Ingenol Mebutate targets protein kinase C (PKC) isoforms. It activates various PKC isoforms, including PKC-α, PKC-β, PKC-γ, PKC-δ, and PKC-ε. It has Ki values of 0.3 nM for PKC-α, 0.105 nM for PKC-β, 0.162 nM for PKC-γ, 0.376 nM for PKC-δ, and 0.171 nM for PKC-ε. By activating PKC, it induces apoptosis in tumor cells and modulates immune responses.

大戟属植物Euphorbia peplus的活性成分英格醇甲酯（也称为英格醇3-天使酯）是一种强效的PKC激活剂，其对PKC-α、PKC-β、PKC-γ、PKC-δ和PKC-ε的Kis值分别为0.3、0.105、0.162、0.376和0.171 nM。英格尼姆二甲酚甲丁酯的EC50值在WEHI-231细胞中分别为：PKC-α 13 ± 2.4 nM，PKC-βI 4.37 ± 0.4 nM，PKC-βII 10.5 ± 2.2 nM，PKC-δ 38.6 ± 2.9 nM，PKC-ε 1.08 ± 0.01 nM，PKC-μ 0.9 ± 0.13 nM，PKC-ε 198 ± 12.5 nM，PKC-βI 69.1 ± 8.2 nM，PKC-ε 4.6 ± 0.4 nM；PKC-μ 1 nM，PKC-α 635 ± 245 nM，PKC-α 146 ± 35 nM。 （PKC-βI）4.7 ± 0.7 nM，（PKC-δ）1.1 ± 0.5 nM（HOP-92细胞），（PKC-ε）30 nM（Colo-205细胞）。WEHI-231细胞、HOP-92细胞和Colo-205细胞均可被英吉醇甲酯增敏，IC50值分别为1.41 ± 0.255 nM、3.24 ± 2.01 nM和11.9 ± 1.307 nM，依次递减[1]。PKC-δ依赖性的英吉醇甲酯（PEP005；20 nM）可诱导原发性急性髓系白血病（AML）骨髓原始细胞凋亡，但对正常髓母细胞无此作用[2]。英吉醇甲酯 (PEP005) 可抑制 PKCδ 并激活 PKCα。与亲代 Colo205-S 细胞相比，Colo205-R 细胞的 IC50 >10 μM，使其对英吉醇甲丁酯的耐药性提高了 300 倍以上 [3]。
英吉醇甲酯能高效激活 PKC，对多种 PKC 亚型的 EC50 值均在纳摩尔范围内。它能诱导急性髓系白血病 (AML) 细胞系和原代 AML 原始细胞凋亡。在原代 AML 骨髓原始细胞中，其作用依赖于 PKC-δ。它能使 WEHI-231、HOP-92 和 Colo-205 细胞对英吉醇甲丁酯敏感，IC50 值分别为 1.41 nM、3.24 nM 和 11.9 nM。

英吉醇甲酯已获准用于局部治疗光化性角化病。其在光化性角化病中的确切作用机制被认为涉及原发性坏死，随后引发中性粒细胞介导的炎症反应，最终导致残留病灶细胞的抗体依赖性死亡。此外，它还表现出抗白血病活性，并已被研究其对多种肿瘤细胞类型的影响。

英吉醇甲酯的主要体外检测方法包括测定其与蛋白激酶C (PKC) 同工酶的结合亲和力 (Ki) 和功能活性 (EC50)。结合试验使用纯化的 PKC 同工酶和放射性标记配体来确定 Ki 值。功能试验则检测 PKC 的激活及其下游信号通路，例如诱导癌细胞系凋亡。

英吉醇甲酯的细胞活性检测包括用该化合物处理癌细胞系（例如急性髓系白血病细胞），并测量其对细胞活力、凋亡和蛋白激酶C (PKC) 激活的影响。该化合物诱导PKCδ核转位的能力可通过免疫荧光显微镜进行评估。其对细胞周期和凋亡标志物的影响可通过流式细胞术进行测量。

已在光化性角化病和白血病模型中开展了英吉醇甲酯的体内动物实验。在光化性角化病模型中，局部应用该药物已证实能有效清除病变。其抗白血病活性已在异种移植模型中得到评估。然而，所提供的资料中并未详细列出具体的体内实验数据。

