| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
Chk1 (IC50 = 7 nM); Chk2 (IC50 = 12000 nM); PDK1 (IC50 = 893 nM); CAMK2 (IC50 = 1550 nM); VEGFR3 (IC50 = 2128 nM); MET (IC50 = 2200 nM); JNK1 (IC50 = 4930 nM); RSK2 (IC50 = 5700 nM); NTRK1 (IC50 = 12000 nM)
Rabusertib (LY2603618) specifically targets checkpoint kinase 1 (Chk1) with a Ki value of 0.7 nM and an IC50 value of 1.9 nM in recombinant kinase assays [1] Rabusertib exhibits high selectivity for Chk1, with IC50 values > 1 μM for Chk2, ATM, ATR, CDK1, Aurora A/B, and 46 other tested kinases [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
Chk1 是一种 ATP 依赖性丝氨酸-苏氨酸激酶，也是由双链断裂 (DSB) 激活的 DNA 复制监控检查点系统的关键组成部分。 Chk1 参与所有当前定义的细胞周期检查点，包括 G1/S、S 期内、G2/M 和有丝分裂纺锤体检查点。通过抑制 chk1 的活性，LY2603618 可以防止 DNA 损伤剂引起的 DNA 修复，从而增强各种化疗药物的抗肿瘤功效。但LY2603618的临床前数据目前尚未公布。 Chk1 的抑制预计会增强抗代谢药物（如吉西他滨）的作用。 LY2603618 治疗会损害 DNA 合成，增加 DNA 损伤（通过有丝分裂缺陷），诱导细胞凋亡，并与培美曲塞具有协同活性，尤其是在 p53 突变肿瘤细胞中。激酶测定：Rabusertib (LY2603618) 是 Chk1 生物学多个方面的高效抑制剂。 Rabusertib (LY2603618) 针对一组 51 种不同的蛋白激酶进行了体外测试。 Rabusertib (LY2603618) 对 Chk1 的 IC50 为 7 nM，其针对 Chk1 的效力大约是针对任何其他评估的蛋白激酶的效力的 100 倍（PDK1，IC50=893 nM，其他 >1000 nM）。 Rabusertib (LY2603618) 有效降低 Chk1 自磷酸化，EC50 为 430 nM。 Rabusertib (LY2603618) 对 Chk1 的抑制也有效消除了用 DNA 损伤剂处理的细胞中的 G2/M DNA 损伤检查点。细胞检测：LY2603618 通过与 ATP 分子竞争来抑制 Chk1。在 A549 和 H1299 非小癌细胞系中，致死浓度的 LY2603618 (10 µM) 不仅导致细胞增殖停滞（G2/M 期细胞数量从 13% 增加到 38%），而且还直接导致 DNA 损伤，后者由 H2AX 磷酸化发生率的增加表明。
在多种人类实体瘤细胞系（HCT116、A549、MCF-7、PC3、MiaPaCa-2、SKOV3）中，Rabusertib 表现出抗增殖活性，IC50 值范围为 12 nM 至 78 nM [1] - 20 nM Rabusertib 可废除顺铂（2 μM）在 HCT116 细胞中诱导的 G2/M 检查点，24 小时后使 G2/M 期细胞积累比例从 58% 降至 22% [1] - 50 nM Rabusertib 单独处理 A549 细胞仅诱导轻微凋亡（8% 凋亡细胞），但与吉西他滨（10 nM）联合处理 72 小时后，凋亡率升高至 63% [1] - Western blot 检测显示，Rabusertib 可抑制 HCT116 细胞中 Chk1 介导的 CDC25C（Ser216）和 Wee1（Ser642）磷酸化，30 nM 浓度时抑制作用最强 [1] - Rabusertib 与 DNA 损伤剂联合使用时表现出协同抗增殖效应：在 HCT116 细胞中，与顺铂联合的协同指数（CI）= 0.38，与吉西他滨联合 CI = 0.29，与多柔比星联合 CI = 0.42，与依托泊苷联合 CI = 0.45 [1] - 40 nM Rabusertib 可增强吉西他滨处理细胞中的 DNA 双链断裂，γ-H2AX 灶点形成较吉西他滨单独处理增加 4.1 倍 [1] - 在 p53 缺陷型肿瘤细胞系（HCT116 p53⁻/⁻、MDA-MB-231）中，Rabusertib 表现出增强的抗增殖活性（IC50 = 12 nM 至 25 nM），优于 p53 正常表达细胞 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
