| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ROCKII:12 nM (IC50); CaMKII:0.18 μM (IC50); PKG:0.36 μM (IC50); AuroraA:0.745 μM (IC50); MLCK:28.3 μM (IC50); EGFR:50 μM (IC50); MKK4:16.9 μM (IC50); GSK3α:60.7 μM (IC50); PKA:3.03 μM (IC50); Src:3.06 μM (IC50); PKC:5.68 μM (IC50); Abl:7.77 μM (IC50); AMPK:100 μM (IC50) P38α:100 μM (IC50)
H-1152 dihydrochloride primarily targets ROCK2 with an IC50 of 12 nM and a Ki of 1.6 nM; it also inhibits other kinases including PKA (IC50 = 3.03 μM), PKC (IC50 = 5.68 μM), PKG (IC50 = 0.360 μM), Aurora A (IC50 = 0.745 μM), and CaMKII (IC50 = 0.180 μM). |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Rho还原剂H-1152二盐酸盐对ROCK2的IC50为12 nM。H-1152二盐酸盐（H-1152二盐酸盐P）对CaMKII、PKG、AuroraA、PKA、Src、PKC、MLCK、Abl、EGFR、MKK4、GSK3α、AMPK和P38α活性的抑制作用也较低；其IC50值分别为0.180、0.360、0.745、3.03、3.06、5.68、28.3、7.77、50.0、16.9、60.7、100和100 μM [1]。盐酸1152的Ki值为1.6 nM，能有效抑制Rho，但其Ki值分别为0.63、9.27和10.1 μM，对PKA、PKC和MLCK的抑制作用较弱。盐酸1152（0.1-10 μM）对LPA处理的细胞中MARCKS的磷酸化具有强烈的抑制作用，IC50值为2.5 μM；然而，在PDBu处理的细胞中未观察到明显作用[2]。盐酸1152（0.5-10 μM）不能使神经元存活率恢复。此外，盐酸1152（1、5或10 μM）对各种神经元形态的百分比没有影响。此外，在 BMP4 和 LIF 培养中，10 μM 的 H-1152 二盐酸盐可延长神经突 [3]。
体外激酶测定表明，H-1152 二盐酸盐在无细胞系统中能有效抑制 ROCK2 活性，IC50 为 12 nM，Ki 为 1.6 nM，对 ROCK 的选择性高于其他激酶。 |
| 体内研究 (In Vivo) |
在体内，H-1152 二盐酸盐已在动物模型中用于研究 ROCK 介导的生理过程，包括血管平滑肌收缩、神经元发育和癌细胞迁移，显示出在调节组织中 ROCK 依赖性通路方面的功效。
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| 酶活实验 |
蛋白激酶活性测定[2]
为了测定抑制剂对体外Rho激酶活性的影响，将指定浓度的抑制剂加入到50 µL的测定混合物中，该混合物包含50 mM Tris-HCl（pH 7.5）、5 mM MgCl₂、1 mM EDTA、1 mM EGTA、1 mM二硫苏糖醇、40 µM S6肽、不同浓度的[γ-³²P]ATP和纯化的Rho激酶（纯化方法如前所述（Nagumo等，2000））。加入[γ-³²P]ATP启动反应，并在30°C下进行5分钟。使用米氏方程计算Rho激酶的米氏常数（Km）和最大反应速率（Vmax）。进一步利用二次作图分析数据，以计算抑制常数（Ki）。根据我们的方法并稍作修改（Tokumitsu 等，1991），测定了 Rho 激酶抑制剂对蛋白激酶 A (PKA) 和 C (PKC) 的影响。PKA 的反应在 37°C 下进行 5 分钟，反应体系为 20 µL，包含 25 mM Tris-HCl (pH 7.0)、10 mM MgCl2、2 mM EGTA、50 µM 环磷酸腺苷反应元件结合蛋白肽和 10 µM [γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)。 PKC 反应在 30 µL 混合物中进行 5 分钟，该混合物包含 50 mM Tris-HCl (pH 7.0)、10 mM MgCl2、0.5 mM CaCl2、0.2 mg/mL III-S 型组蛋白、50 µg/mL 磷脂酰丝氨酸和 10 µm[γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)。在先前文献（Asano 等，1989）描述的条件下，测定了 Rho 激酶抑制剂对肌球蛋白轻链激酶 (MLCK) 的影响。反应体系为 30 µL，包含 40 mM HEPES (pH 7.0)、5 mM 乙酸镁、0.5 mM CaCl2、0.1% (v/v) Tween-80、5.3 nM 钙调蛋白、51 µM 肌球蛋白轻链肽、1.95 nM MLCK 和 [γ-32P]ATP (150 cpm/pmol)[2]。 ROCK 抑制的体外激酶测定包括将 H-1152 二盐酸盐与重组 ROCK2 酶和肽底物（例如 S6 激酶肽）在 ATP 存在下孵育，通过闪烁计数掺入的 32P 或使用标记的磷酸化底物抗体通过荧光偏振来测量磷酸化。 |
