| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 1mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
TRPM8/transient receptor potential M8
Icilin is a synthetic super-cooling agent that activates TRPM8 (transient receptor potential melastatin 8) cation channel [1] Icilin exerts anti-inflammatory effects on CD4⁺ T cells independent of TRPM8 and TRPA1 (transient receptor potential ankyrin-1) channels[3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Icilin 诱发的 TRPM8 电流表现出非常不同的延迟和显着的脱敏。它们还具有可变的激活动力学和 Ca2+ 依赖性[1]。
1. Icilin激活TRPM8的潜伏期存在极大变异性，且在有钙存在时会发生广泛脱敏；Icilin要达到完全效力，需同时升高胞质Ca²⁺水平（既可通过TRPM8通道通透，也可通过细胞内钙库释放），而薄荷醇/寒冷激活TRPM8时表现为快速激活及中度Ca²⁺依赖性适应 [1] 2. Icilin在体外可强效抑制小鼠和人CD4⁺ T细胞的增殖；Icilin对TRPM8基因敲除（TRPM8⁻/⁻）和TRPA1基因敲除（TRPA1⁻/⁻）T细胞增殖的抑制作用与野生型（WT）表型一致，提示其作用机制不依赖TRPM8/TRPA1 [3] 3. Icilin在体外可改变活化CD4⁺ T细胞的表达谱，使其呈现出效应功能受限、神经炎症潜能降低的表型 [3] |
| 体内研究 (In Vivo) |
大鼠和小鼠的行为被 iscilin 激活，iscilin 是一种瞬时受体电位阳离子通道亚家族 M (TRPM8) 激动剂。当给小鼠注射icin（3 mg/kg；皮下注射）时，会给予小鼠“湿狗奶昔”[2]。
1. Icilin处理可保护野生型和TRPM8基因敲除小鼠免受实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE，多发性硬化症的小鼠模型）的疾病进展影响：表现为临床发病延迟、神经炎症减轻；Icilin给药可减少小鼠体内自身抗原限制性T细胞的外周扩增 [3] |
| 酶活实验 |
TRPM8是瞬态受体电位离子通道家族的成员，在寒冷时会使体感神经元去极化。TRPM8也被冷却剂薄荷醇和西林激活。当暴露于薄荷醇或寒冷时，TRPM8表现得像许多配体门控通道一样，表现出快速激活，随后是适度的钙依赖性适应。相比之下，如果存在钙，西林会以极不稳定的潜伏期激活TRPM8，随后进行广泛的脱敏。在这里，我们表明，为了达到完全的疗效，氨苄青霉素需要通过TRPM8通道的渗透或细胞内储存的释放同时提高细胞溶质Ca2+。因此，必须将两个刺激配对以引发全通道激活，这说明了TRP通道进行重合检测的可能性。西林敏感性的决定因素映射到TRPM8的一个区域，该区域对应于有害热受体TRPV1上的辣椒素结合位点，这表明化学激动剂对这些热敏通道的门控具有保守的分子逻辑[1]。
1. TRPM8通道活性实验（膜片钳技术）：将表达TRPM8的细胞暴露于Icilin、薄荷醇或寒冷刺激；通过记录膜电位和离子电流，检测离子通道门控、激活潜伏期、脱敏作用及Ca²⁺依赖性。评估胞质Ca²⁺升高（通过TRPM8通透或细胞内钙库释放）对Icilin介导的TRPM8激活的影响，并将Icilin对TRPM8的敏感性决定簇定位至与TRPV1上辣椒素结合位点同源的区域 [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型：表达 TRPM8 的卵母细胞或 HEK293 细胞 测试浓度： 10 μM 孵育时间： 表达TRPM8的卵母细胞3分钟； HEK293 细胞 1 分钟 实验结果：在表达电压钳制 TRPM8 的卵母细胞或 HEK293 细胞中，激活的膜电流具有不同的起始延迟。 1. TRPM8通道功能实验：将表达TRPM8的细胞用Icilin（浓度未明确）、薄荷醇或寒冷处理；采用膜片钳技术和Ca²⁺成像技术评估Ca²⁺信号、离子通道激活/脱敏动力学。使用螯合剂（如EGTA）调控胞质Ca²⁺水平，以明确Ca²⁺在Icilin介导的TRPM8激活中的作用 [1] 2. T细胞增殖实验：分离并体外激活小鼠和人CD4⁺ T细胞（包括TRPM8⁻/⁻和TRPA1⁻/⁻敲除细胞）；用Icilin（浓度未明确）处理细胞，通过标准方法（未明确说明是[³H]胸苷掺入法或CFSE稀释法）检测细胞增殖。对比野生型和敲除型T细胞的增殖速率，确定Icilin作用对TRPM8/TRPA1的依赖性 [3] 3. T细胞基因表达实验：体外用Icilin处理活化的CD4⁺ T细胞；提取RNA并分析基因表达谱，鉴定效应功能相关基因的表达变化 |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： C57BL/6 小鼠，9-10 周龄（成年，26-30 g）或 24 月龄（老年，35-42 g）[2]。
