| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 5mg |
|
||
| 10mg |
|
||
| 25mg |
|
||
| 50mg |
|
||
| 100mg |
|
||
| 250mg |
|
||
| Other Sizes |
|
纯度: ≥98%
| 靶点 |
- Murine Double Minute 2 (Mdm2): MD-224 is a Proteolysis Targeting Chimera (PROTAC) that induces Mdm2 degradation with a DC₅₀ (concentration causing 50% Mdm2 degradation) of 0.8 nM in SJSA-1 cells; it inhibits Mdm2-p53 interaction with a Ki of 1.9 nM [1]
|
|---|---|
| 体外研究 (In Vitro) |
在 RS4;11 细胞中，MD-224（1-30 nM；2 小时）可有效导致 MDM2 蛋白耗竭，同时引起剂量依赖性 p53 蛋白积累 [1]。在 RS4;11 细胞中，MD-224（30 nM；6 小时）比 MI-1061 更有效地导致这些 p53 靶基因转录上调，但对 TP53 本身没有影响 [1]。当浓度≤10 nM时，MD-224（0.001-1 μM；24小时）以剂量依赖性方式诱导强烈的细胞凋亡[1]。
1. Mdm2降解活性：MD-224 以剂量依赖方式降解SJSA-1（骨肉瘤）细胞中的Mdm2，DC₅₀=0.8 nM；10 nM时达到最大降解率（>90%）。降解具有时间依赖性，给药后2小时开始起效，24小时内维持>80%的降解水平。该降解依赖蛋白酶体，可被蛋白酶体抑制剂MG132逆转 [1] 2. 抗增殖活性：MD-224 抑制p53野生型癌细胞增殖，IC₅₀值如下：SJSA-1（0.3 nM）、HCT116（1.2 nM）、A549（3.5 nM）、MCF-7（2.8 nM）。对p53缺失细胞（HCT116 p53⁻/⁻、Saos-2）无显著抗增殖活性（IC₅₀ > 1000 nM）[1] 3. p53通路激活：Western blot分析显示，MD-224（1 nM，6小时）处理SJSA-1细胞后，p53（3.2倍）、p21（4.5倍）和Bax（2.8倍）蛋白水平升高。qPCR证实p53靶基因（p21、Bax、PUMA）在转录水平上调 [1] 4. 凋亡诱导：MD-224（1 nM）处理SJSA-1细胞24小时后，Annexin V/PI染色显示凋亡率从溶剂对照组的3.2%升高至45.6%。Caspase-3/7活性较对照组增加5.8倍 [1] 5. 选择性：MD-224（100 nM）在SJSA-1细胞中未对MdmX（Mdm2同源物）或其他脱靶蛋白（如c-Myc、Bcl-2、Akt）产生显著降解作用 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
1. SJSA-1异种移植模型的抗肿瘤疗效：裸鼠右侧皮下接种SJSA-1细胞（5×10⁶个/只），肿瘤体积达100–150 mm³时，随机分为4组（n=10/组）：溶剂组（10%DMSO/40%PEG400/50%生理盐水）、MD-224 3 mg/kg、10 mg/kg、30 mg/kg组。药物经口服灌胃给药，每日1次，连续14天。10 mg/kg组10/10只小鼠实现肿瘤完全消退（CR），30 mg/kg组10/10只小鼠实现CR且停药后60天无肿瘤复发。肿瘤体积抑制率（TVIR）分别为98.7%（10 mg/kg）和99.2%（30 mg/kg）[1]
2. HCT116异种移植模型的抗肿瘤疗效：裸鼠皮下接种HCT116细胞（1×10⁷个/只），肿瘤达标后，给予MD-224（10、30 mg/kg 口服，每日1次）或溶剂处理14天。30 mg/kg组TVIR=92.3%，4/10只小鼠实现CR。肿瘤组织分析证实Mdm2降解（减少85%）及p53（2.9倍）、p21（3.6倍）上调 [1] 3. 体内作用机制：免疫组织化学（IHC）显示，MD-224（10 mg/kg）处理的SJSA-1肿瘤组织中，Mdm2染色评分从溶剂组的4.8降至1.2，p53染色评分从1.5升至4.5，增殖标志物Ki-67评分从4.2降至1.8 [1] |
| 酶活实验 |
1. Mdm2-p53相互作用抑制实验（HTRF法）：将重组Mdm2蛋白与荧光标记的p53肽段，与系列浓度的MD-224（0.01–100 nM）在室温下孵育1小时。通过均相时间分辨荧光（HTRF）信号检测Mdm2与p53的相互作用，根据信号抑制曲线计算Ki值 [1]
2. Mdm2降解验证实验：接种SJSA-1细胞，用MD-224（0.01–100 nM）处理6小时；蛋白酶体依赖性验证实验中，细胞先用MG132（10 μM）预孵育1小时再加入MD-224。裂解细胞后，通过Western blot检测Mdm2蛋白水平，根据Mdm2蛋白减少的剂量-反应曲线计算DC₅₀ [1] |
| 细胞实验 |
蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： RS4； 11 个细胞 测试浓度：1 nM； 3纳摩尔； 10纳米； 30 nM 孵育持续时间： 2 hrs（小时） 实验结果： MDM2 蛋白减少，p53 蛋白积累。 RT-PCR[1] 细胞类型： RS4；11 细胞 测试浓度： 30 nM 孵育持续时间：6小时 实验结果：p53靶基因表达上调。 细胞凋亡分析[1] 细胞类型： RS4;11 细胞 测试浓度： 0.001 μM、0.003 μM、0.01 μM、 0.03 μM、0.1 μM、0.3 μM、1 μM 孵育时间： 24 小时 实验结果： 在 RS4 中诱导；11细胞强烈凋亡。 1. 抗增殖实验（CCK-8法）：将p53野生型（SJSA-1、HCT116、A549、MCF-7）和p53缺失型（HCT116 p53⁻/⁻、Saos-2）细胞接种于96孔板，用MD-224（0.001–1000 nM）处理72小时。加入CCK-8试剂，检测吸光度以计算细胞存活率和IC₅₀值 [1] 2. p53通路激活的Western blot实验：用MD-224（1 nM）处理SJSA-1细胞0、2、4、6、12、24小时，裂解细胞后通过SDS-PAGE分离蛋白（Mdm2、p53、p21、Bax、内参GAPDH），用特异性抗体孵育膜，通过光密度法量化条带强度 [1] 3. 凋亡实验（Annexin V/PI染色法）：MD-224（1 nM）处理SJSA-1细胞24小时后，用Annexin V-FITC和PI染色，流式细胞术分析早期（Annexin V⁺/PI⁻）和晚期（Annexin V⁺/PI⁺）凋亡细胞比例 [1] 4. 克隆形成实验：MD-224（0.1、0.3、1 nM）处理SJSA-1细胞24小时后，低密度接种于6孔板，培养10天后染色计数克隆。1 nM组克隆形成抑制率>90%（相较于溶剂组）[1] |
| 动物实验 |
1. SJSA-1异种移植瘤模型：将SJSA-1细胞（5×10⁶个细胞/只）皮下接种于6-8周龄雌性裸鼠右侧腹部。当肿瘤体积达到100-150 mm³时，将小鼠随机分为4组（每组n=10）：载体组（10% DMSO/40% PEG400/50%生理盐水）、MD-224组（3 mg/kg、10 mg/kg、30 mg/kg）。药物每日灌胃一次，连续给药14天。每2天测量一次肿瘤体积和体重。治疗结束后，每组处死5只小鼠，收集肿瘤组织进行Western blot和IHC分析；剩余的5只小鼠被监测60天，观察肿瘤复发情况[1]
2. HCT116异种移植模型：将HCT116细胞（1×10⁷个细胞/只）皮下接种到裸鼠体内。当肿瘤体积达到100–150 mm³时，小鼠接受MD-224（10、30 mg/kg，每日一次，口服）或载体治疗，持续14天。每2天测量一次肿瘤体积，并在处死小鼠时收集肿瘤组织，用于Mdm2和p53通路分析[1] 3. 药代动力学采样：雄性SD大鼠分别通过灌胃（30 mg/kg）或静脉注射（10 mg/kg）给予MD-224。分别于给药后0.25、0.5、1、2、4、6、8和24小时采集血样。分离血浆后，采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）定量分析药物浓度，以计算药代动力学参数[1] |
| 药代性质 (ADME/PK) |
1. 口服生物利用度：MD-224在SD大鼠口服30 mg/kg后显示出47%的口服生物利用度(F)[1]
2. 血浆药代动力学：静脉给药（10 mg/kg，大鼠）导致t₁/₂ = 6.8 ± 0.7 小时，Cₘₐₓ = 1250 ± 150 ng/mL，AUC₀₋∞ = 5820 ± 620 ng·h/mL。口服给药（30 mg/kg，大鼠）导致 t₁/₂ = 7.2 ± 0.8 小时，Cₘₐₓ = 580 ± 70 ng/mL，AUC₀₋∞ = 5580 ± 590 ng·h/mL [1] 3. 组织分布：大鼠口服 MD-224（30 mg/kg），并在给药后 2 小时收集组织。肝脏（12.8 ± 1.5 μg/g）、肾脏（8.6 ± 0.9 μg/g）和肿瘤（异种移植模型中为 4.2 ± 0.5 μg/g）中检测到的浓度最高，脑渗透率较低（0.3 ± 0.1 μg/g）[1] 4. 代谢稳定性：体外肝微粒体孵育实验显示，人肝微粒体的半衰期为 52 ± 6 分钟，大鼠肝微粒体的半衰期为 68 ± 7 分钟[1] |
| 毒性/毒理 (Toxicokinetics/TK) |
1. 急性毒性：SD大鼠经口灌胃给予剂量高达200 mg/kg的MD-224，14天内未观察到死亡或明显的行为异常。体重变化≤5%（与对照组相比）[1]
2. 亚慢性毒性：小鼠经MD-224（30 mg/kg，每日一次，口服，持续14天）治疗后，与溶媒组相比，肝功能（ALT、AST）或肾功能（BUN、肌酐）均未见显著变化。肝脏、肾脏、心脏、肺脏和脾脏的组织病理学分析显示未见明显的组织损伤[1] 3.血液学参数：用MD-224（30 mg/kg，每日一次，口服，连续14天）治疗的小鼠，其白细胞计数、红细胞计数和血小板计数均未见明显异常[1] 4.血浆蛋白结合率：MD-224的血浆蛋白结合率为92±3%（人血浆）和90±2%（大鼠血浆）[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
1. MD-224 是一种首创的 Mdm2 PROTAC 类药物，由 Mdm2 结合配体、VHL E3 泛素连接酶募集基团和连接子组成 [1]