| 细胞实验 |
ROCK抑制剂H-1152用水稀释后，于接种24小时后向培养物中加入10 μl。对照组加入水。加入抑制剂18小时后，用4%多聚甲醛固定培养物（辣根过氧化物酶标记室温固定1小时，荧光标记室温固定20分钟）。ArrayScan/Cellomics自动化分析：将细胞接种于预先包被聚赖氨酸/层粘连蛋白的384孔塑料板中，总体积为50 μl，并在相同的培养基中培养[3]。
为了研究蛋白激酶抑制剂（例如H-1152）的作用，将细胞与抑制剂预孵育15分钟，然后用LPA刺激1分钟或用PDBu刺激5分钟。在刺激后的不同时间点，向培养物中加入5% (v/v) 三氯乙酸，并用橡胶刮刀刮取细胞。沉淀后，用含6 mM二硫苏糖醇的丙酮洗涤沉淀物以去除三氯乙酸，然后干燥。将干燥的细胞粉末置于十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 样品缓冲液中，该缓冲液含有125 mM Tris (pH 7.4)、8 M尿素、10% (w/v) 蔗糖、0.02% (w/v) 溴酚蓝、4% (w/v) SDS和2-巯基乙醇，然后在95℃加热5分钟进行提取。将样品通过0.22 μm离心过滤器（Millipore，美国马萨诸塞州贝德福德）过滤以去除不溶性物质。将样品（2.5 × 10⁵ 个细胞）进行 SDS-PAGE (7.5%)/Western blotting 分析。凝胶中的蛋白质通过电转印转移至聚偏二氟乙烯膜上。用 5% (w/v) 脱脂奶粉孵育后，用 pS159-Mar-Ab 抗体进行印迹，随后用抗小鼠 IgG 抗体进行印迹。采用增强型化学发光-Western印迹检测试剂检测免疫反应性，并使用KODAK 1D图像分析软件扫描X光胶片密度测定其程度，结果以各条件下相对于对照组的百分比表示[2]。体外细胞培养研究采用多种细胞系（例如，血管平滑肌细胞、神经元细胞、癌细胞），用浓度范围为10 nM至10 μM的H-1152二盐酸盐处理，通过Western印迹法测量下游底物（例如，MYPT1、cofilin）的磷酸化水平来评估ROCK活性，并评估细胞表型，例如应力纤维形成、细胞迁移和神经突生长。 |
| 动物实验 |
体内动物实验包括通过腹腔注射或口服灌胃向啮齿动物施用 H-1152 二盐酸盐，通过测量下游底物磷酸化来评估靶组织中 ROCK 的抑制情况，并在疾病模型中评估血压降低、伤口愈合或肿瘤生长抑制等功能性结果。
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| 药代性质 (ADME/PK) |
H-1152 二盐酸盐是一种水溶性、可透过膜的化合物，其分子量约为 386.3 g/mol（游离碱）；通常以粉末形式储存在 -20°C，溶液在避光条件下于 -20°C 可稳定保存长达 1 个月。
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
H-1152 二盐酸盐的毒理学数据仅限于体外细胞毒性评估；浓度高于 10 μM 时，它可能表现出非特异性细胞毒性，并且尚未广泛报道该研究化合物的全面体内毒性研究。
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
(S)-2-甲基-1-(4-甲基异喹啉-5-磺酰基)-1,4-二氮杂环庚烷二盐酸盐是由(S)-2-甲基-1-(4-甲基异喹啉-5-磺酰基)-1,4-二氮杂环庚烷与2摩尔当量氯化氢反应生成的盐酸盐。它是Rho激酶(ROCK)的ATP竞争性抑制剂，属于EC 2.7.11.1（非特异性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶）抑制剂。它含有一个(S)-2-甲基-1-(4-甲基异喹啉-5-磺酰基)-1,4-二氮杂环庚烷(2+)结构域。Rho激酶是一类细胞内信号转导丝氨酸/苏氨酸激酶，可与RHO GTP结合蛋白结合。最初发现它们介导了RhoA GTP结合蛋白对应力纤维和黏着斑形成的影响。Rho相关激酶对多种底物具有特异性，包括肌球蛋白轻链磷酸酶和LIM激酶。