剂量： 3 mg/kg 给药途径： 皮下注射 实验结果： 引起清晰且可量化的抖动行为（“湿狗样抖动”），该行为依赖于 TRPM8。 为了确定“化合物 5”是否能有效抑制活体小鼠体内的 TRPM8 活性，我们进行了 WDS 实验。在该实验中，将强效 TRPM8 激动剂（冰片醇，3 mg/kg，皮下注射）注射到接受“化合物 5”或载体处理的小鼠体内。在小鼠体内注射冰毒后，会产生明显且可量化的抖动行为（“湿狗样抖动”），这种行为依赖于TRPM8（18–22）（2, 3）。因此，有效抑制TRPM8预计会减少冰毒诱发的行为事件。“化合物5”或载体在注射冰毒前60分钟给药。从注射冰毒后10分钟开始，计数5分钟内的“湿狗样抖动”次数。实验方案（总结于表1）：在方案1中，用于建立一种通过激活TRPV1实现持久低温的方法，将DHC（2–4 mg/kg）或载体（20% DMSO生理盐水）通过PE-10导管皮下注射到清醒小鼠体内。全剂量分两次推注给药，间隔 30 分钟（图 1B），或以持续输注的方式给药，输注时可选择是否进行初始推注（图 2）。通过植入腹部的热电偶记录核心温度；第二个热电偶记录笼内环境温度（22–24 °C）。首次输注后，以每分钟 1 次的频率测量温度，持续长达 8 小时。[2]方案 3 用于确定 TRPV1 激动剂在老年受试者中的有效性。年轻（9–10 周龄）或老年（24 个月龄）小鼠单次皮下注射 DHC（1.25 mg/kg）。注射后2小时内，使用遥测仪测量体温（图4）。在方案4中，为了确定TRPM8抑制剂在轻度亚中性和寒冷环境下的降温效应，将“化合物5”（20 mg/kg，皮下注射）或载体注射到植入遥测仪的小鼠体内（图5）。“化合物5”是一种选择性TRPM8抑制剂（参见“药物”部分）。注射后30分钟开始记录核心温度，持续30分钟，然后将小鼠转移到冷室2小时，并每隔20分钟测量一次温度。每个笼子顶部都装有塑料网罩，以便与外界空气进行热交换。笼内平均温度为8℃。[2]方案5用于确定TRPM8抑制剂是否能增强TRPV1激动剂的降温效应。将TRPM8拮抗剂“化合物5”（30 mg/kg，腹腔注射）或载体注射到植入遥测仪的小鼠体内（图6）。60分钟后，两组小鼠均腹腔注射DHC（0.6、1.25或2.5 mg/kg）。从注射“化合物5”或载体开始，记录小鼠体温5.5小时（330分钟），每10分钟测量一次。通过计算每次处理后核心体温（Tcore）的最低值（nadir）来确定低温深度。低温持续时间通过测量从注射DHC到Tcore恢复至≥34 °C的时间（精确到10分钟）来确定。0.6 mg/kg DHC剂量在实验过程中未能可靠地将Tcore降至34 °C以下，因此被排除在Tcore恢复分析之外。在接受较高剂量DHC治疗并预先用“化合物5”处理的两组小鼠中，核心体温（Tcore）偶尔无法在330分钟的测量时间内恢复至34°C。在这些病例中（16只小鼠中的6只），恢复时间被设定为最大值（330分钟）。然而，所有小鼠的Tcore均在第二天早上完全恢复。此外，在接受2.5 mg/kg DHC治疗的载体组中，有一只小鼠的Tcore未降至34°C以下。该小鼠的恢复时间被设定为最小值（0分钟）。[2] 1. EAE小鼠模型方案：雌性C57BL/6小鼠（WT，TRPM8⁻/⁻）被诱导EAE（诱导方法未指定）；在EAE进展期间给予Icilin（给药途径、剂量、频率未指定）。对EAE的临床评分（疾病发作和严重程度）进行监测，并通过组织学或分子方法（未明确说明）评估神经炎症。通过流式细胞术或免疫学检测（未明确说明）评估外周T细胞扩增（自身抗原限制性）[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
3-(2-羟基苯基)-6-(3-硝基苯基)-1,4-二氢嘧啶-2-酮是一种 C-硝基化合物。
1. 冰片是一种合成的超冷剂；它激活 TRPM8 需要同时检测两种刺激（冰片结合和胞质 Ca²⁺ 升高），这说明了 TRP 通道门控的独特机制。 TRPM8 上的 Icilin 敏感区与 TRPV1 上的辣椒素结合位点同源，表明化学激动剂对热敏性 TRP 通道门控的分子机制具有保守性 [1] 2. Icilin 在淋巴细胞介导的神经炎症（EAE 模型）中发挥强效的抗炎作用，其作用机制超越了经典的 TRPM8 通道激活（T 细胞调节中不依赖于 TRPM8/TRPA1 的机制）[3] 3. Icilin 能够通过调节 CD4⁺ T 细胞反应来减轻 EAE 的进展，因此是一种潜在的自身免疫性神经炎症性疾病（例如多发性硬化症）的治疗药物 [3] |
| 分子式 |
C16H13N3O4
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|---|---|---|
| 分子量 |
311.29
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| 精确质量 |
311.09
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| 元素分析 |
C, 61.73; H, 4.21; N, 13.50; O, 20.56
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| CAS号 |
36945-98-9
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
