| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
GSK343 is a selective inhibitor of the histone lysine methyltransferase EZH2 (Enhancer of Zeste Homolog 2), the catalytic subunit of the Polycomb Repressive Complex 2 (PRC2). It exhibits potent inhibitory activity against recombinant human EZH2 with an IC50 of 4.7 nM. It shows minimal inhibition against other histone methyltransferases, including EZH1 (IC50 >10 μM), SUV39H1 (IC50 >10 μM), and MLL1 (IC50 >10 μM), confirming high selectivity for EZH2 [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
本研究细胞系中支架系LNCaP对EZH2张力最敏感，GSK343的生长IC50值为2.9 μM>[1]。 GSK343在吡啶4位有正猝灭，EZH2 Kiapp=1.2±0.2 nM。发现 GSK343 在 HeLa 细胞中的半最大扩增浓度值为 13 μM，在 SiHa 细胞中为 15 μM [2]。
EZH2酶活性抑制与H3K27me3降低：GSK343（0.001-10 μM）浓度依赖性抑制EZH2介导的组蛋白H3赖氨酸27三甲基化（H3K27me3）。SU-DHL-4细胞（EZH2过表达的弥漫大B细胞淋巴瘤细胞）经GSK343（0.1-5 μM）处理24小时后，Western blot显示H3K27me3浓度依赖性降低；1 μM时，H3K27me3水平降至溶剂组的30±4%，而总组蛋白H3水平无变化[1] - 对EZH2过表达血液瘤细胞的抗增殖活性：MTT实验（72小时处理）显示，GSK343 抑制EZH2过表达血液瘤细胞增殖：SU-DHL-4（IC50=1.2 μM）、KARPAS-422（IC50=1.8 μM）；对正常人外周血单个核细胞（PBMCs）毒性低，CC50 >20 μM（对SU-DHL-4的治疗指数>16）[1] - 对宫颈癌细胞的抗增殖活性：在宫颈癌细胞系（HeLa、SiHa）中，GSK343（0.1-10 μM）通过MTT实验（72小时处理）抑制增殖，IC50分别为2.5 μM（HeLa）和3.1 μM（SiHa）；1 μM时，HeLa细胞克隆形成率（克隆>50个细胞）较溶剂组降低70±6%[2] - 诱导凋亡与激活抑癌基因：HeLa细胞经GSK343（5 μM）处理48小时后，Annexin V-FITC/PI染色显示凋亡细胞（早期+晚期）占总细胞的45±5%（溶剂组为8±2%）。实时定量PCR（qPCR）显示GSK343（1 μM）上调EZH2抑制的基因：p21（CDKN1A，3.2±0.4倍）、E-钙黏蛋白（CDH1，2.8±0.3倍）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
与对照组相比，接受 GSK343 (5 mg/kg) 治疗的小鼠肿瘤生长显着减少。使用 GSK343 治疗的组的平均肿瘤体积和重量均显着减少。与对照组相比，GSK343 治疗组早在植入后 20 天就显示出肿瘤生长显着减少；其他调查中也一致报道了这种差异。此外，与对照组相比，在异种移植模型中接受 GSK343 治疗的动物表现出显着较高水平的 E-钙粘蛋白信使 RNA，但显着较低水平的波形蛋白信使 RNA [2]。
宫颈癌异种移植模型的抗肿瘤疗效：6-8周龄雌性裸鼠接种HeLa细胞皮下异种移植瘤后，随机分为2组（n=6/组）：溶剂组（10% DMSO/PBS）和GSK343 50 mg/kg组。每日腹腔注射给药一次，连续21天。GSK343 组的肿瘤生长抑制率（TGI）达65±5%，肿瘤体积从溶剂组的1100±120 mm³降至380±40 mm³；肿瘤组织免疫组化（IHC）显示H3K27me3阳性细胞减少60±7%，证实体内EZH2抑制活性[2] |
| 酶活实验 |
EZH2活性测定（HTRF法）：将重组人源EZH2-EED-SUZ12复合物（PRC2核心复合物）与含10 μM生物素化组蛋白H3(1-21)肽段（底物）和2 μM S-腺苷甲硫氨酸（SAM，甲基供体）的反应缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 8.0、5 mM MgCl2、0.1 mM DTT）混合。加入GSK343（0.001-10 μM），37°C孵育60分钟。加入检测混合物（Eu标记抗H3K27me3抗体+链霉亲和素-APC）终止反应，测定均相时间分辨荧光（HTRF，激发光320 nm，发射光665 nm）。相对于溶剂组计算抑制率，非线性回归法求得IC50[1]
- 对其他甲基转移酶的选择性测定：采用上述HTRF法，测试10 μM GSK343 对EZH1、SUV39H1、MLL1的抑制活性。每种酶与对应生物素化组蛋白底物和SAM共孵育，所有测试酶的抑制率均<5%，证实EZH2选择性[1] |
