Progesterone receptor
Medroxyprogesterone targets the progesterone receptor (PR), acting as a potent agonist. By binding to and activating the PR, it mimics the effects of natural progesterone. It suppresses ovulation, alters the uterine lining, and regulates menstrual cycles. It has also been shown to stimulate the production of Cyclin D1 via the PI3K/Akt signaling pathway in T47D cells, promoting cell proliferation.

在T47D细胞中，甲羟孕酮（10 nM，48 h）通过PI3K/Akt信号通路刺激细胞周期蛋白D1的产生，从而促进细胞增殖[1]。甲羟孕酮（100 nM，24 h）通过提高HUVEC细胞中信号分子的表达，增加HUVEC细胞上单核细胞标志物的数量，这可能是动脉粥样硬化的原因[2]。用醋酸甲羟孕酮（MPA）或17β-雌二醇+MPA处理的HUVEC细胞中黏附分子的mRNA水平比对照组高1.7至2.5倍。与对照组相比，MPA 显著增加了 E-选择素、P-选择素和细胞间黏附分子-1 的蛋白表达（分别为 83.0 ± 0.7、34.8 ± 1.2 和 5.4 ± 0.0 ng/mL），而其他孕激素或与孕激素联用的 17β-雌二醇则未显著改变这些蛋白的表达。与对照组相比，MPA 显著增加了 U937 单核细胞样细胞的黏附（每 10 个视野中黏附细胞数分别为 56.0 ± 1.5 和 46.5 ± 3.5），但并未增加细胞间黏附分子-1 敲低的 HUVEC 细胞的黏附。
结论：MPA 可增加 HUVEC 细胞上细胞黏附分子的表达，从而导致更多单核细胞样细胞黏附于 HUVEC 细胞。 MPA的这些作用可能是接受激素替代疗法的绝经后妇女内皮细胞发生动脉粥样硬化的危险因素。[2]
体外实验表明，甲羟孕酮（10 nM，48 h）可通过PI3K/Akt信号通路刺激T47D细胞产生细胞周期蛋白D1，从而促进细胞增殖。在多种基于细胞的实验中，它是一种强效的孕激素受体激动剂。与醋酸甲羟孕酮（MPA）相比，甲羟孕酮作为孕激素的效力低两个数量级以上。

尽管甲羟孕酮（27.7 μg/天，皮下注射）可促进血栓形成，但它也能抑制动脉血管血栓形成[3]。
MPA 和 MPA + E2 治疗的动物表现出更严重的血栓反应，表现为稳定闭塞时间显著缩短。MPA 的促血栓形成作用与 ETP 升高平行，而血小板活化不受影响。此外，MPA + E2 降低了 α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞的数量，并增加了斑块基质中的透明质酸含量。有趣的是，MPA 可降低总斑块负荷，而 MPA + E2 则无此作用。[3]
结论和意义：尽管 MPA 对 ApoE 缺陷小鼠的动脉粥样硬化具有抑制作用，但长期使用 MPA 和 MPA + E2 治疗会增加动脉血栓形成。凝血酶生成增加、平滑肌含量减少以及非胶原斑块基质重塑可能与促血栓形成作用有关。因此，MPA 对动脉血栓形成和动脉粥样硬化具有不同的作用。[3] 醋酸甲羟孕酮 (MPA) 和 MPA + E2 治疗的动物表现出更严重的血栓形成反应，表现为稳定闭塞时间显著缩短。MPA 的促血栓形成作用与内源性凝血酶生成潜能 (ETP) 的增加平行，而血小板活化不受影响。此外，MPA + E2 减少了 α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞的数量，并增加了斑块基质中的透明质酸含量。有趣的是，MPA 降低了总斑块负荷，而 MPA + E2 则没有改变总斑块负荷。结论及意义：尽管MPA对ApoE缺陷小鼠的动脉粥样硬化具有抑制作用，但长期使用MPA和MPA+E2治疗会增加动脉血栓形成。凝血酶生成增加、平滑肌含量减少以及非胶原斑块基质重塑可能与促血栓形成作用有关。因此，MPA对动脉血栓形成和动脉粥样硬化具有不同的作用。[4]
在体内，甲羟孕酮在兽医临床中用作孕激素，作为发情调节剂。其主要的体内作用与其孕激素活性有关。该化合物本身不用于人类临床，但其醋酸酯衍生物MPA用于避孕、激素替代疗法和其他适应症。