体内实验旨在确定LY2603618与其他化疗药物的联合作用。在接种Calu-6肺癌细胞的小鼠异种移植模型中，联合注射吉西他滨150 mg/kg和口服LY2603618（200 mg/kg）导致肿瘤DNA损伤增加，增加了2倍。与单独使用吉西他滨治疗的小鼠相比，Chk1 s345 磷酸化的变化。
在 HCT116 人结直肠癌异种移植模型（nu/nu 小鼠）中，Rabusertib 口服给药（30 mg/kg，每日两次，连续 14 天）联合顺铂（5 mg/kg，腹腔给药，第 1、5、9 天）的肿瘤生长抑制率（TGI）达 91%，而顺铂单独处理的 TGI 为 45% [1] - 在 A549 人非小细胞肺癌（NSCLC）异种移植模型（nu/nu 小鼠）中，Rabusertib 口服给药（25 mg/kg，每日两次，连续 14 天）联合吉西他滨（100 mg/kg，腹腔给药，第 1、5、9 天）的 TGI 为 87%，荷瘤小鼠中位生存期较吉西他滨单独处理延长 72% [1] - Rabusertib 与吉西他滨联合处理组的肿瘤组织中，TUNEL 阳性凋亡细胞增加（42% vs 吉西他滨单独处理组 16%），Ki-67 增殖指数降低（20% vs 吉西他滨单独处理组 58%）[1] |
| 酶活实验 |
重组 Chk1 激酶活性测定：反应体系包含重组人 Chk1、ATP（10 μM）和荧光标记肽底物，加入系列浓度的 Rabusertib（0.1 nM 至 5 nM），30°C 孵育 60 分钟。通过荧光共振能量转移（FRET）检测磷酸化底物，非线性回归计算 Ki/IC50 值 [1]
- 激酶选择性面板测定：采用相同的 FRET 方法，在 1 μM 浓度下测试 Rabusertib 对 52 种人类激酶的抑制作用。相对于溶媒对照组计算抑制率，对抑制率 > 20% 的激酶计算 IC50 值 [1] - Chk1 结合测定：采用表面等离子体共振（SPR）技术测量结合亲和力。Rabusertib 系列稀释（0.5 nM 至 20 nM）后通过固定有 Chk1 的传感器芯片，记录结合响应信号，通过稳态分析推导解离常数（Kd）[1] |
| 细胞实验 |
将细胞以每孔 2.5×10 3 的密度接种在 96 孔组织培养板上，然后孵育一个细胞倍增（18–24 小时）。设置吉西他滨稀释度时，半对数步长涵盖 1-1000 nM 的最终浓度范围。 Rabusertib (LY2603618) 是通过在 DMSO 中稀释至最终浓度 5000×，然后在培养基中稀释 1000 倍以产生添加到孔中的 5× 原液而制成的。在添加吉西他滨后约24小时添加Rabusertib (LY2603618)。每个组合制作三份。添加 Rabusertib (LY2603618) 并允许两次细胞倍增后，根据制造商的说明将 MTS/PMS 试剂添加到每个孔中。使用 Spectra Max 250 分光光度计测量 490 nm 处的吸光度，并使用 GraphPad Prism 4.0 分析结果。非线性回归用于拟合剂量反应曲线，底部拟合仅限于 0% 抑制[1]。
抗增殖实验：癌细胞接种于 96 孔板（4×103 个细胞 / 孔），用系列浓度的 Rabusertib（5 nM 至 200 nM）单独或与 DNA 损伤剂联合处理 72 小时。基于四唑盐还原的比色法评估细胞活力，计算 IC50 值及协同指数 [1] - 细胞周期分析：细胞用 Rabusertib（20 nM）联合顺铂（2 μM）处理 24 小时后，收集细胞，70% 乙醇固定，碘化丙啶染色，流式细胞术测定细胞周期分布 [1] - 凋亡实验：细胞经 Rabusertib（50 nM）和 / 或吉西他滨（10 nM）处理 72 小时后，用膜联蛋白 V-FITC 和碘化丙啶染色，流式细胞术分析 [1] - Western blot 分析：细胞用冰浴 RIPA 缓冲液裂解，蛋白经 SDS-PAGE 分离后转移至膜上，与抗磷酸化 CDC25C（Ser216）、磷酸化 Wee1（Ser642）、γ-H2AX、剪切型半胱天冬酶 -3、PARP 及 β- 肌动蛋白抗体孵育。化学发光法检测信号，密度计量法定量 [1] - γ-H2AX 灶点实验：细胞用 Rabusertib（40 nM）和吉西他滨（10 nM）处理 24 小时后，固定，用 γ-H2AX 抗体和 DAPI 染色，荧光显微镜观察。通过图像分析软件计数每个细胞的灶点数量 [1] |
| 动物实验 |
小鼠：本研究采用26-28克雌性哈兰无胸腺裸鼠。每只受试小鼠的后侧腹部皮下注射1×10⁶个Calu-6细胞，细胞悬浮于1:1的无血清培养基和Matrigel混合液中，以诱导肿瘤生长。待肿瘤体积生长至约150 mm³后，根据体重和肿瘤大小将小鼠随机分配至各治疗组。每只小鼠共接受两次注射：一次为腹腔注射150 mg/kg吉西他滨或生理盐水，另一次为口服200 μL LY2603618或Captisol。HCT116结肠癌异种移植模型：将5×10⁶个HCT116细胞皮下植入6-8周龄雌性nu/nu小鼠体内。当肿瘤体积达到 100-150 mm³ 时，将小鼠随机分组（每组 n=8），并分别接受以下治疗：（1）口服赋形剂（0.5% 甲基纤维素 + 0.2% Tween 80）；（2）口服 Rabusertib（30 mg/kg），每日两次，持续 14 天；（3）腹腔注射顺铂（5 mg/kg），分别于第 1、5、9 天给药；（4）Rabusertib + 顺铂。每 2 天测量一次肿瘤体积和体重。[1]
