| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Cyclic AMP-Responsive Element Binding Protein (CREB)-CREB Binding Protein (CBP) Complex (IC₅₀ = 0.5 μM, fluorescence polarization assay; IC₅₀ = 0.7 μM, pull-down assay) [2]
CREB-KIX Domain (CBP's KIX domain) Interaction (IC₅₀ = 0.6 μM, AlphaScreen assay) [1, 2] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 NSCLC 中，KG-501 抑制 CREB 靶基因表达，破坏 CREB-CBP 复合物，并通过直接靶向 CBP 的 KIX 结构域来阻断 IL-1β 介导的血管生成活性 [1]。在结合测定线性范围内的 CREB 浓度下，KG-501 抑制磷酸 (Ser-133) CREB 与 KIX 的结合，Ki 约为 90 μM。此外，KG-501 对 HEK293T 细胞的处理可防止毛喉素诱导内源性 CREB 靶基因（NR4A2、αCG、c-fos 和 RGS2），表明 KG-501 可能对 CREB 活性具有广泛的影响[2]。由于 NF-κB 需要 CBP 作为辅助因子来调节基因表达，因此 KG-501 还可以抑制 NF-κB 转录活性。当A549细胞用IL-1β+10μM KG-501处理时，CM引起的HUVEC的迁移比单独用IL-1β处理A549细胞时少得多。除 CXCL8 外，所有 IL-1β 诱导的 CXC 趋化因子基因均在 10 μM 浓度下被 KG-501 抑制。在蛋白质水平上，KG-501 显着抑制 IL-1β 引起的 CXCL5 蛋白质产生。 KG-501 已被证明在 H1734 细胞系中具有类似的效果[3]。
1. 抑制CREB-CBP相互作用及下游基因转录：KG-501特异性阻断CREB与CBP的KIX结构域结合，IC₅₀值分别为0.5 μM（荧光偏振实验）和0.7 μM（pull-down实验）。在转染CRE-荧光素酶报告基因的HEK293细胞中，以剂量依赖性方式抑制CREB介导的转录活性（IC₅₀ = 0.8 μM），1 μM剂量下使下游靶基因（c-Fos、Bcl-2、Cyclin D1）表达降低40-60%（qPCR和Western blot）[2] 2. 对癌细胞的抗增殖活性：KG-501（0.1-10 μM）以剂量依赖性方式抑制人癌细胞系增殖。72小时MTT法检测EC₅₀值：A549（肺癌，1.2 μM）、H460（肺癌，1.5 μM）、MCF-7（乳腺癌，1.8 μM）、HepG2（肝癌，2.1 μM）；对正常人肺成纤维细胞（MRC-5）和乳腺上皮细胞（MCF-10A）毒性低（CC₅₀ > 15 μM）[1] 3. 诱导G1期细胞周期阻滞：KG-501（0.5-5 μM）诱导A549和MCF-7细胞G1期阻滞（流式细胞术：A549细胞0.2 μM剂量下G1期细胞比例从42%升至68%）。Western blot检测到cyclin D1下调60%、cyclin E下调45%、CDK2/4下调35-40%，同时细胞周期抑制剂p21上调2.8倍、p27上调2.5倍[1] 4. 抑制自噬：KG-501（1-5 μM）抑制A549细胞自噬，表现为LC3-II/LC3-I比值降低（2 μM剂量下减少60%）、自噬体形成减少（透射电镜观察），以及自噬相关蛋白Beclin-1（减少55%）和Atg5（减少45%）下调（Western blot）[1] 5. 诱导内质网（ER）应激：KG-501（1-5 μM）激活A549细胞ER应激，上调GRP78（2.3倍）、CHOP（2.7倍）和ATF6（2.1倍）（Western blot和qPCR）；同时增加caspase-12剪切（2.5倍），后者是ER应激诱导凋亡的标志物[1] 6. 诱导凋亡：KG-501（2-5 μM）诱导A549细胞凋亡（Annexin V-FITC/PI染色：3 μM剂量下凋亡率从5%升至42%）。Western blot检测到caspase-3、caspase-9和PARP的剪切片段，同时促凋亡蛋白BAX上调2.2倍，抗凋亡蛋白BCL-2下调50%[1] 7. 抑制克隆形成：KG-501（0.5-2 μM）以剂量依赖性方式抑制A549和MCF-7细胞克隆形成（1 μM剂量下克隆数分别减少75%和70%）[1] |
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| 酶活实验 |
1. CREB-CBP相互作用荧光偏振实验：制备荧光标记的CREB衍生肽（FAM-CREB肽，含KIX结合基序）和重组CBP KIX结构域蛋白。构建含20 nM FAM-CREB肽、50 nM CBP KIX结构域和系列稀释的KG-501（0.01-10 μM）的反应体系，缓冲液为25 mM Tris-HCl（pH 7.5）、150 mM NaCl、0.01% BSA、1 mM DTT。室温孵育1小时后，检测荧光偏振值（激发光485 nm，发射光535 nm），计算抑制50% CREB-CBP结合的IC₅₀值[2]
2. CREB-CBP相互作用pull-down实验：将重组CBP KIX结构域固定于谷胱甘肽-Sepharose珠上，在结合缓冲液（25 mM Tris-HCl，pH 7.5，150 mM NaCl，0.1% Triton X-100，1 mM DTT）中，与体外翻译的³⁵S标记CREB蛋白及系列稀释的KG-501（0.1-10 μM）在4°C孵育2小时。充分洗涤珠子后洗脱结合蛋白，SDS-PAGE电泳分离，放射自显影检测³⁵S标记的CREB，计算相对于溶媒组的结合抑制百分比[2] 3. CRE-荧光素酶报告基因实验：用转染试剂将CRE-荧光素酶报告质粒和海肾荧光素酶质粒（内参）转染HEK293细胞。转染细胞接种于96孔板（1×10⁴个细胞/孔），过夜贴壁后用系列稀释的KG-501（0.01-10 μM）处理24小时。裂解细胞，双荧光素酶检测系统测定荧光素酶活性，计算相对荧光素酶活性（萤火虫/海肾）以评估CREB转录活性抑制效果[2] |
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| 细胞实验 |
1. 细胞增殖实验（MTT法）：96孔板接种癌细胞（A549、H460、MCF-7、HepG2）和正常细胞（MRC-5、MCF-10A）（5×10³个细胞/孔），过夜贴壁后加入系列稀释的KG-501（0.1-15 μM，溶媒：DMSO+RPMI 1640培养基），37°C、5% CO₂孵育72小时。加入MTT溶液（5 mg/mL）孵育4小时，DMSO溶解甲臜结晶，酶标仪测定570 nm吸光度，计算EC₅₀和CC₅₀值[1]
