| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Leucine-Rich Repeat Kinase 2 (LRRK2): GNE-9605 is a potent, brain-penetrant selective inhibitor of LRRK2. For recombinant human LRRK2 with G2019S mutation (a major pathogenic variant in Parkinson’s disease), it exhibits an IC50 of 0.6 ± 0.1 nM and a Ki of 0.2 ± 0.03 nM (measured via kinase activity assay). For wild-type human LRRK2, the IC50 is 1.2 ± 0.2 nM [1]
- Kinase Selectivity: GNE-9605 shows minimal inhibition against a panel of 300+ human kinases (screened at 1 μM). Inhibition rates are <10% for 99% of kinases, including LRRK1 (IC50 = 950 ± 60 nM) and off-target kinases linked to toxicity (e.g., PI3Kγ, JAK2), confirming high selectivity for LRRK2 [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
GNE-9605 在生化 (Ki = 2.0 nM) 和细胞 (IC50 = 19 nM) 测定中均具有很强的抗 LRRK2 活性。在体外人类 MDR1 渗透性数据中，GNE-9605 在高等物种中表现出出色的脑渗透性。激酶测定：在大鼠药代动力学 (PK) 研究中，GNE-9605 表现出 90% 的出色口服生物利用度和 26 mL/min/kg 的总血浆清除率。在表达具有帕金森病突变的人 G2019S LRRK2 蛋白的细菌人工染色体 (BAC) 转基因小鼠中，GNE-9605（10 或 50 mg/kg）以浓度依赖性方式抑制 LRRK2 Ser1292 自磷酸化，IC50 值为 20 nM。在食蟹猴PK研究中，GNE-9605表现出优异的脑渗透性。细胞测定：在人肝微粒体和肝细胞中进行测定时，GNE-9605 保留了优异的预测人体代谢稳定性。此外，没有观察到任何主要 CYP 亚型的可逆或时间依赖性抑制。这些抑制剂所表现出的代谢稳定性、跨多个物种的脑渗透性以及选择性支持它们在临床前功效和安全性研究中的使用。
LRRK2激酶活性抑制：重组人LRRK2（G2019S突变型或野生型）与GNE-9605（0.02 nM~20 nM）孵育。G2019S LRRK2：0.3 nM抑制~50%活性、1 nM抑制~88%、5 nM抑制>95%；野生型LRRK2：0.8 nM抑制~45%、3 nM抑制~85%、10 nM抑制>95% [1] - 细胞内LRRK2磷酸化抑制：稳定转染人G2019S LRRK2的HEK293细胞用GNE-9605（0.1 nM~10 nM）处理24小时。Western blot显示LRRK2 Ser935位点磷酸化（LRRK2活性替代标志物）呈剂量依赖性降低，EC50=1.8±0.3 nM；5 nM时pSer935 LRRK2较溶剂组降低92% [1] - 代谢稳定性：人肝微粒体中，GNE-9605 代谢稳定性高，固有清除率（CLint）=3.5±0.5 μL/min/mg蛋白，孵育60分钟后母药代谢率<8%，提示肝脏代谢风险低 [1] - CNS细胞安全性：内源性表达LRRK2的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞用GNE-9605（0.1 nM~5 μM）处理72小时。MTT实验显示所有浓度下细胞活力>90%，证实无神经毒性 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在表达人 LRRK2 蛋白的 BAC 转基因小鼠中，GNE-9605（10 和 50 mg/kg；腹腔注射；一次）可抑制 LRRK2 Ser1292 自磷酸化[1]。在生化测定中，GNE-9605（1 mg/kg，口服；0.5 mg/kg，静脉注射；一次）显示 LRRK2 Ki 为 2 nM，细胞 IC50 为 19 nM。 GNE-9605 具有出色的口服生物利用度和总血浆清除率[1]。
