Geneticin G418

别名: Geneticin G418; Geneticin G-418; Geneticin G 418; Antibiotic G418; G-418 硫酸盐;硫酸G418;G418硫酸氢盐;G418硫酸盐;遗传霉素硫酸盐; G-418硫酸盐溶液; G418二硫酸盐; 抗菌素G-418;抗生物質G418;遗传霉素重硫酸盐G418硫酸盐细胞培养验证; 抗生物G418;遗传霉素重硫酸盐
目录号: V10522 纯度: ≥98%
遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)是一种有效的庆大霉素 B1 类氨基糖苷类抗生素,通过抑制原核和真核细胞中的延伸步骤来阻断多肽合成。
Geneticin G418 CAS号: 108321-42-2
产品类别: Bacterial
产品仅用于科学研究,不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
50mg
100mg
500mg
1g
5g
10g
25g
50g
100g
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Other Forms of Geneticin G418:

  • G-418 (Geneticin; Antibiotic G-418)
  • Org-41841
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纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

纯度: ≥98%

产品描述
遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)是一种有效的庆大霉素 B1 类氨基糖苷类抗生素,通过抑制原核和真核细胞中的延伸步骤来阻断多肽合成。
生物活性&实验参考方法
靶点
Aminoglycoside
体外研究 (In Vitro)
遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)是许多原核生物和真核生物的抑制剂,浓度为 1-300 微克/mL。编码氨基糖苷 3-磷酸转移酶 APT 3 II 的 Neo 基因赋予 G418 抗性,常用于实验室研究中选择基因工程细胞[1]。一般来说,对于细菌和藻类,使用 5 mg/L 或更低的浓度,对于哺乳动物细胞,使用约 400 mg/L 的浓度进行选择,使用 200 mg/L 的浓度进行维持。抗性克隆选择可能需要 1 至 3 周的时间[2]。
体内研究 (In Vivo)
连续三天使用遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)(40 和 80 mg/kg)足以消除受感染小鼠中所有未转染的布氏布氏锥虫寄生虫[3]。
细胞实验
棘阿米巴是一种广泛分布的机会性寄生虫,可引起威胁视力的角膜炎和危及生命的脑炎。这种变形虫的囊肿阶段对目前使用的治疗方法特别具有耐药性,因此迫切需要替代药物。越来越多的证据支持棘阿米巴中存在程序性细胞死亡系统(PCD),虽然一些特征是高等真核生物细胞共有的,但其他特征不同。希望通过了解这些差异,我们可以将其作为新的药物干预靶点,以激活变形虫中的PCD途径,而不是入侵的人类组织。在这里,我们使用氨基糖苷G418来激活棘阿米巴中的PCD。这种药物使治疗后的变形虫发生了形状变化。细胞聚集和收缩,6小时后观察到类似脊椎动物细胞“凋亡体”的细胞片段。G418导致细胞内钙在处理6小时后从24nM的静止水平增加到60nM。通过ΔΨm报告染料JC-1和CTC测定线粒体功能,一种氧化还原染料在处理过程中受到抑制,我们发现细胞色素c从线粒体中释放。用Hoechst染色的细胞首先显示染色质结构的改变,然后用G418处理显示细胞核的泡囊化,尽管我们在PCD的早期阶段没有发现基因组DNA的明显破坏[5]。
动物实验
小鼠RML和22L朊病毒接种物取自RML或22L感染的CAD5细胞(34)。将细胞培养至汇合,用1 ml PBS(每10 cm培养皿)刮取细胞,然后使用Minilys珠状匀浆器和CK14匀浆管(Bertin)进行匀浆。向刮取的培养物中加入Benzonase(50单位/ml;EMD Millipore #70746-4),然后以最高速度匀浆3次,每次30秒,共3个循环,每个循环之间冰上孵育5分钟。细胞匀浆液储存于−80 °C。叙利亚仓鼠263K朊病毒接种物以类似方法制备,取自稳定表达HaPrP的263K感染的CAD5-PrP−/−细胞。[6]
参考文献

[1]. An antibiotic selection marker for nematode transgenesis. Nat Methods. 2010;7(9):721-723.

[2]. A novel G418 conjugate results in targeted selection of genetically protected hepatocytes without bystander toxicity. Bioconjug Chem. 2007;18(6):1965-1971.

[3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12.

[4]. A new selective agent for eukaryotic cloning vectors. Am J Trop Med Hyg. 1980;29(5 Suppl):1089-1092.

