| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
Enhancer of Zeste Homolog 2 (EZH2), the catalytic subunit of the Polycomb Repressive Complex 2 (PRC2). Ki values: ~0.5 nM (for EZH2-Y641F mutant), ~0.6 nM (EZH2-Y641N), ~0.9 nM (EZH2-Y641S), ~7.5 nM (wild-type EZH2, EZH2-WT) (measured via recombinant PRC2 enzyme assay). IC50 for PRC2 complex activity (H3K27 methylation) was ~4 nM (EZH2-Y641F) and ~50 nM (EZH2-WT). No significant inhibition of other methyltransferases (e.g., SUV39H1, G9a, DOT1L) at concentrations up to 1 μM, confirming high selectivity [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
无论采用何种底物，GSK126 都会选择性抑制野生型和突变型 EZH2 甲基转移酶的活性，并具有相似的功效 (Ki=0.5-3 nM)。它与 S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 具有竞争性，但与肽底物不具有竞争性。 GSK126 对许多其他蛋白质类别和其他甲基转移酶具有显着的选择性（EZH1，IC50=680 nM）[1]。用 GSK126 处理三种 SCLC 细胞系以引起生长抑制。 Lu130、H209和DMS53 SCLC细胞系用0.5、2和8μM GSK126处理，并使用WST-8测试检查生长曲线。 8 μM 的 GSK126 处理可降低所有三种细胞系的细胞增殖，但 Lu130 和 H209 对 GSK126 更敏感，即使剂量较低也是如此 [2]。
1. 携带EZH2激活突变的淋巴瘤细胞系（OCI-Ly19、Karpas-422：EZH2-Y641F；Pfeiffer：EZH2-Y641N）：GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)以剂量依赖性方式抑制细胞增殖。处理72小时后，IC50值分别为OCI-Ly19（约3 nM）、Karpas-422（约4 nM）、Pfeiffer（约5 nM）（CellTiter-Glo法）。而EZH2-WT淋巴瘤细胞（如Raji、SU-DHL-4）的IC50>100 nM，表明该药物对EZH2突变细胞具有选择性敏感性[1] 2. OCI-Ly19细胞Western blot检测：用GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)（0.1-100 nM）处理48小时后，组蛋白H3赖氨酸27三甲基化（H3K27me3）呈剂量依赖性降低，10 nM时降低>90%；总H3蛋白及无关组蛋白修饰（H3K4me3）无显著变化[1] 3. PRC2靶基因qPCR检测：10 nM GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)处理OCI-Ly19细胞72小时后，PRC2抑制的靶基因表达上调，包括p16INK4a（CDKN2A，约8倍）、BMP6（约6倍）、CDH1（约4倍）（相较于溶剂对照组）[1] 4. Karpas-422细胞凋亡检测：流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染）显示，10 nM GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)处理72小时后，细胞凋亡率从对照组的4.5%升至处理组的28.3%[1] 5. 集落形成实验：OCI-Ly19细胞以500个/孔接种于6孔板，用1-10 nM GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)处理14天，集落数量呈剂量依赖性减少；10 nM时集落形成能力较对照组降低约75%[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在雌性米色 SCID 小鼠中，以每 20 克体重 0.2 毫升的剂量腹腔内给予 GSK126。 GSK126显着有效地抑制小鼠EZH2突变型DLBCL异种移植物的生长以及EZH2突变型DLBCL细胞系的增殖[1]。
