| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 2mg |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
IKK2 (IC50 = 30 nM)
Inhibitor of Inhibitor of Nuclear Factor kappa-B Kinase 2 (IKK2, also known as IKKβ): IC50 = 16 nM (recombinant human IKK2 enzyme activity assay); no inhibitory activity against IKK1 (IKKα) or other kinases (e.g., JNK1, p38α) was detected at concentrations up to 10 μM [1] |
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
LY2409881 抑制组成型激活的 NF-ƘB，并在弥漫性大 B 细胞淋巴瘤 (DLBCL) 细胞中引起浓度和时间依赖性生长抑制和凋亡。在卵巢癌细胞系 SKOV3 中，LY2409881 显示出中等的细胞毒性。 LY2409881与阿霉素和环磷酰胺在SUDHL2细胞中具有协同抑制细胞生长的作用，但在LY1细胞中则没有作用。在 SUDHL2 和 LY1 细胞中，LY2409881 与组蛋白脱乙酰酶 (HDAC) 抑制剂罗米地辛协同抑制细胞生长。激酶测定：LY2409881 是一种 IKK2 抑制剂，可抑制 TNFα 诱导的 NF-κB 激活。通过体外激酶测定，LY2409881 有效抑制 IKK2，IC50 为 30 nM。相比之下，IKK1 和其他常见激酶的 IC50 至少高出 1 个对数。通过检查 LY2409881 在 TNFα 依赖性抗凋亡功能中的作用，在基于细胞的测定中进一步研究了 LY2409881 对 NF-κB 信号传导的特异性。 TNFα 是 NF-κB 的一种众所周知的上游刺激物。细胞测定：根据制造商手册，使用 CellTiter-Glo 试剂评估细胞毒性。实验在 96 孔板中进行，每次处理一式三份。通常在治疗后 24、48 和 72 小时取样。细胞毒性表示为相对于同一实验中未处理的对照，每次处理中活细胞百分比的下降。使用 CalcuSyn 2.0 版软件计算每个细胞系的 IC50。
淋巴瘤细胞系中的抗增殖活性：LY2409881以剂量依赖性方式抑制弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞系（Raji、SU-DHL-4、OCI-Ly3）和套细胞淋巴瘤（MCL）细胞系（Jeko-1）的增殖。处理72小时后，IC50值分别为：Raji（0.8 μM）、SU-DHL-4（1.2 μM）、OCI-Ly3（1.5 μM）、Jeko-1（2.0 μM）（MTT法检测）[1] - NF-κB通路抑制作用：Raji细胞经LY2409881（0.5-2 μM）处理4小时后，Western blot显示磷酸化IKK2（Ser177/181）和磷酸化p65（Ser536）呈剂量依赖性降低；细胞质中IκBα蛋白水平升高（因降解减少），而细胞核中p65积累减少（核质分离+Western blot检测）[1] - 与HDAC抑制剂的协同作用：LY2409881（0.2-1 μM）与HDAC抑制剂（如伏立诺他，0.1-0.5 μM）在Raji和SU-DHL-4细胞中联合处理时，表现出协同抗增殖效应，联合指数（CI）<0.7（CompuSyn软件计算）。该协同作用与caspase-3/7活性增强（较单药组升高≥2倍）和凋亡率增加相关（Annexin V-FITC/PI染色+流式细胞术检测）[1] - NF-κB靶基因下调：SU-DHL-4细胞经LY2409881（1 μM）处理6小时后，实时荧光定量PCR显示NF-κB依赖性促存活基因（Bcl-2：下调45%、c-Myc：下调50%、XIAP：下调40%）和促炎基因（IL-6：下调60%、TNF-α：下调55%）的mRNA表达较溶剂对照组降低[1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
在 SCID 米色异种移植小鼠模型中，LY2409881（50、100 和 200 mg/kg，腹腔注射）显着抑制肿瘤生长