醋酸甲羟孕酮 (MPA) 诱导人乳腺癌细胞增殖的机制尚不明确。本研究探讨了 MPA 影响孕激素受体 (PR) 阳性 T47D 人乳腺癌细胞中细胞周期蛋白 D1 表达的机制。MPA (10 nM) 处理 48 小时可诱导细胞增殖（诱导倍数 1.6 倍）。MPA 可诱导细胞周期蛋白 D1 表达（诱导倍数 3.3 倍），而选择性 PR 拮抗剂 RU486 可阻断 MPA 诱导的细胞增殖和细胞周期蛋白 D1 表达（抑制率 23%）。在转染 PRB 的 MCF-7 细胞中，MPA 可增加细胞周期蛋白 D1 的蛋白水平（诱导倍数 2.2 倍）和启动子活性（诱导倍数 2.7 倍），但在转染 PRA 的 MCF-7 细胞中则无此作用。尽管MPA能够转录激活细胞周期蛋白D1的表达，但细胞周期蛋白D1启动子并不包含孕激素反应元件相关序列。我们进一步研究了细胞周期蛋白D1表达的调控机制。由于细胞周期蛋白D1启动子包含三个推定的核因子κB (NF-κB)结合基序，而NF-κB是Akt的底物，因此我们研究了磷脂酰肌醇3-激酶 (PI3K)/Akt/NF-κB信号通路对MPA诱导的细胞周期蛋白D1表达的影响。MPA诱导了Akt的瞬时磷酸化（5分钟时诱导2.7倍），而PI3K抑制剂（wortmannin）处理则减弱了MPA诱导的细胞周期蛋白D1表达上调（抑制40%）和细胞增殖（抑制40%）。 MPA还能诱导NF-κBα抑制因子（IκBα）的磷酸化（诱导2.3倍），而沃特曼宁处理可减弱MPA诱导的IκBα磷酸化（抑制60%）。使用IκBα磷酸化抑制剂（BAY 11-7085）或特异性NF-κB核转位抑制剂（SN-50）处理可减弱MPA诱导的细胞周期蛋白D1表达上调（分别抑制80%和50%）以及细胞增殖上调（分别抑制55%和34%）。由于 MPA 诱导 Akt 的瞬时磷酸化，且细胞周期蛋白 D1 启动子不含孕酮反应元件相关序列，因此 MPA 通过 PRB 诱导细胞增殖，并通过 PI3K/Akt/NFkappaB 级联上调细胞周期蛋白 D1 的表达，可能是一种非基因组机制。[1]

