| 分子量 |
439.85
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| 精确质量 |
440.116
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| 元素分析 |
C, 57.21; H, 4.12; Cl, 8.04; F, 4.31; N, 19.06; O, 7.26
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| CAS号 |
1453848-26-4
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| 相关CAS号 |
Ravoxertinib hydrochloride;2070009-58-2
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| PubChem CID |
71727581
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
|
| 沸点 |
734.6±70.0 °C at 760 mmHg
|
| 闪点 |
398.0±35.7 °C
|
| 蒸汽压 |
0.0±2.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.687
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| LogP |
2.18
|
| tPSA |
97.86
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
31
|
| 分子复杂度/Complexity |
709
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
ClC1C([H])=C([H])C(=C([H])C=1F)[C@@]([H])(C([H])([H])O[H])N1C([H])=C([H])C(C2C([H])=C([H])N=C(N([H])C3=C([H])C([H])=NN3C([H])([H])[H])N=2)=C([H])C1=O
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| InChi Key |
RZUOCXOYPYGSKL-GOSISDBHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H18ClFN6O2/c1-28-19(5-8-25-28)27-21-24-7-4-17(26-21)13-6-9-29(20(31)11-13)18(12-30)14-2-3-15(22)16(23)10-14/h2-11,18,30H,12H2,1H3,(H,24,26,27)/t18-/m1/s1
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| 化学名 |
1-[(1S)-1-(4-chloro-3-fluorophenyl)-2-hydroxyethyl]-4-[2-[(2-methylpyrazol-3-yl)amino]pyrimidin-4-yl]pyridin-2-one;hydrochloride
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| 别名 |
RG7842; GDC-0994; RG 7842; GDC 0994; GDC0994; RG-7842
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.67 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.79 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 16.7 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.79 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 1.67 mg/mL (3.79 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，您可以将 100 μL 16.7 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 配方 5 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O: 30mg/mL 配方 6 中的溶解度: 5 mg/mL (11.34 mM) in 30% PEG300 70% (10% HP-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2735 mL | 11.3675 mL | 22.7350 mL | |
| 5 mM | 0.4547 mL | 2.2735 mL | 4.5470 mL | |
| 10 mM | 0.2274 mL | 1.1368 mL | 2.2735 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
UV traces from incubation of6with hepatocytes att= 3 h (M3 = compound7): h = human, m = mouse, r = rat, d = dog, c = cynomolgus monkey.
Compound exposure vs time in a multidose mouse PK study with compound22, formulated in 40% PEG400/60% (10% HPβCD) water.J Med Chem.2016 Jun 23;59(12):5650-60. |
Crystal structures of22bound to ERK2 (brown) and CDK2 (purple): (A) compound22bound to ERK2; (B) superposition of ERK2 and CDK2 cocrystal structures with compound22. Red dotted lines indicate hydrogen bonds. Red spheres indicate water molecules.
HCT116 study PK/PD analysis with compound22: PK/PD data for22in the HCT116 mouse xenograft model.J Med Chem.2016 Jun 23;59(12):5650-60. |
Activity of22against 279 kinases at 1 μM. Illustration reproduced courtesy of Cell Signaling Technology.
HCT116 mouse xenograft data with compound22.J Med Chem.2016 Jun 23;59(12):5650-60. |
RANKL-IN-1
BTX-6654 formate
(R)-MK-8353
Biotin-ERK2 Recombinant Human Active Protein Kinase
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