| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10 mM * 1 mL in DMSO |
|
||
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| 500mg |
|
||
| Other Sizes |
|
| 靶点 |
GSK-3β (IC50 = 0.9 nM); PI3Kγ (IC50 = 282 nM)
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
LY2090314 通过中断 ATP 结合来选择性抑制 GSK-3 的活性。 LY2090314具有保持β-catenin稳定的能力。作为单一疗法，LY2090314 的疗效有限。顺铂和卡铂与 LY3090314 联合使用时，在体外对实体瘤癌细胞系更有效。 [1]
LY2090314是一种有效的选择性GSK3抑制剂，可激活黑色素瘤细胞系中的Wnt通路。 LY2090314在一组黑色素瘤细胞系中有效诱导凋亡细胞死亡，而与BRAF突变状态无关。 LY2090314诱导的细胞死亡依赖于β-catenin和Wnt信号。LY2090314在Vemurafenib耐药细胞系中保持活性，具有独立的作用机制。［2］ |
| 体内研究 (In Vivo) |
LY2090314（3-[9-氟-2-（哌啶-1-酰基羰基）-1,2,3,4-四氢[1,4]二氮平[6,7,1-hi]吲哚-7-基]-4-咪唑[1,2-a]吡啶-3-酰基- 1h -吡咯-2,5-二酮）是一种用于肿瘤试验的静脉注射糖原合成酶激酶-3抑制剂。对大鼠和狗静脉输注[(14)C]LY2090314后的药物处置进行表征，并与现有临床资料相关。LY2090314表现出高清除率（接近肝血流量）和中等体积分布（~ 1-2 l/kg），导致快速消除（在大鼠、狗和人体内的半衰期分别为~ 0.4、0.7和1.8-3.4小时）。肝微粒体的分级清除准确地预测了跨物种的灌注限制清除。LY2090314被广泛代谢清除，大量代谢物通过胆汁迅速排泄到粪便中(剂量的69-97%；62-93%在0-24小时内完成)；尿中药物相关物质回收率低（≤剂量的3%）。尽管有广泛的代谢，在大鼠和人类中母体化合物是血浆中唯一可识别的与药物相关的部分。即使在Mdr1a-、Bcrp-和mrp2敲除大鼠中，LY2090314代谢物也没有出现在循环中，它们的尿排泄也没有增强，因为没有观察到在缺乏这些小管转运蛋白的情况下代谢物的胆道排泄受损的假设。犬类代谢产物的分布大体相似，但狗特有的LY2090314葡糖苷除外。这种结合物在狗的肝脏中形成，并优先排泄到血液中，在血液中，它占后来循环放射性的大部分，并且主要在尿液中回收（剂量的16%）。综上所述，LY2090314通过广泛的代谢被迅速清除，而循环代谢物暴露可以忽略不计，因为代谢物被胆汁排泄到粪便中，没有明显的肠道重吸收。[1]
LY2090314在A375黑色素瘤模型中表现出单药活性，并在体内与DTIC协同作用[2] 我们试图评估LY2090314在体内激活Wnt通路的能力，并随后质疑通路升高是否会导致黑色素瘤的抗肿瘤疗效。在小鼠中，LY2090314被迅速清除，血浆半衰期为36分钟（图5A）。在评估Wnt应答基因Axin2在体内基因表达的研究中，我们观察到LY2090314剂量后2和4小时在A375异种移植肿瘤组织中显著诱导Axin2 mRNA（图5B）。这一发现与我们的体外实验一致，该实验也显示在初始药物暴露后2-4小时Axin2升高（图1E）。4小时后Axin2基因表达迅速下降，这与化合物体内半衰期短和药代动力学性质一致（图5A和5B）。尽管LY2090314治疗可以短暂提升Wnt通路，但我们能够观察到每3天给药一次的皮下A375异种移植物的单药抗肿瘤效果（图5C， p<0.003）。此外，我们探索了LY2090314在体内与DTIC的协同作用能力，观察到联合治疗相对于对照组和单一治疗组的加性效应有统计学意义（图5D， p<0.02）。在这些研究中，我们没有发现明显的动物体重减轻或其他临床症状。值得注意的是，在探索Wnt激活剂在癌症治疗中的潜在用途时应谨慎，因为它们能够增加正常组织的增殖。当确定诸如此类的化合物是否具有治疗黑色素瘤的足够治疗窗口时，化合物剂量和时间表的优化将是至关重要的。本文提出的研究提供了概念验证数据，支持使用Wnt激活剂治疗黑色素瘤，并支持进一步研究GSK3抑制剂治疗黑色素瘤，特别关注其对健康组织的影响。 |
| 酶活实验 |
GSK3生化测定[2]
LY2090314的抑制酶活性通过在肽底物YRRAAVPPSPSLSRHSSPHQ(Ps)EDEEE中培养重组人GSK3α或GSK3β来评估。 |
| 细胞实验 |