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首次利用 Cunninghamella elegans、Trichothecium roseum 和 Mucor plumbeus 研究了甲羟孕酮 (1) 的真菌转化。所得代谢物如下：6β,20-二羟基甲羟孕酮（2）、12β-羟基甲羟孕酮（3）、6β,11β-二羟基甲羟孕酮（4）、16β-羟基甲羟孕酮（5）、11α,17-二羟基-6α-甲基孕-4-烯-3,20-二酮（6）、11-氧代甲羟孕酮（7）、6α-甲基-17α-羟基孕-1,4-二烯-3,20-二酮（8）、6β-羟基甲羟孕酮（9）、15β-羟基甲羟孕酮（10）、6α-甲基-17α,11β-二羟基-5α-孕烷-3,20-二酮（11）。 11β-羟基甲羟孕酮 (12) 和 11α,20-二羟基甲羟孕酮 (13)。在所有微生物转化产物中，新分离的生物转化产物 13 对 SH-SY5Y 细胞增殖的抑制活性最强。化合物 12、5、6、9、11 和 3（按活性降序排列）也对 SH-SY5Y 肿瘤细胞系表现出一定程度的活性。此前未报道的生物转化产物 2 对乙酰胆碱酯酶的抑制活性最强。为了理解观察到的实验活性，并进一步了解生物转化产物与酶的结合模式和相互作用，我们进行了分子建模研究。[4] 体外甲羟孕酮的酶/受体结合研究通常采用重组孕酮受体 (PR) 进行放射性配体结合试验。采用标记孕酮进行竞争性结合实验，以确定结合亲和力 (Ki)。标准实验方案包括在固定浓度放射性配体的存在下，将受体与递增浓度的甲羟孕酮孵育，然后进行过滤和闪烁计数。

细胞增殖实验[1]
细胞类型： T47D
测试浓度： 10 nM
孵育时间： 24 小时、48 小时、72 小时
实验结果： 48 小时后细胞数量增加。

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蛋白质印迹分析[1]
细胞类型： T47D
测试浓度： 10 nM
孵育时间： 4 小时
实验结果： 诱导细胞周期蛋白 D1 的表达。

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RT-PCR[2]
细胞类型： HUVEC
测试浓度： 100 nM
孵育时间： 24 小时
实验结果： 黏附分子的 mRNA 和蛋白表达增加。

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在 HUVEC 中，我们通过实时 PCR 检测了黏附分子的 mRNA 水平。蛋白表达则通过免疫细胞化学和 ELISA 进行定量。为了模拟单核细胞黏附于内皮细胞的情况，我们使用流动室系统评估了孕激素对 U937 单核细胞样细胞黏附于 HUVEC 单层细胞的影响。我们还利用小干扰 RNA 检测了黏附分子的抑制作用。[2]
体外细胞试验中，甲羟孕酮的作用通常涉及培养表达孕激素受体 (PR) 的细胞系，例如 T47D 乳腺癌细胞。将细胞用化合物进行系列稀释处理，并通过蛋白质印迹法或酶联免疫吸附试验（ELISA）检测下游效应，例如细胞周期蛋白D1的产生。细胞增殖通过细胞计数或[3H]-胸苷掺入法进行评估。基因表达变化通过定量实时聚合酶链式反应（qRT-PCR）进行检测。

动物/疾病模型： ApoE-/- 小鼠模型 [3]
剂量： 27.7 μg/天
给药途径： 皮下注射
实验结果： 动脉粥样硬化斑块减少，血栓形成增加。

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对载脂蛋白 E (ApoE)-/- 小鼠进行双侧卵巢切除术，并分别给予安慰剂、MPA（27.7 μg/天）和 MPA + 17-β-雌二醇 (E2; 1.1 μg/天) 治疗，持续 90 天，期间喂以西式饮食。采用光血栓模型检测血栓反应，通过荧光激活细胞分选 (FACS) 分析 (CD62P) 检测血小板活化，并通过内源性凝血酶生成潜能 (ETP) 检测凝血酶生成。此外，还测定了主动脉斑块负荷和主动脉根部斑块成分。[3]
甲羟孕酮的体内动物研究通常在雌性动物模型中进行，以评估其对动情周期和生殖生理的影响。它在兽医实践中用作动情调节剂。标准方案包括通过注射或口服给药，并监测动情周期、子宫组织学和激素水平。

