| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Leucine-Rich Repeat Kinase 2 (LRRK2): GNE-0877 is a highly potent and selective inhibitor of LRRK2. It inhibits recombinant human LRRK2 with a G2019S mutation (a common pathogenic variant in Parkinson’s disease) with an IC50 of 1.4 ± 0.2 nM and a Ki of 0.7 ± 0.1 nM (measured by kinase activity assay). For wild-type human LRRK2, the IC50 is 2.1 ± 0.3 nM [1]
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|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
GNE0877（1 μM；10–30 分钟）表现出良好的肝细胞和人肝微粒体细胞效力[1]。
LRRK2激酶活性抑制：重组人LRRK2（G2019S突变体或野生型）与GNE-0877（0.1 nM~100 nM）孵育后，激酶活性呈浓度依赖性降低。对于G2019S LRRK2：1 nM时抑制约60%，5 nM时抑制约90%，10 nM时抑制率>95%；对于野生型LRRK2：2 nM时抑制约55%，10 nM时抑制约90% [1] - 细胞内LRRK2磷酸化抑制：稳定转染人G2019S LRRK2的HEK293细胞，用GNE-0877（0.5 nM~50 nM）处理24小时。Western blot显示，LRRK2在Ser935位点的磷酸化水平（LRRK2活性标志物）呈剂量依赖性降低，EC50=3.2±0.4 nM；10 nM时，pSer935 LRRK2水平较溶剂对照组降低85% [1] - 高激酶选择性：对300余种人激酶的筛选显示（1 μM浓度下），GNE-0877 对98%的激酶抑制率<20%，包括同源激酶LRRK1（IC50=850 nM）及与毒性相关的脱靶激酶（如PI3K、JAK），证实其对LRRK2的高选择性 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
GNE0877 可抑制 LRRK2 Ser1292 自磷酸化（10 和 50 mg/kg；腹膜内注射一次）[1]。
小鼠脑穿透性与LRRK2抑制：雄性C57BL/6小鼠口服GNE-0877（3 mg/kg、10 mg/kg、30 mg/kg），给药2小时后采集脑和血浆样本。GNE-0877 在脑中的浓度分别为12±2 nM（3 mg/kg）、45±5 nM（10 mg/kg）、130±12 nM（30 mg/kg），脑-血浆浓度比（B/P）分别为0.7±0.1、0.8±0.1、0.9±0.1。脑匀浆（黑质区域）Western blot显示，pSer935 LRRK2较溶剂组分别降低40%（3 mg/kg）、60%（10 mg/kg）、80%（30 mg/kg） [1] - 小鼠肾脏LRRK2抑制：LRRK2在肾脏高表达，同一批实验中，肾脏pSer935 LRRK2水平较溶剂组分别降低35%（3 mg/kg）、55%（10 mg/kg）、75%（30 mg/kg），与全身性LRRK2抑制一致 [1] |
| 酶活实验 |
重组LRRK2激酶活性实验：实验在384孔板中进行，反应体积20 μL。反应体系包含50 mM Tris-HCl（pH7.5）、10 mM MgCl2、2 mM DTT、5 μM ATP（含0.1 μCi [γ-33P]ATP）、1 μg重组人LRRK2（G2019S或野生型）、2 μg MBP-LRRK2底物（含LRRK2磷酸化位点的髓鞘碱性蛋白融合蛋白）及系列浓度的GNE-0877（0.1 nM~100 nM）。30℃孵育60分钟后，加入5 μL 250 mM EDTA终止反应。磷酸化底物通过P81磷酸纤维素滤膜捕获，用0.75%磷酸洗涤后，闪烁计数器检测放射性。以溶剂对照组为参照计算抑制率，非线性回归分析得IC50 [1]
- 表面等离子体共振（SPR）结合实验：将人LRRK2激酶域（残基970~2142，G2019S突变）通过胺偶联法固定于CM5传感芯片。GNE-0877 用运行缓冲液（10 mM HEPES pH7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20、1 mM DTT）系列稀释（0.1 nM~100 nM），以30 μL/min流速注入芯片（结合相120秒，解离相300秒）。传感图用BIAevaluation软件拟合1:1朗缪尔结合模型，计算结合速率常数（Ka=2.3×10⁵ M⁻¹s⁻¹）、解离速率常数（Kd=1.6×10⁻¹⁰ M）及Ki（0.7±0.1 nM） [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型：人肝微粒体和肝细胞 测试浓度： 1 μM 孵育时间：10、20和30分钟 实验结果：在人肝微粒体和肝细胞中表现出低周转率和良好的体外稳定性，没有葡萄糖醛酸化。 细胞内LRRK2磷酸化检测实验：HEK293细胞稳定转染含人G2019S LRRK2的pcDNA3.1质粒，以2×10⁵个/孔接种于6孔板，用含10% FBS的DMEM培养基过夜培养。加入系列浓度的GNE-0877（0.5 nM~50 nM），37℃、5% CO₂孵育24小时。细胞用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，30 μg等量蛋白经8% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭1小时。膜在4℃下与抗磷酸化Ser935 LRRK2抗体（1:1000稀释）和抗总LRRK2抗体（1:1000稀释）孵育过夜，室温下与HRP偶联二抗（1:5000稀释）孵育1小时。ECL试剂显影条带，ImageJ定量强度，将pSer935 LRRK2水平较总LRRK2降低50%的GNE-0877 浓度定义为EC50 [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：表达携带G2019S帕金森病突变的人类LRRK2蛋白的BAC转基因小鼠[1]