吸收、分布和排泄
由于吲哚美辛甲酯为外用药物，其全身吸收低于 0.1 ng/mL。由于吲哚美辛甲酯为外用药物，不存在消除途径。由于吲哚美辛甲酯为外用药物，不存在分布容积。由于吲哚美辛甲酯为外用药物，不存在清除率。采用基于体重的简单异速生长相关性估算人体血浆清除率和分布容积（稳态）。使用一级吸收和消除动力学的一室模型，估计每日最大预期临床剂量为 2 μg/kg 外用时，吲哚美辛甲酯的血药浓度将低于定量下限 (LLOQ) 0.1 ng/mL。预计稳态血浆清除率和分布容积分别约为 0.22 至 1.01 L/hr/kg 和 0.61 L/kg。预计吸收速率常数和局部生物利用度分别为 0.0277 h⁻¹ 和 0.21%。局部给药剂量为 2 μg/kg/天时，预计达峰时间 (Tmax) 为 2 小时，预计峰浓度 (Cmax) 为 0.107 pg/mL。人体达到可检测血浆浓度所需的最低局部给药剂量为 2000 μg/kg/天。静脉给药后，在大鼠、兔、犬和小型猪中观察到高至极高的血浆清除率、中等至高的稳态分布容积和较短的半衰期。在大鼠中，静脉注射3(H)-英格诺尔甲酯后，药物相关的放射性物质均匀分布于各组织中，受影响器官的分布无性别差异，但雌性大鼠的清除速度更快。体外研究表明，英格诺尔甲酯及其异构体在大鼠、犬、小型猪和人体中均具有较高的血浆蛋白结合率（>99%）。在大鼠中，静脉注射的3(H)-英格拉米定甲酯主要经胆汁排泄，尿液排泄量极少。在大鼠、小型猪和人体皮肤上涂抹0.01%、0.1%或0.05%的PEP005凝胶后，经皮吸收率普遍较低，不同动物物种的吸收率范围为0.04%（小型猪）至8.68%（大鼠），人体的吸收率范围为0.16%至1.93%。 3(H)-英格拉米定甲酯的吸收剂量顺序为：WI大鼠 > SD大鼠 > 人 > 小型猪。在小型猪中，局部应用PEP005凝胶后，血液中通常检测不到甲酯，即使检测到，浓度也仅为0.1 ng/mL。在大鼠中，仅在剂量达到300 μg/kg或更高时，血液中才能稳定检测到甲酯，此时其绝对生物利用度为2%至4%。
在两项研究中，共纳入16名光化性角化病（AK）患者，以评估0.05% Picato凝胶的全身暴露情况。受试者连续两天，每天一次，在前臂背部100 cm²的区域涂抹约1 g 0.05% Picato凝胶。在这些研究中，测定了血液中吲哚美辛甲酯及其两种代谢物（吲哚美辛甲酯的酰基异构体）的浓度。所有受试者的血液样本中，吲哚美辛甲酯及其两种代谢物的浓度均低于定量下限（0.1 ng/mL）。
代谢/代谢物

由于吲哚美辛甲酯是一种外用药物，不抑制或诱导大多数细胞色素P450 (CYP)酶，因此Picato不会被代谢。
体外研究表明，吲哚美辛甲酯在大鼠、犬、小型猪和人类的血液、皮肤匀浆和肝细胞中的代谢性质相似。吲哚美辛甲酯在血液和皮肤匀浆中相对稳定，但在冷冻保存的肝细胞中会发生广泛的代谢。在大鼠、犬和小型猪的肝细胞中，吲哚美辛的主要代谢途径是水解生成吲哚美辛；而在人体内，其主要代谢途径是吲哚美辛甲酯的羟基化。在大鼠、犬、小型猪和人的皮肤中，吲哚美辛甲酯主要重排生成PEP015（约占26%至31%），少量重排生成PEP025（约占1%至2%）；水解生成吲哚美辛的量极少（0%至0.81%）。然而，在大鼠和小型猪局部或静脉注射吲哚美辛甲酯后，未检测到PEP025，且血液中PEP015的浓度低于相应吲哚美辛甲酯浓度的10%。
生物半衰期
由于吲哚美辛甲酯是外用药物，因此没有半衰期数据。
英吉醇甲酯是一种外用药物，全身吸收极少（低于 0.1 ng/mL）。其分子量为 430.53 g/mol，分子式为 C25H34O6。该化合物通常用作研究试剂。其对 PKC 同工酶的 Ki 值在亚纳摩尔范围内。