细胞化学敏感性和caspase激活试验[1]
将细胞接种于96孔板中，密度为2000个细胞/孔，并在常规培养基中粘附过夜。24小时后，取出培养液，替换为含有2%胎牛血清的生长培养基，细胞暴露于0.5nmol/L至10μmol/L的试验剂中72小时。根据制造商的说明，使用CellTiter-Glo法测定黑色素瘤细胞对LY2090314、BIA和Vemurafenib的体外化学敏感性。根据制造商的说明，使用Caspase- glo测定Caspase 3/7的活化。采用GraphPad Prism 6软件，采用非线性回归和s型剂量-响应曲线计算最大半数抑制浓度（IC50）。 PARP裂解试验 [2] 将细胞以25万细胞/孔的密度接种于6孔板中，并在常规培养基中粘附过夜。24小时后，将培养基更换为含有LY2090314的新鲜生长培养基（终浓度为5nM， 15nM），细胞暴露于试验剂中72小时。按照生产商说明，使用Pathscan Cleaved PARP ELISA （Asp214）夹心ELISA试剂盒评估每50μg总蛋白的PARP裂解率。计算相对于DMSO对照处理细胞的裂解PARP水平。 免疫沉淀反应 [2] 为了评估LY2090314处理前后细胞裂解液中的“游离”β-catenin，我们测量了与FLAG标签融合的E-cadherin的c端区域可结合的β-catenin的数量。这种方法在前面已经介绍过了。简单地说，代表300μg总蛋白的裂解物与10μg His-Flag-E-cadherin孵育。Anti-FLAG M2亲和凝胶与裂解液/E-cadherin混合物在4℃下孵育过夜，以结合E-cadherin/β-catenin复合物。过夜孵育后，树脂用裂解缓冲液洗涤3次，然后在含有β-巯基乙醇的凝胶上样缓冲液中重悬。样品在8000g下离心，上清液用于免疫印迹分析。 |
| 动物实验 |
将500万个A375人黑色素瘤细胞与基质胶以1:1的比例混合，皮下注射到6至8周龄雌性无胸腺裸鼠的侧腹部。每日检查小鼠是否有可触及的肿瘤。当肿瘤大小达到约100 mm²时，将小鼠分组，分别静脉注射LY2090314（25 mg/kg，每3天一次）或赋形剂（20% Captisol/0.01N HCl）。每周两次记录动物体重和肿瘤体积（使用游标卡尺测量）。肿瘤体积的计算公式为(a² + b)/2，其中a代表肿瘤的短轴，b代表肿瘤的长轴。在与达卡巴嗪（DTIC，60 mg/kg，每日一次）联合用药的研究中，LY2090314的给药剂量为2.5 mg/kg，每3天一次，并监测肿瘤生长情况。
LY2090314 药代动力学研究 [2] 为了解静脉注射 LY2090314 后体内血浆药代动力学，我们向 CD1 nu/nu 非肿瘤荷瘤小鼠（Harlan，印第安纳州印第安纳波利斯）静脉注射 5mg/kg LY2090314，并在指定时间点（给药后 5、15、30、60 和 120 分钟）通过心脏穿刺采集血液。小鼠采用异氟烷麻醉和颈椎脱臼法处死。血液以 5,000 xg 离心 10 分钟，所得血浆采用高效液相色谱-质谱联用技术分析药物浓度。 体内研究[2] 将500万个A375人黑色素瘤癌细胞与Matrigel以1:1的比例混合，皮下注射到6至8周龄雌性无胸腺裸鼠（Harlan，印第安纳州印第安纳波利斯）的侧腹部。每日监测小鼠是否有可触及的肿瘤。当肿瘤面积达到约100mm²时，将小鼠随机分为两组，分别静脉注射LY2090314（25 mg/kg，每3天一次）或载体（20% Captisol/0.01N HCl）。每周两次记录肿瘤体积（用游标卡尺测量）和动物体重。肿瘤体积的计算公式为：(a² × b)/2（a为肿瘤的较小尺寸，b为较大尺寸）。在与DTIC（60 mg/kg，每日一次）联合用药的研究中，LY2090314的给药剂量为2.5 mg/kg，每3天一次，并监测肿瘤生长情况。在异种移植组织中进行体内靶点抑制研究时，将LY2090314（25mg/kg）给药于携带体积约为200mm2的A375肿瘤的小鼠，并在给药后1、2、4、6、8和24小时收集肿瘤组织进行RNA表达分析。 |
| 药代性质 (ADME/PK) |
