KU-60019

ATM ( IC50 = 6.3 nM ); DNA-PKcs ( IC50 = 1.7 μM )

体外活性：与 KU-55933 相比，KU-60019 是一种改进的水溶性更好的 ATM 激酶抑制剂，同时表现出相似的靶点选择性。 KU-60019 对 DNA-PKcs 和 ATR 以及 229 种其他蛋白激酶（如 PI3K、mTOR 和 mTOR/FKBP12）几乎没有活性，IC50 值分别为 1.7 μM 和 >10 μM。在人胶质瘤 U87 和 U1242 细胞中，KU-60019 在阻断辐射诱导的关键 ATM 蛋白靶标（如 p53、γ-H2AX 和 CHK2）磷酸化方面的效力比 KU-55933 高 3 至 10 倍，浓度为 1 μM KU-60019 显着诱导 p53 (S15) 磷酸化降低 >70%，达到该程度需要约 10 μM 的 KU-55933 才能实现。 KU-60019 在 1 μM 和 10 μM 时有效地使人胶质瘤细胞放射增敏，剂量增强比分别为 1.7 和 4.4，并且还使正常成纤维细胞放射增敏，但不使 AT 成纤维细胞放射增敏。 KU-60019 治疗 (3 μM) 可分别阻断基础和胰岛素诱导的 AKT S473 磷酸化 70% 和约 50%，并将辐射诱导的 AKT 磷酸化完全降低至对照水平以下。 KU-60019 对 AKT S473 磷酸化的影响可以在神经胶质瘤细胞系和正常成纤维细胞中观察到，但在 AT (h-TERT) 细胞中观察不到，并且可以被磷酸酶抑制剂冈田酸显着阻断，这表明 ATM 激酶在通过未知磷酸酶调节 AKT 磷酸化。与抑制促存活 AKT 信号传导相一致，3 μM 的 KU-60019 显着抑制人胶质瘤 U87 细胞的迁移和侵袭，分别 >70% 和 ~60%，以及 U1242 细胞分别 >50% 和 ~60% 。激酶测定：KU-55933 的体外 IC50 为 13 nM，Ki 为 2.2 nM，并且使用一组 60 种蛋白激酶对 ATM 激酶具有高度特异性。 KU-60019 是一种改进的 ATM 激酶抑制剂，IC50 为 6.3 nM，大约是 KU-55933 的一半。 DNA-PKcs 和 ATR 的 IC50 值分别为 1.7 和 >10 μM，几乎比 ATM 高 270 倍和 1600 倍。 KU-60019 在阻断辐射诱导的人胶质瘤细胞中关键 ATM 靶点磷酸化方面的效果比 KU-55933 有效 10 倍。在人 U87 神经胶质瘤细胞中，KU-55933 在 10 μM 浓度下完全抑制 p53 (S15) 的磷酸化，但在 3 μM 浓度下则不然，而在 10 μM 浓度下照射后 1 小时，γ-H2AX 水平仅部分降低。相比之下，3 μM KU-60019 完全抑制 p53 磷酸化，1 μM 则部分抑制。细胞测定：将细胞（U87 和 U1242）暴露于 KU-60019 1、3 和 5 天。细胞生长由 AlamarBlue 测定。将 AlamarBlue 添加到培养基中至推荐的最终浓度。将板在 37°C 下孵育 1 小时，在 Fluoro-Count 读板器上测定荧光（激发波长 530 nm，发射波长 590 nm），并将值作为细胞生长的测量值。通过台盼蓝/荧光激活细胞分选（FACS）测定法测定细胞存活率。

KU-55933 抑制 ATM 依赖性 STAT3 激活可通过上调表面 DR5 表达来增强 TRAIL 介导的细胞凋亡，而抑制 STAT3 和 NF-κB 似乎参与了 cFLIP 的下调，并伴随着 cFLIP 的额外增加。凋亡水平。 ATM 抑制剂 KU-55933 对 TRAIL 介导的细胞凋亡的影响比 JAK2 抑制剂 AG490 或 STAT3β 过表达更强。

KU-60019 暴露于细胞 1、3 和 5 天。 AlamarBlue 是细胞生长的衡量标准。培养基中添加 AlamarBlue，直至达到建议的最终浓度。 Fluoro-Count 读板器（激发波长 530 nm，发射波长 590 nm）用于测量 37 °C 孵育一小时后板上的荧光。获得的值代表细胞的生长。台盼蓝/荧光激活细胞分选 (FACS) 测定用于评估细胞存活率。

[1]. Improved ATM kinase inhibitor KU-60019 radiosensitizes glioma cells, compromises insulin, AKT and ERK prosurvival signaling, and inhibits migration and invasion. Mol Cancer Ther. 2009 Oct;8(10):2894-902.

[2]. Mechanistic Rationale to Target PTEN-Deficient Tumor Cells with Inhibitors of the DNA Damage Response Kinase ATM. Cancer Res. 2015 Jun 1;75(11):2159-65.

C30H33N3O5S

547.67

547.21

925701-49-1

Powder

C[C@@H]1CN(C[C@@H](O1)C)CC(=O)NC2=CC3=C(C=C2)SC4=C(C3)C=CC=C4C5=CC(=O)C=C(O5)N6CCOCC6

SCELLOWTHJGVIC-BGYRXZFFSA-N

InChI=1S/C30H33N3O5S/c1-19-16-32(17-20(2)37-19)18-28(35)31-23-6-7-27-22(13-23)12-21-4-3-5-25(30(21)39-27)26-14-24(34)15-29(38-26)33-8-10-36-11-9-33/h3-7,13-15,19-20H,8-12,16-18H2,1-2H3,(H,31,35)/t19-,20+

2-[(2S,6R)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]-N-[5-(6-morpholin-4-yl-4-oxopyran-2-yl)-9H-thioxanthen-2-yl]acetamide

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

5%DMSO+ 40%PEG300+5%Tween 80+50%ddH2O: 5.0mg/ml (9.13mM) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。