1. OCI-Ly19异种移植模型（雌性SCID小鼠，6-8周龄）：将2×10^7个OCI-Ly19细胞（溶于PBS+50%基质胶）皮下注射到小鼠右侧背部。当肿瘤体积达约150 mm³时，小鼠随机分为两组（每组6只）：（1）溶剂组：0.5%甲基纤维素+0.1%吐温80（每日两次口服灌胃）；（2）GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)组：100 mg/kg（每日两次口服灌胃），处理持续21天。 - 肿瘤生长抑制率（TGI）：第21天处理组平均肿瘤体积约220 mm³，溶剂组约1100 mm³，TGI约80%[1] - 肿瘤组织分析：肿瘤裂解液Western blot显示处理组H3K27me3降低约95%；qPCR证实处理组肿瘤中p16INK4a（约7倍）和BMP6（约5倍）上调[1] - 体重变化：实验期间处理组小鼠无显著体重下降（<5%）[1] |
| 酶活实验 |
1. 重组PRC2酶活实验（Ki值测定）：
- 反应体系：50 mM Tris-HCl（pH 8.0）、5 mM MgCl2、1 mM DTT、0.1 mg/mL BSA、20 nM重组PRC2复合物（含EZH2-WT或EZH2-Y641突变体、EED、SUZ12）、1 μM生物素化组蛋白H3（1-21位氨基酸）肽（底物）、0.5 μM [3H]-S-腺苷甲硫氨酸（SAM，放射性甲基供体）及不同浓度的GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)（0.01-100 nM）。 - 孵育与检测：混合物在37°C孵育60分钟后，加入5%三氯乙酸（TCA）终止反应；用玻璃纤维滤膜收集沉淀肽段，经TCA和乙醇洗涤后，通过液体闪烁计数器检测放射性。 - Ki值计算：使用GraphPad Prism将动力学数据拟合至竞争性抑制模型（相对于SAM），测定EZH2-WT及突变体的Ki值[1] 2. 甲基转移酶选择性实验：采用上述相同反应体系，将PRC2替换为其他甲基转移酶（SUV39H1、G9a、DOT1L、SET7/9）（各20 nM）。GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)测试浓度为1 μM，对所有非靶标甲基转移酶的抑制率<5%，证实其对EZH2的高选择性[1] |
| 细胞实验 |
1. 细胞增殖实验：
- 细胞接种：淋巴瘤细胞系（OCI-Ly19、Karpas-422、Pfeiffer、Raji）以5×10^3个/孔的密度接种于96孔板，培养基为含10% FBS、1%青霉素-链霉素的RPMI-1640。 - 药物处理：贴壁24小时后，加入浓度为0.01、0.1、1、10、100 nM的GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)（每浓度3个复孔），37°C（5% CO2）孵育72小时。 - 活力检测：每孔加入100 μL CellTiter-Glo试剂，10分钟后检测发光值，采用四参数逻辑模型计算IC50[1] 2. H3K27me3 Western blot实验： - 蛋白提取：用GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)（0.1-100 nM）处理48小时的OCI-Ly19细胞，经含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解后，BCA法测定蛋白浓度。 - 电泳与检测：30 μg蛋白经15% SDS-PAGE电泳后转印至PVDF膜，用5%脱脂牛奶（TBST）封闭1小时；膜与一抗（抗H3K27me3、抗总H3、抗H3K4me3）4°C孵育过夜，再与HRP偶联二抗室温孵育1小时；ECL试剂显影，ImageJ定量条带[1] 3. PRC2靶基因qPCR实验： - RNA提取：用RNA提取试剂盒从处理后的OCI-Ly19细胞中提取总RNA，通过随机引物逆转录合成cDNA。 - 实时定量PCR：使用SYBR Green预混液和基因特异性引物（p16INK4a、BMP6、CDH1，内参基因为GAPDH）进行qPCR，采用2^(-ΔΔCt)法计算相对基因表达量[1] |
| 动物实验 |
溶于 20% Captisol；150 mg/kg；腹腔注射。荷 Pfeiffer 或 KARPAS-422 肿瘤的雌性米色 SCID 小鼠。
1. 异种移植模型建立： - 小鼠准备：将 6-8 周龄的雌性 SCID 小鼠在实验室环境中适应 1 周。在对数生长期收集 OCI-Ly19 细胞，用 PBS 洗涤，并重悬于 PBS + 50% Matrigel 中，浓度为 1×10^8 个细胞/mL。 - 细胞注射：每只小鼠右侧腹部皮下注射 0.2 mL 细胞悬液（2×10^7 个细胞）[1]。 2. 治疗方案： - 随机分组：当肿瘤体积达到约 150 mm³（注射后 7-10 天）时，将小鼠随机分为两组（每组 n=6），以确保两组间肿瘤平均体积相等。 - 药物配制：将GSK126（GSK2816126；GSK 2816126A）溶解于0.5%甲基纤维素+0.1%吐温80溶液中，配制成浓度为20 mg/mL的溶液（剂量为100 mg/kg，基于小鼠平均体重20 g）。 - 给药：治疗组每日两次灌胃给予GSK126（GSK2816126；GSK 2816126A）（100 mg/kg）；对照组灌胃给予等体积的溶剂。治疗持续21天[1] 3. 监测和样本采集： - 肿瘤体积：每2天用游标卡尺测量肿瘤的长度（L）和宽度（W），并根据公式V = L×W²/2计算肿瘤体积。 - 体重：每周称量小鼠体重以评估毒性。 - 组织采集：治疗结束后，采用颈椎脱臼法处死小鼠。解剖肿瘤，称重，并分成两份：一份冷冻于-80°C用于Western blot/qPCR，另一份用福尔马林固定用于组织学检查（未观察到明显的病理变化）[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 小鼠血浆药代动力学：
