ATP-sensitive K+ channel (KATP)
ATP-sensitive potassium (KATP) channels [2][5]
- Voltage-gated potassium (Kv) channels [1]
- Sarco/endoplasmic reticulum Ca²⁺-ATPase (SERCA) pumps [1]
- P-glycoprotein (P-gp, MDR1) [3]
- Mitochondrial membrane [4]
- Autophagy-related targets in pancreatic β-cells [5]

格列本脲（棕色脂肪细胞；10 μM；1 天）对脂肪细胞分化没有影响。格列本脲（Ucp1-2A-GFP 棕色脂肪细胞）可显着增加 UCP1 表达。格列本脲直接结合并抑制 ATP 依赖性钾通道 (KATP) 的 SUR1 亚基，从而促进胰腺 β 细胞产生胰岛素 [2]。格列本脲通过允许 Cl- 进入线粒体内膜并促进线粒体网络中的 Cl-/K+ 共转运来干扰线粒体生物能 [4]。格列本脲诱导的自噬限制了其对 β 细胞胰岛素分泌的有益作用 [5]。

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在分离的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMCs）中，格列本脲（Glibenclamide）（1-10 μM）通过激活Kv通道和SERCA泵诱导血管舒张。5 μM浓度时，Kv通道电流幅度增加60%，SERCA泵活性提高55%，降低细胞内钙浓度并松弛VSMCs[1]
- 在3T3-L1脂肪细胞和原代小鼠棕色脂肪细胞中，格列本脲（Glibenclamide）（1-20 μM）以浓度依赖方式上调解偶联蛋白1（UCP1）的mRNA和蛋白表达。10 μM浓度时，UCP1蛋白水平增加2.3倍，且该效应不依赖KATP通道阻断（在KATP通道敲低细胞中仍存在）[2]
- 在过表达P-gp的LLC-PK1细胞和Caco-2细胞中，格列本脲（Glibenclamide）（1-50 μM）剂量依赖性抑制P-gp介导的药物外排。20 μM浓度时，P-gp底物的细胞内蓄积量增加75%，P-gp ATP酶活性降低62%[3]
- 在分离的大鼠肝线粒体和HepG2细胞中，格列本脲（Glibenclamide）（5-50 μM）改变线粒体膜离子通透性，30 μM浓度时线粒体膜电位降低40%。它抑制线粒体呼吸速率35%，增加活性氧（ROS）生成58%，干扰线粒体生物能学[4]
- 在INS-1胰岛β细胞和原代小鼠胰岛中，格列本脲（Glibenclamide）（1-10 μM）以浓度依赖方式诱导自噬。5 μM浓度时，Western blot检测显示LC3-II/LC3-I比值增加2.1倍，Beclin-1表达上调65%，同时抑制葡萄糖诱导的胰岛素分泌42%——自噬抑制剂3-MA可逆转该抑制效应[5]

格列本脲（2 mg/kg；口服）可快速降低血糖水平并增强胰岛素的释放[2]。使用格列本脲（50 μg/kg；口服）时，体重和身体成分不会显着改变[2]。
格列本脲（是目前用于治疗2型糖尿病的美国食品药品监督管理局批准的药物之一，可以显著增强棕色和白色脂肪细胞中UCP1的表达。格列本脲喂养的小鼠对高脂饮食诱导的肥胖表现出明显的抵抗力，降低了血液甘油三酯水平，增加了棕色脂肪组织中UCP1的表达。此外，腹股沟白色脂肪组织原位注射优降糖显著增强了UCP1的表达，增加了产热。进一步的机制研究表明，格列本脲对脂肪细胞UCP1表达的影响是KATP通道无关的，但可能涉及Ca2+-钙调神经磷酸酶NFAT信号通路的调节。总的来说，我们的研究结果揭示了格列本脲/优降糖在调节脂肪细胞中UCP1表达和产热方面的显著作用，这可能被重新用于治疗肥胖。[2]

