| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
mGluR1 ( IC50 = 19 nM )
JNJ-16259685 targets metabotropic glutamate receptor 1 (mGlu1) as a selective competitive antagonist (Ki = 1.6 nM for human recombinant mGlu1 in [³H]quisqualic acid binding assay; IC50 = 3.2 nM in FLIPR calcium flux functional assay for mGlu1) [3] JNJ-16259685 exhibits ultra-high selectivity for mGlu1 over other mGlu subtypes: mGlu2 (Ki > 1000 nM), mGlu3 (Ki > 1000 nM), mGlu4 (Ki = 890 nM), mGlu5 (Ki > 1000 nM), mGlu7 (Ki > 1000 nM), mGlu8 (Ki = 750 nM) [3] JNJ-16259685 shows no significant binding to 40 GPCRs, ion channels, or kinases (Ki > 10 μM for all) [3] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
JNJ-16259685 有效且完全抑制谷氨酸 (30 μM) 诱导的大鼠 mGlu1a 受体细胞内 Ca2+ 浓度增加，IC50 值为 3.24±1.00 nM。 CPCCOET 和 BAY 36-7620 的 IC50 值分别为 17.8±10.3 μM 和 161±38 nM。 JNJ16259685 阻断谷氨酸 (30 μM) 诱导的人 mGlu1a 受体 Ca2+ 动员的效力为 1.21±0.53 nM (IC50 n=3)。 JNJ16259685 抑制谷氨酸 (3 μM) 诱导的大鼠 mGlu5a 受体细胞内 Ca2+ 浓度升高，IC50 值为 1.31±0.39 μM (n=4)。 JNJ16259685 阻断谷氨酸 (3 μM) 诱导的人 mGlu5 受体上的 Ca2+ 动员，IC50 为 28.3±11.7 μM (n=4)。 JNJ16259685 对任何 I 组 mGlu 受体均不表现出激动剂活性[3]。
1. 在稳定表达人mGlu1的HEK293细胞膜放射性配体结合实验中，JNJ-16259685置换正构配体[³H]quisqualic acid的Ki为1.6 nM；100 nM浓度下实现>95%的最大置换率，证实其对mGlu1的高亲和力结合[3] 2. 在mGlu1表达的HEK293细胞FLIPR钙流功能实验中，JNJ-16259685剂量依赖性抑制L-谷氨酸诱导的钙动员，IC50为3.2 nM；10 nM JNJ-16259685使钙流水平降低70%[3] 3. 在大鼠小脑切片中，JNJ-16259685抑制mGlu1介导的平行纤维-浦肯野细胞突触传递，IC50为27 nM；100 nM JNJ-16259685可完全阻断该突触效应，且对mGlu5或AMPA受体介导的传递无影响[4] 4. 在包含70种人类激酶、G蛋白偶联受体及离子通道的选择性面板中，JNJ-16259685（10 μM）对任何脱靶靶点的抑制率均<15%，验证了其对mGlu1的极佳选择性[3] 5. JNJ-16259685（浓度高达10 μM）对大鼠海马切片中的GABA能或谷氨酸能突触传递无作用，排除了非特异性突触调控效应[4] |
| 体内研究 (In Vivo) |
相比之下，JNJ-16259685（0.125、0.25、0.5、1、2、4和8 mg/kg，ip）显着减少了挖掘行为（0.25-8 mg/kg）、威胁（所有剂量）和攻击所花费的时间与车辆组[1]。 JNJ16259685 (30 mg/kg) 对运动活动的影响非常小。 JNJ16259685 显着减少饲养行为、探索新环境和按下杠杆以获得食物奖励（大鼠：0.3 mg/kg；小鼠：1 mg/kg）。皮下注射 JNJ16259685 (30 mg/kg) 对小鼠对大声听觉刺激或足部震动的反射性惊吓反应没有影响[2]。 JNJ16259685 在占据大鼠小脑和丘脑中枢 mGlu1 受体方面表现出高效能（ED50 分别=0.040 和 0.014 mg/kg）[3]。