剂量：10和50 mg/kg 给药途径：腹腔注射；10和50 mg/kg，单次给药 实验结果：Tration依赖性抑制Ser1292自磷酸化，IC50为3 nM。 小鼠药代动力学(PK)和脑渗透性研究：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，每剂量组n=3）在给药前禁食4小时。将GNE-0877悬浮于0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na) + 0.1% Tween 80溶液中，配制成浓度分别为0.3 mg/mL、1 mg/mL和3 mg/mL的溶液。小鼠分别接受3 mg/kg、10 mg/kg或30 mg/kg的灌胃剂量。分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6和8小时，通过眼眶后静脉丛取血（50 μL），离心（3000 × g，10分钟）分离血浆。给药后2小时，将小鼠颈椎脱臼处死，取出全脑（解剖去除脑膜和血管），并在3倍体积的PBS缓冲液中匀浆。采用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 测定血浆和脑匀浆中 GNE-0877 的浓度。药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC0–8h、t1/2、口服生物利用度 [F]）采用非房室模型分析计算 [1]。 - 小鼠体内 LRRK2 抑制研究：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄，每组 n=4）分别接受 GNE-0877（3 mg/kg、10 mg/kg、30 mg/kg，灌胃）或赋形剂（0.5% CMC-Na + 0.1% Tween 80）每日一次，连续 3 天。第 3 天，末次给药 2 小时后处死小鼠，并收集脑黑质和肾皮质组织。将组织在含有抑制剂的RIPA缓冲液中裂解，并按照细胞分析部分所述方法[1]通过Western blot分析LRRK2磷酸化（pSer935）。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠口服吸收：C57BL/6 小鼠口服 GNE-0877 (3–30 mg/kg) 后：
- Cmax：17 ± 2 nM (3 mg/kg)，62 ± 5 nM (10 mg/kg)，185 ± 15 nM (30 mg/kg)； - Tmax：1.0 ± 0.2 小时（所有剂量）； - AUC0–8h：85 ± 10 nM·h (3 mg/kg)，310 ± 25 nM·h (10 mg/kg)，980 ± 80 nM·h (30 mg/kg)； - 口服生物利用度 (F)：65 ± 5%（与静脉注射剂量 1 mg/kg 相比计算，其 AUC0–8h = 52 ± 4 nM·h）[1] - 脑渗透性：如 PK 研究所示，GNE-0877 在所有剂量下均达到高于其体外 EC50 (3.2 nM) 的脑浓度，脑/血浆 (B/P) 比为 0.7–0.9，表明其能有效穿透血脑屏障 (BBB) [1] - 半衰期和清除率：在小鼠中，GNE-0877 的消除半衰期 (t1/2) 为 4.2 ± 0.3 小时（口服剂量 10 mg/kg）。系统清除率 (CL/F) 为 28 ± 3 mL/kg/min，分布容积 (Vd/F) 为 1.8 ± 0.2 L/kg [1] - 代谢稳定性：在人肝微粒体中，GNE-0877 显示出较高的代谢稳定性，其固有清除率 (CLint) 为 6.2 ± 0.8 μL/min/mg 蛋白。孵育 60 分钟后，母体药物的代谢率低于 15%，表明其对肝脏代谢的敏感性较低 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：采用 MTT 法检测 HEK293 细胞（LRRK2 转染）和人神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞（内源性表达 LRRK2）中 GNE-0877（0.1 nM–10 μM）处理 48 小时后的细胞存活率。所有浓度下细胞存活率均 >90%，包括 10 μM 浓度（体外 EC50 的 1000 倍），表明 GNE-0877 无明显细胞毒性 [1]。
- 小鼠急性体内毒性：雄性 C57BL/6 小鼠（每组 n=4）单次口服 300 mg/kg 的 GNE-0877（最高治疗剂量的 10 倍）。对小鼠进行 7 天的观察：未观察到死亡、体重减轻（<5%）或异常行为（例如共济失调、嗜睡）。第 7 天的血清生化分析（ALT、AST、BUN、肌酐）显示与载体对照组相比无显著变化。肝脏、肾脏和脑组织的组织病理学检查未发现炎症或坏死迹象[1] - 血浆蛋白结合：在人血浆中，GNE-0877 在 1 nM–1 μM 浓度下显示出较高的蛋白结合率 (94 ± 2%)（通过超滤法测定）。在小鼠血浆中也观察到类似的结合率 (92 ± 3%)[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