Raji异种移植模型（裸鼠）的抗肿瘤 efficacy：雌性裸鼠皮下接种5×10⁶个Raji细胞，当肿瘤体积达~100 mm³时，将小鼠随机分为4组（n=6/组）：溶剂对照组（0.5% DMSO + 0.5%吐温80生理盐水）、LY2409881单药组（30 mg/kg，腹腔注射）、伏立诺他单药组（100 mg/kg，口服）、联合用药组（LY2409881 30 mg/kg + 伏立诺他100 mg/kg）。每日给药1次，持续21天。联合用药组肿瘤生长抑制率（TGI）最高，达78%，而LY2409881单药组为32%，伏立诺他单药组为28%；联合用药组肿瘤重量较溶剂组减少65%[1] - SU-DHL-4异种移植模型（裸鼠）的抗肿瘤 efficacy：实验设计与Raji模型类似，LY2409881剂量为25 mg/kg（腹腔注射，每日1次），伏立诺他为75 mg/kg（口服，每日1次），持续给药18天。联合用药组TGI达72%，LY2409881单药组为29%，伏立诺他单药组为25%；肿瘤组织Western blot显示联合用药组p-p65降低、切割型caspase-3升高[1] - 体内无脱靶通路激活：在给药小鼠的肿瘤组织中，LY2409881（单药或联合）不影响JNK1或p38α的磷酸化（Western blot检测），证实其对IKK2的特异性[1] |
| 酶活实验 |
LY2409881 是一种 IKK2 抑制剂，可抑制 TNFα 诱导的 NF-κB 激活。在体外激酶测定中，LY2409881 的 IC50 为 30 nM，并有效抑制 IKK2。然而，IKK1 和其他流行激酶的 IC50 至少高出 1 个对数。通过检查 LY2409881 对 TNF 依赖性抗凋亡功能的影响，在基于细胞的测定中进一步研究了该药物对 NF-κB 信号传导的特异性。具有良好特性的 NF-κB 上游刺激物是 TNFα。
重组人IKK2酶活实验：实验在96孔板中进行，总反应体积50 μL。反应体系包含25 mM Tris-HCl（pH 7.5）、10 mM MgCl2、1 mM DTT、50 μM ATP（含[γ-³²P]ATP用于放射性检测）、2 μg GST-IκBα（1-54位残基，底物）、10 nM重组人IKK2，以及系列浓度的LY2409881（0.1 nM-10 μM）。反应混合物在30°C孵育45分钟后，加入25 μL 3× SDS上样缓冲液终止反应。将样品点样至P81磷酸纤维素纸上，用1%磷酸洗涤3次（去除未结合的[γ-³²P]ATP），干燥后用闪烁计数器检测放射性。以溶剂对照组（0.1% DMSO）为参照计算IKK2活性百分比，通过非线性回归分析确定IC50[1] - 激酶选择性实验：采用与IKK2相同的放射性检测方法，测试LY2409881（10 μM）对其他29种激酶（包括IKK1、JNK1、p38α、ERK1、AKT1）的抑制活性。结果显示，对所有测试激酶均无显著抑制（活性降低<10%）[1] |
| 细胞实验 |
根据制造商提供的说明，使用 CellTiter-Glo 试剂评估细胞毒性。实验过程中，每次处理均在 96 孔板中进行三次。通常在治疗后 24、48 和 72 小时收集样本。在同一实验中，与未处理的对照相比，每次处理后活细胞下降的百分比是细胞毒性的衡量标准。 CalcuSyn 2.0 版软件用于确定每个细胞系的 IC50。
MTT细胞活力实验：淋巴瘤细胞（Raji、SU-DHL-4、OCI-Ly3、Jeko-1）以5×10³个/孔（Raji/Jeko-1）或8×10³个/孔（SU-DHL-4/OCI-Ly3）接种于96孔板，过夜培养。加入系列浓度的LY2409881（0.01-20 μM），在37°C（5% CO2）下孵育72小时。每孔加入20 μL MTT溶液（5 mg/mL PBS），继续孵育4小时后去除上清，加入150 μL DMSO溶解甲瓒结晶，在570 nm处检测吸光度。使用GraphPad Prism软件计算IC50[1] - NF-κB通路蛋白Western blot实验：Raji细胞以2×10⁶个/孔接种于6孔板，用LY2409881（0.5-2 μM）处理4小时。核质分离步骤：用细胞质提取缓冲液（含10 mM HEPES、10 mM KCl、0.1 mM EDTA、0.1 mM EGTA及蛋白酶/磷酸酶抑制剂）在冰上裂解细胞15分钟，12,000×g离心5分钟（上清为细胞质组分；沉淀为细胞核组分，用含20 mM HEPES、400 mM NaCl、1 mM EDTA、1 mM EGTA及抑制剂的细胞核提取缓冲液裂解）。总蛋白或分馏蛋白（30 μg/泳道）经SDS-PAGE分离后转移至PVDF膜，用5%脱脂牛奶封闭1小时，4°C下与一抗（抗p-IKK2、抗IKK2、抗p-p65、抗p65、抗IκBα、抗GAPDH、抗Lamin B1）孵育过夜。洗涤后，膜与HRP偶联二抗在室温下孵育1小时，用增强化学发光（ECL）试剂显影[1] - 凋亡实验（Annexin V-FITC/PI染色）：Raji细胞经LY2409881（1 μM）+伏立诺他（0.3 μM）处理48小时后，收集细胞，用冷PBS洗涤，重悬于结合缓冲液中，加入Annexin V-FITC和PI在避光条件下染色15分钟。通过流式细胞术分析凋亡率（Annexin V阳性/PI阴性 + Annexin V阳性/PI阳性细胞比例）[1] - NF-κB靶基因实时荧光定量PCR：SU-DHL-4细胞经LY2409881（1 μM）处理6小时后，用TRIzol试剂提取总RNA，通过逆转录试剂盒逆转录为cDNA，使用SYBR Green Master Mix进行实时荧光定量PCR。所用引物针对Bcl-2、c-Myc、XIAP、IL-6、TNF-α及内参基因GAPDH，采用2-ΔΔCt法计算相对mRNA表达量[1] |