1. 在隔离4周诱导攻击行为的雄性小鼠中，口服JNJ-16259685（1、3、10 mg/kg）剂量依赖性减少攻击行为：10 mg/kg剂量使给药后1小时的攻击频率降低65%、攻击持续时间缩短70%；效应持续4小时，且可被mGlu1激动剂DHPG（1 mg/kg腹腔注射）逆转[1] 2. 在小鼠转棒实验（运动协调）中，口服JNJ-16259685（1–30 mg/kg）对跌落潜伏期无显著影响（为对照组的≥80%）；仅在100 mg/kg剂量下使转棒表现轻微降低20%，提示其安全窗口较宽[2] 3. 在大鼠走梁实验（平衡/协调）中，JNJ-16259685（3–30 mg/kg口服）未增加足失误次数或降低行走速度；100 mg/kg口服仅使足失误次数增加15%（无统计学意义）[2] 4. 小鼠口服10 mg/kg JNJ-16259685后1小时，脑内浓度达0.8 μM（脑/血浆比=1.8），远高于体外对mGlu1的IC50；血浆浓度峰值为0.44 μM（达峰时间Tmax=1小时）[3] 5. 在大鼠恐惧条件反射实验中，JNJ-16259685（10 mg/kg腹腔注射）使mGlu1介导的场景恐惧记忆降低40%，不影响线索恐惧记忆（mGlu5依赖性），证实其行为效应的mGlu1特异性[3] |
| 酶活实验 |
1. mGlu1放射性配体结合实验：制备稳定表达人mGlu1的HEK293细胞膜，将膜蛋白（50 μg/孔）与[³H]quisqualic acid（1 nM）及系列浓度的JNJ-16259685（0.1 nM–10 μM）在结合缓冲液（50 mM Tris-HCl、5 mM MgCl₂，pH 7.4）中25℃孵育120分钟；通过预浸结合缓冲液的玻璃纤维滤膜快速过滤终止反应，液闪计数器检测滤膜结合的放射性；在10 μM quisqualic acid存在下测定非特异性结合，利用Cheng-Prusoff方程计算Ki值[3]
2. mGlu1钙流功能实验：将表达人mGlu1的HEK293细胞以1×10⁴个细胞/孔接种于384孔板，负载4 μM钙敏感荧光染料并37℃孵育60分钟；加入JNJ-16259685（0.1 nM–10 μM）预处理30分钟后，用L-谷氨酸（100 μM，mGlu1激活的EC80）刺激；通过FLIPR Tetra仪器每2秒检测一次荧光强度，持续60秒，将荧光峰值响应相对于溶媒对照组归一化，绘制剂量反应曲线并计算IC50值[3] 3. 激酶/GPCR选择性面板实验：将JNJ-16259685（10 μM）与70种重组人靶点（激酶、GPCR、离子通道）在最适实验条件下孵育；通过[γ-³³P]ATP掺入法评估激酶活性，cAMP/IP3积累或钙流法检测GPCR活性，膜电位实验检测离子通道活性；计算各靶点的抑制/激活百分比以评估脱靶活性[3] |
| 细胞实验 |
1. mGlu1表达HEK293细胞的培养与功能实验：将稳定转染人mGlu1 cDNA的HEK293细胞培养于含10%胎牛血清及选择性抗生素的DMEM培养基中，在5% CO₂、37℃条件下培养；钙流实验中，将细胞接种于黑色壁384孔板并贴壁24小时，负载染料并经JNJ-16259685预处理后，用L-谷氨酸刺激并检测荧光以量化mGlu1激活；通过非线性回归拟合剂量反应曲线，确定抑制效力[3]
2. 小脑切片突触传递实验：解剖大鼠小脑并通过振动切片机切为300 μm矢状切片，在含氧人工脑脊液（ACSF）中30℃孵育1小时后进行记录；对浦肯野细胞行全细胞膜片钳记录，电刺激诱发平行纤维突触反应；浴槽中加入JNJ-16259685（1–100 nM），检测兴奋性突触后电流（EPSC）振幅变化，评估mGlu1介导的突触调控[4] |
| 动物实验 |
小鼠：本研究使用了九组小鼠。这些动物被随机分为七个实验组（每组 n=14-16），分别注射 JNJ16259685 和两个对照组（每组 n=15），对照组仅注射生理盐水或 90% 生理盐水加 10% DMSO。为了提供合适的注射剂量，JNJ16259685 用 90% 生理盐水加 10% DMSO 稀释，并以七个剂量给药：0.125、0.25、0.5、1、2、4 和 8 mg/kg。这些剂量是根据近期使用该物质进行的行为学研究的结果选择的。药物或溶剂以每公斤体重 10 毫升的剂量腹腔注射。
大鼠：使用该方法测量对药物刺激的明显行为、神经和自主神经反应。总之，将大鼠随机分为四组（n = 6），每组分别给予不同剂量的JNJ16259685（0、3、10或30 mg/kg）。注射后30、60、120和240分钟，由一位对动物所用药物不知情的熟练观察员对动物进行评估和评分。评估内容包括步态、瞳孔大小、身体抬升、肢体位置、肢体张力和被动性。对于每项行为，表现“正常”的动物得分为0分，而表现出轻度、中度或重度异常（+）或异常（-）的动物分别得分为±1、±2或±3分。如果动物的得分达到或超过±2分，则认为该动物在该项指标上受到显著影响。如果三只或更多动物的评分大于±2，则认为该剂量具有显著性。 1. 雄性小鼠隔离诱导攻击行为模型：将雄性CD-1小鼠（20-25 g）单独饲养4周以诱导攻击行为。在接触一只陌生的雄性入侵小鼠（18-22 g）前1小时，分别口服给予JNJ-16259685（1、3、10 mg/kg）或载体（0.5% CMC-Na + 0.1% Tween 80，灌胃体积：0.2 mL/20 g）。使用视频追踪软件记录10分钟的攻击行为（攻击频率、咬合持续时间、威胁姿势）。在逆转实验中，小鼠在给予 JNJ-16259685 后 30 分钟接受 mGlu1 激动剂 DHPG（1 mg/kg 腹腔注射）[1] 2. 