IMD 0354   中文名称: IMD 0354

NF-κB (IC50 = 1.2 μM)

体外活性：IMD-0354（浓度 < 5 μM）抑制 HMC-1 细胞中 NF-κB 的表达以及 NF-κB 向细胞核的易位。 IMD-0354 在 HMC-1 细胞中以时间和剂量依赖性方式抑制细胞增殖。 IMD-0354 (0.5 μM) 几乎抑制 IC-2G559 细胞和 IC-2V814 细胞的增殖。 IMD-0354 (0.5 μM) 导致 HMC-1 细胞的细胞周期停滞在 G0/G1 期。 IMD-0354 (1 μM) 增加 HMC-1 细胞中亚二倍体 DNA 含量的细胞数量。 IMD-0354 (<1 μM) 降低 HMC-1 细胞中 S 期和 G2/M 期细胞的比例。 IMD-0354 (1 μM) 在 HMC-1 细胞中以时间依赖性方式下调 Cyclin D3 表达以及 pRb 磷酸化水平。 IMD-0354 (< 10 μM) 对 STAT3 和 STAT6 的信号没有影响，而在 HMC-1 细胞中，高浓度时 STAT1 和 STAT5 的磷酸化受到非常轻微的抑制。 24 小时后，IMD-0354 以剂量依赖性方式抑制 CBhCMC 中 NF-κB 向细胞核的易位。 IMD-0354 在浓度为 10 μg/ml 时可抑制 HepG2 细胞中 98.5% 的 NF-κB 活性。当在血清饥饿 12 小时的 3T3-L1 脂肪细胞中同时给予 TNFα (6 nM) 和胰岛素 (100 nM) 时，IMD-0354 (1 μM) 可改善 TNFα 诱导的培养基中脂联素浓度的降低。当在血清饥饿 12 小时的 3T3-L1 脂肪细胞中同时给予 TNFα (6 nM) 和胰岛素 (100 nM) 时，IMD-0354 (1 μM) 可恢复因 TNFα 治疗而下调的 Akt 磷酸化。 IMD-0354 (1 μM) 抑制培养心肌细胞中由肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 诱导的 IκBα 磷酸化和核因子-κ B (NF-κB) 核转位。 IMD-0354 (1 μM) 显着降低 TNF-α 诱导的培养心肌细胞中白细胞介素 1β 和单核细胞趋化蛋白 1 的产生。激酶测定：IMD0354 抑制 TNF-α 诱导的 NF-κB 转录活性，IC50 为 1.2±0.3 uM。细胞测定：将细胞（浓度为 2×105 个细胞/mL）在含有 10% FCS（对于 HMC-1 和 IC-2 细胞）或 5% FCS（对于 CBhCMC）的无酚红 α-MEM 中孵育，并含有或不含不同浓度的 IMD-0354、STI571 或 PDTC 的抗生素。 IC-2WT 细胞和 CBhCMC 在 100 ng/mL 重组大鼠或重组人 SCF 存在下孵育。将 100 微升细胞悬液加入到 96 孔培养板的每个孔中，并孵育 24、48 和 72 小时。培养结束后 4 小时前，将溶解在 PBS 中的 10 μL 5 mg/mL 3-[4,5-二甲基噻唑-2-基]-2,5-二苯基四唑溴化物 (MTT) 添加到每个孔中。添加 100 μL 10% SDS 的 0.01 N HCl 溶液终止反应。使用ImmunoMini NJ-2300 在577 nm 处测量吸光度。

IMD-0354 (5 mg/kg) 显着降低 OVA 致敏小鼠肺部的 NF-κB，但降低幅度低于 20 mg/kg IMD-0354。 IMD-0354 (20 mg/kg) 可改善 OVA 致敏小鼠的气道高反应性并减少支气管嗜酸性粒细胞和粘液产生细胞的数量。 IMD-0354 (20 mg/kg) 还可减少 OVA 致敏小鼠支气管肺泡灌洗液中的细胞和嗜酸性粒细胞总数。 IMD-0354 (20 mg/kg) 抑制 OVA 致敏小鼠气道和/或肺部中 Th2 细胞因子的产生，例如白细胞介素 (IL)-5 和 IL-13 以及嗜酸细胞趋化因子 (eotaxin)，但不影响免疫功能的恢复。在相同的实验条件下，Th1细胞因子如IL-12和干扰素-γ。 IMD-0354 (20 mg/kg) 导致 OVA 致敏小鼠血清 IgE 浓度部分降低。 IMD-0354 以剂量依赖性方式显着降低用 HF 饮食治疗和喂养的 KKAy 小鼠的血浆葡萄糖水平，而不受体重影响。 IMD-0354 (10 mg/kg) 导致梗塞面积/危险面积比显着剂量依赖性降低，并保持分数缩短比。

