| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 100mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Aminoglycoside
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| 体外研究 (In Vitro) |
G-418(500 μg/mL,12 天)用于耐药 LNCaP 细胞筛选 [1]。
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| 体内研究 (In Vivo) |
连续三天使用遗传霉素 G418(G-418 二硫酸盐)(40 和 80 mg/kg)足以消除受感染小鼠中所有未转染的布氏布氏锥虫寄生虫[3]。
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| 细胞实验 |
棘阿米巴是一种广泛分布的机会性寄生虫,可引起威胁视力的角膜炎和危及生命的脑炎。这种变形虫的囊肿阶段对目前使用的治疗方法特别具有耐药性,因此迫切需要替代药物。越来越多的证据支持棘阿米巴中存在程序性细胞死亡系统(PCD),虽然一些特征是高等真核生物细胞共有的,但其他特征不同。希望通过了解这些差异,我们可以将其作为新的药物干预靶点,以激活变形虫中的PCD途径,而不是入侵的人类组织。在这里,我们使用氨基糖苷G418来激活棘阿米巴中的PCD。这种药物使治疗后的变形虫发生了形状变化。细胞聚集和收缩,6小时后观察到类似脊椎动物细胞“凋亡体”的细胞片段。G418导致细胞内钙在处理6小时后从24nM的静止水平增加到60nM。通过ΔΨm报告染料JC-1和CTC测定线粒体功能,一种氧化还原染料在处理过程中受到抑制,我们发现细胞色素c从线粒体中释放。用Hoechst染色的细胞首先显示染色质结构的改变,然后用G418处理显示细胞核的泡囊化,尽管我们在PCD的早期阶段没有发现基因组DNA的明显破坏[5]。
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| 动物实验 |
小鼠RML和22L朊病毒接种物取自RML或22L感染的CAD5细胞(34)。将细胞培养至汇合,用1 ml PBS(每10 cm培养皿)刮取细胞,然后使用Minilys珠状匀浆器和CK14匀浆管(Bertin)进行匀浆。向刮取的培养物中加入Benzonase(50单位/ml;EMD Millipore #70746-4),然后以最高速度匀浆3次,每次30秒,共3个循环,每个循环之间冰上孵育5分钟。细胞匀浆液储存于−80 °C。叙利亚仓鼠263K朊病毒接种物以类似方法制备,取自稳定表达HaPrP的263K感染的CAD5-PrP−/−细胞。[6]
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| 参考文献 |
[1]. An antibiotic selection marker for nematode transgenesis. Nat Methods. 2010;7(9):721-723.
[2]. A novel G418 conjugate results in targeted selection of genetically protected hepatocytes without bystander toxicity. Bioconjug Chem. 2007;18(6):1965-1971. [3]. Disialyl GD2 ganglioside suppresses ICAM-1-mediated invasiveness in human breast cancer MDA-MB231 cells. Int J Biol Sci. 2017;13(3):265-275. Published 2017 Feb 12. [4]. A new selective agent for eukaryotic cloning vectors. Am J Trop Med Hyg. 1980;29(5 Suppl):1089-1092. [5]. G418 induces programmed cell death in Acanthamoeba through the elevation of intracellular calcium and cytochrome c translocation. Parasitol Res. 2019 Feb;118(2):641-651. [6]. J Biol Chem. 2021 Sep;297(3):101073. doi: 10.1016/j.jbc.2021.101073. Epub 2021 Aug 12. [7]. S Bennett, et al. Reliable method of isolating transfected clones from the LNCaP human prostatic cell line. Biotechniques. 1997 Jul;23(1):66, 68, 70. |
| 其他信息 |
遗传霉素(也称G418)是一种氨基糖苷类抗生素,其结构与庆大霉素B1相似,由红花小单孢菌(Micromonospora rhodorangea)产生。遗传霉素通过抑制原核细胞和真核细胞中多肽链的延伸步骤来阻断多肽合成,常用于实验室研究中筛选基因工程细胞。遗传霉素的抗性是由Tn5转运体上的neo基因赋予的,该基因编码氨基糖苷3'-磷酸转移酶APH 3' II。
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| 分子式 |
C20H40N4O10
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|---|---|
| 精确质量 |
496.274
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| CAS号 |
49863-47-0
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| 相关CAS号 |
G-418 disulfate;108321-42-2
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| PubChem CID |
123865
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| 外观&性状 |
Typically exists as solid at room temperature
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| 密度 |
1.47 g/cm3
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| 沸点 |
760.3ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
413.6ºC
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| LogP |
-5.8
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| tPSA |
248.39
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| 氢键供体(HBD)数目 |