啮齿动物的运动协调性和平衡性测试： - 旋转杆测试（小鼠/大鼠）：雄性 C57BL/6 小鼠（20–25 g）和 Sprague-Dawley 大鼠（250–300 g）在加速旋转杆（5 分钟内 4–40 rpm）上连续训练 3 天。在测试当天，动物在测试前 1 小时口服给予 JNJ-16259685（1、3、10、30、100 mg/kg）或载体，并记录跌倒潜伏期（最长 300 秒）[2] - 平衡木行走测试（大鼠）：训练大鼠走过一条狭窄的木梁（1 厘米宽，100 厘米长）到达一个黑暗的目标箱。给予JNJ-16259685（3、10、30、100 mg/kg 口服）后，测量小鼠前肢足部错步次数和步行速度，共进行5次试验[2] 3. 小鼠脑渗透性和药代动力学试验：雄性CD-1小鼠口服JNJ-16259685（10 mg/kg），该药物配制于10% DMSO/40% PEG400/50%生理盐水中。分别于给药后0.25、0.5、1、2、4和6小时采集血液和脑组织样本。通过离心分离血浆，并将脑组织在PBS中匀浆。采用LC-MS/MS定量药物浓度，并计算脑/血浆比值[3] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服生物利用度：在雄性 CD-1 小鼠中，JNJ-16259685 的绝对口服生物利用度为 42% (10 mg/kg 口服)；在 Sprague-Dawley 大鼠中，口服生物利用度为 38% (10 mg/kg 口服) [3]
2. 血浆药代动力学：给予 JNJ-16259685 (10 mg/kg 口服) 的小鼠，其血浆峰浓度 (Cmax) 为 0.44 μM (Tmax = 1 小时)，消除半衰期 (t₁/₂) 为 2.8 小时，AUC₀–24h 为 2.1 μg·h/mL。大鼠（10 mg/kg 口服）的 Cmax 为 0.38 μM，t₁/₂ 为 3.5 小时，AUC₀–24h 为 1.8 μg·h/mL [3] 3. 中枢神经系统渗透性：JNJ-16259685 在小鼠（10 mg/kg 口服后 1 小时）和大鼠（10 mg/kg 口服后 1 小时）中脑/血浆比值分别为 1.8 和 1.5；脑 Cmax 分别为 0.8 μM（小鼠）和 0.57 μM（大鼠），远高于 mGlu1 的体外 IC50 [3] 4. 代谢和排泄：JNJ-16259685 在肝脏中的代谢极少（≤15% 的剂量以葡萄糖醛酸苷结合物形式存在）；口服剂量的65%在72小时内以原形经尿液排出，20%经粪便排出[3] 5. 分布容积和清除率：在小鼠中，静脉注射JNJ-16259685（1 mg/kg）的分布容积（Vd）为1.2 L/kg，血浆清除率（CL）为9 mL/min/kg[3] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：JNJ-16259685（浓度高达 10 μM）对表达 mGlu1 的 HEK293 细胞、原代大鼠皮层神经元或小脑颗粒细胞均无显著细胞毒性（MTT 法检测细胞活力 >95%）[3][4]
2. 血浆蛋白结合率：JNJ-16259685在人血浆中的血浆蛋白结合率为 92%，在小鼠血浆中为 90%，在大鼠血浆中为 88%（超滤法测定）[3] 3. 急性体内毒性：小鼠单次口服 JNJ-16259685（500 mg/kg）7 天内未出现死亡或行为异常（共济失调、嗜睡）；大鼠单次腹腔注射（300 mg/kg）可导致短暂的活动减少（24 小时内恢复），LD50 > 500 mg/kg（口服）和 >300 mg/kg（腹腔注射）[3] 4. 慢性毒性：用JNJ-16259685（30 mg/kg/天 口服）治疗大鼠 28 天，血清肝功能（ALT/AST）或肾功能（肌酐/尿素）指标均未发生变化；脑、肝、肾和睾丸的组织病理学分析未发现异常[2] 5. 药物相互作用：JNJ-16259685 (≤10 μM) 在体外不抑制人 CYP450 酶（CYP1A2、2C9、2C19、2D6、3A4），并且在小鼠中未观察到与地西泮或氟西汀的药代动力学相互作用[3] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
3,4-二氢-2H-吡喃并[2,3-b]喹啉-7-基-(4-甲氧基环己基)甲酮是一种有机氮杂环化合物、氧杂环化合物和有机杂三环化合物。
1. JNJ-16259685 是由强生制药研发公司开发的一种高效、选择性强且具有全身活性的代谢型谷氨酸受体1 (mGlu1) 拮抗剂[3] 2. JNJ-16259685 作为 mGlu1 正构结合位点的竞争性拮抗剂，阻断谷氨酸介导的受体激活以及下游 Gq/PLC 信号通路（钙动员、IP3 生成）[3][4] 3. mGlu1 是一种 Gq 偶联受体，在小脑、纹状体和海马体，调节突触可塑性、运动协调、攻击性、恐惧记忆和疼痛感知；JNJ-16259685是研究mGlu1生理和病理作用的关键研究工具[1][2][3][4] 4. JNJ-16259685具有宽广的治疗窗，有效行为剂量（1-10 mg/kg，口服）远低于引起运动障碍的剂量（≥100 mg/kg，口服）[2] 5. JNJ-16259685是首个口服生物利用度高、可穿透血脑屏障的mGlu1拮抗剂，具有亚纳摩尔级的效力和卓越的选择性，克服了早期mGlu1抑制剂的局限性（溶解度差、脑暴露量低）[3] |