IMD0354 抑制 TNF-α 诱导的 NF-κB 转录活性，IC50 为 1.2±0.3 uM。

在指定的小时内，将 HMC-1 细胞（2×105 个细胞/mL）与不同浓度的 IMD-0354（0.1、0.5、1、5 和 10 uM）、STI571 或吡咯烷二硫代氨基甲酸酯 (PDTC) 一起孵育，并在每个时间点使用台盼蓝染料排除测试确定活细胞计数。细胞 (2×105 个细胞/mL) 在含有 10% FCS（对于 HMC-1 和 IC-2 细胞）或 5% FCS（对于 CBhCMC）、抗生素（含或不含不同浓度的 IMD）的无酚红 MEM 中孵育-0354（0.1、0.5、1、5 和 10 uM）、STI571 或 PDTC。将重组大鼠或重组人 SCF（100 ng/mL）添加到培养基中，并与 IC-2WT 细胞和 CBhCMC 一起孵育。 96 孔培养板的每个孔接收 100 微升细胞悬液，然后将其放置在其中孵育 24、48 和 72 小时。培养结束后 4 小时前，将 10 μL 溶解在 PBS 中的 5 mg/mL MTT 添加到每个孔中。添加 100 L 10% SDS 的 0.01 N HCl 溶液后，反应即停止。 ImmunoMini NJ-2300[1] 用于测量 577 nm 处的吸光度。

Mice: Female BALB/c nude mice are injected s.c. with MDA-MB-231 cells suspended in PBS (5×106 cells/100 L mouse) when they are 4 to 5 weeks old. Following growth, the tumor is surgically removed, and at the age of 4 weeks, under ether anesthesia, 100 mg of each established tumor is transplanted to the back of additional female nude mice. Each mouse receives an intraperitoneal injection of 5 mg/kg body weight of IMD-0354 (suspended in 100 L/mouse) once daily for 28 days following the implantation. As a control, saline is injected into naked mice. Calculations are made for the estimated tumor weight (mg) and volume (mm3).
Rats: Lewis rats (180–220 g) that are eight weeks old are used. Endotoxin-induced uveitis (EIU) is brought on by injecting 200 μg of diluted Escherichia coli LPS in 200 l of PBS subcutaneously. IMD-0354, diluted in 500 μL of 0.5% CMC, is injected intraperitoneally into the rats at the same time in doses of 30, 10, or 3. 500 μL of CMC alone is intraperitoneally administered to control EIU rats. Control rats are naive rats. Five animals are used in each group for each experiment, which is carried out in triplicate.

[1]. A novel NF-kappaB inhibitor, IMD-0354, suppresses neoplastic proliferation of human mast cells with constitutively activated c-kit receptors. Blood. 2005 Mar 15;105(6):2324-31.

[2]. Study of the inhibitory effects on TNF-α-induced NF-κB activation of IMD0354 analogs. Chem Biol Drug Des. 2017 Dec;90(6):1307-1311.

[3]. A new IkappaB kinase beta inhibitor prevents human breast cancer progression through negative regulation of cell cycle transition. Cancer Res. 2006 Jan 1;66(1):419-26

[4]. Amelioration of endotoxin-induced uveitis treated with an IκB kinase β inhibitor in rats. Mol Vis. 2012;18:2586-97.

C15H8CLF6NO2

383.67

383.01

C, 46.96; H, 2.10; Cl, 9.24; F, 29.71; N, 3.65; O, 8.34

978-62-1

Solid powder

C1=CC(=C(C=C1Cl)C(=O)NC2=CC(=CC(=C2)C(F)(F)F)C(F)(F)F)O

CHILCFMQWMQVAL-UHFFFAOYSA-N

InChI=1S/C15H8ClF6NO2/c16-9-1-2-12(24)11(6-9)13(25)23-10-4-7(14(17,18)19)3-8(5-10)15(20,21)22/h1-6,24H,(H,23,25)

N-[3,5-bis(trifluoromethyl)phenyl]-5-chloro-2-hydroxybenzamide

IKK2 Inhibitor V; IMD0354; IMD 0354; IMD-0354

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

2% DMSO+5% Tween 80+0.5% CMC Na: 3 mg/mL

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。