毒性概述
鉴别和用途：吲哚美辛甲酯为白色至淡黄色结晶性粉末。它以凝胶剂形式（商品名：Picato）用于局部治疗光化性角化病。人体暴露和毒性：三项针对健康志愿者的药理学研究表明，吲哚美辛甲酯凝胶具有良好的局部安全性，未发现皮肤致敏、光敏性或光敏反应的证据。然而，局部过量使用可能导致局部皮肤反应发生率增加。动物研究：在连续28天静脉注射给药的大鼠中，治疗相关效应包括短暂性呼吸急促（与剂量无关）、嗜睡和/或昏睡以及食物摄入量减少。在连续7天给药的小鼠中，1只接受60 μg/kg/天剂量的动物以及所有接受≥80 μg/kg/天剂量的动物均因剂量相关的严重症状在给药后≤4天内被提前实施安乐死。在小型猪中，连续4天以5 μg/kg/天的剂量或连续28天以3 μg/kg/天的剂量给予甲基炎症素后，未发生死亡。治疗相关不良反应仅限于偶发的短暂性行为嗜睡、呕吐以及在给予2.5 μg/kg/天剂量后体重略有下降。在妊娠兔中，静脉注射甲基炎症素导致胚胎-胎儿死亡率增加以及胎儿内脏和骨骼变异发生率增加。在妊娠大鼠中，静脉注射后未观察到与治疗相关的胚胎-胎儿毒性或致畸作用。体外Ames试验、小鼠淋巴瘤试验和体内大鼠微核试验均未发现甲基吲哚美辛具有致突变性。体外叙利亚仓鼠胚胎（SHE）细胞转化试验结果呈阳性。一项为期6个月、涉及154只大鼠的重复静脉给药研究发现，每周两次接受15 μg/kg剂量给药的1只雄性大鼠和1只雌性大鼠出现肾小管腺瘤和肾小管增生。患有肾腺瘤的雌性大鼠也患有垂体腺瘤。1只雄性大鼠在1个月恢复期后实施安乐死时，发现患有滤泡性甲状腺癌。妊娠和哺乳期用药概述 哺乳期用药概述 尚未开展关于哺乳期局部使用吲哚美辛的研究。然而，局部用药后血清浓度无法检测到，因此预计哺乳不会使婴儿接触到该药物。如果母亲需要使用吲哚美辛，这并非停止母乳喂养的理由。请勿将吲哚美辛涂抹于乳房或乳头上，并确保婴儿皮肤不与涂抹部位直接接触。◉ 对母乳喂养婴儿的影响：截至修订日期，未找到相关的已发表信息。◉ 对哺乳和母乳的影响：截至修订日期，未找到相关的已发表信息。◉ 蛋白结合：由于吲哚美辛是外用药物，因此没有血浆蛋白结合数据。
吲哚美辛甲酯的毒理学数据符合外用药物的特征。局部皮肤反应，如红斑、脱屑和结痂，在用药部位较为常见。由于全身吸收率低，全身毒性极小。其安全性已在治疗光化性角化病的临床试验中得到证实。

[1]. Characterization of the interaction of ingenol 3-angelate with protein kinase C. Cancer Res. 2004 May 1;64(9):3243-55.

[2]. PEP005, a selective small-molecule activator of protein kinase C, has potent antileukemic activity mediated via the delta isoform of PKC. Blood. 2005 Aug 15;106(4):1362-8.

[3]. Epithelial-to-mesenchymal transition and resistance to ingenol 3-angelate, a novel protein kinase C modulator, in colon cancer cells. Cancer Res. 2009 May 15;69(10):4260-9.

治疗用途
ClinicalTrials.gov 是一个注册和结果数据库，列出了全球公共和私人机构资助的人体临床研究。该网站由美国国家医学图书馆 (NLM) 和美国国立卫生研究院 (NIH) 维护。ClinicalTrials.gov 上的每条记录都包含研究方案摘要，包括：疾病或病症；干预措施（例如，正在研究的医疗产品、行为或程序）；研究的标题、描述和设计；参与要求（资格标准）；研究地点；研究地点的联系方式；以及指向其他健康网站相关信息的链接，例如 NLM 的 MedlinePlus（用于提供患者健康信息）和 PubMed（用于提供医学领域学术文章的引文和摘要）。吲哚美辛甲酯已列入此数据库。Picardo 凝胶适用于局部治疗光化性角化病。 /包含于美国产品标签/
注：尽管抗逆转录病毒疗法 (ART) 在抑制 HIV 复制方面非常有效，但它无法根除 HIV 感染者体内的病毒。稳定的潜伏 HIV 病毒库可在 HIV 感染早期迅速建立。因此，迫切需要有效的策略来根除 HIV 病毒库。我们报告称，吲哚美辛-3-当归酸酯 (PEP005) 是 Picato（一种先前获得 FDA 批准的用于治疗癌前日光性角化病的局部用药）的唯一活性成分，它能有效激活体外潜伏 HIV，且细胞毒性相对较低。生化分析表明，PEP005 通过诱导 pS643/S676-PKCδ-8-1κBα/ε-NF-κB 信号通路来激活潜伏 HIV。重要的是，PEP005 单独即可诱导接受抗逆转录病毒疗法 (ART) 的 HIV 感染者原代 CD4+ T 细胞中完全延伸和加工的 HIV RNA 的表达。此外，PEP005 与 P-TEFb 激动剂 JQ1 具有激活潜伏 HIV 的协同作用，其联合作用比单独使用 PEP005 高 7.5 倍。相反，PEP005 通过下调 HIV 共受体的细胞表面表达来抑制原代 CD4+ T 细胞中的 HIV 感染。这种抗癌化合物有望成为推进 HIV 根除策略的候选药物。
实验/本研究旨在评估两种 PEP005（甲基吲哚美辛）凝胶治疗浅表基底细胞癌的安全性。疗效是次要终点。这项在澳大利亚八家私人皮肤科诊所开展的随机、赋形剂对照的IIa期研究，纳入了60例经组织学确诊的浅表基底细胞癌（病灶大小4-15 mm）患者。患者被随机分配至A组（第1天和第2天治疗）或B组（第1天和第8天治疗），分别接受0.0025%、0.01%或0.05%的甲酯类异喹啉凝胶或赋形剂凝胶治疗。主要疗效终点为A组和B组不良事件和局部皮肤反应的发生率和严重程度；第85天的病灶清除率为次要疗效终点。不良事件发生率较低。A组中一名接受0.05%甲酯类异喹啉凝胶治疗的患者出现严重的脱屑/鳞屑/干燥，症状扩散至用药部位以外。非严重不良事件，可能与治疗相关，包括红斑扩散至用药部位以外、用药部位疼痛和头痛，两组各有两例患者出现这些事件。A组有6例患者出现一种或多种严重局部皮肤反应。疗效似乎与剂量相关，A组的临床和组织学病变清除率均高于B组。A组随机分配至0.05%甲酯葡聚糖凝胶组的8例患者中，5例（63%）达到组织学清除。两剂0.05%甲酯葡聚糖凝胶对浅表基底细胞癌患者安全有效。
药物警告

