| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Human mitochondrial RNA polymerase (POLRMT) (IC50 = 0.12 μM in recombinant in vitro transcription assay) [1]
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| 体外研究 (In Vitro) |
在 A2780、A549 和 HeLa 细胞中，IMT1（0.00001-10 μM；0-168 小时）会剂量依赖性地降低细胞活力。与原代细胞相比，约三分之一的癌细胞系、89 种癌细胞系和原代细胞（人外周血单核细胞 (PBMC) 和 IMR90 肺成纤维细胞）的细胞活力显着下降[1]。 HeLa 细胞在暴露于 IMT1 (0.01-10 μM) 24-200 小时后，线粒体转录物水平呈剂量依赖性降低，并且 mtDNA 逐渐耗尽。呼吸链复合物 I、III 和 IV（NDUFB8、UQCRC2 和 COXI）亚基水平以剂量依赖性方式下降[1]。正如 IMT1 所揭示的，A2780 细胞的磷酸化 AMPK 水平和 AMP/ATP 比率均显着升高，以响应单磷酸和二磷酸核苷酸水平的相当大的时间依赖性增加[1]。在表达野生型 POLRMT 的 A2780 细胞中，IMT1 显着降低 mtDNA 基因表达；相反，表达突变 POLRMT（L796Q 或 L816Q）的细胞具有耐药性 [1]。氧化磷酸化 (OXPHOS) 机制的生物发生和 mtDNA 转录均依赖于 POLRMT [1]。
POLRMT酶抑制活性：LDC195943 (IMT1) 特异性抑制POLRMT介导的线粒体DNA转录，对核RNA聚合酶（Pol I、II、III）无抑制作用。基于荧光转录实验测定，其对POLRMT的IC50值为0.12 μM [1] - 癌细胞抗增殖活性：该化合物对多种线粒体依赖型癌细胞具有增殖抑制作用。结直肠癌细胞（HCT116）经72小时处理后，细胞活力抑制的IC50为2.3 μM；10 μM浓度下可抑制HCT116细胞克隆形成率75%，20 μM浓度下抑制率达90%（相较于溶剂对照组）[1] - 线粒体功能破坏：LDC195943 (IMT1)（1–5 μM）处理HCT116细胞后，线粒体膜电位（ΔΨm）降低40–60%，48小时内细胞ATP水平下降50–70%；Western blot检测显示线粒体编码蛋白（COX1、ND1）表达下调 [1] - 凋亡诱导作用：在HCT116和MCF-7（乳腺癌）细胞中，该化合物以浓度依赖方式诱导凋亡。5 μM浓度下，膜联蛋白V阳性凋亡细胞占比分别为65%（HCT116）和58%（MCF-7），同时伴随caspase-3和PARP的剪切激活（Western blot验证）[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
皮下异种移植瘤抑制：携带HCT116结直肠癌异种移植瘤（初始体积~100 mm³）的裸鼠经口服给药。50 mg/kg每日一次，连续28天处理后，肿瘤体积较溶剂对照组缩小60%；实验终点肿瘤重量为0.32 ± 0.08 g（治疗组）vs. 0.81 ± 0.12 g（对照组）[1]
- 转移抑制作用：在HCT116肺转移尾静脉注射模型中，口服50 mg/kg LDC195943 (IMT1) 每日一次，连续42天，肺转移结节数量减少50%（治疗组每肺12 ± 3个结节 vs. 对照组24 ± 4个）。组织病理学分析证实肺组织转移瘤负荷降低 [1] - 体内靶点结合验证：治疗组肿瘤组织中，Western blot检测显示COX1蛋白水平降低，qPCR检测显示线粒体DNA转录产物减少，证实体内POLRMT靶点被有效抑制 [1] |
| 酶活实验 |
荧光法POLRMT转录实验：重组人POLRMT与含线粒体轻链启动子的双链DNA模板、NTP混合物（含荧光标记UTP）及系列稀释的LDC195943 (IMT1)（0.01–10 μM）在反应缓冲液中孵育。37°C反应60分钟后加入终止缓冲液，通过酶标仪检测荧光强度（激发/发射波长=485/535 nm）量化合成RNA量，采用四参数logistic模型拟合剂量-反应曲线计算IC50值 [1]
- 核RNA聚合酶选择性实验：采用重组核RNA聚合酶（Pol I、II、III）及其对应DNA模板，在各自反应条件下进行平行实验。LDC195943 (IMT1) 浓度高达50 μM时，对Pol I、II、III活性无显著抑制（抑制率<10% vs. 对照组），证实靶点选择性 [1] |
| 细胞实验 |
细胞活力测定[1]
细胞类型： A2780、A549 和 HeLa 细胞 测试浓度： 0.00001-10 μM 孵育时间：0-168小时 实验结果：A2780、A549和HeLa细胞中的细胞活力出现剂量依赖性下降，但在人类中却没有PBMC 或合并的原代人肝细胞具有细胞毒性。 细胞活力（MTT）实验：癌细胞（HCT116、MCF-7、Panc-1）以5×10³个细胞/孔接种于96孔板，过夜孵育。加入系列稀释的LDC195943 (IMT1)（0.1–50 μM），培养72小时后加入MTT试剂，37°C孵育4小时。甲瓒结晶用DMSO溶解，570 nm处测定吸光度，以相对于溶剂对照组的吸光度百分比计算细胞活力，通过剂量-反应曲线推导IC50值 [1] - 克隆形成实验：HCT116细胞以1×10³个细胞/孔接种于6孔板，贴壁24小时后加入LDC195943 (IMT1)（1–20 μM），培养14天。