| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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描述：Glasdegib（曾用名：PF-04449913；PF4449913；PF04449913；PF-4449913；Daurismo）是一种新型、高效且口服生物利用度高的小分子抑制剂，可抑制 Hedgehog (Hh) 信号通路中的 Smoothened (Smo) 蛋白，具有潜在的抗肿瘤活性。该药于 2018 年获批用于治疗急性髓系白血病，属于新发现的药物。Glasdegib 对 Smoothened (Smo) 的抑制 IC50 为 5 nM。Hh 信号通路对细胞发育、分化和修复均有显著影响。许多类型的癌症已被证实存在 Hh 信号通路的组成型激活。在 Ptch1+/-p53+/- 同种异体移植模型中，Glasdegib 在降低小鼠 Shh 靶基因表达的剂量下，可显著抑制髓母细胞瘤的生长。当 PF-04449913 用于基质细胞共培养实验时，FACS 分析显示，与正常祖细胞相比，BC LSC 显著减少。
| 靶点 |
Smo ( IC50 = 4 nM )
SMO (IC50 = 4 nM for binding to human SMO amino acids 181-787; IC50 = 6.8 nM for inhibition of Shh-stimulated luciferase expression in mouse embryonic fibroblasts). [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：在降低小鼠Shh靶基因表达的剂量下，Glasdegib (PF-04449913) 可显著抑制Ptch1+/-p53+/-同种异体移植模型中髓母细胞瘤的生长，并以6.8 nM的IC50值抑制小鼠胚胎成纤维细胞中Sonic hedgehog (Shh)刺激的荧光素酶表达。与正常祖细胞相比，FACS分析显示，在基质共培养实验中，Glasdegib (PF-04449913) 可显著减少乳腺癌干细胞(BC LSC)。值得注意的是，每日接受 Glasdegib (PF-04449913) 治疗的 RAG2-/-p53-/- 小鼠（移植了人乳腺癌白血病干细胞）的脾脏重量显著低于载体对照组 (p=0.006)。白血病负荷的降低与 GLI2 蛋白表达的降低相对应，这通过对 FACS 纯化的人类祖细胞进行纳米蛋白质组学分析以及对脾脏切片进行 GLI2 共聚焦荧光显微镜分析均得到证实[1]。在 SL/M2 基质细胞与人乳腺癌慢性粒细胞白血病祖细胞共培养中，PF-04449913 (1 μM) 处理 7 天后，与载体组相比，白血病祖细胞的存活率显著降低 (p=0.047，Student's t 检验)，如 FACS 分析所示（图 2b）。 [1]在与正常脐带血CD34+细胞的类似共培养中，PF-04449913 (1 μM) 处理7天后，与载体组相比，集落形成单位 (CFU) 的存活率并未降低（图2c），表明正常祖细胞未受影响。[1]在与人脐带血CD34+细胞的OP9基质细胞共培养中，PF-04449913处理并未影响正常造血干/祖细胞的存活或分化（附加文件1：图S2a）。[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
与载体对照组相比，用格拉斯德吉布（PF-04449913）治疗的移植了人乳腺癌白血病干细胞（BC LSC）的RAG2-/-p53-/-小鼠的脾脏重量显著降低（p=0.006）。与白血病干细胞不同，正常人造血干细胞（HSC）的命运决定不依赖于Hh信号通路。这一结论得到了以下事实的证实：当用格拉斯德吉布（PF-04449913）治疗移植了CD34+脐带血的NSG小鼠时，人CD45+细胞、祖细胞以及髓系和淋巴系细胞的命运决定频率与载体对照组相当。这些发现强调了选择性SMO抑制对特定环境和细胞微环境的显著依赖性效应，这种效应会导致GLI2下调[1]。
在移植了人BC CML LSC的新生RAG2-/-yc-/-小鼠中，PF-04449913（每日100 mg/kg，灌胃给药，持续14天）与载体组相比，显著降低了脾脏重量（p=0.006）（图2d）。[1] 对经PF-04449913治疗的小鼠脾脏中FACS纯化的CD34+CD38+人细胞进行纳米蛋白质组学分析显示，PF-04449913治疗后GLI2蛋白表达降低（p=0.001）（图2e-f）。 [1] 脾脏切片的共聚焦荧光显微镜观察证实，PF-04449913 处理后，人 CD45+ 细胞中 GLI2 表达降低（图 2g）。[1] 在移植了正常人脐带血 CD34+ 细胞的 NSG 小鼠中，PF-04449913（100 mg/kg，每日一次，持续 14 天）不影响人 CD45+ 细胞、祖细胞或髓系/淋巴系分化的移植频率（附加文件 1：图 S2b-d）。[1] 对移植了 BC CML 细胞的小鼠进行 PF-04449913 处理后的骨髓细胞周期流式细胞术分析显示，与载体组相比，G0 期（休眠期）细胞比例显著降低，G1 期细胞比例显著升高（p<0.05）（图 4c-d）。 [1] 对经 FACS 纯化的经治疗小鼠的人类祖细胞进行 RNA 测序显示，PF-04449913 显著下调了“细胞周期调控”通路（家族水平 p=0.02）（图 4e-g）。[1] 与单药治疗相比，PF-04449913（100 mg/kg）联合达沙替尼（50 mg/kg）治疗 14 天显著降低了髓系肉瘤数量（p<0.01，ANOVA）、骨髓白血病干细胞负荷（p<0.05）和 BCR-ABL1 表达（p<0.05）（图 5b-d）。 [1] 连续移植：经PF-04449913联合达沙替尼治疗的小鼠来源的LSC在二次受体中形成髓系肉瘤的能力显著降低（p<0.01，ANOVA）（图5f）。[1] Hedgehog通路基因表达分析：联合治疗显著增加了Hh负调控因子（NUMB、PRKACB、FKBP8、CSNK1A1、CSNK1D）的表达（p=0.05，Limma法）（图5e）。[1] |