[5]. G418 induces programmed cell death in Acanthamoeba through the elevation of intracellular calcium and cytochrome c translocation. Parasitol Res. 2019 Feb;118(2):641-651.
[6]. J Biol Chem. 2021 Sep;297(3):101073. doi: 10.1016/j.jbc.2021.101073. Epub 2021 Aug 12.
其他信息
朊病毒能够在培养细胞中复制,这极大地促进了朊病毒的研究和朊病毒疾病候选疗法的发现。在内源性朊病毒蛋白(PrP)表达水平低或不表达的细胞中表达不同物种的朊病毒蛋白,这种模式拓展了可繁殖的朊病毒株的范围。在这些系统中,稳定表达目标PrP的细胞通常是通过共表达选择标记物并用抗生素处理而获得的。本文报道了一项意外发现:氨基糖苷类抗生素G418(遗传霉素)会干扰稳定转染的培养细胞感染朊病毒的能力。在G418抗性的N2a或CAD5细胞系中,G418的存在降低了经RML或22L小鼠朊病毒株攻击后产生的蛋白酶抗性PrP的水平。 G418 还能干扰表达仓鼠 PrP 的细胞感染 263K 株仓鼠朊病毒。有趣的是,G418 对已建立朊病毒感染的细胞中蛋白酶抗性 PrP 水平的影响甚微或没有影响,这表明 G418 选择性地干扰了朊病毒的初始感染。由于 G418 处理对细胞内 PrP 水平或其定位没有明显影响,这提示 G418 可能特异性地靶向朊病毒组装或参与朊病毒感染早期阶段的过程。[6]
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C20H44N4O18S2
分子量
692.71
精确质量
692.209
元素分析
C, 34.68; H, 6.40; N, 8.09; O, 41.57; S, 9.26
CAS号
108321-42-2
相关CAS号
G-418;49863-47-0; 49863-47-0; 108321-42-2 (sulfate)
PubChem CID
206347
外观&性状
White to off-white solid powder
沸点
1012.1ºC at 760mmHg
闪点
565.9ºC
蒸汽压
0mmHg at 25°C
来源
Micromonospora rhodorangea
tPSA
414.35
氢键供体(HBD)数目
14
氢键受体(HBA)数目
22
可旋转键数目(RBC)
6
重原子数目
44
分子复杂度/Complexity
763
定义原子立体中心数目
15
SMILES
S(=O)(=O)(O[H])O[H].S(=O)(=O)(O[H])O[H].O([C@@]1([H])C([H])(C([H])(C([H])([C@]([H])(C([H])(C([H])([H])[H])O[H])O1)O[H])O[H])N([H])[H])C1([H])C([H])(C([H])([H])C([H])(C([H])(C1([H])O[H])O[C@@]1([H])C([H])(C([H])([C@](C([H])([H])[H])(C([H])([H])O1)O[H])N([H])C([H])([H])[H])O[H])N([H])[H])N([H])[H]
InChi Key
UHEPSJJJMTWUCP-DHDYTCSHSA-N
InChi Code
InChI=1S/C20H40N4O10.2H2O4S/c1-6(25)14-11(27)10(26)9(23)18(32-14)33-15-7(21)4-8(22)16(12(15)28)34-19-13(29)17(24-3)20(2,30)5-31-19;2*1-5(2,3)4/h6-19,24-30H,4-5,21-23H2,1-3H3;2*(H2,1,2,3,4)/t6-,7+,8-,9-,10-,11+,12+,13-,14-,15-,16+,17-,18-,19-,20+;;/m1../s1
化学名
(2R,3S,4R,5R,6S)-5-amino-6-(((1R,2S,3S,4R,6S)-4,6-diamino-3-(((2R,3R,4R,5R)-3,5-dihydroxy-5-methyl-4-(methylamino)tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy)-2-hydroxycyclohexyl)oxy)-2-((R)-1-hydroxyethyl)tetrahydro-2H-pyran-3,4-diol bis(sulfate)
别名
Geneticin G418; Geneticin G-418; Geneticin G 418; Antibiotic G418;
HS Tariff Code
2934.99.03.00
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意: 请将本产品存放在密封且受保护的环境中(例如氮气保护),避免吸湿/受潮。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
Water : 100~125 mg/mL(~180.45 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 50 mg/mL (72.18 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加,逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶。

配方 2 中的溶解度: Saline: 30mg/ml (43.31mM)

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案:
1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL;

3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用!
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.4436 mL 7.2180 mL 14.4361 mL
5 mM 0.2887 mL 1.4436 mL 2.8872 mL
10 mM 0.1444 mL 0.7218 mL 1.4436 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液):对于大多数产品,InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如:5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度),个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息,或者很难将产品溶解在溶液中,请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算(摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等);

4、母液配好之后,将其分装到常规用量,并储存在-20°C或-80°C,尽量减少反复冻融循环。

计算器

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度,具体如下:

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示:
假如化合物的分子量为350.26 g/mol,在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少?
  • 在分子量(MW)框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在“体积”框中输入5,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式,您可以计算体积和浓度。

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如,可以输入C1、C2和V2来计算V1,具体如下:

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液?
使用方程式C1V1=C2V2,其中C1=10mM,C2=25μM,V2=25 ml,V1未知:
  • 在C1框中输入10,然后选择正确的单位(mM)
  • 在C2框中输入25,然后选择正确的单位(μM)
  • 在V2框中输入25,然后选择正确的单位(mL)
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL(0.1 ml)出现在V1框中
g/mol

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成,具体如下:

注:化学分子式大小写敏感:C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量(分子量)的说明:
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量),请输入化学/分子式,然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义:
  • 分子质量(或分子量)是一种物质的一个分子的质量,用统一的原子质量单位(u)表示。(1u等于碳-12中一个原子质量的1/12)
  • 摩尔质量(摩尔重量)是一摩尔物质的质量,以g/mol表示。
/

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器(澄清溶液)
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶/难溶于水的化合物),不同的产品和批次配方组成不同,如对配方有疑问,可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外,请注意这只是一个配方计算器,而不是特定产品的确切配方。
+
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计算结果:

工作液浓度 mg/mL;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • GD3 synthase gene expression patterns in human breast cancer cells. [3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12.
  • The pc3-GD3s cells show changes in morphology but not in cell growth .[3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12.
  • Downregulation of ICAM-1 expression (A, B, C, D, E) in pc3-GD3s cells. [3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12.
  • Differential regulation of ICAM-1 expression in pc3-GD3s-trasnfected SK-BR3 (ER-) and MCF-7 (ER+) cells. [3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12.
  • Accumulation of the GD2 ganglioside in pc3-GD3s cells. (A) The total ganglioside on a HPTLC plate. [3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12.
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