10
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| 氢键受体(HBA)数目 |
14
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
34
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| 分子复杂度/Complexity |
681
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| 定义原子立体中心数目 |
15
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| SMILES |
CN[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@H](N)C[C@H](N)[C@@H](O[C@H]3O[C@H]([C@H](O)C)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]3N)[C@@H]2O)OC[C@]1(C)O
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| InChi Key |
BRZYSWJRSDMWLG-DJWUNRQOSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H40N4O10/c1-6(25)14-11(27)10(26)9(23)18(32-14)33-15-7(21)4-8(22)16(12(15)28)34-19-13(29)17(24-3)20(2,30)5-31-19/h6-19,24-30H,4-5,21-23H2,1-3H3/t6-,7+,8-,9-,10-,11+,12+,13-,14-,15-,16+,17-,18-,19-,20+/m1/s1
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| 化学名 |
(2R,3R,4R,5R)-2-[(1S,2S,3R,4S,6R)-4,6-diamino-3-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-amino-4,5-dihydroxy-6-[(1R)-1-hydroxyethyl]oxan-2-yl]oxy-2-hydroxycyclohexyl]oxy-5-methyl-4-(methylamino)oxane-3,5-diol
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| 别名 |
geneticin; 49863-47-0; G418; antibiotic G 418; antibiotic G-418; G-418; G 418; A08F5XTI6G;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O: ~50 mg/mL
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| 溶解度 (体内实验) |
注意: 如下所列的是一些常用的体内动物实验溶解配方,主要用于溶解难溶或不溶于水的产品(水溶度<1 mg/mL)。 建议您先取少量样品进行尝试,如该配方可行,再根据实验需求增加样品量。
注射用配方
注射用配方1: DMSO : Tween 80: Saline = 10 : 5 : 85 (如: 100 μL DMSO → 50 μL Tween 80 → 850 μL Saline)(IP/IV/IM/SC等) *生理盐水/Saline的制备:将0.9g氯化钠/NaCl溶解在100 mL ddH ₂ O中,得到澄清溶液。 注射用配方 2: DMSO : PEG300 :Tween 80 : Saline = 10 : 40 : 5 : 45 (如: 100 μL DMSO → 400 μL PEG300 → 50 μL Tween 80 → 450 μL Saline) 注射用配方 3: DMSO : Corn oil = 10 : 90 (如: 100 μL DMSO → 900 μL Corn oil) 示例: 以注射用配方 3 (DMSO : Corn oil = 10 : 90) 为例说明, 如果要配制 1 mL 2.5 mg/mL的工作液, 您可以取 100 μL 25 mg/mL 澄清的 DMSO 储备液,加到 900 μL Corn oil/玉米油中, 混合均匀。 View More
注射用配方 4: DMSO : 20% SBE-β-CD in Saline = 10 : 90 [如:100 μL DMSO → 900 μL (20% SBE-β-CD in Saline)] 口服配方
口服配方 1: 悬浮于0.5% CMC Na (羧甲基纤维素钠) 口服配方 2: 悬浮于0.5% Carboxymethyl cellulose (羧甲基纤维素) 示例: 以口服配方 1 (悬浮于 0.5% CMC Na)为例说明, 如果要配制 100 mL 2.5 mg/mL 的工作液, 您可以先取0.5g CMC Na并将其溶解于100mL ddH2O中,得到0.5%CMC-Na澄清溶液;然后将250 mg待测化合物加到100 mL前述 0.5%CMC Na溶液中,得到悬浮液。 View More
口服配方 3: 溶解于 PEG400 (聚乙二醇400) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案: 1、请先配制澄清的储备液(如:用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液,按从左到右的顺序依次添加助溶剂,澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明,并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中,混合均匀/澄清;向上述体系中加入50 μL Tween-80,混合均匀/澄清;然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL; 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出,可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果,工作液请现配现用! 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液,请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
计算结果:
工作液浓度: mg/mL;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请首先与我们联系。
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL ddH2O,混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后,再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶;
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。