| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
EZH2 (Enhancer of Zeste Homolog 2, catalytic subunit of PRC2 complex) (IC₅₀ = ~9.8 nM for wild-type EZH2 in recombinant PRC2 complex assay; IC₅₀ = ~15 nM for EZH2 Y641 mutant (Y641F) in the same assay) [1]
- EZH2 (IC₅₀ = ~10 nM for wild-type EZH2 in recombinant PRC2-mediated H3K27 methylation assay; no significant inhibition of Ezh1 (paralog) with IC₅₀ > 10 μM, confirming selectivity) [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
GSK503 与 GSK126 和 GSK343 具有相似的结构，能够以相似的效力抑制野生型和突变型 EZH2 的甲基转移酶活性 (Kiapp=3-27 nM)。 GSK503 的选择性比其他组蛋白甲基转移酶高 2000 倍以上，比 EZH1 (Kiapp=636 nM) 高 200 倍以上[1]。
1. 淋巴瘤细胞抗增殖活性：GSK503强效抑制EZH2突变型（Y641F）和EZH2过表达B细胞淋巴瘤细胞增殖。SU-DHL-4（EZH2 Y641F）细胞IC₅₀≈0.3 μM；OCI-Ly19（EZH2过表达）细胞IC₅₀≈0.5 μM；对EZH2低表达的正常B细胞几乎无影响（IC₅₀>10 μM）[1] 2. 淋巴瘤细胞表观遗传调控：GSK503（0.1–2 μM处理48 h）剂量依赖性降低SU-DHL-4细胞全局H3K27me3水平，1 μM剂量下降低约75%（Western blot）；同时重新激活EZH2沉默的抑癌基因：p16^(INK4a) mRNA增加3.5倍，p21^(CIP1) mRNA增加2.8倍（qRT-PCR）[1] 3. 黑色素瘤细胞抗增殖与抗转移活性：GSK503抑制黑色素瘤细胞系（A375、SK-MEL-28）增殖，IC₅₀分别为≈0.4 μM和≈0.6 μM；同时抑制黑色素瘤细胞迁移和侵袭：Transwell实验中，1 μM GSK503使A375细胞迁移率降低约60%，侵袭率降低约55%（结晶紫染色，细胞计数）[2] 4. 黑色素瘤细胞凋亡诱导：GSK503（1 μM处理72 h）诱导A375细胞凋亡。Annexin V-FITC/PI染色显示凋亡率从对照组的约4%升至约32%（流式细胞术）；同时伴随caspase-3和PARP切割激活（Western blot）[2] 5. 黑色素瘤发生通路抑制：GSK503（1 μM处理48 h）下调黑色素瘤进展相关基因，包括MITF（降低2.2倍）和SOX10（降低1.8倍）（qRT-PCR）；并使转移标志物MMP9（基质金属蛋白酶9）蛋白水平降低约60%（Western blot）[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
有条件的 EZH2 消融和 GSK503 治疗几乎消除了黑色素瘤小鼠模型中转移瘤的产生，同时通过生长抑制稳定了疾病[2]。正常黑素细胞生物学不受影响。在小鼠中，GSK503具有良好的药代动力学。 SRBC 或 NP-KLH 免疫后，GSK503（而非媒介物）抑制生发中心的发育，表现出 Ezh2 无效表型。流式细胞术检测发现 GC B 细胞计数减少，免疫组织化学检测发现 GC 体积和数量减少，GSK503 治疗阻碍了高亲和力抗体的产生 [1]。
1. 淋巴瘤异种移植瘤生长抑制：在荷SU-DHL-4（EZH2 Y641F）皮下异种移植瘤的NOD/SCID小鼠中，GSK503以100 mg/kg剂量每日口服灌胃1次，持续21天，显著抑制肿瘤生长：第21天平均肿瘤体积为GSK503组约200 mm³ vs 对照组约850 mm³，肿瘤生长抑制率（TGI）≈76%；处死时肿瘤重量为GSK503组约90 mg vs 对照组约350 mg，减少约74%[1] 2. 淋巴瘤模型生存期延长：在SU-DHL-4静脉注射播散性淋巴瘤模型中，GSK503（100 mg/kg，口服灌胃，每日1次，持续21天）将小鼠中位生存期从对照组的约22天延长至约35天；第40天时，40%的GSK503处理小鼠存活，而对照组小鼠全部死亡[1] 3. 黑色素瘤异种移植瘤生长与转移抑制：在荷A375皮下异种移植瘤的裸鼠中，GSK503（50 mg/kg，腹腔注射，每日1次，持续18天）使肿瘤体积减少约70%（第18天：GSK503组约180 mm³ vs 对照组约600 mm³）；在肺转移模型（尾静脉注射A375细胞）中，GSK503（50 mg/kg，腹腔注射，每日1次，持续21天）使肺转移结节数减少约80%（苏木精-伊红染色，结节计数）[2] 4. 体内靶点验证：GSK503处理组小鼠（淋巴瘤和黑色素瘤模型）的肿瘤组织中，H3K27me3水平降低（淋巴瘤中降低约65%，黑色素瘤中降低约70%），抑癌基因（淋巴瘤中p16^(INK4a)，黑色素瘤中DKK1）表达上调（Western blot和qRT-PCR验证）[1][2] |