| 动物实验 |
小鼠：本研究进行了小鼠实验。将10⁷ Ly10细胞与Matrigel基质胶混合后，皮下注射到5至7周龄的SCID米色小鼠后侧腹部。当肿瘤体积达到150 mm³时，将小鼠分为四组，每组八只：（1）对照组，注射5%葡萄糖溶液；（2）LY2409881组，注射50 mg/kg LY2409881（溶于5%葡萄糖溶液）；（3）LY2409881组，注射100 mg/kg LY2409881（溶于5%葡萄糖溶液）；（4）LY2409881组，注射200 mg/kg LY2409881（溶于5%葡萄糖溶液）。连续四周，分别于第1天和第4天腹腔注射LY2409881或5%葡萄糖溶液。结果以各组随时间变化的平均肿瘤体积（mm³）表示。测定肿瘤体积。
裸鼠异种移植模型：雌性无胸腺裸鼠（6-8周龄）饲养于特定病原体清除（SPF）环境中（22±2°C，湿度50±5%，12小时光照/黑暗循环），自由摄取食物和水。Raji异种移植：将5×10⁶个Raji细胞（悬浮于100 μL PBS + 100 μL Matrigel中）皮下注射至每只小鼠的右侧腹部。SU-DHL-4异种移植：将8×10⁶个SU-DHL-4细胞（与Raji细胞悬浮液相同）皮下注射。当肿瘤平均体积达到约 100 mm³ 时，将小鼠随机分为 4 组（每组 n=6）： 1. 载体组：0.5% DMSO + 0.5% Tween 80 生理盐水，腹腔注射 (ip)，每日一次 (qd)，持续 21 天（Raji 组）或 18 天（SU-DHL-4 组） 2. LY2409881 组：LY2409881 溶于载体中，浓度为 6 mg/mL，Raji 组剂量为 30 mg/kg（腹腔注射，qd），SU-DHL-4 组剂量为 25 mg/kg（腹腔注射，qd） 3. Vorinostat 组：Vorinostat 悬浮于 0.5% 甲基纤维素溶液中，Raji 组剂量为 100 mg/kg（灌胃，qd），SU-DHL-4 组剂量为 75 mg/kg（灌胃，qd） SU-DHL-4 灌胃给药，每日一次 4. 联合用药组：LY2409881（同上）+伏立诺他（同上），同时给药 - 肿瘤体积和体重监测：每3天使用游标卡尺测量肿瘤体积，计算公式为：体积 = (长度 × 宽度²)/2。每周测量体重以评估毒性。治疗结束后，小鼠通过吸入二氧化碳安乐死；切除肿瘤，称重，并储存于-80°C用于Western blot分析，或用10%福尔马林固定用于组织病理学检查[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
体外细胞毒性：用LY2409881（浓度最高达10 μM）处理正常人外周血单核细胞（PBMC）72小时后，细胞活力保持在80%以上（MTT法），表明脱靶细胞毒性较低[1]。体内毒性：在Raji和SU-DHL-4异种移植模型中，所有治疗组均未观察到明显的体重下降（<5% vs. 初始体重）。对治疗组小鼠的肝脏、肾脏和脾脏进行组织病理学分析，结果显示与载体对照组相比，未见异常变化（例如炎症、坏死）[1]。
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| 参考文献 | |
| 其他信息 |
作用机制：LY2409881通过特异性抑制IKK2发挥抗肿瘤作用，IKK2可阻断IκBα的磷酸化和降解，从而阻止NF-κB p65亚基的核转位。这导致NF-κB依赖性促生存和促炎基因的下调，抑制淋巴瘤细胞增殖并促进细胞凋亡[1]。
- 治疗潜力：LY2409881与HDAC抑制剂的协同作用提示，对于单药疗效通常有限的NF-κB依赖性淋巴瘤（例如，弥漫性大B细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤），联合用药可能是一种有前景的治疗策略[1]。 |
| 分子式 |
C24H32CL4N6OS
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|---|---|
| 分子量 |
594.43
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| 精确质量 |
592.111
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| 元素分析 |
C, 48.49; H, 5.43; Cl, 23.86; N, 14.14; O, 2.69; S, 5.39
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| CAS号 |
946518-60-1
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| 相关CAS号 |
LY2409881;946518-61-2
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| PubChem CID |
68856073