| 酶活实验 |
Glasdegib 是一种新型强效小分子抑制剂，IC50 为 5 nM，是一种口服生物利用度高的 Hedgehog (Hh) 信号通路 Smoothened (Smo) 抑制剂。它曾用名 PF-04449913。在细胞中，Hh 信号通路对细胞的生长、分化和修复至关重要。在多种癌症中，均有 Hh 信号通路持续激活的报道。在 Ptch1+/-p53+/- 的同种异体移植模型中，Glasdegib 在降低小鼠 Shh 靶基因表达的剂量下，可显著抑制髓母细胞瘤的生长。与正常祖细胞相比，FACS 分析显示，在基质共培养实验中，PF-04449913 可显著减少乳腺癌白血病干细胞 (BC LSC) 的数量。
PF-04449913 已测试其与人 SMO 蛋白（氨基酸 181-787）的竞争性结合能力。 IC50 测定值为 4 nM（补充文件 1：图 S1a）。[1] PF-04449913 被评估用于抑制小鼠胚胎成纤维细胞中 Sonic hedgehog (Shh) 刺激的荧光素酶表达。该化合物抑制荧光素酶报告基因活性的 IC50 值为 6.8 nM（补充文件 1：图 S1b、c）。[1] |
| 细胞实验 |
BMS-354825 (50 nM)、Glasdegib (PF-04449913) (1 μM) 或二者联合用药用于治疗 BC CML 或正常细胞中的 CD34+ 细胞。将 M2-10B4 (M2) 和 SL/SL (SL) 小鼠骨髓基质细胞系以 1:1 的比例混合，最终浓度为 100,000 个细胞/mL，并在与 10,000–20,000 个 CD34+ BC CML 或正常祖细胞共培养前一天进行接种。培养 14 天后，对祖细胞进行计数，并在培养一周后通过流式细胞术分选，用于造血祖细胞分析。采用以下方法评估正常人造血干细胞和祖细胞的存活率：将经辐射（20 Gy）的 OP9（M2 克隆）基质细胞与 50,000 个人类 CD34+ 脐带血细胞、载体或 Glasdegib (PF-04449913) 在含 20% Hyclone FBS、1% 青霉素-链霉素-谷氨酰胺的 AlphaMEM 培养基中共同培养，并补充 50 ng/mL SCF、10 ng/mL 血小板生成素和 10 ng/mL Flt3。使用每周一次的FACS分析记录结果[1]。
将正常或BC CML CD34+细胞接种于经丝裂霉素C处理的汇合SL/M2细胞（小鼠骨髓基质细胞系M2-10B4和SL/SL以1:1的比例混合）上，并加入载体或PF-04449913（1 μM）培养7天。培养后，通过FACS分选祖细胞进行造血祖细胞分析，并在14天时对集落进行计数。 [1] 为了评估正常人造血干细胞和祖细胞的存活率，将经辐照的OP9基质细胞与50,000个人类CD34+脐带血细胞、载体或PF-04449913在含20% FBS、50 ng/ml SCF、10 ng/ml血小板生成素和10 ng/ml Flt3的AlphaMEM培养基中共培养，并每周进行FACS分析定量。[1] 为了进行细胞周期分析，将经载体或PF-04449913处理的LSC异种移植小鼠的骨髓细胞制成单细胞悬液，用抗人CD45抗体、LIVE/DEAD染色，然后用FITC标记的抗Ki-67抗体和7-AAD抗体进行免疫染色，最后进行FACS分析。[1] |
| 动物实验 |
小鼠：将等量的BC LSC或正常祖细胞肝内移植到RAG2-/-c-/-小鼠体内。在鉴定出人CD45+细胞外周血植入后，连续14天，每天通过灌胃给予小鼠Glasdegib（100 mg/kg）、BMS-354825（50 mg/kg）或二者联合用药。然后使用流式细胞术（FACS）检测造血微环境中人源细胞的植入量。在对 7 至 10 周龄的 NOD Cg-PrkdcSCID IL2R1Wjl/SzJ 小鼠进行亚致死剂量照射 8 周后，将 100,000 个 CD34+ 人脐带血细胞经眼眶后移植，并用载体或 Glasdegib (100 mg/kg) 治疗小鼠 14 天，然后进行 FACS 移植分析，以评估对正常 HSC 功能的影响。
将等量的正常祖细胞或 BC LSC 经肝内移植到新生免疫缺陷的 RAG2-/-yc-/- 小鼠中。检测到人CD45+细胞外周血植入后，小鼠每日灌胃给予载体（50% 1,2-丙二醇、50% HBSS或甲基纤维素）、PF-04449913（100 mg/kg）、达沙替尼（50 mg/kg）或二者联合用药，持续14天，随后进行FACS分析以定量人源细胞植入。[1] 为了评估正常造血干细胞（HSC）功能，将7-10周龄的NOD.Cg-PrkdcSCID IL2R1Wj/SzJ (NSG)小鼠进行亚致死剂量照射，然后经眼眶后方移植100,000个CD34+人脐带血细胞，8周后给予载体或PF-04449913（100 mg/kg）治疗14天，随后进行FACS分析以评估植入情况。[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