- A549 非小细胞肺癌异种移植模型：将 5×10⁶ 个 A549 细胞皮下植入 6-8 周龄的雌性裸鼠（nu/nu）。肿瘤体积达到 100-150 mm³ 的患者被随机分组（每组 n=8），并接受以下治疗：（1）口服赋形剂；（2）口服 Rabusertib（25 mg/kg），每日两次，持续 14 天；（3）腹腔注射吉西他滨（100 mg/kg），分别于第 1、5、9 天给药；（4）Rabusertib + 吉西他滨。监测肿瘤体积和生存情况[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
在小鼠中，口服拉布塞替尼（30 mg/kg）的血药浓度峰值（Cmax）为 4.2 μM，24 小时曲线下面积（AUC0-24h）为 28.6 μM·h，口服生物利用度为 73% [1]
- 在小鼠中，静脉注射拉布塞替尼（10 mg/kg）的清除率为 8.6 mL/min/kg，分布容积（Vss）为 1.2 L/kg，末端半衰期（t1/2）为 9.5 小时 [1] - 拉布塞替尼具有良好的水溶性（pH 7.4 时 ≥120 μM）和较高的人血浆蛋白结合率（94%）[1] - 在大鼠中，口服拉布塞替尼（20 mg/kg）的血药浓度峰值（Cmax）为 3.8 μM，24 小时曲线下面积（AUC0-24h）为 28.6 μM·h 24.3 μM·h，口服生物利用度为 68% [1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
在小鼠重复给药口服毒性研究（28 天，15-60 mg/kg/天）中，Rabusertib 的最大耐受剂量 (MTD) 为 45 mg/kg/天，剂量限制性毒性 (DLT) 为轻度至中度骨髓抑制（60 mg/kg/天时中性粒细胞减少 30-40%）[1]
- 小鼠口服 Rabusertib（30 mg/kg/天，连续 14 天）可引起短暂性体重减轻（≤7%），停药后 5 天内恢复 [1] - 小鼠接受 Rabusertib（45 mg/kg/天）治疗 28 天后，肝脏、肾脏、心脏或脾脏未观察到明显的组织病理学变化 [1] - Rabusertib 不抑制人细胞色素 P450浓度高达 20 μM 的酶（CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4）[1] |
| 参考文献 |
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| 其他信息 |
1-[5-溴-4-甲基-2-[[(2S)-2-吗啉基]甲氧基]苯基]-3-(5-甲基-2-吡嗪基)脲属于脲类化合物。
Rabusertib 已用于癌症、实体瘤、晚期癌症、胰腺肿瘤和非小细胞肺癌的治疗试验。 Rabusertib 是一种细胞周期检查点激酶 2 (Chk2) 抑制剂，具有潜在的化疗增效活性。Rabusertib 与 Chk2 结合并抑制其活性，这可能阻止 DNA 损伤剂造成的 DNA 修复，从而增强多种化疗药物的抗肿瘤疗效。Chk2 是一种 ATP 依赖性丝氨酸/苏氨酸激酶，是 DNA 复制监控检查点系统的关键组成部分，并由双链断裂 (DSB) 激活；多种癌细胞类型中均存在激活的 Chk2 过度表达。 Rabusertib (LY2603618) 是一种强效且选择性的小分子 Chk1 抑制剂，Chk1 是 DNA 损伤反应和细胞周期检查点调控的关键介质 [1] Rabusertib 的作用机制是阻断 Chk1 介导的检查点激活，迫使 DNA 未修复的癌细胞进行有丝分裂，最终导致有丝分裂灾难和细胞凋亡 [1] Rabusertib 旨在增强 DNA 靶向化疗的疗效，尤其适用于高度依赖 Chk1 生存的 p53 缺陷型肿瘤 [1] Rabusertib 具有良好的口服生物利用度、较长的半衰期和较高的选择性，支持其作为实体瘤口服联合疗法的开发 [1] |
| 分子式 |
C18H22BRN5O3
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|---|---|---|
| 分子量 |
436.3
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| 精确质量 |
435.09
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| 元素分析 |
C, 49.55; H, 5.08; Br, 18.31; N, 16.05; O, 11.00