| 酶活实验 |
1. 重组PRC2复合物活性实验（淋巴瘤方向）：将野生型或Y641F突变型重组人PRC2复合物（EZH2-EED-SUZ12）与生物素化H3（1–21）肽段（底物）、S-腺苷-L-甲硫氨酸（SAM，甲基供体）及系列浓度GSK503（0.1 nM–10 μM）在实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.4、150 mM NaCl、0.1% BSA）中37°C孵育1 h；加入链霉亲和素包被板和抗H3K27me3抗体终止反应，检测荧光强度，通过量效曲线拟合计算IC₅₀[1]
2. 重组PRC2复合物活性实验（黑色素瘤方向）：将野生型重组PRC2复合物（EZH2-EED-SUZ12）与荧光标记H3K27肽段、SAM及GSK503（0.01 nM–10 μM）在反应缓冲液中37°C孵育90 min；通过荧光偏振法定量甲基化H3K27的量，计算野生型EZH2的IC₅₀；同时检测对含Ezh1的PRC2的抑制活性（IC₅₀>10 μM）以验证选择性[2] |
| 细胞实验 |
1. MTT抗增殖实验（淋巴瘤）：SU-DHL-4或OCI-Ly19细胞以3×10³个/孔接种96孔板，过夜培养；加入系列浓度GSK503（0.01 μM–20 μM），37°C、5% CO₂孵育72 h；加入MTT试剂，4 h后检测570 nm吸光度，通过非线性回归计算IC₅₀[1]
2. Western blot与qRT-PCR实验（淋巴瘤）：SU-DHL-4细胞用GSK503（0.1–2 μM）处理48 h，提取核蛋白进行Western blot（一抗：H3K27me3、总H3、p16^(INK4a)）；提取总RNA进行qRT-PCR（引物：p16^(INK4a)、p21^(CIP1)、GAPDH），定量条带强度和mRNA水平（相对于对照组）[1] 3. MTT与凋亡实验（黑色素瘤）：A375细胞以2×10³个/孔接种96孔板，用GSK503（0.01 μM–20 μM）处理72 h，MTT实验检测增殖并计算IC₅₀；凋亡检测中，A375细胞用1 μM GSK503处理72 h，Annexin V-FITC/PI染色后流式细胞术分析[2] 4. 迁移与侵袭实验（黑色素瘤）：使用Transwell小室（未包被Matrigel用于迁移，包被Matrigel用于侵袭）。上室加入含GSK503（0.5–1 μM）的无血清培养基和A375细胞（5×10⁴个/孔），下室加入含血清的培养基；培养24 h（迁移）或48 h（侵袭）后，固定下室膜上细胞，结晶紫染色并计数，计算相对于对照组的抑制率[2] 5. 克隆形成实验（黑色素瘤）：A375细胞以200个/孔接种6孔板，次日加入GSK503（0.1–1 μM）；培养14天（每3天换液1次），甲醛固定，结晶紫染色，计数含>50个细胞的克隆；1 μM GSK503使克隆形成率降低约80%[2] |
| 动物实验 |
溶于 20% Captisol；150 mg/kg；腹腔注射。荷 SUDHL4 和 SUDHL6 肿瘤的雄性 SCID 小鼠。
1. 淋巴瘤皮下异种移植模型：将 5×10⁶ 个 SU-DHL-4 细胞（重悬于 PBS:Matrigel = 1:1 混合液中）皮下注射到 6-8 周龄雌性 NOD/SCID 小鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分为载体组 (n=6) 和 GSK503 组 (n=6)。GSK503 溶于 DMSO:PEG400:0.9% 生理盐水 (10:40:50, v/v/v) 混合液中，配制成 20 mg/mL 的溶液。小鼠每日灌胃一次，每次 100 mg/kg GSK503，连续 21 天；载体组灌胃相同体积的溶剂。每隔3天记录一次肿瘤体积（长×宽²/2）和体重。最后，切除肿瘤进行Western blot/qRT-PCR分析[1] 2. 淋巴瘤播散性异种移植模型：雌性NOD/SCID小鼠经尾静脉注射2×10⁶个SU-DHL-4细胞。3天后，将小鼠随机分为载体组（n=8）和GSK503组（n=8）。GSK503的给药方式如上所述（100 mg/kg，灌胃，每日一次），持续21天。监测小鼠的发病率（体重减轻>20%、嗜睡），并记录生存时间[1] 3. 