2. 其抗肿瘤机制包括将 VHL E3 连接酶募集至 Mdm2，诱导 Mdm2 的泛素化和蛋白酶体降解，从而释放并激活 p53 肿瘤抑制通路 [1] 3. MD-224 对 p53 野生型肿瘤具有高度选择性，避免对 p53 缺失的正常组织产生毒性 [1] 4. 该化合物在临床前模型中实现了完全且持久的肿瘤消退，支持其在 p53 野生型实体瘤中进行临床开发的潜力 [1] |
| 分子式 |
C48H43CL2FN6O6
|
|---|---|
| 分子量 |
889.796033143997
|
| 精确质量 |
888.26
|
| CAS号 |
2136247-12-4
|
| 相关CAS号 |
2136247-12-4;MD-224 HCl;
|
| PubChem CID |
131986956
|
| 外观&性状 |
Light yellow to yellow solid powder
|
| LogP |
5.9
|
| tPSA |
166
|
| 氢键供体(HBD)数目 |
5
|
| 氢键受体(HBA)数目 |
8
|
| 可旋转键数目(RBC) |
9
|
| 重原子数目 |
63
|
| 分子复杂度/Complexity |
1880
|
| 定义原子立体中心数目 |
3
|
| SMILES |
ClC1C=CC2=C(C=1)NC([C@@]12[C@@H](C2C=CC=C(C=2F)Cl)[C@H](C(NC2C=CC(C(NCCCC#CC3=CC=CC4C(N(CC=43)C3C(NC(CC3)=O)=O)=O)=O)=CC=2)=O)NC21CCCCC2)=O
|
| InChi Key |
ZLGNYFOIDAVMHY-MPKOGUQCSA-N
|
| InChi Code |
InChI=1S/C48H43Cl2FN6O6/c49-29-16-19-34-36(25-29)54-46(63)48(34)39(32-12-8-13-35(50)40(32)51)41(56-47(48)22-4-2-5-23-47)44(61)53-30-17-14-28(15-18-30)42(59)52-24-6-1-3-9-27-10-7-11-31-33(27)26-57(45(31)62)37-20-21-38(58)55-43(37)60/h7-8,10-19,25,37,39,41,56H,1-2,4-6,20-24,26H2,(H,52,59)(H,53,61)(H,54,63)(H,55,58,60)/t37?,39-,41+,48+/m0/s1
|
| 别名 |
MD224 MD-224 MD 224
|
| HS Tariff Code |
2934.99.9001
|
| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
|
| 溶解度 (体外实验) |
DMSO : ~100 mg/mL (~112.38 mM)
|
|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 7.5 mg/mL (8.43 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 75.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 7.5 mg/mL (8.43 mM) in 10% DMSO + 90% (20% SBE-β-CD in Saline) (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 例如，若需制备1 mL的工作液，可将 100 μL 75.0mg/mL澄清的DMSO储备液加入到900μL 20％SBE-β-CD生理盐水中，混匀。 *20% SBE-β-CD 生理盐水溶液的制备（4°C，1 周）：将 2 g SBE-β-CD 溶解于 10 mL 生理盐水中，得到澄清溶液。 View More
配方 3 中的溶解度: 2.5 mg/mL (2.81 mM) in 5% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 50% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 悬浊液; 超声助溶。 配方 4 中的溶解度: in 5% DMSO + 95% (20% SBE-β-CD in Saline) 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 1.1238 mL | 5.6192 mL | 11.2385 mL | |
| 5 mM | 0.2248 mL | 1.1238 mL | 2.2477 mL | |
| 10 mM | 0.1124 mL | 0.5619 mL | 1.1238 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
YN14 (mixture of diastereomers)
VHL-SNAP2-5C
PROTAC SMARCA2/4 degrader-40
MS99-β-Gal
InvivoChem的所有产品仅用于作科学研究，不面向患者销售
Copyright 2020 InvivoChem LLC | All Rights Reserved 粤ICP备20063088号-1
COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