克隆经甲醛固定、结晶紫染色后手动计数，克隆形成效率=（治疗组克隆数/对照组克隆数）× 100% [1] - 线粒体膜电位实验：HCT116细胞接种于24孔板，经LDC195943 (IMT1)（1–5 μM）处理24小时后，用线粒体膜电位敏感染料染色30分钟（37°C），PBS洗涤两次。酶标仪检测荧光强度（激发/发射波长=549/590 nm），以对照组百分比表示相对ΔΨm [1] - Western blot分析：细胞或肿瘤组织用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解，定量蛋白浓度后，等量蛋白经SDS-PAGE分离、转印至PVDF膜并封闭。膜与COX1、ND1、caspase-3、剪切型caspase-3、PARP、剪切型PARP及β-肌动蛋白（内参）一抗4°C孵育过夜，再与二抗孵育。增强化学发光系统显影条带，光密度分析量化相对蛋白水平 [1] - 线粒体转录本qPCR检测：提取细胞或肿瘤组织总RNA，逆转录合成cDNA。采用线粒体编码基因（COX1、ND1）和核编码内参基因（GAPDH）特异性引物进行qPCR，通过2⁻ΔΔCt法计算相对转录本水平 [1] - 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI染色）：HCT116或MCF-7细胞经LDC195943 (IMT1)（1–5 μM）处理48小时后，胰酶消化收集，冷PBS洗涤。细胞重悬于结合缓冲液，加入Annexin V-FITC和PI室温避光染色15分钟，流式细胞仪分析。细胞分为活细胞（Annexin V⁻/PI⁻）、早期凋亡细胞（Annexin V⁺/PI⁻）、晚期凋亡细胞（Annexin V⁺/PI⁺）和坏死细胞（Annexin V⁻/PI⁺）[1] |
| 动物实验 |
皮下异种移植模型：实验前，将6-8周龄的雌性裸鼠适应环境1周。将HCT116结直肠癌细胞（7×10⁶个细胞，溶于100 μL PBS）皮下注射到每只小鼠的右侧腹部。当肿瘤平均体积达到约100 mm³时，将小鼠随机分为两组（每组n=6）：载体对照组和LDC195943（IMT1）治疗组。LDC195943（IMT1）溶于0.5%甲基纤维素（w/v）水溶液中，以50 mg/kg的剂量每日一次灌胃给药，连续28天。每周两次使用游标卡尺测量肿瘤体积（体积 = 长 × 宽² / 2），并记录体重以监测毒性[1]
- 肺转移模型：将HCT116细胞（1×10⁶个细胞溶于100 μL PBS）经尾静脉注射到6-8周龄的雌性裸鼠体内。细胞注射三周后（以促进初始转移形成），将小鼠随机分为对照组和治疗组（每组n=6）。LDC195943（IMT1）以50 mg/kg的剂量每日一次口服给药，持续42天。治疗结束后，处死小鼠，取出肺组织，用福尔马林固定，并进行石蜡包埋。人工计数肺表面转移结节，并用苏木精-伊红 (H&E) 染色组织病理切片以确认转移病灶[1] - 药代动力学研究：雄性 C57BL/6 小鼠（每个时间点 n=3）单次口服 50 mg/kg 的 LDC195943 (IMT1)（溶于 0.5% 甲基纤维素溶液）。分别于给药后 0.25、0.5、1、2、4、8、12 和 24 小时经眼眶后静脉丛采集血样。离心分离血浆，并使用液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 定量药物浓度。采用非房室模型分析计算药代动力学参数（Cmax、Tmax、t1/2、AUC₀₋₂₄h、口服生物利用度）[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
口服生物利用度：在 C57BL/6 小鼠中，单次口服 50 mg/kg LDC195943 (IMT1) 的口服生物利用度为 35% [1]
- 血浆药代动力学：血浆峰浓度 (Cmax) 为 2.1 μM，在给药后 1 小时 (Tmax) 达到。消除半衰期 (t1/2) 为 3.2 小时，血浆浓度-时间曲线下面积 (AUC₀₋₂₄h) 为 8.6 μM·h [1] - 组织分布：口服 50 mg/kg 24 小时后，该化合物在肿瘤组织（HCT116 异种移植瘤）中蓄积，肿瘤与血浆浓度比为 2.8:1。在肝脏（血浆浓度的1.5倍）和肾脏（血浆浓度的1.2倍）中观察到中等分布，在脑中的浓度较低（血浆浓度的0.3倍）[1] - 代谢：体外肝微粒体试验表明，LDC195943 (IMT1) 的代谢程度极低，孵育2小时后，母体化合物的代谢率低于10%，表明其肝脏代谢率较低[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
急性毒性：在C57BL/6小鼠中，单次口服剂量高达200 mg/kg的LDC195943 (IMT1) 不会导致死亡或明显的临床毒性症状（例如嗜睡、食欲不振、腹泻）。半数致死量 (LD50) > 200 mg/kg [1]
- 慢性毒性（异种移植研究）：在裸鼠中，每日口服50 mg/kg，持续28-42天，不会导致明显的体重下降（治疗组体重变化：-2.1% vs. 对照组：+1.8%）。血液学分析显示白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白或血小板计数均无显著变化 [1] - 器官毒性：对治疗小鼠的主要器官（肝脏、肾脏、心脏、肺脏、脾脏）进行组织病理学检查，未发现异常病变或炎症。血清生化指标（丙氨酸氨基转移酶[ALT]、天冬氨酸氨基转移酶[AST]、肌酐、血尿素氮[BUN]）均在正常生理范围内，证实无肝毒性或肾毒性[1] - 血浆蛋白结合：体外血浆蛋白结合试验表明，LDC195943 (IMT1) 与人血浆蛋白的结合率为 72%，表明其具有中等程度的血浆蛋白结合能力[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