LY2090314（3-[9-氟-2-(哌啶-1-基羰基)-1,2,3,4-四氢[1,4]二氮杂卓并[6,7,1-hi]吲哚-7-基]-4-咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基-1H-吡咯-2,5-二酮）是一种用于肿瘤临床试验的静脉注射糖原合成酶激酶-3抑制剂。本研究对大鼠和犬静脉输注[(14)C]LY2090314后的药物分布进行了表征，并与已有的临床数据进行了关联。LY2090314具有较高的清除率（接近肝血流量）和中等的分布容积（约1-2 L/kg），导致其快速消除（在大鼠、犬和人体内的半衰期分别为约0.4、0.7和1.8-3.4小时）。肝微粒体清除率的标准化结果能够准确预测不同物种的灌注限制清除率。LY2090314 经广泛代谢清除，其众多代谢产物迅速经胆汁排泄至粪便（占剂量的 69-97%；62-93% 在 0-24 小时内排出）；尿液中药物相关物质的回收率较低（≤3% 剂量）。尽管代谢广泛，但在大鼠和人体中，血浆中唯一可识别的药物相关成分是母体化合物。即使在 Mdr1a、Bcrp 和 Mrp2 基因敲除大鼠中，LY2090314 的代谢产物也未出现在循环系统中，其尿排泄也未增加，因为未观察到假设的在缺乏这些毛细胆管转运蛋白的情况下代谢产物胆汁排泄受损的情况。犬的代谢物分布总体相似，但犬特有的LY2090314葡萄糖醛酸苷是个显著例外。该结合物在犬肝脏中生成，并优先排泄到血液中，在后期循环放射性中占大部分，且主要从尿液中回收（占剂量的16%）。总之，LY2090314通过广泛的代谢迅速清除，由于代谢物经胆汁排泄到粪便中，且无明显的肠道重吸收，因此循环代谢物暴露量可忽略不计。[1] 在小鼠中，LY2090314清除迅速，血浆半衰期为36分钟（图5A）。在评估Wnt反应基因Axin2体内基因表达的研究中，我们观察到在A375异种移植瘤组织中，LY2090314给药后2小时和4小时Axin2 mRNA显著诱导表达（图5B）。这一发现与我们的体外实验结果一致，体外实验也显示，首次给药后2-4小时Axin2表达升高（图1E）。4小时后Axin2基因表达的快速下降与该化合物在体内的短半衰期和药代动力学特性相符（图5A和5B）。[2]
|
| 参考文献 |
|
| 其他信息 |
LY-2090314 属于二氮杂环庚并吲哚类化合物，其结构为 1,2,3,4-四氢[1,4]二氮杂环庚并[6,7,1-hi]吲哚，分别在 2、7 和 9 位被哌啶-1-基羰基、4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-3-基和氟取代。它是一种强效的糖原合成酶激酶-3 (GSK-3) ATP 竞争性抑制剂，对 GSK-3α 和 GSK-3β 的 IC50 值分别为 1.5 nM 和 0.9 nM。该药物目前正处于治疗晚期/转移性癌症的临床开发阶段。它具有诱导细胞凋亡、抗肿瘤、激活Wnt信号通路和抑制EC 2.7.11.26（tau蛋白激酶）的作用。它是一种咪唑并吡啶类、二氮杂环庚并吲哚类、单氟苯类、哌啶甲酰胺类、脲类和马来酰亚胺类化合物。
Ly2090314已用于白血病、晚期癌症和胰腺癌的治疗试验。 GSK-3抑制剂LY2090314是一种糖原合成酶激酶-3 (GSK-3)抑制剂，具有潜在的抗肿瘤活性。给药后，LY2090314以ATP竞争性方式与GSK-3结合并抑制其活性。这可阻止 GSK-3 介导的 β-catenin 磷酸化，从而抑制 β-catenin 的后续泛素化和蛋白酶体降解。这导致 Wnt/β-catenin 通路的激活，并诱导易感肿瘤细胞凋亡。GSK-3 是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，在参与蛋白质合成、细胞增殖、分化和凋亡的众多通路中发挥关键作用。Wnt/β-catenin 信号通路在细胞增殖和分化中均起着关键作用。β-catenin 是一种转录激活因子，其表达增加与某些癌症的细胞增殖减少和预后改善相关。此前已有研究观察到，黑色素瘤进展过程中 β-catenin 表达降低，且核内 β-catenin 水平与细胞增殖呈负相关，提示激活 Wnt/β-catenin 通路可能对黑色素瘤患者有益。为了进一步探究这一概念，我们测试了LY2090314，一种高效且选择性的小分子抑制剂，对GSK3α和GSK3β亚型均有活性。在一系列黑色素瘤细胞系中，纳摩尔浓度的LY2090314可刺激TCF/LEF TOPFlash报告基因的活性，稳定β-catenin，并提高Axin2的表达。Axin2是一种Wnt反应基因，也是该通路激活的标志物。细胞毒性试验表明，黑色素瘤细胞系在体外对LY2090314非常敏感（处理72小时后IC50约为10 nM），而其他实体瘤细胞系则不然（IC50 > 10 μM），这由caspase激活和PARP裂解所证实。携带突变型B-RAF或N-RAS的细胞系对LY2090314的敏感性与对BRAF抑制剂维莫非尼产生耐药性的细胞系相当。 shRNA研究表明，β-catenin的稳定是GSK3抑制剂治疗后细胞凋亡所必需的，因为敲低β-catenin可以克服黑色素瘤细胞系对LY290314的敏感性。我们进一步证明，在体内，单次给药LY290314即可提高Axin2基因的表达，并且重复给药可延缓A375黑色素瘤异种移植瘤的生长。LY290314在临床前模型中的活性提示，应进一步探索Wnt激活剂在黑色素瘤治疗中的作用。[2] |
