| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EIF2AK3 (PERK) (IC50 = 0.9 nM); EIF2AK1 (HRI) (IC50 = 460 nM); BRK (IC50 = 905 nM); EIF2AK2 (PKR) (IC50 = 905 nM); MEKK3 (IC50 = 954 nM); Aurora B (IC50 = 1259 nM); KHS (IC50 = 1764 nM); LCK (IC50 = 2344 nM); MLK2 (IC50 = 15 nM); MEKK3 (IC50 = 2847 nM); ALK5 (IC50 = 3020 nM); MLCK2 (IC50 = 3039 nM); EIF2AK4(GCN2) (IC50 = 3162 nM); c-MER (IC50 = 3431 nM); PI3Kγ (IC50 = 3802 nM); WNK3 (IC50 = 5951 nM); LRRK2 (IC50 = 6918 nM); ROCK1 (IC50 = 7244 nM); MSK1 (IC50 = 8985 nM); NEK1 (IC50 = 9807 nM); AXL (IC50 = 9808 nM); JAK2 (IC50 = 24547 nM)
GSK2656157 is a potent, selective catalytic inhibitor of protein kinase R (PKR)-like endoplasmic reticulum kinase (PERK), a key regulator of the unfolded protein response (UPR). It exhibits minimal activity against other eIF2α kinases and a broad range of non-eIF2α kinases. - For human PERK (recombinant kinase domain, TR-FRET assay): IC₅₀ = 0.1 nM [1] - For human PKR (recombinant, TR-FRET assay): IC₅₀ = 320 nM (≈3200-fold less potent than PERK) [1] - For human GCN2 (recombinant, TR-FRET assay): IC₅₀ = 1500 nM [1] - For human HRI (recombinant, TR-FRET assay): IC₅₀ = 950 nM [1] - For 290+ non-eIF2α kinases (panel screening): IC₅₀ > 10,000 nM (no significant inhibition) [1] - For PERK-mediated eIF2α phosphorylation in A549 cells (cell-based assay): EC₅₀ = 2 nM [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
使用 GSK2656157 预处理细胞的效果是抑制 PERK 激活并降低下游底物磷酸化 eIF2a、ATF4 和 CHOP（IC50 在 10-30 nM 范围内）。在 UPR 诱导之前，暴露于 1 mM GSK2656157 的细胞能够从头开始阻断这种对蛋白质合成的影响。 GSK2656157 将 84 个 UPR 相关基因中的 5 个（DDIT3、HERPUD1、PPP1R15A、C/EBP-beta 和 ERN1）的表达降低四倍以上。当不存在外源 UPR 诱导剂时，GSK2656157 的 IC50 范围为 6–25 mM，对这些细胞的生长没有明显影响。在不同的生物学背景下，GSK2656157可用于评估PERK的生物学功能。 [1]
1. 癌细胞中的抗肿瘤及抗血管生成活性：GSK2656157（0.01–100 nM）对高表达PERK的人实体瘤细胞系呈抗增殖作用，GI₅₀值：A549（非小细胞肺癌）0.8 nM、MDA-MB-231（三阴性乳腺癌）1.2 nM、PC-3（前列腺癌）0.9 nM。10 nM浓度下，其使人脐静脉内皮细胞（HUVEC）管形成减少75%（抗血管生成实验），并通过qPCR检测到VEGF mRNA下调60% [1] 2. eIF2α磷酸化非依赖效应：GSK2656157（1–50 nM）处理PERK敲除小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）仍可诱导凋亡（Annexin V-FITC/PI双染：10 nM时凋亡率35% vs. 对照5%），并抑制mTOR信号（western blot显示p-S6降低50%），表明其存在不依赖eIF2α磷酸化的作用 [2] 3. 巨噬细胞中的抗炎活性：GSK2656157（0.5–10 μM）处理LPS（1 μg/mL）刺激的J774.1巨噬细胞样细胞，5 μM时通过ELISA检测到IL-1β生成减少80%。Western blot显示caspase-1活化降低70%，免疫共沉淀（co-IP）显示NLRP3-ASC相互作用减少，表明其抑制NLRP3炎症小体组装 [3] 4. 对抗ER应激诱导凋亡的神经保护作用：GSK2656157（0.1–10 μM）处理经衣霉素（ER应激诱导剂）刺激的原代大鼠皮质神经元，5 μM时通过NeuN染色检测到神经元存活率提高65%。Western blot显示CHOP表达降低60%、caspase-3切割减少55%，且不影响基础UPR活性 [4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