H-1152二盐酸盐是一种广泛用于研究心血管生物学、神经生物学、癌症研究和细胞迁移研究中ROCK介导的信号通路的研究工具；它尚未获准用于临床，但可作为比较ROCK抑制剂效力和选择性的重要参考化合物。 |
| 分子式 |
C16H23CL2N3O2S
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|---|---|
| 分子量 |
392.3437
|
| 精确质量 |
391.088
|
| 元素分析 |
C, 48.98; H, 5.91; Cl, 18.07; N, 10.71; O, 8.16; S, 8.17
|
| CAS号 |
871543-07-6
|
| 相关CAS号 |
H-1152;451462-58-1;Glycyl H-1152 hydrochloride;913844-45-8
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| PubChem CID |
11560225
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| 外观&性状 |
Typically exists as White to yellow solids at room temperature
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| LogP |
4.867
|
| tPSA |
70.68
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
476
|
| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
S(N1CCCNC[C@@H]1C)(C1C=CC=C2C=NC=C(C=12)C)(=O)=O.Cl
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| InChi Key |
BFOPDSJOLUQULZ-GXKRWWSZSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H21N3O2S.2ClH/c1-12-9-18-11-14-5-3-6-15(16(12)14)22(20,21)19-8-4-7-17-10-13(19)2;;/h3,5-6,9,11,13,17H,4,7-8,10H2,1-2H3;2*1H/t13-;;/m0../s1
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| 化学名 |
4-methyl-5-[[(2S)-2-methyl-1,4-diazepan-1-yl]sulfonyl]isoquinoline;dihydrochloride
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| 别名 |
H-1152 Dihydrochloride; 871543-07-6; H-1152 (dihydrochloride); H1152; 4-methyl-5-[[(2S)-2-methyl-1,4-diazepan-1-yl]sulfonyl]isoquinoline;dihydrochloride; brd7446 dihydrochloride; Rho Kinase; H 1152 dichloride;
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
H2O : ~35.71 mg/mL (~91.02 mM)
DMSO : ~10 mg/mL (~25.49 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.8 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.08 mg/mL (5.30 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 50 mg/mL (127.44 mM) in PBS (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.5488 mL | 12.7440 mL | 25.4881 mL | |
| 5 mM | 0.5098 mL | 2.5488 mL | 5.0976 mL | |
| 10 mM | 0.2549 mL | 1.2744 mL | 2.5488 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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