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| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
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| tPSA |
102
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
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| 氢键受体(HBA)数目 |
7
|
| 可旋转键数目(RBC) |
8
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| 重原子数目 |
36
|
| 分子复杂度/Complexity |
661
|
| 定义原子立体中心数目 |
0
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| SMILES |
Cl.O=C(C1C2=C(SC(C3C(Cl)=CN=C(NCCCN4CCN(C)CC4)N=3)=C2)C=CC=1)NC1CC1
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| InChi Key |
IEXCRLAGBWKVPW-UHFFFAOYSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C24H29ClN6OS.3ClH/c1-30-10-12-31(13-11-30)9-3-8-26-24-27-15-19(25)22(29-24)21-14-18-17(4-2-5-20(18)33-21)23(32)28-16-6-7-16;;;/h2,4-5,14-16H,3,6-13H2,1H3,(H,28,32)(H,26,27,29);3*1H
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| 化学名 |
2-[5-chloro-2-[3-(4-methylpiperazin-1-yl)propylamino]pyrimidin-4-yl]-N-cyclopropyl-1-benzothiophene-4-carboxamide;trihydrochloride
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| 别名 |
LY2409881 tri-HCl; LY2409881 trihydrochloride; LY-2409881; LY 2409881
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month 注意： 请将本产品存放在密封且受保护的环境中，避免吸湿/受潮。 |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 1.43 mg/mL (2.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 14.3 mg/mL澄清DMSO储备液加入400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 1.43 mg/mL (2.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 14.3mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 1.43 mg/mL (2.41 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO+30% PEG 300+5% Tween 80+ddH2O: 5mg/mL 配方 5 中的溶解度: 35 mg/mL (58.88 mM) in 20% SBE-β-CD in Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液; 超声助溶. *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.6823 mL | 8.4114 mL | 16.8228 mL | |
| 5 mM | 0.3365 mL | 1.6823 mL | 3.3646 mL | |
| 10 mM | 0.1682 mL | 0.8411 mL | 1.6823 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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LLVK
LLVK TFA
Tat-IKIP (46-60) TFA
ITA-5
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