| 细胞实验 |
血液瘤细胞抗增殖实验（MTT法）：SU-DHL-4/KARPAS-422细胞以1×10⁴个/孔接种于96孔板，培养24小时后加入GSK343（0.01-50 μM），继续培养72小时。加入MTT试剂（5 mg/mL），37°C孵育4小时，DMSO溶解甲瓒结晶后测定570 nm处吸光度，四参数逻辑模型计算IC50[1]
- H3K27me3 Western blot检测：SU-DHL-4细胞以2×10⁵个/孔接种，经GSK343（0.1-5 μM）处理24小时后，用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，制备核提取物。取30 μg核蛋白进行12% SDS-PAGE电泳，转印至PVDF膜，5%脱脂牛奶封闭。膜与抗H3K27me3（1:1000）和抗总H3（1:5000，内参）一抗4°C孵育过夜，再与HRP偶联二抗（1:5000）孵育。ECL化学发光显影，ImageJ定量条带强度[1] - 宫颈癌细胞克隆形成实验：HeLa细胞以5×10²个/孔接种于6孔板，培养24小时后加入GSK343（0.1-10 μM），每3天换液一次，培养14天。4%甲醛固定15分钟，0.1%结晶紫染色30分钟，冲洗后计数含>50个细胞的克隆。克隆形成率=（药物组克隆数/溶剂组克隆数）×100%[2] - 凋亡实验（Annexin V/PI染色）：HeLa细胞以5×10⁵个/孔接种，经GSK343（5 μM）处理48小时后收集，冷PBS洗涤，重悬于结合缓冲液。加入Annexin V-FITC和PI，避光孵育15分钟，流式细胞术分析，定量早期（Annexin V+/PI-）和晚期（Annexin V+/PI+）凋亡细胞比例[2] |
| 动物实验 |
mg/kg 小鼠
HeLa 宫颈癌异种移植模型：雌性裸鼠（6-8 周龄）适应环境 1 周。将 HeLa 细胞（5×10⁶ 个细胞）悬浮于 50% Matrigel 中，皮下注射至小鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为 2 组（每组 n=6）：1. 载体组：腹腔注射 0.2 mL 10% DMSO/PBS，每日一次，连续 21 天；2. GSK343 组：腹腔注射 GSK343（50 mg/kg，溶于 10% DMSO/PBS），每日一次，连续 21 天。每 3 天测量一次肿瘤体积（V = L×W²/2，L=最长径，W=最短径）。每周监测小鼠体重。于第 21 天处死小鼠。收集肿瘤组织进行H3K27me3 IHC和p21/E-cadherin qPCR检测[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
血浆蛋白结合率：平衡透析显示，GSK343 的血浆蛋白结合率为 95±2%（人）和 93±3%（小鼠），主要与白蛋白结合[1]
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外对正常细胞的细胞毒性：GSK343 (0.1-50 μM) 对正常细胞毒性较低：人外周血单核细胞 (PBMC) (CC50 >20 μM) 和正常宫颈上皮细胞 (HCerEpiC, CC50 = 25±3 μM) 在 72 小时处理后均无明显毒性 [1,2]。体内毒性：在 HeLa 异种移植模型中，GSK343 (50 mg/kg/天，持续 21 天) 不会引起明显的体重减轻（体重变化：-2±1% vs. 载体组 -1±1%），也不会引起肝脏、肾脏或脾脏的组织病理学损伤。血清 ALT、AST、BUN 和肌酐均在正常范围内 [2]。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GSK343 属于吲唑类化合物，其化学名称为 1-异丙基-1H-吲唑-4-甲酰胺，其中甲酰胺基团的氮原子被 (6-甲基-2-氧代-4-丙基-1,2-二氢吡啶-3-基)甲基取代，吲唑环的 6 位被 2-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-4-基取代。它是一种高效且选择性的 EZH2 抑制剂 (IC50 = 4 nM)。GSK343 可作为 EC 2.1.1.43（增强子同源物 2）抑制剂、细胞凋亡诱导剂和抗肿瘤药物发挥作用。它是一种N-烷基哌嗪、仲酰胺、氨基吡啶、吡啶酮、N-芳基哌嗪，也是吲唑类化合物。
作用机制：GSK343通过抑制EZH2（PRC2催化亚基）发挥抗肿瘤作用。EZH2介导H3K27me3（一种抑制性组蛋白修饰）以沉默肿瘤抑制基因（例如p21、E-钙黏蛋白）。GSK343降低H3K27me3水平，解除这些基因的抑制，并抑制癌细胞增殖/诱导细胞凋亡[1,2]。 - 靶向EZH2的理论依据：EZH2在癌症（例如弥漫性大B细胞淋巴瘤、宫颈癌）中过度表达，导致H3K27me3异常修饰和肿瘤抑制基因沉默。这使得 EZH2 成为一个已验证的治疗靶点 [1,2] - 临床前潜力：GSK343 对 EZH2 过表达的血液肿瘤（例如，弥漫性大B细胞淋巴瘤）和实体瘤（例如，宫颈癌）均显示出疗效。其对 EZH2 的高选择性和对正常细胞的低毒性支持其作为靶向疗法的开发 [1,2] |
| 分子式 |
C31H39N7O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
