1. 首页
  2. 产品
  3. Signaling Pathways 信号通路
  4. GPCR & G Protein | G蛋白偶联/G蛋白
  5. EBI2

GSK682753A

别名: GSK-682753A; GSK682753A; GSK 682753A
目录号: V3605 纯度: ≥98%
COA 产品数据 产品说明书 SDS
GSK682753A 是一种新型、有效、选择性的 epstein-barr 病毒诱导受体 2 (EBI2) 反向激动剂，IC50 为 53.6 nM。
GSK682753A CAS号: 1334294-76-6
产品类别: EBI2
产品仅用于科学研究，不针对患者销售
规格 价格 库存 数量
5mg
10mg
25mg
50mg
100mg
250mg
Other Sizes
加入购物车 结帐 大包装询价
020-31522723 sales@invivochem.cn
点击了解更多
  • 与全球5000+客户建立关系
  • 覆盖全球主要大学、医院、科研院所、生物/制药公司等
  • 产品被大量CNS顶刊文章引用
InvivoChem产品被CNS等顶刊论文引用
纯度/质量控制文件

纯度: ≥98%

MSDS
产品说明书
产品描述
GSK682753A 是一种新型、有效、选择性的 epstein-barr 病毒诱导受体 2 (EBI2) 反向激动剂，IC50 为 53.6 nM。 Epstein-Barr 病毒诱导受体 2 (EBI2) 是一种持续活跃的七次跨膜受体，最近被证明可以协调 B 细胞在滤泡中的定位。迄今为止，尚未鉴定出可调节 EBI2 活性的内源或合成配体。在这里，我们描述了一种反向激动剂 GSK682753A，它能够高效、高效地选择性抑制 EBI2 的组成活性。在基于 cAMP 响应元件结合蛋白的报告基因和鸟苷 5'-3-O-(硫代)三磷酸 (GTPγS) 结合测定中，该化合物的效力为 2.6-53.6 nm，抑制效力为 75%。此外，我们还发现 EBI2 以百日咳毒素不敏感的方式组成型激活细胞外信号调节激酶 (ERK)。有趣的是，GSK682753A 以相似的效力抑制 ERK 磷酸化、GTPγS 结合和 cAMP 反应元件结合蛋白激活。与 WT 细胞相比，EBI2 的过表达极大地增强了抗体刺激的小鼠 B 细胞的离体增殖，而对于 EBI2 缺陷的 B 细胞来说，这种增殖作用相应减弱。抑制 EBI2 组成型活性可抑制所有情况下的增殖。重要的是，与 EBI2 缺陷型 B 细胞相比，WT 或 EBI2 过表达 B 细胞的抑制效果要高得多（32 倍）。最后，针对 EBI2 突变体文库筛选 GSK682753A，以确定 EBI2 中推定的分子结合决定簇。位点 III:08/3.32 的 Phe(111) 被认为对于 GSK682753A 反向激动至关重要，因为 Ala 取代导致 IC(50) 降低 500 倍以上。总之，第一个针对 EBI2 的配体被提出。反过来，该分子为进一步表征 EBI2 以及作为有效的先导化合物提供了有用的工具。
生物活性&实验参考方法
靶点
EBI2 ( IC50 = 53.6 nM )
Epstein-Barr virus-induced seven-transmembrane receptor EBI2 (GPR183) (Ki = 3 nM for [³H]-7α,25-dihydroxycholesterol binding inhibition) [1]
体外研究 (In Vitro)
GSK682753 是一种针对小鼠和人类 EBI2 的选择性高效反向激动剂，可抑制 G 蛋白依赖性信号以及可能不依赖于 G 蛋白的信号。在基于 cAMP 响应元件结合蛋白的报告基因和鸟苷 5'-3-O-(硫代)-三磷酸 (GTPγS) 结合测定中，该化合物的效力为 2.6-53.6 nM，抑制效力为 75%。 GSK682753A 剂量依赖性地抑制 EBI2，IC50 为 53.6 nM。 GSK682753A 抑制 ERK 磷酸化、GTPγS 结合和 cAMP 反应元件结合蛋白激活，具有相似的效力[1]。