吸收、分布和排泄
醋酸甲羟孕酮 (MPA) 在人体内的绝对生物利用度尚未进行专门研究。MPA 可从胃肠道迅速吸收，口服后 2 至 4 小时达到血浆峰浓度。与食物同服可提高 MPA 的生物利用度。餐前或餐后立即服用 10 mg MPA 可使 MPA 的 Cmax 增加 50% 至 70%，AUC 增加 18% 至 33%。食物不影响 MPA 的半衰期。约 90% 的醋酸甲羟孕酮与蛋白质结合，主要与白蛋白结合；MPA 不与性激素结合球蛋白结合。大多数 MPA 代谢物以葡萄糖醛酸苷结合物的形式经尿液排出，仅有少量以硫酸盐形式排出。有关甲羟孕酮（10种类型）的吸收、分布和排泄的更完整数据，请访问HSDB记录页面。

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代谢/代谢物
口服后，MPA主要在肝脏经羟基化代谢，随后进行结合反应，最终经尿液排泄。……MPA几乎完全经肝脏代谢和排泄。在14例晚期肝病患者中，MPA的分布显著改变（排泄减少）。在脂肪肝患者中，服用10 mg或100 mg剂量后24小时内，尿液中完整MPA的平均排泄百分比分别为7.3%和6.4%。

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生物半衰期
口服制剂的消除半衰期为32至44小时。醋酸盐/
甲羟孕酮的分子量为344.49，分子式为C₂₂H₃₂O₃。它可溶于DMSO（50 mg/mL）。它具有口服生物利用度。与醋酸盐衍生物相比，甲羟孕酮本身作为孕激素的效力显著降低，因此不用于临床。它是醋酸甲羟孕酮的代谢产物。

甲羟孕酮的毒性通常被认为与其他孕激素相似。副作用可能包括月经出血改变、体重增加和情绪波动。作为一种孕激素，它可能影响脂质代谢和葡萄糖耐量。有血栓栓塞性疾病史、肝病史或已知对孕激素过敏的患者禁用。

[1]. Medroxyprogesterone acetate induces cell proliferation through up-regulation of cyclin D1 expression via phosphatidylinositol 3-kinase/Akt/nuclear factor-kappaB cascade in human breast cancer cells. Endocrinology. 2005 Nov;146(11):4917-25.

[2]. Medroxyprogesterone acetate enhances monocyte-endothelial interaction under flow conditions by stimulating the expression of cell adhesion molecules. J Clin Endocrinol Metab. 2014 Jun;99(6):2188-97.

[3]. Differential effects of medroxyprogesterone acetate on thrombosis and atherosclerosis in mice. Br J Pharmacol. 2009 Dec;158(8):1951-60.

[4]. Medroxyprogesterone derivatives from microbial transformation as anti-proliferative agents and acetylcholineterase inhibitors (combined in vitro and in silico approaches). Steroids. 2020 Dec;164:108735.

甲羟孕酮是一种3-氧代Δ⁴-甾体，一种孕-4-烯-3,2'-二酮，其17位被α-羟基取代，6位被甲基取代。它是一种避孕药、孕激素和合成口服避孕药。它是一种2'-氧代甾体、3-氧代Δ⁴-甾体、17α-羟基甾体和叔α-羟基酮。甲羟孕酮是一种孕激素。甲羟孕酮是孕酮的合成衍生物，以醋酸盐（醋酸甲羟孕酮）的形式给药，具有抗雌激素活性。与其他孕激素一样，甲羟孕酮与核受体结合并激活核受体，核受体随后与靶基因结合并激活这些基因的转录。作为一种抗雌激素，该药物可能抑制雌激素对雌激素敏感肿瘤细胞的促生长作用。(NCI04)
一种合成孕激素，在兽医实践中用作发情调节剂。

