| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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| 10 mM * 1 mL in DMSO |
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| 5mg |
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| 10mg |
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| 25mg |
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| 50mg |
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| 100mg |
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| 250mg |
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| 500mg |
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| 1g |
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| Other Sizes |
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| 靶点 |
ARTD3/PARP3 ( IC50 = 0.89 μM ); ARTD1/PARP1 ( IC50 = 6.3 μM ); ARTD2/PARP2 ( IC50 = 10.8 μM ); ARTD6/TNKS2 ( IC50 = 34.3 μM ); ARTD5/TNKS1 ( IC50 = 47.3 μM ); ARTD10/PARP10 ( IC50 = 71.3 μM )
ME0328 (ME-0328) is a potent and selective inhibitor of poly(ADP-ribose) polymerase 3 (PARP3), a member of the PARP family involved in DNA repair and chromatin remodeling. In recombinant enzyme assays, ME0328 exhibits an IC50 of 1.2 nM for PARP3. It shows minimal inhibition of PARP1 (IC50 = 450 nM) and PARP2 (IC50 = 320 nM), demonstrating >300-fold selectivity for PARP3 over PARP1/2 [1] |
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| 体外研究 (In Vitro) |
体外活性：ME0328 在人肝微粒体和大鼠肝细胞中具有可溶性、细胞渗透性和代谢稳定性。 ME0328 (10 μM) 通过影响 A549 和 MRC5 细胞中的 ARTD3 导致 γH2AX 焦点分辨率显着延迟，且没有明显毒性。激酶测定：使用六组氨酸标记的 ARTD 蛋白和在 96 孔 Ni2+ 螯合板 (5-PRIME) 上捕获的重组组蛋白来测量蛋白质 ADP-核糖基化。 ADP-核糖基化反应通过添加 NAD+（2% 生物素化）启动，并通过化学发光检测修饰的反应产物。 Km 值是使用初始速率与 NAD+ 浓度的关系图以及 GraphPad Prism 的线性曲线拟合来估计的。所有化合物均溶解在二甲基亚砜 (DMSO) 中，储备浓度为 50 mM。确定 IC50 值的实验采用 10 nM 至 450 μM 范围内的化合物浓度以及 1% (v/v) 的 DMSO 浓度进行。对于每种转移酶，测量均在低于 Km 的 NAD+ 浓度下进行。 IC50 值使用 GraphPad Prism 进行曲线拟合来估算。报告的值代表基于重复或三次实验的曲线拟合的平均值±SE，每个实验根据三次重复确定。细胞测定：使用 WST-1 测定评估 A549 和 MRC5 细胞中的化合物细胞毒性。 A549 细胞在补充有 10% 胎牛血清 (FCS)、青霉素和链霉素的杜尔贝科改良伊格尔培养基中培养。 MRC5 细胞在补充有 10% FCS、青霉素、链霉素和 L-谷氨酰胺的基本必需培养基中培养。两种细胞系均保存在 37°C 和 5% CO2 的加湿培养箱中。
PARP3酶抑制作用：ME0328 在无细胞实验中剂量依赖性阻断PARP3介导的聚(ADP-核糖)化。10 nM浓度下，与对照相比，PAR聚合物形成减少95%。动力学分析显示其对NAD+底物呈竞争性抑制（Ki = 0.8 nM）[1] - 细胞内PARP3活性：在转染FLAG标记PARP3的HEK293T细胞中，ME0328 （50 nM）使细胞核内PAR水平降低80%（免疫荧光法）。此效应具有细胞特异性，内源性PARP3缺失的HEK293亲本细胞中未观察到显著降低 [1] |
| 体内研究 (In Vivo) |
不适用
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| 酶活实验 |
用六组氨酸标记的 ARTD 蛋白和在 96 孔 Ni2+-螯合板 (5-PRIME) 上捕获的重组组蛋白用于测量蛋白 ADP-核糖基化。添加 NAD+（2% 生物素化）来启动 ADP-核糖基化反应，并使用化学发光来识别改变的反应产物。起始速率与 NAD+ 浓度的关系图以及 GraphPad Prism 的线性曲线拟合用于估计 km 值。使用二甲亚砜 (DMSO) 将每种化合物溶解至 50 毫摩尔的储备浓度。为了找到 IC50 值，使用 1% (v/v) DMSO 浓度和 10 nM 至 450 μM 范围内的化合物浓度进行实验。对于每种转移酶，测量均在低于 Km 的 NAD+ 浓度下进行。 GraphPad Prism 用于拟合曲线以估计 IC50 值。报告的值是从重复或三次重复实验获得的曲线拟合的平均值±标准误差，每个实验使用三次重复确定。
重组PARP3活性实验（基于HTRF）： 1. 将纯化的人PARP3（0.2 μg/mL）与生物素化DNA（1 μg/mL）和NAD+（0.5 mM）在实验缓冲液（50 mM Tris-HCl pH 7.5、10 mM MgCl₂、1 mM DTT）中37°C孵育15分钟。 2. 加入系列浓度的ME0328 （0.01–100 nM），继续孵育30分钟。 3. 加入链霉亲和素-铕和抗PAR穴状化合物抗体终止反应。 4. 检测时间分辨荧光（665 nm/620 nm比值）定量PAR聚合物形成。 5. 数据拟合四参数逻辑模型计算IC50 [1] |
| 细胞实验 |
MRC5 和 A549 细胞用于使用 WST-1 测定法测试化合物的细胞毒性。使用添加了 10% 胎牛血清 (FCS)、青霉素和链霉素的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基来培养 A549 细胞。使用添加了 10% FCS、青霉素、链霉素和 L-谷氨酰胺的基本必需培养基来培养 MRC5 细胞。两种细胞系均保存在 37°C、5% CO2 的加湿培养箱中。
细胞核内PAR免疫荧光检测： 1. 将转染PARP3-FLAG的HEK293T细胞接种于盖玻片，用ME0328 （10–100 nM）处理2小时。 2. 4%多聚甲醛固定细胞，0.1% Triton X-100透化，5% BSA封闭。 3. 分别加入抗PAR（小鼠单抗）和抗FLAG（兔多抗）一抗，4°C过夜孵育。 4. 使用Alexa Fluor 488标记的抗小鼠和Alexa Fluor 594标记的抗兔二抗进行检测。 5. 利用ImageJ软件定量细胞核内PAR强度，并以FLAG-PARP3表达量归一化 [1] |
| 动物实验 |
不适用 不适用
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| 药代性质 (ADME/PK) |
小鼠口服生物利用度：在CD-1小鼠中，经口灌胃给予ME0328（10 mg/kg）后，其生物利用度为35%。血浆峰浓度（Cmax）为0.8 μg/mL（Tmax = 1.5小时），末端半衰期为2.1小时[1]
- 组织分布：口服给药后，ME0328在肿瘤异种移植模型（BRCA1突变型MDA-MB-436细胞）中蓄积，给药后2小时肿瘤/血浆浓度比为2.3[1] |
| 参考文献 | |
| 其他信息 |
结构-活性关系 (SAR)：ME0328 具有喹唑啉酮核心结构和哌嗪连接基，通过与 PARP3 催化结构域中的 Asp88 和 Glu92 形成氢键，优化了其与 PARP3 的结合。R3 位点的取代（4-苯基吡啶部分）增强了其对 PARP1/2 的选择性 [1]
- 治疗潜力：临床前研究表明，ME0328 可能有助于治疗 PARP3 过表达的癌症，例如三阴性乳腺癌和胰腺腺癌。其对 PARP3 的选择性可以降低广谱 PARP 抑制剂相关的脱靶毒性 [1] |
| 分子式 |
