LY-341495

mGluR1a ( IC50 = 7.8 μM ); mGluR2 ( IC50 = 21 nM ); mGluR3 ( IC50 = 14 nM ); mGluR4 ( IC50 = 22 μM ); mGluR5a ( IC50 = 8.2 μM ); mGluR7 ( IC50 = 990 nM ); mGluR8 ( IC50 = 170 nM )
LY-341495 targets the group II metabotropic glutamate receptors, specifically mGlu2 and mGlu3. It acts as a potent and selective orthosteric antagonist with IC50 values of 21 nM for mGlu2, 14 nM for mGlu3, 170 nM for mGlu8, 990 nM for mGlu7, 7.8 μM for mGlu1a, 8.2 μM for mGlu5a, and 22 μM for mGlu4. By blocking mGluR2/3 signaling, the compound modulates glutamatergic neurotransmission.

LY341495 对 Akt 和 Wnt 通路蛋白的影响 [2]
使用 mGlu2/3 受体拮抗剂 LY341495 来研究阻断 mGlu2/3 对 Akt 和 Wnt 通路蛋白的影响。重复给予 3.0 mg/kg LY341495 可降低前额叶皮层 (PFC) 和纹状体 (STR) 中 Dvl-2、pGSK-3α/β 和 β-catenin 的蛋白水平，但对 Dvl-1、Dvl-3 和 GSK-3α/β 的蛋白水平无影响（图 3a 和 b）。此外，除了 Wnt 蛋白的变化外，在 PFC 和 STR 中还观察到 pAkt Ser473 的减少，但总 Akt 或 pAkt Thr308 的水平没有变化（图 3c 和 d）。重复给予较低剂量的LY341495（1.0 mg/kg）也未对前额叶皮层（PFC）或纹状体（STR）中检测的Akt或Wnt通路蛋白产生影响（数据未显示）。最后，我们评估了急性给予LY341495后Akt和Wnt通路蛋白的变化。在急性给予LY341495（3.0 mg/kg）后，PFC和STR中pGSK-3α/β（图4a和b）和pAkt Ser473（图4c和d）的水平降低。因此，急性给予LY341495可降低pAkt和pGSK-3的水平，但需要重复给药（3.0 mg/kg）才能降低β-catenin的水平。此外，与mGlu2/3激动剂LY379268相比，LY341495在急性及慢性给药后通常表现出相反的作用。体外实验表明，LY-341495对mGlu2（IC50 = 21 nM）和mGlu3（IC50 = 14 nM）具有强效拮抗活性，而对其他mGlu受体亚型的效力则显著降低。该化合物对II组mGlu受体的高效性和选择性使其成为研究mGluR2/3功能的宝贵工具。

LY341495（0.3、1 和 3 mg/kg，腹腔注射）表现出较低的状态洞察力[1]。LY341495（3.0 mg/kg）降低了前额叶皮层（PFC）和纹状体（STR）中 Dvl-2、pGSK-3α/β 和 β-catenin 的蛋白水平，但未激活 Dvl-1、Dvl-3 和 GSK-3α/β。与 mGlu2/3 受体激动剂 LY379268 相比，LY341495 在禁食和禁食后通常能产生恰到好处的效果[2]。LY341495（3 mg/kg，腹腔注射，2.5 小时）诱导的 c-Fos 表达在两种 KO 小鼠脑中均未发生改变。在mGluR3敲除小鼠中，LY341495在中央杏仁核、消退核（CeL）和终纹床核背侧核（BSTLD）的活性很低[3]。实验证据表明，代谢型谷氨酸受体2/3（mGlu2/3）拮抗剂会影响认知功能，但也有相互矛盾的研究结果报道。为了阐明mGlu2/3受体拮抗剂在认知功能某一方面的作用，本研究探讨了不同剂量的mGlu2/3受体拮抗剂LY341495对大鼠训练后识别记忆成分（存储和/或提取）的影响。此外，本研究还考察了LY341495拮抗识别记忆消退的效力。本研究采用新物体识别测试作为记忆测试。在所有测试的延迟条件下，给予最高剂量的LY341495（0.3、1和3 mg/kg）均会损害大鼠的识别记忆能力，而给予较低剂量（0.05和0.1 mg/kg）则不会损害识别记忆。此外，给予低剂量LY341495（0.05和0.1 mg/kg）还能逆转识别记忆的消退。本研究结果表明，mGlu2/3受体拮抗剂LY341495对大鼠的识别记忆的影响取决于化合物的剂量和延迟时间，既可以损害也可以增强识别记忆。因此，结合先前报道的研究结果，目前的数据表明该化合物对认知功能，特别是识别记忆，具有复杂的影响。[1]