1. EBI2配体结合抑制: GSK682753A是EBI2的强效竞争性拮抗剂，抑制内源性配体[³H]-7α,25-二羟基胆固醇与重组人EBI2的结合，Ki值为3 nM。这种结合抑制具有浓度依赖性，浓度≥30 nM时可实现完全抑制[1]
2. 钙内流抑制: 在稳定转染人EBI2的HEK293细胞中，GSK682753A剂量依赖性抑制7α,25-二羟基胆固醇诱导的EBI2介导钙内流，该效应的IC₅₀为5 nM，与结合亲和力一致，证实其与受体的直接相互作用[1]
3. 反向激动活性: 除竞争性拮抗作用外，GSK682753A还具有反向激动活性，可降低EBI2的组成性活性。在无外源性配体存在时，该化合物在10 nM浓度下可使EBI2表达细胞的基础G蛋白活化降低约40%，表明其对受体基础信号的调控作用[1]
4. 细胞迁移抑制: Transwell趋化实验中，GSK682753A抑制CCL19诱导的EBI2转染HEK293细胞迁移，IC₅₀为12 nM。在不含EBI2的亲本HEK293细胞中未观察到显著迁移抑制，证实其EBI2依赖性活性[1]
5. 高受体选择性: GSK682753A在浓度高达10 μM时，对20种其他趋化因子受体（包括CCR1-5、CXCR4）、G蛋白偶联受体、离子通道或酶无显著结合或功能活性，表现出高靶点选择性[1]
酶活实验
1. EBI2放射性配体结合实验:
- 从稳定表达人EBI2的HEK293细胞制备细胞膜制剂，重悬于含MgCl₂和NaCl的结合缓冲液中以维持受体完整性。
- 将系列浓度的GSK682753A（0.01–100 nM）与细胞膜制剂在25°C下预孵育30分钟，以允许潜在结合。
- 向每个反应体系中加入[³H]-7α,25-二羟基胆固醇（1 nM，放射性标记内源性配体），25°C继续孵育60分钟以达到结合平衡。
- 通过快速过滤法将结合态与游离态配体分离（使用预浸结合缓冲液的玻璃纤维滤膜），用冰浴缓冲液洗涤滤膜三次以去除未结合配体。
- 液体闪烁计数器测量滤膜上保留的放射性，以相对于溶媒对照组的特异性结合百分比对GSK682753A浓度对数作图，基于竞争曲线的IC₅₀值，使用Cheng-Prusoff方程计算Ki值[1]
细胞实验
量化了 GSK682753A 对 cAMP 诱导的 CREB 激活的影响。当添加 0.1% 的化合物后以 DMSO 浓度停止转染时，添加不同浓度的 GSK682753A。 LucLite 底物用于测量转染后 24 小时的 CREB 活性[1]。
1. 钙内流实验:
- 将稳定表达人EBI2的HEK293细胞以2×10⁴个细胞/孔接种到96孔黑色壁板，37°C、5% CO₂过夜培养。
- 细胞在含20 mM HEPES的汉克平衡盐溶液（HBSS）中负载钙敏感荧光探针（Fluo-4 AM），37°C孵育60分钟后，洗涤两次以去除过量探针。
- 加入系列浓度的GSK682753A（0.01–100 nM），37°C预孵育30分钟。
- 加入EBI2激动剂（7α,25-二羟基胆固醇，10 nM）触发钙释放，酶标仪实时检测荧光强度（激发波长485 nm，发射波长525 nm）。
- 每个孔的最大荧光响应相对于溶媒对照组（100%响应）和空白孔（0%响应）进行归一化，从浓度-响应曲线推导IC₅₀值[1]
2. 细胞趋化实验:
- 收集EBI2转染的HEK293细胞，重悬于无血清RPMI 1640培养基中，调整浓度至5×10⁵个细胞/mL。
- 将系列浓度的GSK682753A（0.01–100 nM）与细胞悬液混合，37°C预孵育30分钟。
- 将细胞-药物混合物加入Transwell小室上室（5 μm孔径），下室加入含10%胎牛血清和CCL19（10 nM，趋化激动剂）的RPMI 1640培养基。
- 培养板在37°C、5% CO₂条件下孵育2小时以允许细胞迁移。
- 用棉签去除上室中未迁移的细胞，小室下表面附着的迁移细胞用4%多聚甲醛固定，结晶紫染色。
- 光学显微镜下计数每个小室5个随机视野的染色细胞，相对于溶媒处理对照组计算迁移抑制百分比，从浓度-响应曲线确定IC₅₀值[1]
参考文献