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作用机制
甲羟孕酮的药理作用与孕激素相似。在内源性雌激素充足的女性中，甲羟孕酮可将增生期子宫内膜转化为分泌期子宫内膜。甲羟孕酮在动物中已被证明具有轻微的雄激素活性。也有报道称其具有合成代谢作用，但该药物在人体内似乎缺乏显著的雌激素活性。在动物中，该药物表现出显著的促肾上腺皮质激素活性，但在人体中尚未观察到具有临床意义的作用。常规肌注或皮下注射（例如，每3个月注射150或104毫克）后，甲羟孕酮可抑制垂体促性腺激素的分泌，从而阻止卵泡成熟和排卵，导致子宫内膜变薄；这些作用具有避孕效果。现有证据表明，口服常规剂量（即每日一次，每次5-10毫克）的甲羟孕酮不会产生这些作用。高剂量甲羟孕酮可抑制垂体分泌黄体生成素（LH）和卵泡刺激素（FSH），并阻止正常月经周期中促性腺激素的周期性激增。研究表明，该药物作用于下丘脑，因为它不会抑制促性腺激素释放激素给药后黄体生成素 (LH) 和卵泡刺激素 (FSH) 的释放，并且当用作避孕药时，LH 和 FSH 的基础浓度仍保持在正常低值范围内。尽管其作用机制尚不明确，但甲羟孕酮对某些癌症（例如子宫内膜癌和肾细胞癌）具有抗肿瘤活性。孕激素可诱导孕酮通常产生的各种药理反应，程度不一：诱导子宫内膜分泌变化、升高基础体温（产热效应）、引起阴道上皮组织学改变、松弛子宫平滑肌、刺激乳腺腺泡组织生长、抑制垂体功能，并在雌激素存在的情况下引起撤退性出血。孕激素与胞质受体蛋白结合后，被转运至细胞核内并形成复合物，其作用类似于雌激素。然而，与雌激素受体不同，孕激素似乎不需要受体改变。孕酮
尽管醋酸甲羟孕酮 (MPA) 被用作注射避孕药、激素替代疗法 (HRT) 以及某些癌症的治疗方法，但我们对参与 MPA 作用的类固醇受体及其靶基因的了解仍然有限。研究人员发现，MPA 与地塞米松 (dex) 一样，能显著抑制小鼠成纤维细胞 (L929sA) 中肿瘤坏死因子 (TNF) 刺激的白细胞介素-6 (IL-6) 蛋白的产生。此外，MPA通过干扰核因子κB (NF-κB)和激活蛋白-1 (AP-1)，在转录水平上抑制IL-6和IL-8启动子-报告基因构建体。而且，与地塞米松类似，MPA不影响NF-κB的DNA结合活性。作者还观察到，MPA对L929sA和COS-1细胞中糖皮质激素反应元件(GRE)驱动的启动子-报告基因构建体具有显著的转录激活作用。MPA诱导的糖皮质激素受体(GR)核转位和RU486拮抗作用强烈提示，MPA在这些细胞中的作用至少部分是通过GR介导的。研究人员还评估了MPA与孕酮和二氢睾酮(DHT)在人乳腺癌细胞中的转录效应。我们构建并鉴定了一种新型的孕激素受体阴性、雄激素受体阳性的人乳腺癌细胞系，命名为Y-AR。利用合成的启动子/报告基因构建体，我们对缺乏或含有孕激素受体和/或雄激素受体的细胞进行了转录分析，并比较了孕激素、醋酸甲羟孕酮（MPA）和二氢睾酮（DHT）的内源性基因表达谱。在孕激素受体阳性细胞中，瞬时转录分析表明，MPA通过两种孕激素受体亚型均发挥强效的孕激素效应。有趣的是，DHT通过B型孕激素受体传递信号。对孕激素和MPA中调控内源性孕激素受体的基因表达谱分析表明，尽管MPA的孕激素效力可能略高于孕激素，但其性质与孕激素相似。为了研究MPA通过雄激素受体的作用，我们利用Y-AR细胞进行了表达谱分析，比较了孕酮、MPA和DHT的表达。结果显示，DHT和MPA通过雄激素受体的基因调控存在广泛的重叠，但与孕酮则无重叠。有趣的是，药理剂量和生理剂量的MPA之间没有差异，这表明高剂量治疗性MPA可能存在冗余。MPA和孕酮基因调控谱的比较表明，MPA的作用并不能完全模拟内源性孕酮在生理激素替代疗法中的作用。……MPA增加乳腺癌风险和/或增强癌症治疗效果可能部分由雄激素受体介导。
甲羟孕酮是一种合成孕激素，可作为强效的孕激素受体激动剂。它也被称为17α-羟基-6α-甲基孕酮和U8840。虽然它未上市销售用于人类，但它是临床常用药物醋酸甲羟孕酮（MPA）的代谢产物。在法国，它以商品名Controlestril在兽医学领域有少量应用。它是一种用于研究孕激素受体功能的重要研究化合物。

