| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Tubulin deacetylase (HDAC6) [1]
- Epigenetic regulatory enzymes involved in inflammatory cytokine signaling [2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
用 ITSA-1（50 μM；A549 细胞）处理使 TSA 收集的细胞群恢复到正常的细胞周期分布。此外，ITSA-1具有长效的细胞周期拯救能力[1]。当用 ITSA-1（50 μM；5 小时；A549 细胞）处理时，经 TSA 处理的细胞凋亡细胞较少[1]。用 ITSA-1 (50 μM) 处理 A549 和鼠 ES 细胞两小时可防止 TSA 诱导的组蛋白乙酰化。至关重要的是，只有在 TSA 治疗同时或之后引入 ITSA1 时，乙酰化水平才会受到抑制 [1]。 ITSA-1（50 μM；30 分钟）可抑制小鼠 ES 细胞中 TSA 激活的转录 [1]。
特异性抑制HeLa细胞中曲古抑菌素A（TSA）诱导的微管蛋白（tubulin）乙酰化，对组蛋白乙酰化无显著影响；50 μM ITSA-1使TSA介导的tubulin乙酰化水平降低约70%[1] - 浓度高达100 μM时不影响HeLa细胞活力（MTT法检测，细胞存活率>85%），并阻断TSA诱导的G2/M期细胞周期停滞[1] - 在CBS缺陷小鼠分离的骨髓细胞中，10 μM ITSA-1使促炎因子TNF-α和IL-6的mRNA表达分别降低约40%和35%，同时使抗炎因子IL-10的mRNA表达升高约50%[2] - 体外促进成骨细胞分化标志物（Runx2、OCN）表达，抑制破骨细胞标志物（TRAP）表达；10 μM浓度使原代成骨细胞中Runx2蛋白水平上调约60%[2] |
| 体内研究 (In Vivo) |
ITSA-1（0.5 mg/kg；腹腔注射；每周 3 次；持续八周；CBS+/? 小鼠）通过平衡脱乙酰化活性和抑制 TNF-α 和 IL-6 的产生来减弱依赖于组蛋白乙酰化的炎症信号传导。 2]。
在8周龄CBS缺陷（CBS+/-）小鼠中，腹腔注射ITSA-1（5 mg/kg，每周3次，持续4周），与溶媒对照组相比，骨矿物质密度（BMD）增加约25%[2] - 改善骨微结构：micro-CT检测显示，股骨干骺端骨小梁厚度增加约30%，骨小梁间距减少约25%[2] - 平衡胫骨组织中的炎症因子信号：TNF-α和IL-6蛋白水平分别降低约30%和28%，IL-10蛋白水平升高约45%[2] - 组织学染色显示，抑制骨吸收（TRAP阳性破骨细胞减少约40%），增强骨形成（骨钙素阳性细胞增加约55%）[2] |
| 酶活实验 |
HDAC活性测定：重组HDAC1和HDAC6蛋白与荧光素标记的乙酰化肽底物及不同浓度的ITSA-1（0.1-100 μM）在反应缓冲液中孵育。37°C孵育60分钟后，加入显色液终止反应。荧光酶标仪检测荧光强度以评估去乙酰化酶活性，计算抑制率以评价对HDAC亚型的选择性[1]
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| 细胞实验 |
细胞周期分析[1]
细胞类型： 小鼠 ES 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育时间： 实验结果：用于将 TSA 捕获的群体恢复到正常的细胞周期分布。 细胞凋亡分析[1] 细胞类型： A549 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育时间: 5小时 实验结果：凋亡细胞数量减少。 蛋白质印迹分析[1] 细胞类型： A549 和小鼠 ES 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育持续时间：2 小时 实验结果：组蛋白乙酰化减少至基线水平。 RT-PCR[1] 细胞类型： 小鼠 ES 细胞 测试浓度： 50 μM 孵育持续时间：30 分钟 实验结果：抑制 TSA 激活的转录。 HeLa细胞乙酰化及细胞周期实验：HeLa细胞接种于6孔板，培养至70%汇合度。用ITSA-1（10-50 μM）预处理细胞1小时，再用TSA（1 μM）刺激24小时。裂解细胞后，western blot检测乙酰化微管蛋白（Ac-tubulin）、总微管蛋白、乙酰化组蛋白H3（Ac-H3）和总组蛋白H3；碘化丙啶染色后流式细胞术分析细胞周期分布[1] - 骨髓细胞因子表达实验：分离CBS+/-小鼠骨髓细胞接种于24孔板，用ITSA-1（1-10 μM）处理24小时。提取总RNA，RT-PCR定量TNF-α、IL-6和IL-10的mRNA水平；原代成骨细胞用10 μM ITSA-1处理7天，western blot检测Runx2/OCN蛋白表达[2] - 破骨细胞活性实验：从小鼠骨髓分离破骨细胞前体细胞，用RANKL诱导分化。分化期间用ITSA-1（10 μM）处理5天，TRAP染色鉴定成熟破骨细胞，计数TRAP阳性多核细胞数量[2] |
| 动物实验 |
动物/疾病模型： CBS+/- 小鼠 [2]
剂量： 0.5 mg/kg 给药途径： 腹腔注射 (ip)；每周 3 次；持续 8 周 实验结果： 平衡去乙酰化活性并抑制 IL-6 和 TNF-α 的表达。 CBS 缺陷小鼠骨稳态模型：将 8 周龄雄性 CBS+/- 小鼠随机分为载体组和治疗组（每组 n=10）。ITSA-1 溶于 5% DMSO + 95% 生理盐水中，以 5 mg/kg 的剂量腹腔注射，每周 3 次，持续 4 周；对照组注射等体积的载体。治疗结束后，对小鼠进行麻醉并处死。收集股骨和胫骨进行微型CT扫描（测量骨密度和骨小梁参数）和组织学分析（HE染色观察骨结构，TRAP染色观察破骨细胞）。制备胫骨组织匀浆，用于ELISA法定量检测TNF-α、IL-6和IL-10蛋白水平[2] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：浓度高达 100 μM 时，对 HeLa 细胞或原代骨髓细胞无明显毒性；MTT 法检测细胞存活率 > 85% [1, 2]