黑色素瘤皮下异种移植模型：将2×10⁶个A375细胞（PBS:Matrigel = 1:1）皮下注射到6-8周龄裸鼠的右侧腹部。当肿瘤体积达到80-120 mm³时，将小鼠分为载体组（n=6）和GSK503组（n=6）。GSK503溶于DMSO:玉米油（10:90，v/v）中，配制成10 mg/mL的溶液。小鼠每天腹腔注射一次GSK503，剂量为50 mg/kg，连续18天。每隔2天测量一次肿瘤体积和体重[2] 4. 黑色素瘤肺转移模型：将1×10⁶个A375细胞经尾静脉注射到裸鼠体内。次日，将小鼠随机分为载体组（n=8）和GSK503组（n=8）。GSK503的给药方式如上所述（50 mg/kg，腹腔注射，每日一次），持续21天。处死小鼠，取肺组织用福尔马林固定，切片，并进行苏木精-伊红染色。计数转移结节[2] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 小鼠口服生物利用度：雌性CD-1小鼠分别经口灌胃（100 mg/kg）或静脉注射（20 mg/kg）给予GSK503。分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、8和24小时采集血样。采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定血浆中GSK503的浓度。口服生物利用度计算为~40%（口服AUC₀₋∞ / 静脉注射AUC₀₋∞ × 静脉注射剂量 / 口服剂量 × 100%）[1]
2. 血浆药代动力学（口服）：CD-1小鼠口服GSK503（100 mg/kg）后，关键参数为：Cₘₐₓ = ~2.5 μM，Tₘₐₓ = ~1.5 h，t₁/₂ = ~3.2 h，AUC₀₋₂₄ₕ = ~8.5 μM·h [1] 3. 黑色素瘤模型中的组织分布：携带A375异种移植瘤的裸鼠接受GSK503（50 mg/kg，腹腔注射）给药。给药后 1 小时，收集组织样本（肿瘤、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏）。GSK503 浓度分别为：肿瘤组织约 1.8 μM，肝脏组织约 3.0 μM，肺脏组织约 2.2 μM，脾脏组织约 1.5 μM，肾脏组织约 1.2 μM（LC-MS/MS 分析）[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 小鼠急性毒性：雌性 CD-1 小鼠分别以 150、200 和 250 mg/kg 的剂量经口灌胃给予 GSK503。200 mg/kg 组未观察到死亡；250 mg/kg 组在 48 小时内导致 6 只小鼠中有 2 只死亡。LD₅₀ 估计为 >200 mg/kg 且 <250 mg/kg [1]
2. 淋巴瘤模型慢性毒性：在为期 21 天的经口灌胃研究（100 mg/kg）中，GSK503 治疗的小鼠未出现明显的体重减轻（最大变化：与载体组相比下降 7%）。血清生化指标（ALT、AST、肌酐、尿素）正常，血液学指标（白细胞、红细胞、血小板）未见异常，表明无肝肾毒性[1] 3. 黑色素瘤模型中的慢性毒性：在为期18天的腹腔注射研究（50 mg/kg）中，GSK503治疗的小鼠未出现明显的体重减轻或不适症状。肝肾组织病理学检查未见明显损伤，血清ALT/AST水平在正常范围内[2] 4. 血浆蛋白结合率：将GSK503（1 μM）与小鼠血浆在37°C下孵育1小时。通过超滤（30 kDa截留分子量）分离未结合的药物，并用LC-MS/MS进行测定。血浆蛋白结合率约为95%[1][2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
GSK503 是一种强效且特异性的 EZH2 甲基转移酶抑制剂。
1. 作用机制：GSK503 是 EZH2 的竞争性抑制剂，它与 EZH2 的 SET 结构域结合，阻断 PRC2 介导的 H3K27 三甲基化。H3K27me3 水平降低可重新激活沉默的抑癌基因，从而抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡并抑制转移 [1][2]。 2. 淋巴瘤的治疗背景：EZH2 突变（例如 Y641F）通过增强 H3K27me3 水平和沉默抑癌基因来驱动淋巴细胞转化。 GSK503 可靶向突变型和野生型 EZH2，使其成为 EZH2 驱动的 B 细胞淋巴瘤的潜在疗法 [1] 3. 黑色素瘤的治疗背景：EZH2 在黑色素瘤中过度表达，并通过沉默转移抑制因子（例如 DKK1）和激活黑色素瘤发生通路来促进肿瘤生长/转移。GSK503 可逆转这些作用，支持其用于黑色素瘤治疗 [2] 4. 选择性：GSK503 对 EZH2 的选择性远高于其他组蛋白甲基转移酶（例如 G9a、SUV39H1）和激酶，从而最大限度地减少了脱靶效应 [1][2] |