161930
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| 外观&性状 |
Typically exists as Light yellow to yellow solids at room temperature
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| 密度 |
1.4±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
594.8±50.0 °C at 760 mmHg
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| 熔点 |
200-208ºC
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| 闪点 |
313.5±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.7 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.672
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| LogP |
2.73
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| tPSA |
98.39
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
2
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| 重原子数目 |
23
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| 分子复杂度/Complexity |
502
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C1N([H])C(C2C([H])=C([H])C([H])=C(C=2[H])[N+](=O)[O-])=C([H])C([H])([H])N1C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1O[H]
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| InChi Key |
RCEFMOGVOYEGJN-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C16H13N3O4/c20-15-7-2-1-6-14(15)18-9-8-13(17-16(18)21)11-4-3-5-12(10-11)19(22)23/h1-8,10,20H,9H2,(H,17,21)
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| 化学名 |
3-(2-hydroxyphenyl)-6-(3-nitrophenyl)-1,4-dihydropyrimidin-2-one
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.03 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 +5% Tween-80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80+，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.2124 mL | 16.0622 mL | 32.1244 mL | |
| 5 mM | 0.6425 mL | 3.2124 mL | 6.4249 mL | |
| 10 mM | 0.3212 mL | 1.6062 mL | 3.2124 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Clonidine pretreatment reduces WDS induced by a fixed dose of icilin.Brain Res.2011 Apr 12;1384:110-7. |
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Pretreatment with a fixed dose of clonidine (0.15 mg/kg) reduces WDS evoked by graded doses of icilin.Brain Res.2011 Apr 12;1384:110-7. |
ST-91 pretreatment reduces WDS induced by a fixed dose of icilin.Brain Res.2011 Apr 12;1384:110-7. |
L-R4W2 acetate
TRPM2-IN-1
TRPA1-IN-4
TRPA1 agonist-1
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