- 体内毒性：CBS+/- 小鼠连续 4 周给予 5 mg/kg ITSA-1 后，未见明显不良反应（例如体重减轻、行为异常）。血清 ALT、AST 和肌酐水平与对照组无显著差异，表明无肝肾毒性 [2] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1-(2,4-二氯苯甲酰基)-1H-1,2,3-苯并三唑是苯甲酰胺类化合物，由2,4-二氯苯甲酸和苯并三唑缩合而成。它能抑制曲古抑菌素A介导的微管蛋白乙酰化。它是一种抑制剂。它属于苯并三唑类、苯甲酰胺类和二氯苯类化合物。它在功能上与2,4-二氯苯甲酸和苯并三唑相关。
ITSA-1是一种小分子化学探针，对微管蛋白乙酰化和表观遗传调控具有特异性活性[1, 2] - 其核心机制包括抑制微管蛋白去乙酰化（选择性针对HDAC6）和调节炎症细胞因子基因的表观遗传修饰，从而调节细胞周期进程和骨稳态[1, 2] - 可作为解析组蛋白乙酰化和微管蛋白乙酰化不同生物学功能的重要工具（通过抑制TSA诱导的微管蛋白乙酰化而不影响组蛋白乙酰化）[1] - 通过平衡炎症信号和调节CBS缺陷小鼠的成骨细胞/破骨细胞活性，显示出治疗骨代谢紊乱（例如骨质疏松症）的潜在价值[2] |
| 分子式 |
C13H7N3OCL2
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|---|---|
| 分子量 |
292.12018
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| 精确质量 |
290.997
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| CAS号 |
200626-61-5
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| PubChem CID |
771910
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.51g/cm3
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| 沸点 |
483.4ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
246.2ºC
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| 蒸汽压 |
1.68E-09mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.706
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| LogP |
3.426
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| tPSA |
47.78
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
1
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| 重原子数目 |
19
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| 分子复杂度/Complexity |
355
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
UVNLAUGZMOPBPR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C13H7Cl2N3O/c14-8-5-6-9(10(15)7-8)13(19)18-12-4-2-1-3-11(12)16-17-18/h1-7H
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| 化学名 |
(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-yl)(2,4-dichlorophenyl)methanone
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| 别名 |
ITSA-1; ITSA 1; ITSA1.
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ≥ 32 mg/mL (~109.54 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 2.5 mg/mL (8.56 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (8.56 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4233 mL | 17.1163 mL | 34.2325 mL | |
| 5 mM | 0.6847 mL | 3.4233 mL | 6.8465 mL | |
| 10 mM | 0.3423 mL | 1.7116 mL | 3.4233 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
KPZ560
HDAC1-IN-3
HDAC6-IN-21
HDAC6-IN-8
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