C22H32O3

344.48

344.235

C, 76.70; H, 9.36; O, 13.93

520-85-4

Medroxyprogesterone;520-85-4;Medroxyprogesterone-d3;162462-69-3;Medroxyprogesterone-d7; 71-58-9 (acetate)

10631

White to off-white solid powder

1.1±0.1 g/cm3

488.0±45.0 °C at 760 mmHg

220-223.5ºC

263.0±25.2 °C

0.0±2.8 mmHg at 25°C

1.554

3.38

54.37

1

3

1

25

664

7

CC([C@@]1(O)CC[C@@]2([H])[C@]3([H])C[C@H](C)C4=CC(CC[C@]4(C)[C@@]3([H])CC[C@]12C)=O)=O

FRQMUZJSZHZSGN-HBNHAYAOSA-N

InChI=1S/C22H32O3/c1-13-11-16-17(20(3)8-5-15(24)12-19(13)20)6-9-21(4)18(16)7-10-22(21,25)14(2)23/h12-13,16-18,25H,5-11H2,1-4H3/t13-,16+,17-,18-,20+,21-,22-/m0/s1

Pregn-4-ene-3,20-dione, 17-hydroxy-6-alpha-methyl-

Medroxyprogesterone; NSC 27408; Medroxyprogesteron; Medroxiprogesteronum; Medroxiprogesterona; Medroxyprogesteronum; Medrossiprogesterone; 17-Hydroxy-6alpha-methylprogesterone; NSC-27408; NSC27408;

2934.99.9001

Powder      -20°C    3 years

                     4°C     2 years

In solvent   -80°C    6 months

                  -20°C    1 month

Room temperature (This product is stable at ambient temperature for a few days during ordinary shipping and time spent in Customs)

DMSO : ~50 mg/mL (~145.14 mM)

配方 1 中的溶解度: ≥ 2.5 mg/mL (7.26 mM) (饱和度未知) in 10% DMSO + 90% Corn Oil (这些助溶剂从左到右依次添加，逐一添加), 澄清溶液。
例如，若需制备1 mL的工作液，可将100 μL 25.0 mg/mL 澄清 DMSO 储备液加入900 μL 玉米油中，混合均匀。

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请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解配方/方案：
1、请先配制澄清的储备液(如：用DMSO配置50 或 100 mg/mL母液(储备液));
2、取适量母液，按从左到右的顺序依次添加助溶剂，澄清后再加入下一助溶剂。以 下列配方为例说明 (注意此配方只用于说明，并不一定代表此产品 的实际溶解配方):
10% DMSO → 40% PEG300 → 5% Tween-80 → 45% ddH2O (或 saline);
假设最终工作液的体积为 1 mL, 浓度为5 mg/mL: 取 100 μL 50 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀/澄清；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀/澄清；然后继续加入450 μL ddH2O (或 saline)定容至 1 mL；
3、溶剂前显示的百分比是指该溶剂在最终溶液/工作液中的体积所占比例;
4、 如产品在配制过程中出现沉淀/析出，可通过加热(≤50℃)或超声的方式助溶;
5、为保证最佳实验结果，工作液请现配现用！
6、如不确定怎么将母液配置成体内动物实验的工作液，请查看说明书或联系我们;
7、 以上所有助溶剂都可在 Invivochem.cn网站购买。