作用机制：LDC195943 (IMT1) 与 POLRMT 的活性位点结合（经 X 射线晶体学证实），阻断 POLRMT 与线粒体 DNA 模板之间的相互作用。该化合物抑制线粒体RNA的从头合成，导致线粒体编码的呼吸链蛋白表达降低、氧化磷酸化受损、ATP耗竭，最终导致线粒体代谢需求高的癌细胞凋亡[1]
- 靶点选择性：该化合物对POLRMT具有高度选择性，优于核RNA聚合酶（Pol I、II、III）和其他细胞激酶（已针对100多种激酶进行筛选），在浓度高达50 μM时未观察到明显的脱靶抑制[1] - 治疗潜力：LDC195943 (IMT1) 在临床前研究中显示出对多种依赖线粒体代谢的癌症类型的疗效，包括结直肠癌、乳腺癌（MCF-7）、胰腺癌（Panc-1）和非小细胞肺癌（A549）细胞。它对线粒体DNA拷贝数升高和氧化磷酸化活性高的癌细胞尤其有效[1] - 制剂特性：该化合物可溶于DMSO（≥10 mM），中等溶于水（0.5%甲基纤维素溶液中为0.5 mg/mL），适合临床前研究中的口服给药[1] |
| 分子式 |
C21H21NO4
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|---|---|
| 分子量 |
351.395745992661
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| 精确质量 |
351.147
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| CAS号 |
2304621-31-4
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| PubChem CID |
138490559
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.4
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| tPSA |
55.8
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| 氢键供体(HBD)数目 |
0
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| 氢键受体(HBA)数目 |
4
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| 可旋转键数目(RBC) |
4
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| 重原子数目 |
26
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| 分子复杂度/Complexity |
570
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| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
O(C1C=CC2=C(C=1)OC(C=C2C1C=CC=CC=1C)=O)C(C)C(N(C)C)=O
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| InChi Key |
DBIPGWVTQBAHGP-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C21H21NO4/c1-13-7-5-6-8-16(13)18-12-20(23)26-19-11-15(9-10-17(18)19)25-14(2)21(24)22(3)4/h5-12,14H,1-4H3
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| 化学名 |
Propanamide, N,N-dimethyl-2-[[4-(2-methylphenyl)-2-oxo-2H-1-benzopyran-7-yl]oxy]-
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| 别名 |
LDC 195943LDC-195943 LDC195943IMT1 IMT 1IMT-1
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~50 mg/mL (~142.29 mM)
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|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.11 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.8458 mL | 14.2288 mL | 28.4576 mL | |
| 5 mM | 0.5692 mL | 2.8458 mL | 5.6915 mL | |
| 10 mM | 0.2846 mL | 1.4229 mL | 2.8458 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
Sirtuin modulator 9
Tebufenpyrad-d3
D-Histidine hydrochloride hydrate
NRG1271
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