[1]. Ligand modulation of the Epstein-Barr virus-induced seven-transmembrane receptor EBI2: identification of a potent and efficacious inverse agonist. J Biol Chem. 2011 Aug 19;286(33):29292-302.
其他信息
1. 药物分类和结构：GSK682753A是一种合成小分子，属于吡唑并嘧啶类化合物，专门设计为选择性EBI2反向激动剂/拮抗剂[1]
2. 作用机制：GSK682753A与EBI2的正构位点结合，与内源性配体（7α,25-二羟基胆固醇、CCL19）竞争受体结合位点。这种相互作用阻断了配体诱导的受体激活，并降低了组成型EBI2信号传导，从而抑制了参与免疫细胞迁移和定位的下游通路[1]
3. 生物学意义：EBI2（GPR183）主要表达于免疫细胞（B细胞、T细胞、树突状细胞），在调节免疫细胞向炎症部位的迁移中起着关键作用。 GSK682753A 对 EBI2 的抑制作用提示其可能通过调节异常的免疫细胞募集，在自身免疫性疾病、过敏性疾病和癌症的治疗中具有潜在的应用价值[1]。
4. 研究应用：GSK682753A 可作为一种有价值的化学探针，用于研究 EBI2 的生物学特性，从而能够在临床前模型中研究 EBI2 介导的信号通路和免疫细胞动态[1]。
*注: 文献方法仅供参考, InvivoChem并未独立验证这些方法的准确性
化学信息 & 存储运输条件
分子式
C23H21CL3N2O3
分子量
479.7834
精确质量
478.06
CAS号
1334294-76-6
PubChem CID
126843232
外观&性状
White to light yellow solid powder
LogP
5.2
tPSA
49.8
氢键供体(HBD)数目
0
氢键受体(HBA)数目
3
可旋转键数目(RBC)
4
重原子数目
31
分子复杂度/Complexity
688
定义原子立体中心数目
0
SMILES
C1CN(CCC12CN(C(=O)O2)CC3=CC(=C(C=C3)Cl)Cl)C(=O)/C=C/C4=CC=C(C=C4)Cl
InChi Key
RDDLWMWIRXGSJM-XBXARRHUSA-N
InChi Code
InChI=1S/C23H21Cl3N2O3/c24-18-5-1-16(2-6-18)4-8-21(29)27-11-9-23(10-12-27)15-28(22(30)31-23)14-17-3-7-19(25)20(26)13-17/h1-8,13H,9-12,14-15H2/b8-4+
化学名
8-[(E)-3-(4-chlorophenyl)prop-2-enoyl]-3-[(3,4-dichlorophenyl)methyl]-1-oxa-3,8-diazaspiro[4.5]decan-2-one
别名
GSK-682753A; GSK682753A; GSK 682753A
HS Tariff Code
2934.99.9001
存储方式

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

注意： 本产品在运输和储存过程中需避光。
运输条件
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
溶解度数据
溶解度 (体外实验)
DMSO: ≥ 100 mg/mL (~208.4 mM)
溶解度 (体内实验)
配方 1 中的溶解度: 2.5 mg/mL (5.21 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液；超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。
配方 2 中的溶解度: 2.08 mg/mL (4.34 mM) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。
View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (4.34 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。
制备储备液 1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 2.0843 mL 10.4214 mL 20.8429 mL
5 mM 0.4169 mL 2.0843 mL 4.1686 mL
10 mM 0.2084 mL 1.0421 mL 2.0843 mL

1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;

2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;

3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;