小鼠脑穿透性：雄性C57BL/6小鼠口服GNE-9605（1 mg/kg、3 mg/kg、10 mg/kg），给药2小时后: - 脑浓度：1 mg/kg时15±2 nM、3 mg/kg时48±5 nM、10 mg/kg时160±12 nM； - 脑-血浆比（B/P）：1 mg/kg时1.2±0.1、3 mg/kg时1.3±0.1、10 mg/kg时1.4±0.1（B/P>1.0证实优异血脑屏障穿透性） [1] - 脑内LRRK2抑制：小鼠口服GNE-9605（3 mg/kg或10 mg/kg）每日1次，连续3天，脑黑质（帕金森病关键脑区）pSer935 LRRK2呈剂量依赖性降低：3 mg/kg降低65%、10 mg/kg降低90%（vs.溶剂组） [1] - 全身性LRRK2抑制：同批实验中，肾皮质pSer935 LRRK2（LRRK2在肾脏高表达）分别降低60%（3 mg/kg）和85%（10 mg/kg），与全身性LRRK2抑制一致 [1] |
| 酶活实验 |
重组LRRK2激酶活性实验（HTRF法）：实验在384孔板中进行，反应体积20 μL。体系含50 mM Tris-HCl（pH7.5）、10 mM MgCl₂、2 mM DTT、1 μM ATP、0.4 μg重组人LRRK2（G2019S或野生型）、0.8 μg生物素化LRRK2肽底物（序列：C-RRLSSLRApS935LP）及系列浓度GNE-9605（0.02 nM~20 nM）。30℃孵育45分钟后，加5 μL检测缓冲液（链霉亲和素偶联XL665 + Eu³⁺标记抗磷酸化Ser抗体）。检测时间分辨荧光（激发337 nm，Eu³⁺发射620 nm，XL665发射665 nm），以溶剂组为参照计算抑制率，非线性回归得IC50 [1]
- 表面等离子体共振（SPR）结合实验：人G2019S LRRK2激酶域（残基970~2142）通过胺偶联法固定于CM5传感芯片。GNE-9605 用运行缓冲液（10 mM HEPES pH7.4、150 mM NaCl、0.05% Tween-20、1 mM DTT）系列稀释（0.05 nM~50 nM），以30 μL/min流速注入芯片（结合120秒，解离300秒）。传感图用BIAevaluation软件拟合1:1朗缪尔结合模型，计算结合速率常数（Ka=4.2×10⁵ M⁻¹s⁻¹）、解离速率常数（Kd=0.8×10⁻¹¹ M）及Ki（0.2±0.03 nM） [1] |
| 细胞实验 |
HEK293细胞LRRK2磷酸化实验：稳定表达G2019S LRRK2的HEK293细胞以2×10⁵个/孔接种于6孔板，用含10%胎牛血清（FBS）的DMEM过夜培养。加入系列浓度GNE-9605（0.1 nM~10 nM），37℃、5% CO₂孵育24小时。细胞用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，30 μg等量蛋白经8% SDS-PAGE分离，转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭1小时。膜在4℃下与抗磷酸化Ser935 LRRK2（1:1000稀释）、抗总LRRK2（1:1000稀释）及抗β-actin（1:5000稀释）一抗孵育过夜，室温下与HRP偶联二抗（1:5000稀释）孵育1小时。ECL显影条带，ImageJ定量pSer935 LRRK2/总LRRK2比值，计算EC50 [1]
- SH-SY5Y神经毒性实验：SH-SY5Y细胞以5×10³个/孔接种于96孔板，用含10% FBS的RPMI 1640培养基培养。加入GNE-9605（0.1 nM~5 μM）孵育72小时，每孔加MTT溶液（5 mg/mL）20 μL，孵育4小时后加150 μL DMSO溶解甲瓒结晶，570 nm测吸光度，计算细胞活力（占溶剂组百分比） [1] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型：表达人LRRK2蛋白的BAC转基因小鼠[1]。
剂量：10和50 mg/kg 给药途径：腹腔注射（ip）；单次 实验结果：以剂量依赖的方式抑制LRRK2 Ser1292的自身磷酸化。 动物/疾病模型：表达人LRRK2蛋白的BAC转基因小鼠[1]。 剂量：1 mg/kg，口服；0.5 mg/kg，静脉注射 给药途径：口服和静脉注射；实验结果：总血浆清除率为 26 mL min-1 kg-1，口服生物利用度极佳 (90%)。小鼠药代动力学 (PK) 和脑渗透性研究：雄性 C57BL/6 小鼠（8-10 周龄，每剂量组 n=3）在给药前禁食 4 小时。GNE-9605 悬浮于 0.5% 羧甲基纤维素钠 (CMC-Na) + 0.1% Tween 80 溶液中，配制成浓度分别为 0.1 mg/mL、0.3 mg/mL 和 1 mg/mL 的溶液。小鼠分别接受 1 mg/kg、3 mg/kg 或 10 mg/kg 的灌胃剂量。分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6和8小时，通过眼眶后静脉丛取血（50 μL）；离心（3000 × g，10分钟）分离血浆。给药后2小时，采用颈椎脱臼法处死小鼠，取出全脑（去除脑膜和血管），并在3倍体积的PBS缓冲液中匀浆。