| 分子式 |
C28H25FN6O3
|
|---|---|
| 分子量 |
512.5349
|
| 精确质量 |
512.197
|
| 元素分析 |
C, 65.61; H, 4.92; F, 3.71; N, 16.40; O, 9.36
|
| CAS号 |
603288-22-8
|
| 相关CAS号 |
603288-22-8
|
| PubChem CID |
10029385
|
| 外观&性状 |
Off-white to light yellow solid powder
|
| 密度 |
1.6±0.1 g/cm3
|
| 折射率 |
1.776
|
| LogP |
3.43
|
| tPSA |
95.44
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
1
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
5
|
| 可旋转键数目(RBC) |
2
|
| 重原子数目 |
38
|
| 分子复杂度/Complexity |
1030
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
|
| SMILES |
FC1C([H])=C2C(C3C(N([H])C(C=3C3=C([H])N=C4C([H])=C([H])C([H])=C([H])N34)=O)=O)=C([H])N3C([H])([H])C([H])([H])N(C(N4C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C4([H])[H])=O)C([H])([H])C(C=1[H])=C32
|
| InChi Key |
HRJWTAWVFDCTGO-UHFFFAOYSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C28H25FN6O3/c29-18-12-17-15-34(28(38)32-7-3-1-4-8-32)11-10-33-16-20(19(13-18)25(17)33)23-24(27(37)31-26(23)36)21-14-30-22-6-2-5-9-35(21)22/h2,5-6,9,12-14,16H,1,3-4,7-8,10-11,15H2,(H,31,36,37)
|
| 化学名 |
3-[6-fluoro-10-(piperidine-1-carbonyl)-1,10-diazatricyclo[6.4.1.04,13]trideca-2,4,6,8(13)-tetraen-3-yl]-4-imidazo[1,2-a]pyridin-3-ylpyrrole-2,5-dione
|
| 别名 |
LY 2090314; LY2090314; 603288-22-8; LY-2090,314; LY 2090,314; Kinome_3681; 3-(9-Fluoro-2-(piperidine-1-carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-[1,4]diazepino[6,7,1-hi]indol-7-yl)-4-(imidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)-1H-pyrrole-2,5-dione; UNII-822M3GYM67; CHEMBL362558; LY-2090314
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO: ~100 mg/mL (~195.1 mM)
Water: <1 mg/mL Ethanol: ~2 mg/mL warmed (~3.9 mM) |
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 12.5 mg/mL澄清的DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；再向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；然后加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.25 mg/mL (2.44 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 12.5 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 5% DMSO+45% PEG 300+ddH2O: 17mg/mL 配方 4 中的溶解度: 10 mg/mL (19.51 mM) in 20% HP-β-CD/10 mM citrate pH 2.0 (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.9511 mL | 9.7555 mL | 19.5111 mL | |