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LY341495 是一种代谢型谷氨酸受体 (mGluR) 拮抗剂，对 mGluR2/3 具有选择性，但在浓度高 10-1000 倍时，对所有 mGluR 亚型均具有可测量的拮抗效力。在啮齿动物体内，它能增加运动活性和觉醒度，增强认知能力并调节情绪。它还能诱导广泛的神经元激活，表现为 c-Fos 表达的增加。为了进一步研究 LY341495 在体内可能作用的受体亚型，我们分析了其在 mGluR2 敲除 (KO) 和 mGluR3 敲除 (KO) 小鼠脑中的作用变化。在大多数脑区，LY341495（3 mg/kg，腹腔注射，2.5 小时）诱导的 c-Fos 表达在两种 KO 小鼠脑中均未发生改变。然而，在 mGluR3 敲除小鼠中，LY341495 在中央延伸杏仁核[杏仁核中央核外侧部 (CeL) 和终纹床核外侧背侧部 (BSTLD)] 几乎没有活性，提示 mGluR3 的急性阻断激活了野生型小鼠脑中的这些神经元。在丘脑腹外侧核 (VL) 中，LY341495 在 mGluR3 敲除小鼠中产生显著增强的反应，而在 mGluR2 敲除小鼠中则产生减弱的反应。我们还分析了小鼠在熟悉环境中的运动情况，发现无论基因型如何，LY341495（1-30 mg/kg，腹腔注射）均能剂量依赖性地增加小鼠的运动活性。在陌生环境中，两种基因敲除小鼠均表现出对LY341495的敏感性增强，运动习惯化程度降低。综上所述，我们的结果表明，LY341495的某些作用可能并非通过阻断mGluR2或mGluR3介导，而是可能涉及其他mGluR亚型。或者，mGluR2和mGluR3的功能可能存在冗余，导致无论LY341495在体内拮抗的是哪种受体亚型，其作用效果都相似。[3]

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在体内，LY-341495已被广泛用于临床前研究，以探索认知、焦虑、抑郁和神经退行性疾病的机制。通过阻断 mGluR2/3 信号传导，该化合物已被证明可以调节各种动物模型中的突触传递和行为反应，从而深入了解 II 组 mGlu 受体在神经和精神疾病中的作用。

本研究在非神经元细胞（RGT，大鼠谷氨酸转运体）中表达的人重组代谢型谷氨酸（mGlu）受体亚型上，考察了一种结构新颖的化合物LY341495的体外药理学特性。LY341495是1S,3R-1-氨基环戊烷-1,3-二羧酸（ACPD）诱导的福斯克林刺激的mGlu2和mGlu3受体cAMP生成抑制的纳摩尔级强效拮抗剂（IC50值分别为0.021和0.014 μM）。在表达I组mGlu受体的细胞中，LY341495是奎斯奎酸诱导的磷脂酰肌醇（PI）水解的微摩尔级强效拮抗剂，对mGlu1a和mGlu5a受体的IC50值分别为7.8和8.2 μM。在人类III型代谢型谷氨酸受体中，LY341495对L-2-氨基-4-膦酸丁酸（L-AP4）反应的抑制作用最强，其对mGlu8受体的IC50值为0.17 μM。LY341495对mGlu7受体的抑制作用较弱（IC50 = 0.99 μM），对mGlu4受体的抑制作用最弱（IC50 = 22 μM）。在大鼠脑膜上的结合研究也表明，LY341495对II型代谢型谷氨酸受体具有纳摩尔级的亲和力，且对离子型谷氨酸受体配体的结合没有明显的置换作用。因此，LY341495对代谢型谷氨酸受体亚型具有独特的选择性，其效力顺序为：mGlu3 ≥ mGlu2 > mGlu8 > mGlu7 >> mGlu1a = mGlu5a > mGlu4。尤其值得一提的是，LY341495 是迄今为止报道的对 mGlu2、3 和 8 受体最有效的拮抗剂。因此，它代表了一种用于阐明 mGlu 受体在实验系统中功能的新型药理学试剂 [5]。体外 mGlu 受体拮抗作用的受体结合试验包括将表达人重组 mGlu 受体的细胞膜与放射性标记的配体和不同浓度的 LY-341495 一起孵育。功能性试验测量该化合物阻断激动剂诱导的福斯克林刺激的 cAMP 积累抑制的能力，该抑制作用发生在表达 mGlu2 或 mGlu3 受体的细胞中。IC50 值由剂量反应曲线计算得出。