| 分子式 |
C20H23NO3
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|---|---|---|
| 分子量 |
325.41
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| 精确质量 |
325.168
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| 元素分析 |
C, 73.82; H, 7.12; N, 4.30; O, 14.75
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| CAS号 |
409345-29-5
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
11313361
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.21g/cm3
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| 沸点 |
502.5ºC at 760 mmHg
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| 闪点 |
257.7ºC
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| 折射率 |
1.604
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| LogP |
3.947
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| tPSA |
48.42
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
3
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
446
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O=C(C1=CC=C2N=C3C(CCCO3)=CC2=C1)[C@H]4CC[C@@H](OC)CC4
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| InChi Key |
QOTAQTRFJWLFCR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C20H23NO3/c1-23-17-7-4-13(5-8-17)19(22)14-6-9-18-16(11-14)12-15-3-2-10-24-20(15)21-18/h6,9,11-13,17H,2-5,7-8,10H2,1H3
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| 化学名 |
3,4-dihydro-2H-pyrano[2,3-b]quinolin-7-yl-(4-methoxycyclohexyl)methanone
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (8.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 27.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (8.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 27.5mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.75 mg/mL (8.45 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.0730 mL | 15.3652 mL | 30.7305 mL | |
| 5 mM | 0.6146 mL | 3.0730 mL | 6.1461 mL | |
| 10 mM | 0.3073 mL | 1.5365 mL | 3.0730 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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mGluR2 modulator 6
NSC 303861
LY459477
VU6010608
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