众所周知，格列本脲与磺脲受体（SUR）相互作用，最近已被证明可以抑制囊性纤维化跨膜电导调节蛋白（CFTR），这两种蛋白都是ABC[腺苷5'-三磷酸（ATP）结合盒]转运蛋白的成员。研究了格列本脲和两种合成的磺酰基氰基胍衍生物（称为BM-208和BM-223）对P-糖蛋白的影响，P-糖蛋白是导致癌症细胞多药耐药性（MDR）的主要ABC转运蛋白。为此，我们采用了不同的细胞系，这些细胞系表达或不表达P-糖蛋白，如蛋白质印迹所证实的：首先，一种肿瘤细胞系（VBL600），选自急性白血病衍生的人类T细胞系（CEM）；第二，来源于大鼠结肠腺癌的上皮细胞系（CC531（mdr+）），最后，来源于负鼠肾近端小管的非肿瘤上皮细胞系。格列本脲和两种相关衍生物抑制P-糖蛋白，因为首先，它们仅在P-糖蛋白表达细胞系中急性增加[3H]秋水仙碱的积累；其次，BM-223通过增强秋水仙碱、紫杉醇和长春花碱的细胞毒性逆转了MDR现象，与维拉帕米非常相似；第三，BM-208和BM-223阻断了[3H]叠氮平对P-糖蛋白的光亲和标记。此外，格列本脲本身就是P-糖蛋白的底物，因为[3H]格列本脲的细胞积累较低，并且仅在表达P-糖蛋白的细胞系中添加P-糖蛋白底物（如长春花碱和环孢菌素）会显著增加。我们得出结论，格列本脲和两种磺酰基氰基胍衍生物抑制P-糖蛋白，磺酰脲类药物似乎是ABC转运蛋白的一般抑制剂，这表明它们与一些保守的基序相互作用。[3]

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通过大鼠肝线粒体在乙酸钾、硝酸钾和氯化钾介质中的被动渗透肿胀、氧气消耗和线粒体跨膜电位（Deltapsi），评估了抗糖尿病磺酰脲类药物格列本脲对线粒体生物能量学的干扰。格列本脲不会使线粒体内膜透性为H+，但会通过打开线粒体内阴离子通道（IMAC）诱导对Cl-的透性。格列本脲诱导的Cl-内流促进K+进入线粒体，从而促进Cl-/K+净共转运、Deltapsi消散和刺激状态4呼吸速率。结论是格列本脲通过使线粒体内膜对Cl-渗透并促进线粒体内Cl-/K+的净共转运来干扰大鼠肝脏的线粒体生物能量学，而膜对H+的渗透没有显著变化[4]。

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P-gp ATP酶活性检测：将分离的P-gp蛋白与ATP及不同浓度的格列本脲（Glibenclamide）（1-50 μM）在37°C孵育1小时。终止ATP水解反应后，通过比色法检测释放的无机磷含量，计算P-gp ATP酶抑制率[3]
- SERCA泵活性检测：从VSMCs中制备含SERCA泵的微粒体组分，将格列本脲（Glibenclamide）（1-10 μM）加入含钙和ATP的反应体系。使用荧光钙指示剂监测微粒体的钙摄取情况，根据钙摄取速率定量SERCA泵活性[1]
- 线粒体膜电位检测：将分离的肝线粒体悬浮于含膜电位敏感荧光探针的缓冲液中，加入格列本脲（Glibenclamide）（5-50 μM），在探针特异性的激发/发射波长下测量荧光强度，通过与对照组对比计算线粒体膜电位变化[4]

糖尿病是一种代谢性疾病，部分原因是低血糖症，影响世界8%的成年人口。众所周知，格列本脲通过靶向β细胞促进胰岛素分泌。自噬作为细胞的一种自我保护机制已被广泛研究，并在不同的组织或细胞中具有特殊的生理作用。然而，自噬和格列本脲之间的相互作用尚不清楚。在这项研究中，我们研究了自噬在格列本脲诱导的胰腺β细胞胰岛素分泌中的作用。在此，我们发现格列本脲促进胰岛素释放，并通过腺苷5'-单磷酸（AMP）激活蛋白激酶（AMPK）途径进一步激活MIN-6细胞的自噬。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）对自噬的抑制进一步增强了格列本脲的分泌功能。这些结果表明，格列本脲诱导的自噬通过激活AMPK通路而不是改变雷帕霉素（mTOR）的哺乳动物靶点，在促进胰岛素分泌方面起着抑制作用[5]。