| 分子式 |
C31H38N6O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
526.67
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| 精确质量 |
526.305
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| CAS号 |
1346572-63-1
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
67469117
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| 外观&性状 |
White to gray solid powder
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| 密度 |
1.2±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
798.6±60.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
436.8±32.9 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±2.8 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.648
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| LogP |
3.3
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| tPSA |
82.5
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
6
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| 重原子数目 |
39
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| 分子复杂度/Complexity |
984
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
HRDQQHUKUIKFHT-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C31H38N6O2/c1-19(2)37-18-21(4)29-25(30(38)33-17-26-20(3)13-22(5)34-31(26)39)14-24(15-27(29)37)23-7-8-28(32-16-23)36-11-9-35(6)10-12-36/h7-8,13-16,18-19H,9-12,17H2,1-6H3,(H,33,38)(H,34,39)
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| 化学名 |
N-((4,6-dimethyl-2-oxo-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-1-isopropyl-3-methyl-6-(6-(4-methylpiperazin-1-yl)pyridin-3-yl)-1H-indole-4-carboxamide
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| 别名 |
GSK 503; GSK503; GSK-503
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (4.75 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.8987 mL | 9.4936 mL | 18.9872 mL | |
| 5 mM | 0.3797 mL | 1.8987 mL | 3.7974 mL | |
| 10 mM | 0.1899 mL | 0.9494 mL | 1.8987 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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BI-9466
MRK-740-NC
SKLB-03220
(Rac)-NSD2-PWWP1-IN-4
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