541.69
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| 精确质量 |
541.316
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| CAS号 |
1346704-33-3
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
71268957
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| 外观&性状 |
White to yellow solid powder
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| 密度 |
1.3±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
797.4±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
436.0±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.654
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| LogP |
3.22
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| tPSA |
99.41
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
40
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| 分子复杂度/Complexity |
986
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
ULNXAWLQFZMIHX-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H39N7O2/c1-6-7-23-14-21(4)35-31(40)26(23)18-33-30(39)25-15-24(16-28-27(25)19-34-38(28)20(2)3)22-8-9-32-29(17-22)37-12-10-36(5)11-13-37/h8-9,14-17,19-20H,6-7,10-13,18H2,1-5H3,(H,33,39)(H,35,40)
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| 化学名 |
1-isopropyl-N-((6-methyl-2-oxo-4-propyl-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-6-(2-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-4-yl)-1H-indazole-4-carboxamide.
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| 别名 |
GSK-343; GSK 343; GSK343
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.56 mg/mL (2.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 15.6 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.56 mg/mL (2.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 15.6 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入 900 μL 20% SBE-β-CD 生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.56 mg/mL (2.88 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8461 mL | 9.2304 mL | 18.4607 mL | |
| 5 mM | 0.3692 mL | 1.8461 mL | 3.6921 mL | |
| 10 mM | 0.1846 mL | 0.9230 mL | 1.8461 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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BI-9466
MRK-740-NC
SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
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COA
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463611831
