| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| 5g |
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| 10g |
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| 25g |
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| 50g |
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| 100g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aminoglycoside
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| 体外研究 (In Vitro) |
遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)是许多原核生物和真核生物的抑制剂,浓度为 1-300 微克/mL。编码氨基糖苷 3-磷酸转移酶 APT 3 II 的 Neo 基因赋予 G418 抗性,常用于实验室研究中选择基因工程细胞[1]。一般来说,对于细菌和藻类,使用 5 mg/L 或更低的浓度,对于哺乳动物细胞,使用约 400 mg/L 的浓度进行选择,使用 200 mg/L 的浓度进行维持。抗性克隆选择可能需要 1 至 3 周的时间[2]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
连续三天使用遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)(40 和 80 mg/kg)足以消除受感染小鼠中所有未转染的布氏布氏锥虫寄生虫[3]。
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| 细胞实验 |
棘阿米巴是一种广泛分布的机会性寄生虫,可引起威胁视力的角膜炎和危及生命的脑炎。这种变形虫的囊肿阶段对目前使用的治疗方法特别具有耐药性,因此迫切需要替代药物。越来越多的证据支持棘阿米巴中存在程序性细胞死亡系统(PCD),虽然一些特征是高等真核生物细胞共有的,但其他特征不同。希望通过了解这些差异,我们可以将其作为新的药物干预靶点,以激活变形虫中的PCD途径,而不是入侵的人类组织。在这里,我们使用氨基糖苷G418来激活棘阿米巴中的PCD。这种药物使治疗后的变形虫发生了形状变化。细胞聚集和收缩,6小时后观察到类似脊椎动物细胞“凋亡体”的细胞片段。G418导致细胞内钙在处理6小时后从24nM的静止水平增加到60nM。通过ΔΨm报告染料JC-1和CTC测定线粒体功能,一种氧化还原染料在处理过程中受到抑制,我们发现细胞色素c从线粒体中释放。用Hoechst染色的细胞首先显示染色质结构的改变,然后用G418处理显示细胞核的泡囊化,尽管我们在PCD的早期阶段没有发现基因组DNA的明显破坏[5]。
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| 动物实验 |
小鼠RML和22L朊病毒接种物取自RML或22L感染的CAD5细胞(34)。将细胞培养至汇合,用1 ml PBS(每10 cm培养皿)刮取细胞,然后使用Minilys珠状匀浆器和CK14匀浆管(Bertin)进行匀浆。向刮取的培养物中加入Benzonase(50单位/ml;EMD Millipore #70746-4),然后以最高速度匀浆3次,每次30秒,共3个循环,每个循环之间冰上孵育5分钟。细胞匀浆液储存于−80 °C。叙利亚仓鼠263K朊病毒接种物以类似方法制备,取自稳定表达HaPrP的263K感染的CAD5-PrP−/−细胞。[6]
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| 参考文献 |
[1]. An antibiotic selection marker for nematode transgenesis. Nat Methods. 2010;7(9):721-723. [5]. G418 induces programmed cell death in Acanthamoeba through the elevation of intracellular calcium and cytochrome c translocation. Parasitol Res. 2019 Feb;118(2):641-651.[6]. J Biol Chem. 2021 Sep;297(3):101073. doi: 10.1016/j.jbc.2021.101073. Epub 2021 Aug 12. |
| 其他信息 |
朊病毒能够在培养细胞中复制,这极大地促进了朊病毒的研究和朊病毒疾病候选疗法的发现。在内源性朊病毒蛋白(PrP)表达水平低或不表达的细胞中表达不同物种的朊病毒蛋白,这种模式拓展了可繁殖的朊病毒株的范围。在这些系统中,稳定表达目标PrP的细胞通常是通过共表达选择标记物并用抗生素处理而获得的。本文报道了一项意外发现:氨基糖苷类抗生素G418(遗传霉素)会干扰稳定转染的培养细胞感染朊病毒的能力。在G418抗性的N2a或CAD5细胞系中,G418的存在降低了经RML或22L小鼠朊病毒株攻击后产生的蛋白酶抗性PrP的水平。 G418 还能干扰表达仓鼠 PrP 的细胞感染 263K 株仓鼠朊病毒。有趣的是,G418 对已建立朊病毒感染的细胞中蛋白酶抗性 PrP 水平的影响甚微或没有影响,这表明 G418 选择性地干扰了朊病毒的初始感染。由于 G418 处理对细胞内 PrP 水平或其定位没有明显影响,这提示 G418 可能特异性地靶向朊病毒组装或参与朊病毒感染早期阶段的过程。[6]
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| 分子式 |
C20H44N4O18S2
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|---|---|
| 分子量 |
692.71
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| 精确质量 |
692.209
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| 元素分析 |
C, 34.68; H, 6.40; N, 8.09; O, 41.57; S, 9.26
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| CAS号 |
108321-42-2
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| 相关CAS号 |
G-418;49863-47-0; 49863-47-0; 108321-42-2 (sulfate)
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| PubChem CID |
206347
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 沸点 |
1012.1ºC at 760mmHg
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| 闪点 |
565.9ºC
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| 蒸汽压 |
0mmHg at 25°C
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| 来源 |
Micromonospora rhodorangea
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| tPSA |
414.35
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| 氢键供体(HBD)数目 |
14
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| 氢键受体(HBA)数目 |
22
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
44
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| 分子复杂度/Complexity |
763
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| 定义原子立体中心数目 |
15
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| SMILES |
S(=O)(=O)(O[H])O[H].S(=O)(=O)(O[H])O[H].O([C@@]1([H])C([H])(C([H])(C([H])([C@]([H])(C([H])(C([H])([H])[H])O[H])O1)O[H])O[H])N([H])[H])C1([H])C([H])(C([H])([H])C([H])(C([H])(C1([H])O[H])O[C@@]1([H])C([H])(C([H])([C@](C([H])([H])[H])(C([H])([H])O1)O[H])N([H])C([H])([H])[H])O[H])N([H])[H])N([H])[H]
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| InChi Key |
UHEPSJJJMTWUCP-DHDYTCSHSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H40N4O10.2H2O4S/c1-6(25)14-11(27)10(26)9(23)18(32-14)33-15-7(21)4-8(22)16(12(15)28)34-19-13(29)17(24-3)20(2,30)5-31-19;2*1-5(2,3)4/h6-19,24-30H,4-5,21-23H2,1-3H3;2*(H2,1,2,3,4)/t6-,7+,8-,9-,10-,11+,12+,13-,14-,15-,16+,17-,18-,19-,20+;;/m1../s1
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| 化学名 |
(2R,3S,4R,5R,6S)-5-amino-6-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-dihydroxy-5-methyl-4-(methylamino)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy)-2-hydroxycyclohexyl)oxy)-2-((R)-1-hydroxyethyl)tetrahydro-2H-pyran-3,4-diol bis(sulfate)
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| 别名 |
Geneticin G418; Geneticin G-418; Geneticin G 418; Antibiotic G418;
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| HS Tariff Code |
2934.99.03.00
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
Water : 100~125 mg/mL(~180.45 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (72.18 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。
配方 2 中的溶解度: Saline: 30mg/ml (43.31mM) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.4436 mL | 7.2180 mL | 14.4361 mL | |
| 5 mM | 0.2887 mL | 1.4436 mL | 2.8872 mL | |
| 10 mM | 0.1444 mL | 0.7218 mL | 1.4436 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);
4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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