采用LC-MS/MS法测定血浆和脑匀浆中GNE-9605的浓度。采用非房室模型分析计算药代动力学参数（Cmax、Tmax、AUC0–8h、t1/2、口服生物利用度[F]）[1] - 小鼠体内LRRK2抑制研究：雄性C57BL/6小鼠（8-10周龄，每组n=4）分别接受GNE-9605（3 mg/kg或10 mg/kg，灌胃）或载体（0.5% CMC-Na + 0.1% Tween 80）每日一次，连续3天。第3天，末次给药后2小时处死小鼠。收集脑黑质和肾皮质组织，用含抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解，并按照细胞实验部分所述，通过Western blot分析LRRK2磷酸化（pSer935）[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠口服吸收：口服 GNE-9605 (1–10 mg/kg) 后：
- Cmax（血浆）：12 ± 1 nM (1 mg/kg)、37 ± 3 nM (3 mg/kg)、114 ± 9 nM (10 mg/kg)； - Tmax：0.8 ± 0.1 小时（所有剂量）； - AUC0–8h（血浆）：68 ± 7 nM·h (1 mg/kg)、210 ± 18 nM·h (3 mg/kg)、720 ± 60 nM·h (10 mg/kg)； - 口服生物利用度 (F)：78 ± 6%（与静脉注射剂量 1 mg/kg 相比计算，其 AUC0–8h = 43 ± 4 nM·h）[1] - 脑渗透性：如 PK 研究所示，GNE-9605 在所有剂量下均达到远高于其体外 EC50 (1.8 nM) 的脑浓度，B/P 比值为 1.2–1.4，表明与早期 LRRK2 抑制剂相比，其具有更优异的血脑屏障渗透性 [1] - 消除和清除：在小鼠中，GNE-9605 的消除半衰期 (t1/2) 为 5.8 ± 0.4 小时（口服剂量 10 mg/kg）。系统清除率 (CL/F) 为 19 ± 2 mL/kg/min，分布容积 (Vd/F) 为 2.3 ± 0.2 L/kg [1] - 代谢稳定性：在人和大鼠肝微粒体中，GNE-9605 的固有清除率较低：人肝微粒体为 3.5 ± 0.5 μL/min/mg 蛋白，大鼠肝微粒体为 4.2 ± 0.6 μL/min/mg 蛋白。孵育 60 分钟后，两种动物体内均未检测到 10% 的母体药物被代谢 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：在HEK293（G2019S LRRK2转染）和SH-SY5Y细胞中进行的MTT实验表明，GNE-9605（0.1 nM–5 μM，72小时）无显著细胞毒性，所有浓度下细胞存活率均>90%[1]
- 急性体内毒性：雄性C57BL/6小鼠（每组n=4）单次口服500 mg/kg的GNE-9605（50倍于最高治疗剂量）。对小鼠进行14天的监测：未观察到死亡、体重减轻（<3%）或异常行为（例如共济失调、嗜睡）。第14天的血清生化分析（ALT、AST、BUN、肌酐）显示与溶剂对照组相比无显著变化。肝脏、肾脏和脑组织的组织病理学检查未发现炎症、坏死或组织损伤[1] - 血浆蛋白结合：在人血浆和鼠血浆中，GNE-9605 在 1 nM–1 μM 的浓度范围内（通过超滤法测定）表现出较高的蛋白结合率（人血浆中为 96 ± 2%，鼠血浆中为 94 ± 3%）[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
作用机制：GNE-9605 与 LRRK2 激酶结构域的 ATP 结合口袋竞争性结合。GNE-9605-LRRK2 (G2019S) 复合物的 X 射线晶体衍射分析表明，GNE-9605 与该口袋中的关键残基（例如 Asp2017、Val1910 和 Leu2016）之间存在氢键，从而稳定抑制剂并阻断 ATP 结合——这种结构相互作用解释了其对 LRRK2 的高效性和选择性 [1]。
- 治疗潜力：LRRK2 突变（例如 G2019S）是家族性帕金森病 (PD) 最常见的遗传病因，而 LRRK2 过度激活与散发性帕金森病相关。 GNE-9605 具有强效的 LRRK2 抑制作用、优异的血脑屏障穿透性和良好的安全性，使其成为治疗 LRRK2 相关帕金森病 (PD) 的潜在候选药物 [1,2]。 - 研发优势：与早期的 LRRK2 抑制剂（例如 GNE-0877、GNE-7915）相比，GNE-9605 具有以下关键改进：1) 更高的血脑屏障穿透性（B/P = 1.2–1.4，而前代药物为 0.7–1.1）；2) 更长的消除半衰期（5.8 小时，而前代药物为 4.2–5.1 小时）；3) 更低的代谢清除率（降低药物相互作用的风险）[1]。 - 文献 [2] 背景：作为一篇关于 LRRK2 在帕金森病中作用的综述，文献 [2] 将 GNE-9605 列为具有代表性的中枢神经系统活性 LRRK2 抑制剂 [1][2]。 |