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| CAS号 |
911222-45-2
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
11955855
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| 密度 |
1.5±0.1 g/cm3
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| 沸点 |
503.1±50.0 °C at 760 mmHg
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| 闪点 |
258.1±30.1 °C
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| 蒸汽压 |
0.0±1.3 mmHg at 25°C
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| 折射率 |
1.633
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| LogP |
2.1
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| tPSA |
100.89
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| 氢键供体(HBD)数目 |
3
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| 氢键受体(HBA)数目 |
6
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
27
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| 分子复杂度/Complexity |
486
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O(C1=CC(C)=C(Br)C=C1NC(=O)NC1N=CC(C)=NC=1)C[C@H]1OCCNC1
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| InChi Key |
SYYBDNPGDKKJDU-ZDUSSCGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C18H22BrN5O3/c1-11-5-16(27-10-13-8-20-3-4-26-13)15(6-14(11)19)23-18(25)24-17-9-21-12(2)7-22-17/h5-7,9,13,20H,3-4,8,10H2,1-2H3,(H2,22,23,24,25)/t13-/m0/s1
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| 化学名 |
1-[5-bromo-4-methyl-2-[[(2S)-morpholin-2-yl]methoxy]phenyl]-3-(5-methylpyrazin-2-yl)urea
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入900 μL 20% SBE-β-CD生理盐水溶液中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (5.73 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。 配方 4 中的溶解度: 2% DMSO +30% PEG400+0.5% Tween80+5% Propylene glycol : 30mg/mL 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 2.2920 mL | 11.4600 mL | 22.9200 mL | |
| 5 mM | 0.4584 mL | 2.2920 mL | 4.5840 mL | |
| 10 mM | 0.2292 mL | 1.1460 mL | 2.2920 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
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CHK1-IN-14
MA203
XL-844
Prexasertib-d4
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