Western blotting [2]
蛋白质分离、定量和Western blotting实验按照之前对PFC和STR的描述进行（Alimohamad等，2005a）。使用灰阶校准扫描仪和Kodak分子成像软件从X光胶片上获得密度值。密度值已校正α-微管蛋白，并以对照组的百分比表示。使用Student's t检验分析数据的统计学意义。

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共免疫沉淀[2]
使用添加了蛋白酶和磷酸酶抑制剂的非变性裂解缓冲液，从未经药物处理的大鼠或用LY379268（3 mg/kg，腹腔注射）处理的大鼠的PFC中分离蛋白质（n = 6只大鼠/实验）。免疫沉淀 (IP) 使用 ExactCruz 系统进行，使用 500 μg 蛋白和 mGlu2/3 (4 μg/IP) 或 Dvl-2 (4 μg/IP) 抗体，具体方法如前所述 (Sutton 等，2007)。阴性对照使用同种非特异性 IgG 代替 IP 抗体。IP 样品进行蛋白质印迹分析，并用以下抗体进行检测：Dvl-2 (1:100)、Dvl-3 (Santa Cruz Biotechnology；1:100)、GSK-3 (1:300) 和 Akt (1:1250)。

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细胞实验使用表达人重组 mGlu2 或 mGlu3 受体的细胞系进行。在 II 组 mGlu 受体激动剂和福斯克林存在的情况下，用不同浓度的 LY-341495 处理细胞。细胞内 cAMP 水平采用发光或荧光 cAMP 检测试剂盒进行测定。化合物的拮抗效力通过测定其逆转激动剂诱导的 cAMP 积累抑制作用的能力来确定。

通过随机分配大鼠，创建了六个实验组（每组十只大鼠）：载体组和 0.05、0.1、0.3、1 和 3 mg/kg LY341475 组。LY341495 的剂量是根据先前发表的研究结果选择的，这些研究评估了该化合物对认知的影响。训练：在训练阶段，对大鼠进行两次 2 分钟的测试。T1 结束后，立即给动物注射 LY341495 或载体。鉴于这些实验中未处理的对照组大鼠仍然具有完整的识别记忆，因此采用 1 小时的间隔时间 (ITI)，每次测试持续 2 分钟。

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运动活性 [2]
记录单次注射或连续五天注射 LY341495（1.0 和 3.0 mg/kg，腹腔注射）或相应载体的大鼠的水平运动活性（每组 n = 12 只大鼠）。在另一组实验中，大鼠接受LY341495（3.0 mg/kg，腹腔注射）或溶剂对照，每日一次或连续五天给药，5分钟后，再给予GSK-3抑制剂SB216763（3.0 mg/kg，腹腔注射）或溶剂对照（每组8只大鼠）。SB216763的剂量选择基于先前的研究，该研究表明3.0 mg/kg的剂量可以减轻DAT-KO小鼠的活动过度（Beaulieu等，2004）。分别于第1天和第5天记录水平运动活性，所有实验均在光照期（上午9:00至下午1:00）进行。使用Med Associates活动监测仪和软件记录水平运动活性，持续60分钟。数据分析采用单因素方差分析或双因素方差分析，并进行Newman-Keuls事后检验。体内研究在神经和精神疾病的啮齿动物模型中进行。LY-341495以不同剂量腹腔注射或脑室内注射给药。进行高架十字迷宫、强迫游泳实验或新物体识别实验等行为学测试，以评估该化合物对焦虑、抑郁和认知的影响。收集脑组织进行生物标志物分析。

LY-341495（分子量 353.37，分子式 C₂₀H₁₉NO₅）是一种小分子化合物。它可溶于 DMSO，通常储存于 -20°C。其理化性质使其适用于体外和体内研究。

临床前毒性研究已在动物模型中评估了LY-341495。作为一种mGluR2/3拮抗剂，其毒性特征与谷氨酸能神经传递的调节有关。在治疗剂量下未见明显毒性报道。该化合物的安全性特征支持其在研究应用中的用途。

[1]. The metabotropic glutamate 2/3 receptor antagonist LY341495 differentially affects recognition memory in rats. Behav Brain Res. 2012 May 1;230(2):374-9.

[2]. Regulation of Akt and Wnt signaling by the group II metabotropic glutamate receptor antagonist LY341495 and agonist LY379268.J Neurochem. 2011 Jun;117(6):973-83.