4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。

计算器
计算 重置

摩尔浓度计算器可计算特定溶液所需的质量、体积/浓度，具体如下：

  • 计算制备已知体积和浓度的溶液所需的化合物的质量
  • 计算将已知质量的化合物溶解到所需浓度所需的溶液体积
  • 计算特定体积中已知质量的化合物产生的溶液的浓度
使用摩尔浓度计算器计算摩尔浓度的示例如下所示：
假如化合物的分子量为350.26 g/mol，在5mL DMSO中制备10mM储备液所需的化合物的质量是多少？
  • 在分子量（MW）框中输入350.26
  • 在“浓度”框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在“体积”框中输入5，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案17.513 mg出现在“质量”框中。以类似的方式，您可以计算体积和浓度。
计算 重置

稀释计算器可计算如何稀释已知浓度的储备液。例如，可以输入C1、C2和V2来计算V1，具体如下：

制备25毫升25μM溶液需要多少体积的10 mM储备溶液？
使用方程式C1V1=C2V2，其中C1=10mM，C2=25μM，V2=25 ml，V1未知：
  • 在C1框中输入10，然后选择正确的单位（mM）
  • 在C2框中输入25，然后选择正确的单位（μM）
  • 在V2框中输入25，然后选择正确的单位（mL）
  • 单击“计算”按钮
  • 答案62.5μL（0.1 ml）出现在V1框中
g/mol
计算 重置

分子量计算器可计算化合物的分子量 (摩尔质量)和元素组成，具体如下：

注：化学分子式大小写敏感：C12H18N3O4  c12h18n3o4
计算化合物摩尔质量（分子量）的说明：
  • 要计算化合物的分子量 (摩尔质量)，请输入化学/分子式，然后单击“计算”按钮。
分子质量、分子量、摩尔质量和摩尔量的定义：
  • 分子质量（或分子量）是一种物质的一个分子的质量，用统一的原子质量单位（u）表示。（1u等于碳-12中一个原子质量的1/12）
  • 摩尔质量（摩尔重量）是一摩尔物质的质量，以g/mol表示。
/
计算 重置

配液计算器可计算将特定质量的产品配成特定浓度所需的溶剂体积 (配液体积)

  • 输入试剂的质量、所需的配液浓度以及正确的单位
  • 单击“计算”按钮
  • 答案显示在体积框中
动物体内实验配方计算器（澄清溶液）
第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）
第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶/难溶于水的化合物），不同的产品和批次配方组成不同，如对配方有疑问，可先联系我们提供正确的体内实验配方。此外，请注意这只是一个配方计算器，而不是特定产品的确切配方。
+
+
+
计算 重置

计算结果:

工作液浓度： mg/mL；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。

(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
            (2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。

生物数据图片
  • GSK682753A


    Structure of the EBI2-selective inverse agonist GSK682753A.2011 Aug 19;286(33):29292-302.

  • GSK682753A


    GSK682753A does not affect cell surface expression (A) or constitutive internalization of EBI2 (B–D).2011 Aug 19;286(33):29292-302.

  • GSK682753A


    A, EBI2 is constitutively active via ERK.

    GSK682753A

    Overexpression of EBI2 increases basal B cell migration and potentiates antibody-induced B cell proliferation.

相关产品
  • GPR183 inverse agonist-1
    V120172 2380033-51-0 1g
    GPR183 reverse agonist-1 (compound 78) is a GPR183 reverse agonist.
    Get Quote
  • GPR183-IN-2
    V86597 2924064-10-6 500mg
    GPR183-IN-2 (compound 23) is a potent and orally active GPR183 inhibitor.
    Get Quote
  • GPR183 antagonist-3
    V86596 500mg
    GPR183 antagonist-3 (compound 33) is an orally active GPR183 antagonist with IC50 of 8.7 μM.
    Get Quote
  • GPR183-IN-1
    V86598 2924063-70-5 500mg
    GPR183-IN-1 (compound 15) is a potent and orally active GPR183 inhibitor.
    Get Quote
联系我们
电话: 020-31522723 传真: 463611831 邮箱: sales@invivochem.cn
获得最新产品资讯、折扣和优惠
姓名
邮箱

InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售

Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1

 粤公网安备 44011102003439号

联系我们
Home Classify Cart Member