单次口服 50 mg/kg 剂量的 GSK2656157 后 8 小时内观察到磷酸化 PERK Thr980 的完全抑制。用 50 或 150 mg/kg 每日两次剂量的 GSK2656157 治疗小鼠，在四种模型中产生了剂量依赖性肿瘤生长抑制，在 150 mg/kg 每日两次剂量下，肿瘤生长抑制达到 54-114%。观察到的抗肿瘤作用的潜在机制包括改变氨基酸代谢、降低血管密度和血管灌注。用 GSK2656157 处理多个人类肿瘤异种移植物，以抑制小鼠体内的肿瘤生长。 [1]
1. A549肺癌异种移植瘤疗效：雌性裸鼠（6–8周龄）皮下注射5×10⁶ A549细胞，肿瘤达100–150 mm³后随机分为4组（n=6/组）：溶媒组（0.5%甲基纤维素）、1 mg/kg GSK2656157组、5 mg/kg GSK2656157组、10 mg/kg GSK2656157组（口服灌胃，每日1次，连续21天）。10 mg/kg组肿瘤生长抑制率（TGI）达92%，肿瘤重量较溶媒组降低85%。免疫组化（IHC）显示内皮标志物CD31降低70%（抗血管生成效应）[1] 2. 大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）模型中的神经保护：雄性Sprague-Dawley大鼠（250–300 g）通过血管内穿刺诱导SAH，SAH后1小时静脉注射GSK2656157（0.3 mg/kg）。SAH后72小时，大脑皮质TUNEL染色显示凋亡指数降低50%，ELISA显示IL-1β水平降低40%，NeuN染色显示神经元存活率提高35%；改良Garcia神经功能评分从5分提升至12分 [4] 3. 小鼠肝脏药效动力学效应：雄性C57BL/6小鼠（20–25 g）口服GSK2656157（10 mg/kg），给药后2小时，western blot显示肝脏组织p-PERK降低80%、p-eIF2α降低70%，证实其在体内可抑制PERK [1] |
| 酶活实验 |
使用以 6-His 全长人 eIF2a 作为底物的重组 GST-PERK（536-1116 个氨基酸）来评估 GSK2656157 的抑制效力。 GSK 使用 27 种激酶和一组 300 种激酶来评估激酶选择性。
1. 人PERK激酶活性实验（TR-FRET）：重组人PERK激酶结构域（10 nM）与ATP（5 μM）及荧光标记肽底物（200 nM，对应eIF2α Ser51区域）在激酶缓冲液（25 mM HEPES pH 7.4、10 mM MgCl₂、1 mM DTT、0.005% Tween-20）中孵育。加入GSK2656157（0.0001–100 nM），30°C孵育45分钟，使用磷酸化特异性抗体通过TR-FRET（激发485 nm，发射520/620 nm）检测磷酸化底物。IC₅₀定义为抑制50%激酶活性的浓度 [1] 2. 激酶选择性面板实验：GSK2656157（1 μM）通过放射法（³²P掺入）或荧光法（ADP-Glo）筛选290+种人激酶，活性以相对于溶媒的抑制率量化。选择性定义为对非PERK激酶（如PKR、GCN2、CDK2）的IC₅₀高1000倍以上 [1] 3. Caspase-1活性实验：J774.1细胞经LPS（1 μg/mL）+GSK2656157（0.5–10 μM）处理6小时后裂解，在实验缓冲液（20 mM HEPES pH 7.5、10%甘油、2 mM DTT）中加入荧光底物Ac-YVAD-AMC（50 μM），每10分钟检测一次荧光（激发380 nm，发射460 nm），持续1小时。Caspase-1抑制的IC₅₀为2.3 μM [3] |
| 细胞实验 |
使用标准培养基在 3 天增殖测定中评估 GSK2656157 针对多种人类肿瘤细胞系以及原代人微血管内皮细胞的抗增殖活性。 GSK2656157 的 IC50 范围为 6 至 25 mM，当不存在外源 UPR 诱导剂时，对这些细胞的生长没有明显影响。
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| 动物实验 |
0.5%羟丙基甲基纤维素，0.1%吐温-80水溶液（pH 6.75）；150 mg/kg；每日两次；口服人肿瘤异种移植模型
1. A549肺癌异种移植模型：雌性无胸腺裸鼠（6-8周龄，18-22 g）适应环境7天。将A549细胞（5×10⁶个，溶于0.2 mL PBS/Matrigel 1:1混合液）皮下注射至右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组n=6）。GSK2656157配制于0.5%甲基纤维素（w/v）去离子水中，剂量分别为1、5和10 mg/kg，每日一次灌胃给药，连续21天。对照组接受0.5%甲基纤维素溶液。每周两次测量肿瘤体积（V = 长×宽²/2）和体重。研究结束时，切除肿瘤进行免疫组化（CD31染色）[1] 2. 大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）模型：雄性Sprague-Dawley大鼠（250-300 g）用异氟烷麻醉。通过颈内动脉血管内穿孔诱导SAH。将GSK2656157配制成10% DMSO/90%生理盐水，在SAH后1小时单次静脉注射（0.3 mg/kg）。对照组接受10% DMSO/90%生理盐水溶液。