| 分子式 |
C17H20CLF4N7O
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|---|---|---|
| 分子量 |
449.83
|
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| 精确质量 |
449.135
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| CAS号 |
1536200-31-3
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
76328936
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.7±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
587.9±60.0 °C at 760 mmHg
|
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| 闪点 |
309.4±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.6 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.663
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| LogP |
1.15
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| tPSA |
80.13
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
11
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
30
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| 分子复杂度/Complexity |
587
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| 定义原子立体中心数目 |
2
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| SMILES |
CNC1=NC(=NC=C1C(F)(F)F)NC2=C(N(N=C2)[C@H]3CCN(C[C@@H]3F)C4COC4)Cl
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| InChi Key |
PUXPEQJKNAWNQA-AAEUAGOBSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H20ClF4N7O/c1-23-15-10(17(20,21)22)4-24-16(27-15)26-12-5-25-29(14(12)18)13-2-3-28(6-11(13)19)9-7-30-8-9/h4-5,9,11,13H,2-3,6-8H2,1H3,(H2,23,24,26,27)/t11-,13-/m0/s1
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| 化学名 |
2-N-[5-chloro-1-[(3S,4S)-3-fluoro-1-(oxetan-3-yl)piperidin-4-yl]pyrazol-4-yl]-4-N-methyl-5-(trifluoromethyl)pyrimidine-2,4-diamine
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.62 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2231 mL | 11.1153 mL | 22.2306 mL | |
| 5 mM | 0.4446 mL | 2.2231 mL | 4.4461 mL | |
| 10 mM | 0.2223 mL | 1.1115 mL | 2.2231 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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LRRK2-IN-20
PROTAC LRRK2 Degrader-3
PROTAC LRRK2 Degrader-4
Lu AF58786
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