- 给药：雌性 SCID 小鼠（每个时间点 n=3）单次口服 GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)（100 mg/kg）或静脉注射（10 mg/kg）。 - 样本采集：分别于给药后 0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时采集血浆样本。 - 分析：采用 LC-MS/MS 法测定药物浓度。关键参数：Cmax（口服）= ~1.2 μM，Tmax（口服）= ~1 小时，半衰期（t1/2，口服）= ~3.5 小时，AUC0-24h（口服）= ~8.6 μM·h，AUC0-24h（静脉注射）= ~2.1 μM·h [1] 2. 肿瘤渗透： - 荷 OCI-Ly19 异种移植瘤的小鼠接受口服 GSK126（GSK2816126；GSK 2816126A）（100 mg/kg）治疗。分别于给药后 1、4 和 8 小时收集肿瘤和血浆样本。 - 采用 LC-MS/MS 法测定肿瘤药物浓度。1 小时时肿瘤/血浆浓度比约为 0.9，4 小时时约为 1.1，表明药物有效渗透至肿瘤 [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性（SCID小鼠）：
- 小鼠单次口服给予GSK126（GSK2816126；GSK 2816126A）（200、400、600 mg/kg）（每剂量组n=3）。7天内未观察到死亡。600 mg/kg剂量组出现短暂性体重下降（<8%），4天内恢复[1] 2. 亚慢性毒性（异种移植模型）： - 小鼠每日两次口服100 mg/kg GSK126（GSK2816126；GSK 2816126A），持续21天，与溶媒组相比，肝功能（ALT、AST）或肾功能（BUN、肌酐）均未见显著变化。对主要器官（肝脏、肾脏、脾脏）的组织学检查未发现药物引起的病变[1] 3. 血浆蛋白结合：[1]中未明确报告 |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
GSK126 属于甲基吲哚类化合物，其结构为 1H-吲哚，分别在 1、3、4 和 6 位被 (2S)-丁-2-基、甲基、N-[(4,6-二甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基]乙酰胺和 6-(哌嗪-1-基)吡啶-3-基取代。它是一种强效且高选择性的 EZH2 甲基转移酶抑制剂（IC50 = 9.9 nM）。GSK126 具有神经保护、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤、抗肥胖、抑制血管生成以及抑制 EC 2.1.1.43（增强子同源物 2）等多种药理活性。它属于吡啶类、仲羧酰胺类、吡啶酮类、N-芳基哌嗪类和甲基吲哚类化合物。
EZH2 抑制剂是指任何抑制组蛋白赖氨酸甲基转移酶 EZH2 的药物。 1. 作用机制：GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A) 是一种选择性的、SAM 竞争性 EZH2 抑制剂。它与 EZH2 的 SAM 结合口袋结合，阻止 SAM 向 H3K27 提供甲基，从而减少 H3K27me3 并重新激活 PRC2 抑制的肿瘤抑制基因（例如 p16INK4a）[1] 2. 治疗潜力：该药物对携带 EZH2 激活突变（Y641F/N/S）的淋巴瘤细胞具有选择性疗效，这些突变在滤泡性淋巴瘤和弥漫性大 B 细胞淋巴瘤中很常见。其良好的口服生物利用度和在小鼠体内的低毒性支持其作为 EZH2 突变淋巴瘤靶向治疗药物的开发[1] 3. 文献[2]主要关注 PRC2 过表达和小细胞肺癌的预后，并未提及 EZH2 抑制剂或GSK126 (GSK2816126; GSK 2816126A)[2] |
| 分子式 |
C31H38N6O2
|
|
|---|---|---|
| 分子量 |
526.67
|
|
| 精确质量 |
526.305
|
|
| CAS号 |
1346574-57-9
|
|
| 相关CAS号 |
|
|
| PubChem CID |
68210102
|
|
| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
|
|
| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
|
|
| 沸点 |
823.4±65.0 °C at 760 mmHg
|
|
| 闪点 |
451.8±34.3 °C
|
|
| 蒸汽压 |
0.0±3.0 mmHg at 25°C
|
|
| 折射率 |
1.654
|
|
| LogP |
3.14
|
|
| tPSA |
98.8
|
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
|
| 可旋转键数目(RBC) |
7
|
|
| 重原子数目 |
39
|
|
| 分子复杂度/Complexity |
972
|
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
|
|
| SMILES |
CC[C@H](C)N1C=C(C2=C(C=C(C=C21)C3=CN=C(C=C3)N4CCNCC4)C(=O)NCC5=C(C=C(NC5=O)C)C)C
|
|
| InChi Key |
FKSFKBQGSFSOSM-QFIPXVFZSA-N
|
|
| InChi Code |
InChI=1S/C31H38N6O2/c1-6-22(5)37-18-20(3)29-25(30(38)34-17-26-19(2)13-21(4)35-31(26)39)14-24(15-27(29)37)23-7-8-28(33-16-23)36-11-9-32-10-12-36/h7-8,13-16,18,22,32H,6,9-12,17H2,1-5H3,(H,34,38)(H,35,39)/t22-/m0/s1
|
|
| 化学名 |
(S)-1-(sec-butyl)-N-((4,6-dimethyl-2-oxo-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-3-methyl-6-(6-(piperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-indole-4-carboxamide
|
|
| 别名 |
GSK-2816126; GSK 2816126; GSK2816126; GSK126; GSK-126; GSK 126
|
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
|
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 1.25 mg/mL (2.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.37 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: ≥ 0.82 mg/mL (1.56 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 5 中的溶解度: ≥ 0.82 mg/mL (1.56 mM) (饱和度未知) in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 配方 6 中的溶解度: 4% DMSO+corn oil:0.5mg/mL 配方 7 中的溶解度: 10 mg/mL (18.99 mM) in 50% PEG300 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 8 中的溶解度: 20 mg/mL (37.97 mM) in 20% SBE-β-CD adjusted to pH 4-4.5 with 1 N acetic (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 通过加热和超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8987 mL | 9.4936 mL | 18.9872 mL | |
| 5 mM | 0.3797 mL | 1.8987 mL | 3.7974 mL | |
| 10 mM | 0.1899 mL | 0.9494 mL | 1.8987 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Recruitment | interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT02082977 | Terminated Has Results | Drug: GSK2816126 | Cancer Neoplasms |
GlaxoSmithKline | April 24, 2014 | Phase 1 |
|
|
|
BI-9466
MRK-740-NC
SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