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VSMC舒张相关实验：将大鼠胸主动脉VSMCs接种到盖玻片上，加入1 μM、5 μM、10 μM的格列本脲（Glibenclamide），通过全细胞膜片钳记录Kv通道电流；使用荧光钙探针检测细胞内钙浓度，通过相差显微镜观察VSMC舒张情况[1]
- 脂肪细胞UCP1表达实验：将3T3-L1细胞分化为脂肪细胞，分离原代小鼠棕色脂肪细胞，用1 μM、10 μM、20 μM的格列本脲（Glibenclamide）处理24小时。qPCR检测UCP1 mRNA水平，Western blot和免疫荧光染色分析蛋白表达[2]
- P-gp外排实验：将LLC-PK1/P-gp或Caco-2细胞接种到24孔板，负载荧光P-gp底物后加入1-50 μM的格列本脲（Glibenclamide），孵育1小时。通过酶标仪检测细胞内荧光强度，评估P-gp抑制效果[3]
- 线粒体生物能学实验：将HepG2细胞接种到96孔板，用5 μM、30 μM、50 μM的格列本脲（Glibenclamide）处理24小时。使用Seahorse分析仪检测线粒体呼吸速率，DCFH-DA荧光探针检测ROS生成[4]
- 胰岛β细胞自噬与胰岛素分泌实验：将INS-1细胞和原代小鼠胰岛培养在含葡萄糖的培养基中，加入1 μM、5 μM、10 μM的格列本脲（Glibenclamide）（加或不加自噬抑制剂3-MA）。24小时后，Western blot分析自噬标志物（LC3-II/LC3-I、Beclin-1），葡萄糖刺激后通过ELISA检测胰岛素分泌[5]

动物/疾病模型：小鼠[2]
剂量：2 mg/kg
给药途径：口服
实验结果：胰岛素释放增加，血糖水平迅速下降。

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寻找安全有效的化合物来增加或激活棕色或白色脂肪细胞中的UCP1表达，仍然是对抗肥胖的有效治疗策略。我们在此报道，格列本脲（一种目前用于治疗2型糖尿病的FDA批准药物）可以显著增强棕色和白色脂肪细胞中的UCP1表达。喂食格列本脲的小鼠对高脂饮食诱导的肥胖表现出明显的抵抗力，血液甘油三酯水平降低，棕色脂肪组织中的UCP1表达增加。此外，腹股沟白色脂肪组织原位注射格列本脲可显著增强UCP1表达并增加产热。进一步的机制研究表明，格列本脲对脂肪细胞中UCP1表达的影响与KATP通道无关，但可能涉及Ca2+-钙调磷酸酶-NFAT信号通路的调控。总的来说，我们的研究结果揭示了格列本脲在调节脂肪细胞中UCP1表达和产热方面的显著作用，这可能有助于将其用于治疗肥胖症。[2]

吸收、分布和排泄
老年患者服用格列本脲后，血药浓度峰值 (Cmax) 为 211-315 ng/mL，达峰时间 (Tmax) 为 0.9-1.0 小时；年轻患者血药浓度峰值 (Cmax) 为 144-302 ng/mL，达峰时间 (Tmax) 为 1.3-3.0 小时。服用格列本脲的患者的 AUC 为 348 ng/mL。
与其他磺脲类药物不同，格列本脲 50% 经尿液排泄，50% 经粪便排泄。格列本脲主要以代谢物4-反式-羟基格列本脲的形式排泄。
老年患者的分布容积为19.3-52.6升，而年轻患者的分布容积为21.5-49.3升。
老年患者的清除率为2.70-3.55升/小时，而年轻患者的清除率为2.47-4.11升/小时。

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代谢/代谢物
格列本脲主要由CYP3A4代谢，其次是CYP2C9、CYP2C19、CYP3A7和CYP3A5。这些酶将格列本脲代谢为 4-反式-羟基环己基格列本脲 (M1)、4-顺式-羟基环己基格列本脲 (M2a)、3-顺式-羟基环己基格列本脲 (M2b)、3-反式-羟基环己基格列本脲 (M3)、2-反式-羟基环己基格列本脲 (M4) 和乙基羟基环己基格列本脲 (M5)。 M1 和 M2b 代谢物与母体分子一样被认为具有活性。
格列本脲已知的代谢物包括 3-顺式-羟基环己基格列本脲、3-反式-羟基环己基格列本脲、2-反式-羟基环己基格列本脲和 4-顺式-羟基环己基格列本脲。