SAH后72小时，处死大鼠；收集脑组织进行TUNEL染色、IL-1β ELISA和NeuN染色。每日使用改良的Garcia评分量表（0-18分）[4]对神经功能缺损进行评分。 3. 小鼠肝脏药效学模型：雄性C57BL/6小鼠（20-25 g）口服给予GSK2656157（10 mg/kg，溶于0.5%甲基纤维素）或溶剂。分别于给药后0.5、1、2和4小时处死小鼠；收集肝组织，液氮速冻，裂解后进行p-PERK和p-eIF2α的Western blot分析[1]。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 小鼠口服药代动力学：雄性 CD-1 小鼠（每时间点 n=3）接受 GSK2656157（10 mg/kg，口服，0.5% 甲基纤维素）。分别于给药后 0.25、0.5、1、2、4、6、8 和 12 小时采集血浆。采用 LC-MS/MS 法测定药物浓度。参数：Cmax = 4.2 μM，Tmax = 1 小时，末端半衰期 (t₁/₂) = 5.8 小时，口服生物利用度 (F) = 52% [1]
2. 静脉注射药代动力学：小鼠接受 GSK2656157（3 mg/kg，静脉注射，10% DMSO/90% 生理盐水）。参数：CL = 8.6 mL/min/kg，Vdss = 0.6 L/kg [1] 3. 组织分布：小鼠（10 mg/kg，口服）于2小时后处死（Tmax）。组织（肝脏、肺、肿瘤、脑、肾脏）匀浆；采用LC-MS/MS测定药物浓度。最高浓度：肝脏（12.5 μM），肺（9.8 μM）；肿瘤（5.1 μM，肿瘤/血浆比 = 1.2）；脑（0.8 μM，脑/血浆比 = 0.19）[1] 4. 血浆蛋白结合：将人血浆（500 μL）与GSK2656157（0.1–10 μM）混合，并在37°C下透析（12–14 kDa膜）4小时。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定游离药物浓度。结合率：98.5%（人），97.2%（小鼠）[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：GSK2656157（浓度高达 1 μM）对正常人细胞无显著毒性：正常肺成纤维细胞 (MRC-5) 和原代肝细胞（MTT 法检测细胞活力 > 90%，与溶剂对照组相比）。在治疗浓度 (0.01–100 nM) 下未诱导过度内质网应激（CHOP 过表达）[1]
2. 体内急性毒性：小鼠经 GSK2656157（1–30 mg/kg，口服，单次给药）治疗 14 天后，未出现死亡、体重减轻（<5%，与基线相比）或临床症状（嗜睡、共济失调）。血清ALT/AST、BUN和肌酐均在正常范围内[1] 3. 异种移植模型中的亚急性毒性：在A549异种移植小鼠中（10 mg/kg，口服，每日一次，持续21天），GSK2656157未引起明显的体重减轻、肝/肾/脾脏的组织病理学损伤或血常规（白细胞、红细胞、血小板与载体组相比无变化）[1] 4. SAH模型中的毒性：用GSK2656157（0.3 mg/kg，静脉注射）治疗的大鼠在SAH后72小时未出现肝/肾功能异常（血清标志物）或脑组织坏死[4] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GSK2656157 是一种吡咯并嘧啶类化合物，其化学名称为 7-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺，其 5 位被 4-氟-2,3-二氢-1H-吲哚-5-基取代，该取代基的氮原子被 (6-甲基吡啶-2-基)乙酰基酰化。它是一种口服生物利用度高的 PERK 抑制剂。GSK2656157 具有多种药理活性，包括作为 EC 3.1.3.48（蛋白酪氨酸磷酸酶）抑制剂、PERK 抑制剂和抗肿瘤药物。它是一种吡咯并嘧啶、联芳基、吲哚类化合物、甲基吡啶类化合物、有机氟化合物和叔酰胺。
1. 背景：GSK2656157 是一种第二代选择性 PERK 抑制剂，由早期类似物（例如 GSK2606414）优化而来，具有更高的效力、口服生物利用度和选择性。它被开发用于治疗 PERK 依赖性疾病，包括癌症、炎症和神经退行性疾病 [1, 2]。 2. 作用机制：GSK2656157 与 PERK 的 ATP 结合口袋结合，抑制其催化活性并阻断 PERK 介导的 eIF2α 磷酸化（经典效应）。它还发挥非经典效应，包括 mTOR 信号抑制和 NLRP3 炎症小体抑制，这些效应独立于 eIF2α [1, 2, 3] 3. 治疗潜力：临床前数据支持 GSK2656157 通过抗肿瘤/抗血管生成作用治疗实体瘤（非小细胞肺癌、乳腺癌），通过抑制 NLRP3 治疗炎症性疾病，并通过神经保护作用治疗神经系统疾病（蛛网膜下腔出血、内质网应激相关神经退行性疾病）。该药物在早期临床前研究中进行了评估，但未进入临床试验阶段[1, 3, 4] 4. 相对于早期PERK抑制剂的优势：GSK2656157具有更高的效力（PERK IC₅₀ = 0.1 nM，而GSK2606414为0.4 nM）、更好的口服生物利用度（52% vs. 45%）以及更广泛的治疗应用（抗炎/神经保护，而GSK2606414主要针对内质网应激）[1, 2] 5. 局限性：GSK2656157的脑渗透性有限（脑/血浆比 = 0.19），这可能限制其在中枢神经系统的应用。由于该药物仍处于临床前开发阶段，因此缺乏长期毒性数据或FDA安全性信息[1, 4] |
| 分子式 |
C23H21FN6O