上市后报告显示，本品可能引起超敏反应，包括过敏性休克和过敏性接触性皮炎。如果发生过敏性休克或其他具有临床意义的超敏反应，应立即停用Picato凝胶并采取适当的医疗措施。

避免用于眼周区域。
接触后可能出现眼部问题，包括剧烈眼痛、化学性结膜炎、角膜灼伤、眼睑水肿、眼睑下垂和眼周水肿。
上市后观察到，0.015%和0.05%的Picato（甲酯）凝胶可能出现以下不良反应：超敏反应、过敏性接触性皮炎、带状疱疹、化学性结膜炎和角膜灼伤。
局部应用Picato凝胶后，治疗部位可能出现严重的皮肤反应，包括红斑、结痂、肿胀、水疱/脓疱和糜烂/溃疡。建议在皮肤从先前的药物或手术治疗中完全愈合之前，不要使用Picato凝胶。
有关氟化甲酯药物警告（共12项）的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

---

药效学
甲基氟化物诱导光化性角化病细胞死亡的药效学机制尚不清楚。
英吉醇甲酯 (PEP005) 是一种强效的蛋白激酶C (PKC) 激活剂，已获准用于光化性角化病的局部治疗。它具有双重作用，既能促进细胞死亡，又能诱导免疫反应。其对多种PKC亚型的Ki值均在亚纳摩尔范围内。该化合物也称为英吉醇3-天使酸酯。

C25H34O6

430.53

430.235

75567-37-2

Ingenol;30220-46-3

6918670

White to off-white solid powder

1.3±0.1 g/cm3

576.9±50.0 °C at 760 mmHg

191.4±23.6 °C

0.0±3.6 mmHg at 25°C

1.594

5.18

104.06

3

6

4

31

926

8

C/C=C(/C)\C(=O)O[C@H]1C(=C[C@@]23[C@@]1([C@@H](C(=C[C@H](C2=O)[C@H]4[C@H](C4(C)C)C[C@H]3C)CO)O)O)C

VDJHFHXMUKFKET-WDUFCVPESA-N

InChI=1S/C25H34O6/c1-7-12(2)22(29)31-21-13(3)10-24-14(4)8-17-18(23(17,5)6)16(20(24)28)9-15(11-26)19(27)25(21,24)30/h7,9-10,14,16-19,21,26-27,30H,8,11H2,1-6H3/b12-7-/t14-,16+,17-,18+,19-,21+,24+,25+/m1/s1

[(1S,4S,5S,6R,9S,10R,12R,14R)-5,6-dihydroxy-7-(hydroxymethyl)-3,11,11,14-tetramethyl-15-oxo-4-tetracyclo[7.5.1.01,5.010,12]pentadeca-2,7-dienyl] (Z)-2-methylbut-2-enoate

PEP 005; PEP-005; PEP005

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ≥ 100 mg/mL (~232.27 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。
*生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。

---

配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。
*20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。

---

View More

配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.81 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入到 900 μL 玉米油中并混合均匀。

---

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。