| 5 mM | 0.3902 mL | 1.9511 mL | 3.9022 mL | |
| 10 mM | 0.1951 mL | 0.9756 mL | 1.9511 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
| NCT Number | Status | Interventions | Conditions | Sponsor/Collaborators | Start Date | Phases |
| NCT01287520 | Completed | Drug: LY2090314 Drug: pemetrexed |
Advanced Cancer | Eli Lilly and Company | November 2007 | Phase 1 |
| NCT01214603 | Completed | Drug: LY2090314 | Leukemia | Eli Lilly and Company | November 2010 | Phase 2 |
LY2090314 is a GSK inhibitor which elevated Wnt signaling in melanoma cell lines. |
LY2090314 potently induces apoptotic cell death in a range of melanoma cell lines irrespective of BRAF mutation status. |
Cell death induced by LY2090314 is dependent on β-catenin and GSK3β knockdown increases the sensitivity of cells to LY2090314.A. Melanoma cells stably transfected with shRNAs targeting β-catenin display decreased β-catenin and Axin2 protein expression by western blot. A375 (B) and M14 (C) cells expressing shRNAs targeting β-catenin (● Control; ■ β-catenin shRNA 1;▲β-catenin shRNA 2; ▼ β-catenin shRNA 3) become resistant to LY2090314 suggesting that β-catenin is required for apoptotic cell death in response to LY2090314.D, E.A375 cells targeted with GSK3β shRNA, but not GSK3α shRNA, demonstrates increased sensitivity to LY2090314 (4.5nM, 72hr).PLoS One.2015 Apr 27;10(4):e0125028. |
LY2090314 demonstrates activity in cell lines resistant to the BRAF inhibitor Vemurafenib and has an independent mechanism of action.PLoS One.2015 Apr 27;10(4):e0125028. |
LY2090314 elevates Axin2 gene expression in vivo, demonstrates single agent activity in the A375 xenograft model of melanoma and enhances the efficacy of DTIC.PLoS One.2015 Apr 27;10(4):e0125028. |
CDKL5/GSK3-IN-1
GSK-3β inhibitor 23
GSK3β-IN-1
GSK-3β inhibitor 25
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