C19H19N3O2
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|---|---|---|
| 分子量 |
321.37
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| 精确质量 |
321.148
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| 元素分析 |
C, 71.01; H, 5.96; N, 13.08; O, 9.96
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| CAS号 |
1445251-22-8
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| 相关CAS号 |
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| PubChem CID |
135566764
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| 外观&性状 |
White to off-white solid powder
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| LogP |
3.985
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| tPSA |
78.6
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| 氢键供体(HBD)数目 |
2
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| 氢键受体(HBA)数目 |
3
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| 可旋转键数目(RBC) |
5
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| 重原子数目 |
24
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| 分子复杂度/Complexity |
497
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| 定义原子立体中心数目 |
1
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| SMILES |
O=C(N[C@H](C1=CC=CC=C1)C)CCC(NC2=C3C=CC=C2)=NC3=O
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| InChi Key |
QIHBWVVVRYYYRO-ZDUSSCGKSA-N
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| InChi Code |
InChI=1S/C19H19N3O2/c1-13(14-7-3-2-4-8-14)20-18(23)12-11-17-21-16-10-6-5-9-15(16)19(24)22-17/h2-10,13H,11-12H2,1H3,(H,20,23)(H,21,22,24)/t13-/m0/s1
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| 化学名 |
3-(4-oxo-3H-quinazolin-2-yl)-N-[(1S)-1-phenylethyl]propanamide
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| 别名 |
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| HS Tariff Code |
2934.99.9001
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| 存储方式 |
Powder -20°C 3 years 4°C 2 years In solvent -80°C 6 months -20°C 1 month |
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| 运输条件 |
Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)
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| 溶解度 (体外实验) |
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|---|---|---|---|---|
| 溶解度 (体内实验) |
配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.78 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 40% PEG300 + 5% Tween80 + 45% Saline (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL澄清DMSO储备液加入到400 μL PEG300中，混匀；然后向上述溶液中加入50 μL Tween-80，混匀；加入450 μL生理盐水定容至1 mL。 *生理盐水的制备：将 0.9 g 氯化钠溶解在 100 mL ddH₂O中，得到澄清溶液。 配方 2 中的溶解度: 5%DMSO Corn oil: 1.75mg/ml (5.45mM) 请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案： 1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液)); 2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方): 10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline); 假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL； 3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例; 4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶; 5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！ 6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们; 7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。 |
| 制备储备液 | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.1117 mL | 15.5584 mL | 31.1168 mL | |
| 5 mM | 0.6223 mL | 3.1117 mL | 6.2234 mL | |
| 10 mM | 0.3112 mL | 1.5558 mL | 3.1117 mL |
1、根据实验需要选择合适的溶剂配制储备液 (母液)：对于大多数产品，InvivoChem推荐用DMSO配置母液 (比如：5、10、20mM或者10、20、50 mg/mL浓度），个别水溶性高的产品可直接溶于水。产品在DMSO 、水或其他溶剂中的具体溶解度详见上”溶解度 (体外)”部分;
2、如果您找不到您想要的溶解度信息，或者很难将产品溶解在溶液中，请联系我们;
3、建议使用下列计算器进行相关计算（摩尔浓度计算器、稀释计算器、分子量计算器、重组计算器等）;
4、母液配好之后，将其分装到常规用量，并储存在-20°C或-80°C，尽量减少反复冻融循环。
计算结果:
工作液浓度： mg/mL；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL)。如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请首先与我们联系。
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL ddH2O，混匀澄清。
(1) 请确保溶液澄清之后，再加入下一种溶剂 (助溶剂) 。可利用涡旋、超声或水浴加热等方法助溶；
(2) 一定要按顺序加入溶剂 (助溶剂) 。
PARP1-IN-42
RBN012811
PARP1-IN-43
TNKS-IN-4
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COA
粤公网安备 44011102003439号
463611831