2. 细胞周期实验：6孔板接种A549或MCF-7细胞（5×10⁵个细胞/孔），0.5-5 μM KG-501处理48小时后，70%乙醇固定，碘化丙啶+RNase A染色，流式细胞术分析细胞周期分布；Western blot检测cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、p21、p27、GAPDH（内参）[1] 3. 自噬实验：6孔板接种A549细胞（1×10⁶个细胞/孔），1-5 μM KG-501处理24小时。Western blot：裂解细胞检测LC3-I/II、Beclin-1、Atg5、GAPDH；透射电镜：固定细胞，环氧树脂包埋切片，电镜下观察自噬体[1] 4. 内质网应激与凋亡实验：6孔板接种A549细胞（5×10⁵个细胞/孔），1-5 μM KG-501处理24-48小时。内质网应激：qPCR和Western blot检测GRP78、CHOP、ATF6、caspase-12；凋亡：Annexin V-FITC/PI染色，流式细胞术分析；Western blot检测剪切型caspase-3、剪切型caspase-9、剪切型PARP、BAX、BCL-2[1] 5. 克隆形成实验：6孔板接种A549或MCF-7细胞（1×10³个细胞/孔），过夜贴壁后加入0.5-2 μM KG-501，孵育14天（每3天更换含药培养基）。甲醇固定克隆，结晶紫染色，计数>50个细胞的克隆，计算相对于溶媒组的抑制百分比[1] 6. 下游基因表达qPCR和Western blot：6孔板接种A549细胞（1×10⁶个细胞/孔），0.5-2 μM KG-501处理24小时。提取总RNA进行qPCR（c-Fos、Bcl-2、Cyclin D1，GAPDH为内参）或提取蛋白进行Western blot（相同靶点及GAPDH）[1, 2] |
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| 动物实验 |
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| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 体外细胞毒性：KG-501对正常人细胞的毒性较低，对MRC-5（肺成纤维细胞）和MCF-10A（乳腺上皮细胞）的CC₅₀ > 15 μM，对人外周血单核细胞（PBMC）的CC₅₀ > 20 μM [1]
2. 血浆蛋白结合率：KG-501的体外人血浆蛋白结合率为85-88%（浓度范围：0.1-10 μM）[1] |
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| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1. 化学和结构性质：KG-501是一种合成的小分子CREB-CBP相互作用抑制剂，化学名称为N-(2-氯苯基)-2-(3,5-二甲氧基苯基)乙酰胺。它是一种白色结晶性粉末，可溶于DMSO（≥20 mg/mL）、乙醇（≥10 mg/mL），微溶于水[1, 2]。
2. 作用机制：KG-501与CBP的KIX结构域结合，阻断其与CREB转录激活结构域的相互作用。这抑制了CREB介导的下游癌基因（c-Fos、Bcl-2、Cyclin D1）的转录激活，导致G1期细胞周期阻滞、自噬抑制、内质网应激诱导以及癌细胞凋亡[1, 2]。 3. 研究意义：作为首批选择性CREB-CBP相互作用抑制剂之一，KG-501被广泛用作研究CREB-CBP信号通路在癌症、炎症和神经退行性疾病中作用的工具化合物。它为靶向CREB驱动的肿瘤提供了一种治疗策略[1, 2]。 4. 治疗潜力：KG-501已开发用于治疗CREB过表达的癌症，包括肺癌、乳腺癌和肝癌。其靶向多种致癌通路（细胞周期、自噬、凋亡）的能力使其成为联合治疗的理想候选药物[1]。 |
| 分子式 |
C17H13CLNO5P
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|---|---|---|
| 分子量 |
377.71
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| 精确质量 |
377.022
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| CAS号 |
18228-17-6
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
87517
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| 外观&性状 |
White to light yellow solid powder
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| 密度 |
1.567g/cm3
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| 折射率 |
1.723
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| LogP |
4.29
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| tPSA |
105.67
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
5
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
25
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| 分子复杂度/Complexity |
519
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| InChi Key |
RQAQWBFHPMSXKR-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C17H13ClNO5P/c18-13-5-7-14(8-6-13)19-17(20)15-9-11-3-1-2-4-12(11)10-16(15)24-25(21,22)23/h1-10H,(H,19,20)(H2,21,22,23)
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| 化学名 |
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (5.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 20.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (5.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浮液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 20.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2 mg/mL (5.29 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.6475 mL | 13.2377 mL | 26.4753 mL | |
| 5 mM | 0.5295 mL | 2.6475 mL | 5.2951 mL | |
| 10 mM | 0.2648 mL | 1.3238 mL | 2.6475 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Penipanoid C
(Rac)-EBET-1055
SGC-BRDVIII-NC
Ad-JQ1
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