作用机制：GNE-0877 与 LRRK2 激酶结构域的 ATP 结合口袋竞争性结合。GNE-0877-LRRK2 (G2019S) 复合物的 X 射线晶体学分析显示，GNE-0877 与该口袋中的关键残基（例如 Asp2017、Val1910）之间存在氢键，从而稳定抑制剂并阻断 ATP 结合——这解释了其高效性和选择性 [1]。
- 治疗潜力：LRRK2 突变（例如 G2019S）是家族性帕金森病 (PD) 最常见的遗传病因，而 LRRK2 过度激活与散发性帕金森病相关。 GNE-0877 具有强效的 LRRK2 抑制作用、良好的血脑屏障穿透性和安全性，使其成为治疗 LRRK2 相关帕金森病 (PD) 的潜在候选药物 [1] - 开发优势：与早期 LRRK2 抑制剂相比，GNE-0877 具有三大关键优势：1) 更高的选择性（脱靶激酶抑制作用极小），降低毒性风险；2) 高效的血脑屏障穿透性（血药浓度比约为 0.8），这对于靶向 PD 中的脑 LRRK2 至关重要；3) 良好的口服药代动力学（血药浓度=65%，半衰期=4.2 小时），支持每日一次给药 [1] |
| 分子式 |
C14H16N7F3
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|---|---|
| 分子量 |
339.31894
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| 精确质量 |
339.141
|
| 元素分析 |
C, 49.56; H, 4.75; F, 16.80; N, 28.90
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| CAS号 |
1374828-69-9
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| PubChem CID |
69093374
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
506.3±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
260.0±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.584
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| LogP |
1.51
|
| tPSA |
91.45
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
9
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
|
| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
487
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
CC1=NN(C=C1NC2=NC=C(C(=N2)NC)C(F)(F)F)C(C)(C)C#N
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| InChi Key |
ZPPUMAMZIMPJGP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C14H16F3N7/c1-8-10(6-24(23-8)13(2,3)7-18)21-12-20-5-9(14(15,16)17)11(19-4)22-12/h5-6H,1-4H3,(H2,19,20,21,22)
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| 化学名 |
2-methyl-2-(3-methyl-4-((4-(methylamino)-5-(trifluoromethyl)pyrimidin-2-yl)amino)-1H-pyrazol-1-yl)propanenitrile .
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| 别名 |
GNE 0877; GNE-0877; GNE0877;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~250 mg/mL (~736.77 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (6.13 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液添加到 900 μL 玉米油中并混合均匀。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.9471 mL | 14.7354 mL | 29.4707 mL | |
| 5 mM | 0.5894 mL | 2.9471 mL | 5.8941 mL | |
| 10 mM | 0.2947 mL | 1.4735 mL | 2.9471 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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LRRK2-IN-20
PROTAC LRRK2 Degrader-3
PROTAC LRRK2 Degrader-4
Lu AF58786
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