[3]. Use of MGLUR2 and MGLUR3 knockout mice to explore in vivo receptor specificity of the MGLUR2/3 selective antagonist LY341495. Neuropharmacology. 2009 Aug;57(2):172-82. Epub 2009 May 27.

[4]. N-acetyl-cysteine attenuates neuropathic pain by suppressing matrix metalloproteinases. Pain. 2016 Aug;157(8):1711-23.

[5]. LY341495 Is a Nanomolar Potent and Selective Antagonist of Group II Metabotropic Glutamate Receptors.Neuropharmacology. 1998;37(1):1-12.

(1S,2S)-2-[(1S)-1-氨基-1-羧基-2-(9H-呫吨酮-9-基)乙基]-1-环丙烷羧酸属于呫吨酮类化合物。代谢型谷氨酸受体2/3 (mGlu(2/3))与精神分裂症相关，被认为是一种新的治疗靶点。本研究探讨了mGlu(2/3)是否调控Akt（蛋白激酶B）和Wnt（Wingless/Int-1）信号通路，这两个通路均与精神分裂症相关，并受抗精神病药物的影响。 Western blotting结果显示，LY379268（一种mGlu(2/3)激动剂）的急性及重复处理均可提高磷酸化Akt (pAkt)和磷酸化糖原合成酶激酶-3 (pGSK-3)的水平，而Dishevelled-2 (Dvl-2)、Dishevelled-3 (Dvl-3)、GSK-3和β-catenin的水平升高仅在重复处理后观察到。LY341495（一种mGlu(2/3)拮抗剂）诱导的反应与LY379268相反。共免疫沉淀实验表明mGlu(2/3)复合物与Dvl-2存在关联，这为解释mGlu(2/3)如何介导Wnt信号通路的变化提供了一种可能的机制。然而，未发现mGlu(2/3)复合物与Akt之间存在关联，提示LY341495和LY379268处理后Akt信号通路的变化可能并非由mGlu(2/3)直接介导。此外，LY341495处理诱导的运动活性增加与pAkt和pGSK-3水平升高相关，且可被GSK-3抑制剂SB216763减弱。总体而言，结果表明mGlu(2/3)调节Akt和Wnt信号通路，且LY379268处理与D(2)多巴胺受体拮抗剂（抗精神病药物）具有重叠效应。[2] LY-341495是一种强效且选择性的II组mGlu受体拮抗剂，广泛用作神经科学研究工具。其作用机制涉及阻断mGluR2/3信号通路，从而调节谷氨酸能神经传递。该化合物已被用于研究认知、焦虑、抑郁和神经退行性疾病的机制。LY-341495目前仍是一种实验性化合物和研究工具，尚未获批用于临床。

C20H19NO5

353.36856

353.126

C, 67.98; H, 5.42; N, 3.96; O, 22.64

201943-63-7

(Rac)-LY341495

9819927

White to off-white solid powder

1.4±0.1 g/cm3

580.8±40.0 °C at 760 mmHg

305.1±27.3 °C

0.0±1.7 mmHg at 25°C

1.669

2.53

109.85

3

6

5

26

559

3

O=C(O)[C@@H]1[C@H](C1)[C@@](N)(CC2C3=C(C=CC=C3)OC4=C2C=CC=C4)C(O)=O

VLZBRVJVCCNPRJ-KPHUOKFYSA-N

InChI=1S/C20H19NO5/c21-20(19(24)25,15-9-13(15)18(22)23)10-14-11-5-1-3-7-16(11)26-17-8-4-2-6-12(14)17/h1-8,13-15H,9-10,21H2,(H,22,23)(H,24,25)/t13-,15-,20-/m0/s1

(1S,2S)-2-[(1S)-1-amino-1-carboxy-2-(9H-xanthen-9-yl)ethyl]cyclopropane-1-carboxylic acid

LY 341495; LY-341495; 201943-63-7; (2S)-2-AMINO-2-[(1S,2S)-2-CARBOXYCYCLOPROP-1-YL]-3-(XANTH-9-YL) PROPANOIC ACID; 2-[(1s,2s)-2-Carboxycyclopropyl]-3-(9h-Xanthen-9-Yl)-D-Alanine; (1S,2S)-2-[(1S)-1-amino-1-carboxy-2-(9H-xanthen-9-yl)ethyl]cyclopropane-1-carboxylic acid; 9H-Xanthene-9-propanoic acid, alpha-amino-alpha-[(1S,2S)-2-carboxycyclopropyl]-, (alphaS)-; LY341495

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO: ~6 mg/mL (~17 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 0.6 mg/mL (1.70 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 6.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。