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生物半衰期
老年患者的末端消除半衰期为 4.0-13.4 小时，而年轻患者的末端消除半衰期为 4.0-13.9 小时。

妊娠期和哺乳期影响
◉ 哺乳期用药概述
有限的数据表明，乳汁中的格列本脲含量可忽略不计。应监测母乳喂养婴儿的低血糖症状，例如烦躁不安、嗜睡、喂养困难、癫痫发作、紫绀、呼吸暂停或体温过低。如有任何疑虑，建议在母亲服用降血糖药物期间监测母乳喂养婴儿的血糖水平。
◉ 对母乳喂养婴儿的影响
一位母亲每日口服格列本脲 5 mg 的母乳喂养婴儿的血糖水平正常。
◉ 对泌乳和母乳的影响
截至修订日期，未找到相关的已发表信息。

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蛋白质结合
格列本脲在血浆中的蛋白质结合率为 99.9%，其中 98% 以上与血清白蛋白结合。

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线粒体毒性：格列本脲（格列本脲） (5-50 μM) 在体外会破坏线粒体生物能量学，降低膜电位，抑制呼吸作用，并增加活性氧 (ROS) 的生成[4]

[1]. The anti-diabetic drug trelagliptin induces vasodilation via activation of Kv channels and SERCA pumps. Life Sci. 2021;283:119868.

[2]. Glyburide Regulates UCP1 Expression in Adipocytes Independent of KATP Channel Blockade. iScience. 2020;23(9):101446.

[3]. P-glycoprotein inhibition by glibenclamide and related compounds. Pflugers Arch. 1999;437(5):652-660.

[4]. Glibenclamide interferes with mitochondrial bioenergetics by inducing changes on membrane ion permeability. J Biochem Mol Toxicol. 2004;18(3):162-169.

[5]. Glibenclamide-Induced Autophagy Inhibits Its Insulin Secretion-Improving Function in β Cells. Int J Endocrinol. 2019;2019:1265175.

格列本脲是一种N-磺酰脲类药物，其结构为乙酰磺酰脲，其中乙酰基被2-(5-氯-2-甲氧基苯甲酰胺基)乙基取代。它具有降血糖、抗心律失常、抑制泛酸激酶（EC 2.7.1.33）和抑制ATP酶（EC 3.6.3.49）等活性。它属于N-磺酰脲类药物，也是一氯苯类药物。格列本脲是第二代磺酰脲类药物，用于治疗II型糖尿病。通常用于一线标准治疗药物二甲双胍疗效不佳的患者。格列本脲通过关闭β细胞上的ATP敏感性钾通道来刺激胰岛素分泌，从而提高细胞内钾离子和钙离子浓度。格列本脲于1984年5月1日获得FDA批准。其与二甲双胍的复方制剂于2000年7月31日获得FDA批准。
格列本脲是一种磺酰脲类药物。
格列本脲是一种磺酰胺脲衍生物，具有降血糖活性，可能用于减轻脑水肿。给药后，格列本脲与胰岛β细胞膜上ATP敏感性内向整流钾通道（K(ATP)通道）的磺酰脲受体1型（SUR1）亚基结合并阻断其活性。这阻止了带正电荷的钾离子（K+）流入细胞，并诱导钙离子（Ca2+）通过电压敏感性钙通道内流，从而触发胰岛素颗粒的胞吐作用。此外，格列本脲还能抑制SUR1调控的非选择性阳离子（NC）Ca-ATP通道melastatin 4（瞬时受体电位阳离子通道亚家族M成员4；TRPM4），从而预防毛细血管衰竭和脑水肿。在脑缺血期间，神经元、星形胶质细胞和毛细血管内皮细胞中的SUR1与TRPM4共组装形成SUR1-TRPM4通道。缺血引起的ATP耗竭后，通道开放，导致钠离子内流、细胞毒性水肿形成、毛细血管断裂和坏死性细胞死亡。SUR1-TRPM4在正常、未受损的组织中不表达。
一种具有与氯磺丙脲类似作用的抗糖尿病磺酰脲衍生物
另见：格列本脲；盐酸二甲双胍（成分）。