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|---|---|---|
| 分子量 |
416.45
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| 精确质量 |
416.176
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| 元素分析 |
C, 66.33; H, 5.08; F, 4.56; N, 20.18; O, 3.84
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| CAS号 |
1337532-29-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
53469059
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| 外观&性状 |
white to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
744.6±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
404.1±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.5 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.722
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| LogP |
3.43
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| tPSA |
89.93
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| 氢键供体(HBD)数目 |
1
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
31
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| 分子复杂度/Complexity |
666
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
FC1=C(C([H])=C([H])C2=C1C([H])([H])C([H])([H])N2C(C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C(C([H])([H])[H])=N1)=O)C1=C([H])N(C([H])([H])[H])C2C1=C(N([H])[H])N=C([H])N=2
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| InChi Key |
PRWSIEBRGXYXAJ-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C23H21FN6O/c1-13-4-3-5-14(28-13)10-19(31)30-9-8-16-18(30)7-6-15(21(16)24)17-11-29(2)23-20(17)22(25)26-12-27-23/h3-7,11-12H,8-10H2,1-2H3,(H2,25,26,27)
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| 化学名 |
1-[5-(4-amino-7-methylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-yl)-4-fluoro-2,3-dihydroindol-1-yl]-2-(6-methylpyridin-2-yl)ethanone
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 5.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 5.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 0.5 mg/mL (1.20 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 1% CMC Na: 30mg/mL 配方 5 中的溶解度: 4.17 mg/mL (10.01 mM) in 0.5% HPMC 0.2%Tween80 (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.4012 mL | 12.0062 mL | 24.0125 mL | |
| 5 mM | 0.4802 mL | 2.4012 mL | 4.8025 mL | |
| 10 mM | 0.2401 mL | 1.2006 mL | 2.4012 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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GSK-2606414
Salubrinal
反式-ISRIB
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