吸收、分布和排泄
赤霉素的药代动力学特征呈剂量比例性，血浆峰浓度分布范围较广，且呈剂量比例性。本研究中，50 mg剂量下，达到最大浓度321 ng/ml的中位时间为4小时，AUC为9587 ng·h/ml。据报道，赤霉素的口服生物利用度为55%。在一项50 mg的多剂量研究中，Cmax、tmax和AUC分别为542 ng/ml、4小时和9310 ng·h/ml。在同一项研究中，稳态平均浓度为388 ng/ml。同时摄入高脂肪、高热量食物会影响赤霉素的吸收率。单次口服100 mg放射性标记的格拉斯哥赤霉素后，49%经尿液排出，其中17%以原形排出；42%经粪便排出，其中20%以原形排出。 据报道，50 mg格拉斯地吉布的分布容积（Vz）为225 L。血液系统恶性肿瘤患者的几何平均表观分布容积（Vz/F）为188 L（20%）。 据报道，50 mg格拉斯地吉布的清除率为5.22 L/h。血液系统恶性肿瘤患者每日一次服用100 mg格拉斯地吉布后，几何平均表观清除率（%CV）为6.45 L/h（25%）。 代谢/代谢物口服后，glasdegibr 主要通过 CYP3A4 代谢，CYP2C8 和 UGT1A9 的贡献较小。仅有 69% 的给药剂量在血浆中以未代谢的形式存在。 生物半衰期据报道，glasdegibr 的半衰期为 17.4 小时。 |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
肝毒性
格拉地吉布治疗期间，血清ALT水平升高较为常见，发生率达31%，其中11%的患者ALT水平超过正常值上限的5倍。格拉地吉布的临床应用有限，尚未发现有症状或黄疸的急性肝损伤病例。由于Hedgehog抑制剂的临床经验有限，其引起肝损伤的可能性尚不明确。概率评分：E（未经证实，但怀疑是临床显著肝损伤的原因）。妊娠和哺乳期影响 ◉ 哺乳期用药概述 目前尚无关于哺乳期使用格拉地吉布的信息。该药物与血浆蛋白的结合率为91%，因此其在母乳中的浓度可能较低。格拉地吉布的半衰期为17.4小时，末次给药后4至7天内可从母乳中清除。然而，制造商建议在接受格拉地吉治疗期间以及末次给药后至少30天内停止母乳喂养。 ◉ 对母乳喂养婴儿的影响 截至修订日期，未找到已发表的信息。 ◉ 对哺乳和母乳的影响 截至修订日期，未找到已发表的信息。 蛋白质结合 据报道，格拉地吉的蛋白质结合率为91%，这与其高亲脂性有关。 在体外和体内，用PF-04449913处理的正常人造血干细胞和祖细胞未观察到明显的毒性，这表现为分化能力、集落形成单位（CFU）存活率和移植率均未发生改变（图2c；附加文件1：图S2）。[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
药效学
在临床前研究中，glasdegib显著降低了异种移植模型中的白血病干细胞负荷，并减少了表达白血病干细胞标志物的细胞数量。在临床试验中，glasdegib显著下调了皮肤中胶质瘤相关转录因子GL11的表达，下调幅度超过80%。在同一项研究中，8%的急性髓系白血病患者达到形态学完全缓解，31%的患者病情稳定。近期临床试验证实，glasdegib可将总生存期延长至8.3个月，几乎是接受低剂量阿糖胞苷治疗患者的两倍。此外，有报道称，接受glasdegib治疗的患者会出现剂量依赖性的QTc间期延长。 PF-04449913是一种选择性Smoothened (SMO)拮抗剂，可降低GLI表达。该化合物已被证实能够抑制 Hedgehog 信号通路，并减少慢性粒细胞白血病 (CML) 中白血病干细胞的维持，尤其是在急变期。该化合物能够诱导休眠的白血病干细胞 (LSC) 的细胞周期激活，使其对酪氨酸激酶抑制剂（如达沙替尼）更加敏感。基于这项研究，目前正在进行将 SMO 抑制剂与酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 联合用于治疗晚期髓系恶性肿瘤的 1b/2 期临床试验。[1] |
| 分子式 |
C21H22N6O
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|---|---|---|
| 分子量 |
374.44
|
|
| 精确质量 |
374.185
|
|
| 元素分析 |
C, 67.36; H, 5.92; N, 22.44; O, 4.27
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| CAS号 |
1095173-27-5
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| 相关CAS号 |
1095173-27-5; 2030410-25-2; 1095173-64-0 (HCl); 1352568-48-9 (2HCl)
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| PubChem CID |
25166913
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|
| 外观&性状 |
White solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
633.4±55.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
336.9±31.5 °C
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|
| 蒸汽压 |
0.0±1.9 mmHg at 25°C
|
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| 折射率 |
1.686
|
|
| LogP |
2.77
|
|
| tPSA |
100.33
|
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
3
|
|
| 重原子数目 |
28
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
595
|
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| 定义原子立体中心数目 |
2
|
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| SMILES |
O=C(NC1=CC=C(C#N)C=C1)N[C@H]2C[C@H](C3=NC4=CC=CC=C4N3)N(C)CC2
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| InChi Key |
SFNSLLSYNZWZQG-VQIMIIECSA-N
|
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H22N6O/c1-27-11-10-16(24-21(28)23-15-8-6-14(13-22)7-9-15)12-19(27)20-25-17-4-2-3-5-18(17)26-20/h2-9,16,19H,10-12H2,1H3,(H,25,26)(H2,23,24,28)/t16-,19-/m1/s1
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| 化学名 |
1-[(2R,4R)-2-(1H-benzimidazol-2-yl)-1-methylpiperidin-4-yl]-3-(4-cyanophenyl)urea
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.55 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6707 mL | 13.3533 mL | 26.7065 mL | |
| 5 mM | 0.5341 mL | 2.6707 mL | 5.3413 mL | |
| 10 mM | 0.2671 mL | 1.3353 mL | 2.6707 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Glasdegib (PF-04449913) With Temozolomide Newly Diagnosed Glioblastoma
CTID: NCT03466450
Phase: Phase 1/Phase 2 Status: Completed
Date: 2024
A phase Ib/IIa pilot trial of the oral Hedgehog Signalling Inhibitor, Glasdegib, in Patients with sclerotic chronic graft-versus-host disease refractory to second-line treatment
CTID: null
Phase: Phase 1, Phase 2 Status: Completed
Date: 2017-09-28
 Selective shh inhibition reduces lsc burden in stromal co-cultures.J Transl Med.2015 Mar 21;13:98. |
|---|
Shh inhibition induces cycling of dormant leukemic progenitors.J Transl Med.2015 Mar 21;13:98. |
PF-04449913 induced cell cycle activation enhances TKI sensitivity.J Transl Med.2015 Mar 21;13:98. |
GLI2 induces cell cycle arrest in leukemic progenitors.J Transl Med.2015 Mar 21;13:98. |
|---|
SHH pathway deregulation in chronic myeloid leukemia progression.J Transl Med.2015 Mar 21;13:98. |
GLI1-IN-3
Hedgehog IN-4
2-ACC
CBR-096-4
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