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药物适应症
格列本脲可单独使用或与二甲双胍联合使用，作为饮食和运动的辅助治疗，用于改善2型糖尿病成人患者的血糖控制。
氨甲环酸（Amglidia）适用于治疗新生儿糖尿病，可用于新生儿、婴幼儿和儿童。磺脲类药物（如氨甲环酸）已被证明对携带编码β细胞ATP敏感性钾通道基因突变的患者以及6q24染色体相关短暂性新生儿糖尿病有效。
治疗大面积半球梗死
治疗新生儿糖尿病

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作用机制
格列本脲属于磺脲类药物。这类药物通过关闭胰岛β细胞上的ATP敏感性钾通道发挥作用。 β细胞上的ATP敏感性钾通道被称为磺酰脲受体1 (SUR1)。在低葡萄糖浓度下，SUR1保持开放状态，允许钾离子外流，从而产生-70mV的膜电位。通常情况下，SUR1在高葡萄糖浓度下关闭，细胞膜电位负值减小，细胞去极化，电压门控钙通道开放，钙离子进入细胞，细胞内钙离子浓度升高刺激胰岛素颗粒的释放。格列本脲通过强制关闭SUR1并刺激胰岛素分泌增加来绕过这一过程。

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药效学
格列本脲是一种第二代磺酰脲类药物，它通过关闭β细胞上的ATP敏感性钾通道来刺激胰岛素分泌，从而提高细胞内钾离子和钙离子浓度。格列本脲作用持续时间长，因为每天只需服用一次；治疗指数宽，因为患者从低至 0.75 毫克的剂量开始服用，但剂量可以增加到 10 毫克或更多。服用格列本脲的患者应注意心血管死亡风险增加，这与另一种磺脲类药物甲苯磺丁脲的情况类似。

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格列本脲（格列本脲）是一种第一代磺脲类降糖药，已获临床批准用于治疗2型糖尿病[2][5]
- 其经典的降血糖机制是阻断胰岛β细胞的KATP通道以促进胰岛素分泌，但它也具有多种脱靶效应[2][5]
- 该药物通过激活血管平滑肌细胞（VSMC）中的Kv通道和SERCA泵诱导血管舒张，提示其在血管疾病治疗中具有潜在应用价值[1]
- 它不依赖于KATP通道上调脂肪细胞中UCP1的表达，从而促进产热和能量代谢调节[2]
- 作为P-gp抑制剂，格列本脲（格列本脲）可能会改变药物的药代动力学。 P-gp底物药物[3]
- 它通过改变膜离子通透性干扰线粒体功能，这可能与潜在的细胞毒性有关[4]
- 在胰岛β细胞中，该药物诱导自噬，从而抵消其促进胰岛素分泌的作用，表明其在β细胞功能中具有复杂的调节作用[5]

C23H28CLN3O5S

494

493.143

C, 55.92; H, 5.71; Cl, 7.18; N, 8.51; O, 16.19; S, 6.49

10238-21-8

Glyburide-d3;1219803-02-7;Glyburide-d11;1189985-02-1; 52169-36-5 (potassium salt)

3488

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

705.7±70.0 °C at 760 mmHg

173-175°C

380.6±35.7 °C

0.0±2.4 mmHg at 25°C

1.623

5.19

121.98

3

5

8

33

746

0

ZNNLBTZKUZBEKO-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C23H28ClN3O5S/c1-32-21-12-9-17(24)15-20(21)22(28)25-14-13-16-7-10-19(11-8-16)33(30,31)27-23(29)26-18-5-3-2-4-6-18/h7-12,15,18H,2-6,13-14H2,1H3,(H,25,28)(H2,26,27,29)

5-chloro-N-[2-[4-(cyclohexylcarbamoylsulfamoyl)phenyl]ethyl]-2-methoxybenzamide

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

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配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.21 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。